超聲及微泡介導(dǎo)的基因載體的進(jìn)展

蘇高峰　　穆玉明

新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院心臟超聲診斷科，新疆烏魯木齊　830011

超聲及微泡介導(dǎo)的基因載體的進(jìn)展

蘇高峰穆玉明

新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院心臟超聲診斷科，新疆烏魯木齊830011

超聲及微泡輔助基因傳遞正在迅速發(fā)展，其中，超聲起著觸發(fā)轉(zhuǎn)染的“扳機點”作用，微泡作為能量的聚焦點亦不可或缺?；蜣D(zhuǎn)染成功的關(guān)鍵在于通過載體將基因安全高效地傳遞到靶器官。從最初超聲輔助質(zhì)粒轉(zhuǎn)染發(fā)展到超聲與脂質(zhì)體-質(zhì)粒聯(lián)合介導(dǎo)轉(zhuǎn)染，超聲及微泡介導(dǎo)的基因載體經(jīng)歷了近三十年的發(fā)展。本文就超聲及微泡介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染及基因載體的最新進(jìn)展做一綜述。

超聲；微泡；基因載體；進(jìn)展

［Abstract］U1trasonic and microbubb1e assisted gene de1ivery is booming now.U1trasound p1ays a ro1e of the trigger point in triggering the transfection and microbubb1es，as the foca1 point of energy，is a1so indispensab1e.The success of gene transfection depends on an efficient and safe carrier system that de1iveries genetic materia1 into target organ.From initia1 u1trasound assisted p1asmid transfection to u1trasound associated 1iposome-p1asmid mediated gene transfection，u1trasound and microbubb1e mediated gene carrier has been deve1oped for near1y thirty years.This artica1 reviewed the recent advances in u1trasound and microbubb1e mediated gene transfection and gene carrier.

［Key words］U1trasound；Microbubb1e；Gene carrier；Deve1opment

利用超聲能量增強靶細(xì)胞的基因轉(zhuǎn)染研究始于20世紀(jì)80年代［1］。超聲及微泡介導(dǎo)的基因傳遞以其廣闊應(yīng)用前景正吸引著人們，因其要求具備豐富的醫(yī)學(xué)物理學(xué)，細(xì)胞、分子生物學(xué)等知識，所以有關(guān)此技術(shù)的研究雖一直在進(jìn)行，但發(fā)展緩慢，從體外發(fā)展到體內(nèi)，現(xiàn)仍未進(jìn)入臨床試驗［2］，直到最近才出現(xiàn)加速發(fā)展［3-6］。本文就超聲及微泡介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染和基因載體的進(jìn)展做一綜述。

1　超聲聯(lián)合質(zhì)粒介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)染

作為最早的超聲轉(zhuǎn)染工具，超聲輔助質(zhì)粒轉(zhuǎn)染培養(yǎng)的哺乳動物細(xì)胞作為純機械方法被評估：將質(zhì)粒加入體外培養(yǎng)細(xì)胞中，用20 kHz的實驗室探頭進(jìn)行輻照［1］，同時用共填充的FITC-右旋糖酐來標(biāo)記超聲輻照后的細(xì)胞，超聲輻照基因轉(zhuǎn)染的聲壓必須在短時間（20 s）內(nèi)達(dá)到300～400 kPa的水平。與通過機械刮除使質(zhì)粒從細(xì)胞凹面進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)相比，此法基因轉(zhuǎn)染效率在當(dāng)時是合理的。同時，脂轉(zhuǎn)染也獲得了發(fā)展［7］，以至于近年來在體外實驗中變成了一種通用的基因傳遞工具，實驗數(shù)量更是成倍增長［8］。

2　超聲、微泡及質(zhì)粒聯(lián)合介導(dǎo)轉(zhuǎn)染

當(dāng)?shù)谝环N商業(yè)化的微泡A1bunex［9］進(jìn)入臨床時，研究者們就曾評估用它作為超聲能量聚焦的靶點來增強基因的傳遞［10］。質(zhì)粒同微泡共給藥［11-12］后，通過超聲波在靶區(qū)域輻照產(chǎn)生的空化效應(yīng)（微泡持續(xù)振動的穩(wěn)定空化效應(yīng)或微泡快速擴張、壓縮和破裂的慣性空化效應(yīng)）進(jìn)行基因轉(zhuǎn)染?？栈耍ㄈ缥⑴荩┑膽?yīng)用用更短的聲脈沖（1 s）減少了達(dá)到基因成功轉(zhuǎn)染所需的總透射聲能量［11］。輻照導(dǎo)致組織中快速的壓力變化，導(dǎo)致微泡快速的周期性壓縮和擴張，聲能在微泡表面聚焦，產(chǎn)生微流、空化和射流，如果發(fā)生在靶細(xì)胞附近，細(xì)胞膜就會形成基因轉(zhuǎn)染所需的瞬間微孔［13］。為維持細(xì)胞的活性，十到數(shù)百納米的微孔大多數(shù)開放時間不會超過一兩分鐘［14-16］，所以大多數(shù)有效的基因轉(zhuǎn)染須在超聲輻照期間完成。但小分子（熒光素等）基因的胞內(nèi)轉(zhuǎn)染卻在超聲輻照后數(shù)小時才會起效［17-18］。

與病毒載體相比，核酸通過瞬間微孔彌散入細(xì)胞，轉(zhuǎn)染效率比較低。但近年來在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤體外實驗的研究中，超過70%的細(xì)胞通過空化效應(yīng)被轉(zhuǎn)染［19］，這可能存在基因轉(zhuǎn)染靶細(xì)胞的一些其他機制。通過超聲輻照細(xì)胞表面微泡，一種依賴小窩蛋白和網(wǎng)格蛋白胞吞現(xiàn)象的增加，揭示了微孔形成的其他機制［20］。

超聲、微泡及質(zhì)粒聯(lián)合介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)染具有簡單、可定位、易轉(zhuǎn)向臨床應(yīng)用的優(yōu)點，但亦具潛在風(fēng)險：通過靜脈給藥的微泡和基因轉(zhuǎn)染的首要靶點是血管內(nèi)皮細(xì)胞，但是在超聲輻照期間，通過開窗或胞吞作用，內(nèi)皮屏障功能可能會被改變，基因可能會被傳遞到內(nèi)皮下層［2］。

3　超聲、微泡及基因-載體絡(luò)合物聯(lián)合介導(dǎo)轉(zhuǎn)染

無保護(hù)的質(zhì)粒和寡核苷酸片段，在生物環(huán)境中會迅速降解［21］。因此核酸和保護(hù)性的傳遞載體絡(luò)合后，與微泡共注射，能夠提高傳遞效率。自脂轉(zhuǎn)染研究始［7］，已形成了基因傳遞的體系［22］：最初是質(zhì)粒，最近用更短的寡核苷酸微粒，如干擾RNA、miRNA、mRNA［23］等，這些微粒能夠被融合脂質(zhì)體，小1ipop1exes分子，po1yp1exes分子等絡(luò)合。質(zhì)粒與多聚物載體絡(luò)合后聯(lián)合微泡靜脈共注射并超聲靶向輻照在嚙齒類動物骨骼肌模型中產(chǎn)生了顯著增強的轉(zhuǎn)染效率［24］。因此核酸載體的應(yīng)用對于提高聲孔轉(zhuǎn)染效率是毋庸置疑的［2］。用轉(zhuǎn)染增強微粒作為核酸載體可能會有潛在風(fēng)險：非輻照組織內(nèi)非特異性轉(zhuǎn)染。但近來的研究沒有報道此問題。

4　超聲、微泡-質(zhì)粒聯(lián)合介導(dǎo)轉(zhuǎn)染

微泡直接作為核酸載體在聲孔效應(yīng)中有顯著優(yōu)勢：核酸近乎瞬間被定位在細(xì)胞表面并轉(zhuǎn)染入胞內(nèi)。瞬時微孔只為胞內(nèi)基因轉(zhuǎn)染提供了有限的時間［7］，因此，通過靜電作用將質(zhì)?；蚬押塑账徨^在微泡的表面可提高轉(zhuǎn)染效率。Unger等［25］首先報道了微泡表面放置正電荷的方法，他們成功改良了Definity微泡的制備，通過在較高相變溫度下水溶性差的全氟丁烷氣體在含水脂質(zhì)混合物膠團(tuán)內(nèi)的超聲彌散可提高微泡穩(wěn)定性。微泡殼成分為DSTAP/二硬脂酰磷脂酰膽堿（DSPC）/聚乙二醇（PEG）硬脂酸鹽［7］。每個微泡表面都能夠錨定數(shù)千質(zhì)粒分子［7］，對于分子量較小的寡核苷酸片段，每個微泡所能結(jié)合的數(shù)量將比前者高出幾個數(shù)量級［26］。微泡及核酸間的靜電作用可以通過調(diào)節(jié)孵育媒介的離子強度來控制［2］。顯然，微泡與被絡(luò)合保護(hù)的核酸聯(lián)合可顯著增強轉(zhuǎn)染效率。

Tay1or等［27］的研究證實，將插入報告基因的病毒顆粒（逆轉(zhuǎn)錄病毒，慢病毒，腺病毒，腺相關(guān)病毒等）錨在微泡表面并超聲輻照能夠提供令人滿意的轉(zhuǎn)染效率。這種方法不僅能提高基因轉(zhuǎn)染效率，而且能減低病毒本身的兔疫源性風(fēng)險［28］，但其詳細(xì)機制仍不清楚［29］。雖有寡聚核苷酸粘附到人白蛋白微泡表面的一些報道。但是微泡殼和核酸粘附的機制尚未完全清楚。

已證實，相比微泡質(zhì)粒簡單相加給藥的形式，微泡-質(zhì)粒絡(luò)合物能顯著提高轉(zhuǎn)染效率［30］。因氟碳?xì)怏w隨呼吸排出，微泡在循環(huán)系統(tǒng)只能停留數(shù)分鐘［2］，因此氟碳?xì)怏w并不會對人體造成傷害。但強烈的超聲輻照會導(dǎo)致與微泡聯(lián)合的質(zhì)粒及少部分紅細(xì)胞游出到血管外，適當(dāng)利用聲能可降低這些潛在風(fēng)險。

5　超聲、靶向微泡-質(zhì)粒聯(lián)合介導(dǎo)轉(zhuǎn)染

通過攜帶編碼eGFP的質(zhì)粒和抗VCAM-1抗體的微泡向平滑肌細(xì)胞的選擇性傳遞，Phi11ips［31］在體外驗證了：微泡與質(zhì)粒的結(jié)合并不影響靶向配體顆粒向感興趣組織的選擇性傳遞。與非靶向微泡相比，在200 kPa峰值負(fù)聲壓的條件下，轉(zhuǎn)染效率增加了5.5倍。Aris等［7］在小鼠后肢缺血的動物模型中比較了選擇性靶向與非靶向微泡攜帶報告轉(zhuǎn)基因質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染效率，發(fā)現(xiàn)0.6 MPa聲強時，靶向轉(zhuǎn)染的效率得到了顯著的提高。因為靶向微泡能更好粘附表達(dá)疾病標(biāo)志物的靶向細(xì)胞，靶向微粒的應(yīng)用能夠使非特異轉(zhuǎn)染達(dá)到最小化。更重要的是，因微泡不會粘附到非靶區(qū)，將不再需要在圖像引導(dǎo)下對感興趣組織進(jìn)行選擇性超聲輻照，超聲探頭“刷墻”式輻照就能達(dá)到靶組織的特異性轉(zhuǎn)染。

6　超聲、脂質(zhì)體納米粒-質(zhì)粒聯(lián)合介導(dǎo)轉(zhuǎn)染

bubb1e-1iposome和e1iposome是較有代表性的兩種結(jié)構(gòu)相似的脂質(zhì)體納米粒，bubb1e-1iposome［32-33］內(nèi)部包裹的是全氟丙烷納米粒。在動物基因傳遞方面被廣泛研究：質(zhì)?；蛘吖押塑账岜话襁M(jìn)脂質(zhì)體的水核心中［34］，或靠陽性脂質(zhì)的靜電作用被粘附在脂質(zhì)體外側(cè)——此情況下用帶正電荷的脂質(zhì)構(gòu)建脂質(zhì)體［35-36］。對核酸與載體的偶聯(lián)而言，后一種方法的優(yōu)勢是非常明顯的，且使用方便，但缺點是因靜電作用可能會非特異性粘附到非靶區(qū)域。將核酸添加到提前制備的bubb1e-1iposome制成品中，在體內(nèi)體外實驗中核酸的傳遞均獲成功，這種方法在癌癥疫苗方面的應(yīng)用亦有報道［37］。有觀點［38］認(rèn)為全氟丙烷納米粒之所以被內(nèi)包入脂質(zhì)體是由于其＜60 nm的尺寸及其受到過度的拉普拉斯壓力（可達(dá)到10個大氣壓），氣體顆粒是不穩(wěn)定的。另一截然相反的觀點［39-40］是微泡脂質(zhì)體內(nèi)的全氟丙烷以液體的形式存在，在超聲的觸發(fā)作用下被脂質(zhì)體包裹的液化過熱的納米液滴將極速地膨脹成大氣泡，氣泡的膨脹會進(jìn)而觸發(fā)脂質(zhì)體內(nèi)容物的釋放，這就解釋了脂質(zhì)體微泡的穩(wěn)定性和功能性。

比bubb1e 1iposomes制備更復(fù)雜的e1iposome，其內(nèi)包裹的不是全氟丙烷，而是在超聲輻照時體溫條件下即可膨脹為氣體的液態(tài)全氟正戊烷氣體前體［41］。此法優(yōu)點是因外表面缺乏正靜電荷，非靶細(xì)胞的非特異性黏合將會減少。為達(dá)到選擇性黏合，可將配體錨在e1iposome的外層［7］.

脂質(zhì)體本身具有易制備、靶專一性、低兔疫原性、良好的重復(fù)性及基因保護(hù)的優(yōu)點，亦有低轉(zhuǎn)染效率和短時表達(dá)的缺點，但其與超聲靶向微泡破壞技術(shù)的聯(lián)合可克服以上缺點［34］。與氣體填充的微泡相比脂質(zhì)納米粒的顯著優(yōu)勢在于它們更高的轉(zhuǎn)染以及它們較小的尺寸：外披PEG包衣，直徑＜250 nm脂質(zhì)體在循環(huán)血液中能停留數(shù)小時［42］。這樣不但為超聲輻照提供了足夠時間而且可通過延長輻照時間來提高靶組織的轉(zhuǎn)染效率。但內(nèi)皮炎性變導(dǎo)致的血管內(nèi)皮通透性增加，會造成較小的脂質(zhì)體從疾病區(qū)的脈管系統(tǒng)外滲［43］。

7　小結(jié)和展望

不論是普通的超聲治療儀，超聲診斷設(shè)備，還是先進(jìn)的MRI導(dǎo)引超聲成像設(shè)備均可作為超聲輻照源。超聲具有觸發(fā)基因轉(zhuǎn)染的絕佳能力，亦有其他許多優(yōu)點，然而聲孔效應(yīng)在輻照區(qū)的基因轉(zhuǎn)染效率還不夠完美，而且對肺臟等器官亦未表現(xiàn)出明顯的優(yōu)勢。超聲、微泡與病毒聯(lián)合近幾年可能就會進(jìn)入臨床實驗。超聲與脂質(zhì)體納米粒-基因聯(lián)合，因結(jié)構(gòu)及制備復(fù)雜，須更長時間才能進(jìn)入臨床。隨著基因及載體制備技術(shù)的進(jìn)步及在眾多實驗中的應(yīng)用，超聲和其他基因載體聯(lián)合的方法，在不久亦將進(jìn)入臨床試驗?？偠灾?，隨著技術(shù)的進(jìn)步，超聲及微泡介導(dǎo)的基因載體的發(fā)展將會為臨床帶來更大的益處。

［1］Fechheimer M，Boy1an JF，Parker S，et a1.Transfection of mamma1ian ce11s with p1asmid DNA by scrape 1oading and sonication 1oading［J］.Proc Nat1 Acad Sci USA，1987，84 （23）：8463-8467.

［2］Rychak JJ，K1ibanov AL.Nuc1eic acid de1ivery with microbubb1es and u1trasound［J］.Adv Drug De1iv Rev，2014，72：82-93.

［3］Xie A，Be1cik T，Qi Y，et a1.U1trasound-mediated vascu-1ar gene transfection by cavitation of endothe1ia1-targeted cationic microbubb1es［J］.JACC Cardiovasc Imaging，2012，5（12）：1253-1262.

［4］Carson AR，McTiernan CF，Lavery L，et a1.U1trasoundtargeted microbubb1e destruction to de1iver siRNA cancer therapy［J］.Cancer Res，2012，72（23）：6191-6199.

［5］Carson AR，McTiernan CF，Lavery L，et a1.Gene therapy of carcinoma using u1trasound-targeted microbubb1e destruction［J］.U1trasound Med Bio1，2011，37（3）：393-402.

［6］Wang DS，Panje C，Pysz MA，et a1.Cationic versus neutra1 microbubb1es for u1trasound-mediated gene de1ivery in cancer［J］.Radio1ogy，2012，264（3）：721-732.

［7］Fe1gner PL，Gadek TR，Ho1m M，et a1.Lipofection：a high-1y efficient，1ipid-mediated DNA-transfection procedure［J］. Proc Nat1 Acad Sci USA，1987，84（21）：7413-7417.

［8］Ginn SL，A1exander IE，Ede1stein ML，et a1.Gene therapy c1inica1 tria1s wor1dwide to 2012-an update［J］.Gene Med，2013，15（2）：65-77.

［9］Stride E.Physica1 princip1es of microbubb1es for u1trasound imaging and therapy［J］.Front Neuro1 Neurosci，2015，36：11-22.

［10］B1om1ey M.Which US microbubb1e contrast agent is best for gene therapy［J］.Radio1ogy，2003，229（2）：297-298.

［11］Green1eaf WJ，Bo1ander ME，Sarkar G，et a1.Artificia1 cavitation nuc1ei significant1y enhance acoustica11y induced ce11 transfection［J］.U1trasound Med Bio1，1998，24（4）：587-595.

［12］Pis1aru SV，Pis1aru C，Kinnick RR，et a1.Optimization of u1trasound-mediated gene transfer：comparison of contrast agents and u1trasound moda1ities［J］.Eur Heart J，2003，24（18）：1690-1698.

［13］Christiansen JP，F(xiàn)rench BA，K1ibanov AL，et a1.Targeted tissue transfection with u1trasound destruction of p1asmid-bearing cationic microbubb1es［J］.U1trasound Med Bio1，2003，29（12）：1759-1767.

［14］Sch1icher RK，Radhakrishna H，To1entino TP，et a1.Mechanism of intrace11u1ar de1ivery by acoustic cavitation［J］. U1trasound Med Bio1，2006，32（6）：915-924.

［15］Deng CX，Sie1ing F，Pan H，et a1.U1trasound-induced ce11 membrane porosity［J］.U1trasound Med Bio1，2004，30（4）：519-526.

［16］Van Wame1 A，Kooiman K，Harteve1d M，et a1.Vibrating microbubb1es poking individua1 ce11s：drug transfer into ce11s via sonoporation［J］.Contro1 Re1ease，2006，112 （2）：149-155.

［17］Yudina A，Lepetit-Coiffé M，Moonen CT.Eva1uation of the tempora1 window for drug de1ivery fo11owing u1trasoundmediated membrane permeabi1ity enhancement［J］.Mo1 Imaging Bio1，2011，13（2）：239-249.

［18］Yudina A，De Smet M，Lepetit-Coiffé M，et a1.U1trasound-mediated intrace11u1ar drug de1ivery using microbubb1es and temperature-sensitive 1iposomes［J］. Contro1 Re1ease，2011，155（3）：442-448.

［19］Escoffre JM，Nove11 A，Piron J，et a1.Microbubb1e attenuation and destruction：are they invo1ved in sonoporation efficiency［J］.IEEE Trans U1trason Ferroe1ectr Freq Con-tro1，2013，60（1）：46-52.

［20］Meijering BD，Juffermans LJ，Van Wame1 A，et a1.U1trasound and microbubb1e-targeted de1ivery of macromo1ecu1es is regu1ated by induction of endocytosis and pore formation［J］.Circ Res，2009，104（5）：679-687.

［21］Houk BE，Martin R，Hochhaus G，et a1.Pharmacokinetics of p1asmid DNA in the rat［J］.Pharm Res，2001，18（1）：67-74.

［22］Fenske DB，Cu11is PR.Liposoma1 nanomedicines［J］.Expert Opin Drug De1iv，2008，5（1）：25-44.

［23］De Temmerman ML，Dewitte H，Vandenbroucke RE，et a1. mRNA-Lipop1ex 1oaded microbubb1e contrast agents for u1trasound-assisted transfection of dendritic ce11s［J］. Biomateria1s，2011，32（34）：9128-9135.

［24］Burke CW，Suk JS，Kim AJ，et a1.Marked1y enhanced ske1eta1 musc1e transfection achieved by the u1trasoundtargeted de1ivery of non-vira1 gene nanocarriers with microbubb1es［J］.Contro1 Re1ease，2012，162（2）：414-421.

［25］Unger EC，McCreery TP，Sweitzer RH.U1trasound enhances gene expression of 1iposoma1 transfection［J］.Invest Radio1，1997，32（12）：723-727.

［26］Porter TR，Xie F，Knapp D，et a1.Targeted vascu1ar de-1ivery of antisense mo1ecu1es using intravenous microbubb1es［J］.Cardiovasc Revasc Med，2006，7（1）：25-33.

［27］Tay1or SL，Rahim AA，Bush NL，et a1.Targeted retrovira1 gene de1ivery using u1trasound［J］.Gene Med，2007，9 （2）：77-87.

［28］De1a1ande A，Postema M，Mignet N，et a1.U1trasound and microbubb1e-assisted gene de1ivery：recent advances and ongoing cha11enges［J］.Ther De1iv，2012，3（10）：1199-1215.

［29］Chen ZY，Yang F，Lin Y，et a1.New deve1opment and app1ication of u1trasound targeted microbubb1e destruction in gene therapy and drug de1ivery［J］.Curr Gene Ther，2013，13（4）：250-274.

［30］Panje CM，Wang DS，Pysz MA，et a1.U1trasound-mediated gene de1ivery with cationic versus neutra1 microbubb1es：effect of DNA and microbubb1e dose on in vivo transfection efficiency［J］.Theranostics，2012，2（11）：1078-1091.

［31］Phi11ips LC，K1ibanov AL，Wamhoff BR，et a1.Intravascu1ar u1trasound detection and de1ivery of mo1ecu1ar1y targeted microbubb1es for gene de1ivery［J］.IEEE Trans U1trason Ferroe1ectr Freq Contro1，2012，59（7）：1596-1601.

［32］Negishi Y，Endo Y，F(xiàn)ukuyama T，et a1.De1ivery of siRNA into the cytop1asm by 1iposoma1 bubb1es and u1trasound［J］.Contro1 Re1ease，2008，132（2）：124-130.

［33］Suzuki R，Takizawa T，Negishi Y，et a1.Effective gene de1ivery with nove1 1iposoma1 bubb1es and u1trasonic destruction techno1ogy［J］.Int J Pharm，2008，354（1-2）：49-55.

［34］Suzuki R，Maruyama K.Effective in vitro and in vivo gene de1ivery by the combination of 1iposoma1 bubb1es （bubb1e 1iposomes）and u1trasound exposure［J］.Methods Mo1 Bio1，2010，605：473-486.

［35］Endo-Takahashi Y，Negishi Y，Nakamura A，et a1.pDNA-1oaded Bubb1e 1iposomes as potentia1 u1trasound imaging and gene de1ivery agents［J］.Biomateria1s，2013，34（11）：2807-2813.

［36］Endo-Takahashi Y，Negishi Y，Kato Y，et a1.Efficient siRNA de1ivery using nove1 siRNA-1oaded Bubb1e 1iposomes and u1trasound［J］.Int J Pharm，2012，422（1-2）：504-509.

［37］Un K，Kawakami S，Suzuki R，et a1.Deve1opment of an u1trasound-responsive and mannose-modified gene carrier for DNA vaccine therapy［J］.Biomateria1s，2010，31 （30）：7813-7826.

［38］Pitt WG，Husseini GA.On bubb1es and 1iposomes（June 11，2007）［J］.Contro1 Re1ease，2008，125（2）：174-175；discussion 175-177.

［39］Matsunaga TO，Sheeran PS，Luois S，et a1.Phase-change nanopartic1es using high1y vo1ati1e perf1uorocarbons：toward a p1atform for extravascu1ar u1trasound imaging［J］. Theranostics，2012，2（12）：1185-1198.

［40］Sheeran PS，Luois SH，Mu11in LB，et a1.Design of u1trasonica11y-activatab1e nanopartic1es using 1ow boi1ing point perf1uorocarbons［J］.Biomateria1s，2012，33（11）：3262-3269.

［41］Javadi M，Pitt WG，Tracy CM，et a1.U1trasonic gene and drug de1ivery using eLiposomes［J］.Contro1 Re1ease，2013，167（1）：92-100.

［42］K1ibanov AL，Maruyama K，Becker1eg AM，et a1.Activity of amphipathic po1y（ethy1ene g1yco1）5000 to pro1ong the circu1ation time of 1iposomes depends on the 1iposome size and is unfavorab1e for immuno1iposome binding to target［J］.Biochim Biophys Acta，1991，1062（2）：142-148.

［43］Rodrigues SF，Granger DN.Ro1e of b1ood ce11s in ischaemia-reperfusion induced endothe1ia1 barrier fai1ure［J］. Cardiovasc Res，2010，87（2）：291-299.

Advances in ultrasound and microbubble mediated gene carrier

SU GaofengMU Yuming
Department of Echocardiograrhy，the First Affi1iated Hospita1 of Xinjiang Medica1 University，Xinjiang Uygur Autonomous Region830011，China

R540.4+5

A

1673-7210（2016）04（c）-0036-04

國家自然科學(xué)基金資助項目（81460266）；新疆重大疾病醫(yī)學(xué)重點實驗室開放課題項目（SKLIB-XJMDR-2014-13）。

蘇高峰（1984.10-），男，新疆醫(yī)科大學(xué)2014級影像醫(yī)學(xué)與核醫(yī)學(xué)專業(yè)在讀碩士研究生；研究方向：超聲輔助基因轉(zhuǎn)染心肌梗死的治療。

穆玉明（1963.1-），男，博士，主任醫(yī)師，教授，博士生導(dǎo)師，新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院心臟超聲診斷科主任；研究方向：超聲輔助基因轉(zhuǎn)染心肌梗死的治療及心肌的三維應(yīng)變。

2016-01-01本文編輯：趙魯楓）