用ELISA法檢測乙型肝炎兩對半準(zhǔn)確性的影響因素探討

王　 迪 張錦偉 韓亞男

（大連市第六人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 大連 116031）

用ELISA法檢測乙型肝炎兩對半準(zhǔn)確性的影響因素探討

王 迪 張錦偉 韓亞男

（大連市第六人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 大連 116031）

目的 探討用ELISA法（酶聯(lián)免疫吸附法）檢測乙型肝炎兩對半準(zhǔn)確性的影響因素。方法 選取2014年8月至2015年8月在我院采用ELISA法檢測乙型肝炎兩對半的1628例患者為觀察目標(biāo)，對其檢測過程進(jìn)行回顧性分析，并總結(jié)影響檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的影響因素。結(jié)果 影響1628例患者檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的因素具體如下：實(shí)驗(yàn)前標(biāo)本準(zhǔn)備工作不充足、檢驗(yàn)人員的素質(zhì)與水平較差、血清標(biāo)本質(zhì)量不達(dá)標(biāo)、檢驗(yàn)操作程序不規(guī)范、檢驗(yàn)結(jié)果研讀不準(zhǔn)確等。結(jié)論 乙型肝炎兩對半應(yīng)用ELISA法檢測過程中，檢驗(yàn)人員必須保持高度負(fù)責(zé)、嚴(yán)謹(jǐn)慎重的工作態(tài)度，妥善安排實(shí)驗(yàn)前的標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)備工作，規(guī)范操作，準(zhǔn)確評定檢驗(yàn)結(jié)果，對相關(guān)影響因素進(jìn)行控制，切實(shí)提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和有效性，以便為臨床診斷和治療提供真實(shí)可靠的數(shù)據(jù)參考。

乙型肝炎兩對半；影響因素；準(zhǔn)確性；ELISA法

乙型肝炎是臨床比較常見的一種惡性傳染性疾病，其對患者身體健康和生命安全造成嚴(yán)重威脅。ELISA法是臨床檢測乙型肝炎患者的常用方法之一，其檢測結(jié)果真實(shí)有效，可為臨床診斷和治療乙型肝炎提供詳盡的信息。然而，由于實(shí)際操作過程中多種因素的影響，ELISA法的檢測結(jié)果也存在假陽性或假陰性的可能性。明確可能影響ELISA法檢測結(jié)果的相關(guān)因素，制定相應(yīng)的防范措施，對提高乙型肝炎兩對半準(zhǔn)確性和檢驗(yàn)質(zhì)量具有非常重要的作用［1］。本文選取在我院采用ELISA法檢測乙型肝炎兩對半的1628例患者為觀察目標(biāo)，現(xiàn)作如下報(bào)道。

1　 資料與方法

1.1 一般資料：選取2014年8月至2015年8月在我院采用ELISA法檢測乙型肝炎兩對半的1628例患者作為觀察目標(biāo)，其中男996例，女632例，患者年齡27～70歲，平均年齡（48.3±6.2）歲?；仡櫺苑治鏊腥脒x病例的乙型肝炎兩對半臨床資料，對影響檢測結(jié)果的因素進(jìn)行評析。

1.2 ELISA法的具體應(yīng)用及影響因素分析：乙型肝炎兩對半應(yīng)用ELISA法進(jìn)行檢測時(shí)，做好試劑盒的選擇與保存非常關(guān)鍵。如果試劑盒質(zhì)量不佳，將會直接影響到檢測結(jié)果，所以試劑盒必須達(dá)到優(yōu)質(zhì)、可靠的要求，以保證其性能的穩(wěn)定性和靈敏度、特異性均不會出現(xiàn)任何差異。試劑盒的保存必須按照既定的要求和標(biāo)準(zhǔn)，開始進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前，將試劑盒在常溫下放置30 min。對試劑盒的性能以及實(shí)驗(yàn)操作過程的具體流程、易發(fā)生問題的環(huán)節(jié)，實(shí)驗(yàn)操作人員必須十分了解，除此之外，還必須，明確乙型肝炎兩對半每個(gè)標(biāo)志代表的不同意義以及失控處理方法、質(zhì)量檢測方法、標(biāo)準(zhǔn)等［2］。

標(biāo)本處理過程和保存也是影響乙型肝炎兩對半檢測結(jié)果的主要因素。采集標(biāo)本過程中，如果標(biāo)本已經(jīng)出現(xiàn)溶血的情況，那么已經(jīng)發(fā)生破裂的紅細(xì)胞就會不斷釋放出大量的氧化物酶活性物，對顯色劑的顯色反應(yīng)造成干擾，最后導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)小三陽或大三陽的結(jié)論。對采集試管進(jìn)行清潔處理時(shí)，必須嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行操作，保證對其進(jìn)行完全、徹底的清洗，以便有效控制檢查感染發(fā)生率。在實(shí)際的檢測過程中，盡量選擇玻璃試管或1次性真空采集管，標(biāo)本則選擇非抗凝標(biāo)本。標(biāo)本凝固不全也會在一定程度上對檢測結(jié)果造成不良影響。少數(shù)檢驗(yàn)操作人員為盡快完成ELISA法檢測工作，通常在標(biāo)本還沒有達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)要求時(shí)就對血清進(jìn)行強(qiáng)行分離，殘留的纖維蛋白原會使檢測結(jié)果出現(xiàn)假陽性的結(jié)論。所以，對血液標(biāo)本進(jìn)行分離操作之前，必須保證其充分凝固狀態(tài)，以得到準(zhǔn)確無誤的檢測結(jié)果［3］。ELISA法具有非常高的而敏感性，其對各種干擾元素的敏感性也非常強(qiáng)，因此，抗凝、離心操作時(shí)必須科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)，以降低交叉感染發(fā)生率，保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。按照血清的存放條件對標(biāo)本進(jìn)行保存，禁止對血清進(jìn)行顛倒混勻或者反復(fù)溶凍，也不可長時(shí)間存放。綜合乙型肝炎兩對半監(jiān)控技術(shù)的特異性與靈敏性對質(zhì)控方法進(jìn)行選擇，對病原體或抗體進(jìn)行篩查，保證血清OD值的穩(wěn)定性不受影響，切實(shí)提高檢測質(zhì)量。可通過復(fù)驗(yàn)的方法對失控標(biāo)本進(jìn)行處理，保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確率符合既定要求［4］。

根據(jù)臨床現(xiàn)在相關(guān)研究結(jié)果可知，很多人的血清標(biāo)本中都含有類風(fēng)濕因子、嗜異性抗體、補(bǔ)體等非液體性干擾物質(zhì)，這些物質(zhì)會對ELISA法檢測乙型肝炎兩對半的結(jié)果產(chǎn)生一定的影響，對患者血清標(biāo)本自身特異性導(dǎo)致異常實(shí)驗(yàn)結(jié)果的情況，需要再次進(jìn)行復(fù)檢的方法得到檢測結(jié)果。除此之外，在為患者進(jìn)行乙型肝炎兩對半ELISA法檢測之前，還必須明確其之前用藥情況，將血液本身的相關(guān)影響因素排除之后，方可進(jìn)行檢測。

乙型肝炎兩對半應(yīng)用ELISA法檢測時(shí)，加樣、溫育以及洗板、顯色這幾個(gè)環(huán)節(jié)是最為重要的影響因素。加樣時(shí)，首先需要明確實(shí)驗(yàn)室操作具體規(guī)程，然后按照這些標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行操作，經(jīng)常校準(zhǔn)加樣器，并徹底清洗加樣器。將標(biāo)本加入向反應(yīng)孔時(shí)，切不可同時(shí)與其他反應(yīng)孔接觸，使用振蕩器對標(biāo)本進(jìn)行＞30 s的混勻后才能將其置入溫育箱。溫育環(huán)節(jié)中需要對標(biāo)本是否出現(xiàn)周邊效應(yīng)進(jìn)行密切觀察，可選擇水育的方法進(jìn)行操作，以防止出現(xiàn)周邊效應(yīng)或其進(jìn)入其他影響物質(zhì)。進(jìn)行洗板的操作時(shí)，需要對時(shí)間差進(jìn)行控制，徹徹底底的進(jìn)行清洗，待洗凈之后還要做好污染的預(yù)防措施。使用含氯的消毒劑時(shí)，必須防控好其與反應(yīng)孔之間的相互作用，避免洗滌液發(fā)生外溢或者混用的情況出現(xiàn)。顯色是ELISA法檢測必不可少的一個(gè)溫育反應(yīng)過程，時(shí)間、光線、溫度等均會對這一過程產(chǎn)生干擾。所以進(jìn)行顯色操作時(shí)必須避免強(qiáng)光刺激，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)快速完成比色操作，嚴(yán)格審查檢測結(jié)果，做好詳細(xì)數(shù)據(jù)記錄［5］。

2　 結(jié) 果

影響1628例患者檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的因素具體如下：實(shí)驗(yàn)前標(biāo)本準(zhǔn)備工作不充足、檢驗(yàn)人員的素質(zhì)與水平較差、血清標(biāo)本質(zhì)量不達(dá)標(biāo)、檢驗(yàn)操作程序不規(guī)范、檢驗(yàn)結(jié)果研讀不準(zhǔn)確等。

3　 討 論

ELISA法對乙型肝炎兩對半的檢測具有非常重要的作用，其在乙型肝炎診斷和治療方面意義顯著［6］。由本次研究結(jié)果可知，實(shí)驗(yàn)前標(biāo)本準(zhǔn)備工作不充足、檢驗(yàn)人員的素質(zhì)與水平較差、血清標(biāo)本質(zhì)量不達(dá)標(biāo)、檢驗(yàn)操作程序不規(guī)范、檢驗(yàn)結(jié)果研讀不準(zhǔn)確等諸多因素都會對ELISA法檢測乙型肝炎兩對半的結(jié)果產(chǎn)生影響。對這些影響因素進(jìn)行充分分析并做好相應(yīng)的防范措施，可顯著提高ELISA法檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和檢測質(zhì)量。鑒于此，檢驗(yàn)人員必須保持高度負(fù)責(zé)、嚴(yán)謹(jǐn)慎重的工作態(tài)度，妥善安排實(shí)驗(yàn)前的標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)備工作，規(guī)范操作，準(zhǔn)確評定檢驗(yàn)結(jié)果，對相關(guān)影響因素進(jìn)行控制，切實(shí)提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和有效性，以便為臨床診斷和治療提供真實(shí)可靠的數(shù)據(jù)參考。

［1］ 黃家麗.分析對用ELISA法檢測乙肝兩對半準(zhǔn)確性的影響因素［J］.當(dāng)代醫(yī)藥論叢，2014，12（4）:168-169.

［2］ 趙遠(yuǎn)懷，向際兵，羅樂平，等.乙肝兩對半檢測的臨床意義和影響因素［J］.中國當(dāng)代醫(yī)藥，2011，18（3）:69-70.

［3］ 羅斌，曾永龍，滕元姬，等.TRFIA與ELISA法對乙肝兩對半測定的比較分析［J］.右江醫(yī)學(xué)，2012，40（5）:701-703.

［4］ 楊雙明.ELISA法檢測患者乙肝兩對半的影響因素及意義［J］.健康必讀（中旬刊），2013，12（8）:154-.

［5］ 石梁.酶聯(lián)免疫法和膠體金快速檢測板檢測乙肝兩對半的比較分析［J］.臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)電子雜志，2015，49（28）:5919-5920.

［6］ 薛春楊，周建波.ELISA法乙肝兩對半檢測影響因素分析和臨床意義［J］.中國誤診學(xué)雜志，2011，11（16）:3913-3914.

［7］ 張琴.ELISA法檢測乙肝兩對半的影響因素及處理方法［J］.中國保健營養(yǎng)（中旬刊），2013，26（5）:208.

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1671-8194（2016）30-0142-02