皮層肌動蛋白與磷酸化黏著斑激酶在非小細胞肺癌中的表達及其與臨床病理因素的關系

鄭　末　姜忠敏

(天津市第五中心醫(yī)院病理科，天津　300450)

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皮層肌動蛋白與磷酸化黏著斑激酶在非小細胞肺癌中的表達及其與臨床病理因素的關系

鄭末姜忠敏

(天津市第五中心醫(yī)院病理科，天津300450)

〔摘要〕目的探討皮層肌動蛋白(Cortactin)與磷酸化黏著斑激酶(FAKPY397)在非小細胞肺癌(NSCLC)中的表達及其與臨床病理因素的關系。方法選取2014年5月至2015年5月該院收治的行擇期手術的NSCLC患者120例，分別取患者肺癌組織和癌旁正常組織，并應用免疫組織化學法檢測肺癌組織和癌旁正常組織中Cortactin和FAKPY397表達，分析兩者相關性。結果正常組織中Cortactin和FAKPY397表達陽性率顯著低于肺癌組織(P<0.05)；Ⅲ期和Ⅳ期患者肺癌組織Cortactin和FAKPY397表達陽性率顯著高于Ⅰ期和Ⅱ期患者(P<0.05)；淋巴結轉移者Cortactin和FAKPY397表達陽性率顯著高于無淋巴結轉移者(P<0.05)；Speaman分析顯示：Cortactin表達與FAKPY397表達呈正相關(r=0.532，P<0.05)。結論NSCLC組織中Cortactin和FAKPY397表達會顯著增高，兩者具有正相關關系，可能對NSCLC的發(fā)展具有促進作用。

〔關鍵詞〕皮層肌動蛋白；磷酸化黏著斑激酶；非小細胞肺癌

非小細胞肺癌(NSCLC)早期臨床表現不明顯，確診時一般處于中晚期，發(fā)病與多種因素有關〔1〕。癌細胞侵襲和轉移能力高者預后往往較差，其惡性程度也較高。皮層肌動蛋白(Cortactin)是一種廣泛存在于侵襲性偽足中的肌動蛋白結核蛋白，與細胞的侵襲和轉移存在較大關系。磷酸化黏著斑激酶(FAKPY397)與細胞增殖有關，有研究顯示〔2〕，FAKPY397與癌細胞的浸潤、轉移和增殖具有較大關系。本研究旨在分析Cortactin與FAKPY397在NSCLC中的表達及其與臨床病理因素的關系。

1資料與方法

1.1一般資料選取2014年5月至2015年5月我院收治的行擇期手術的NSCLC患者120例，均經病理確診，且均未經過任何治療。其中男63例，女57例，年齡37~80〔平均(56.3±1.1)〕歲，其中鱗癌69例，腺癌51例。根據WHO制定的分期標準〔3〕：Ⅰ期者54例，Ⅱ期24例，Ⅲ期者25例，Ⅳ期者17例。根據是否有淋巴結轉移分為：有淋巴結轉移54例，無淋巴結轉移66例。研究經倫理委員會批準，所有患者均知情同意并簽訂知情同意書。

1.2方法取所有入選者NSCLC組織及癌旁正常組織，將其放置于甲醛溶液中固定，然后采用石蠟包埋，將其制備成厚度約4 μm的切片，然后進行脫蠟、脫苯和水化待用。應用免疫組織化學染色法檢測組織中Cortactin與FAKPY397表達情況，染色法根據鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化物酶試劑說明進行操作，抗Cortactin和抗FAKPY397均經高壓修復處理，抗原修復液緩沖液pH6.0，以磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗作為對照。

1.3結果判定細胞染色強度為4等級：0分表示無染色；1分表示淺黃色，2分表示棕黃色，3分表示棕褐色。細胞陽性所占百分比分為5等級：0分表示<10%；1分表示10%~25%；2分表示26%~50%；3分表示51%~75%；4分表示>75%。總分=細胞染色強度等級×細胞陽性占比例等級。其中0~2分表示陰性，>2分表示陽性〔4〕。

1.4統計學方法應用SPSS17.0軟件進行χ2檢驗和Spearman等級相關分析。

2結果

2.1正常與腫瘤組織比較正常組織中Cortactin和FAKPY397表達陽性率分別為19.2%(23例)、24.2%(29例)，顯著低于肺癌組織的57.5%(69例)、52.5%(63例)(P<0.05)。

2.2不同分期比較Ⅲ期和Ⅳ期患者癌組織Cortactin和FAKPY397表達陽性率78.6%(33例)、69.0%(29例)，顯著高于Ⅰ期和Ⅱ期57.7%(45例)、44.9%(35例)(P<0.05)。

2.3不同淋巴結轉移比較淋巴結轉移者Cortactin和FAKPY397表達陽性率72.2%(39例)、64.8%(35例)，顯著高于無淋巴結轉移者的43.9%(29例)、42.4%(39例)(P<0.05)。

2.4相關性分析Cortactin表達與FAKPY397表達呈正相關關系(r=0.532，P=0.017)。

3討論

NSCLC是肺癌的主要類型，多數患者確診后處于中晚期，患者的預后較差，而癌組織的轉移和侵襲是導致患者預后差的最重要因素〔5〕。Cortactin的氨基端含有5或6個重復氨基酸序列，是Cortactin與纖維狀肌動蛋白(F-actin)連接的橋梁。也有報道顯示，Cortactin在肝癌、肺癌、結腸癌等組織中高表達，其表達量顯著高于周圍正常組織，且轉移和侵襲病灶中Cortactin表達能力會顯著增強〔6〕。Cortactin與腫瘤轉移有關的機制是：Cortactin可以和肌動蛋白相關蛋白(Arp2/3)復合體相互作用，進而導致F-actin的骨架發(fā)生重構，促使細胞之間的黏附能力降低，進而腫瘤出現轉移〔7〕。有研究顯示，前列腺癌、結腸癌等腫瘤細胞中FAKPY397的表達能力會顯著增加，且多種腫瘤細胞中存在FAKPY397基因擴增，在一定程度上說明FAKPY397表達增強可能與基因擴增存在較大關系〔8〕。有報道顯示，FAKPY397可以和多種含有SH2結構域的蛋白質分子進行結合，如細胞信號抑制因子、Src家族、生長相關蛋白(GAP)、生長因子連接蛋白等，可以使下游相應的事件被啟動，進而參與腫瘤的發(fā)生、侵襲和轉移〔9〕。本研究證實了Cortactin和FAKPY397表達與NSCLC進展有關，Cortactin導致細胞黏附能力降低，骨架發(fā)生重組，進而導致細胞出現轉移，導致腫瘤組織進展。FAKPY397可能增強Cortactin表達。

有研究顯示，FAKPY397能夠通過PRR2與PRR3區(qū)域和Cortactin相連接，進而增強Cortactin的表達能力〔10〕。也有研究顯示〔11〕，FAKPY397與相應蛋白相結合以后，可以催化相應的氨基酸位點，進而使其發(fā)生磷酸化。Cortactin是FAKPY397的催化對象，可以催化Cortactin導致其構象發(fā)生變化，致使其發(fā)生磷酸化，Cortactin發(fā)生磷酸化以后其表達能力會較前增強，使細胞的轉移能力顯著增強〔12〕。本研究充分說明Cortactin表達與FAKPY397表達具有協同作用，共同促進NSCLC組織的轉移和侵襲。分析其原因：Cortactin表達增強可以導致細胞骨架重組和黏附能力降低，細胞黏附能力降低會導致其轉移和侵襲能力增強。FAKPY397可以與Cortactin相連接，其表達能力增強可以促進其與Cortactin的連接能力，而FAKPY397與Cortactin相連接會增強Cortactin的表達能力，如此兩組相協同增強細胞的侵襲和轉移能力。臨床可以通過抑制Cortactin與FAKPY397表達改善非小細胞肺癌患者的預后。

4參考文獻

1姚嬋,劉益飛,章建國,等.Cortactin在浸潤性乳腺癌組織中的表達及其臨床意義〔J〕.腫瘤學雜志,2015;21(1):44-7.

2黃曉峰,張寧,王亞芳,等.siRNA下調Notch3表達對非小細胞肺癌骨轉移能力的影響〔J〕.現代腫瘤醫(yī)學,2014;22(11):2534-8.

3盧家奇,趙松,楊洋,等.Ki67表達對非小細胞肺癌淋巴結轉移的診斷價值〔J〕.中國老年學雜志,2014;34(23):6617-8.

4Mukherjee S,Kim J,Mooren OL,etal.Role of cortactin homolog HS1 in transendothelial migration of natural killer cells〔J〕.PLoS One,2015;10(2):e0118153.

5王鳳,呂京澴,沈銘紅,等.肺癌組織中HE4表達及其與臨床病理因素的關系〔J〕.診斷病理學雜志,2014;21(12):768-70.

6王濤,李小飛,韓勇,等.非小細胞肺癌不同肺葉切除術后對患者生活質量影響的研究〔J〕.現代生物醫(yī)學進展,2012;12(5):885-8,903.

7裴峰,宋立彪,宋瑛,等.血清CYFRA21-1、NSE和CEA對非小細胞肺癌輔助診斷的價值分析〔J〕.海南醫(yī)學院學報,2015;21(4):530-3.

8Shen HL,Liu QJ,Yang PQ,etal.Protein interactions of cortactin in relation to invadopodia formation in metastatic renal clear cell carcinoma〔J〕.Tumour Biol,2015;36(5):3417-22.

9Labrador-Horrillo M,Martínez MA,Selva-O'Callaghan A,etal.Identification of a novel myositis-associated antibody directed against cortactin〔J〕.Autoimmun Rev,2014;13(10):1008-12.

10谷艷嬌,張敬坤,包翠芬,等.FAK、FAKpY397和Src在肝細胞癌中的表達和意義〔J〕.重慶醫(yī)科大學學報,2013;38(8):851-4.

11何菁,夏添松,王水,等.皮動蛋白與腫瘤侵襲性研究進展〔J〕.中華腫瘤防治雜志,2015;22(1):72-5,80.

12孫波,于涓瀚,齊新陽,等.Cortactin及FAKPY397在非小細胞肺癌中的表達及關系〔J〕.現代腫瘤醫(yī)學,2015;23(4):464-7.

〔2015-12-20修回〕

(編輯袁左鳴/滕欣航)

〔中圖分類號〕R73

〔文獻標識碼〕A

〔文章編號〕1005-9202(2016)05-1132-02；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.05.051

第一作者：鄭末(1978-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事臨床病理學及腫瘤方面的研究。