即溶靈芝的質(zhì)量控制

張佳麗宋 翔李云蘭*

（1 山西醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，山西 太原 030001；2 山西醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院，山西 太原 030001）

即溶靈芝的質(zhì)量控制

張佳麗1△宋 翔2△李云蘭1*

（1 山西醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，山西 太原 030001；2 山西醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院，山西 太原 030001）

目的 建立即溶靈芝的質(zhì)量控制方法。方法 采用紫外分光光度法測定靈芝多糖的含量。結(jié)果 靈芝多糖的含量測定線性范圍為3.44～17.19 μg/mL，回歸方程為y=5.4036m+0.0370（r=0.9996）；三批樣品中靈芝多糖的含量分別為（19.0±0.25），（24.1±0.93）及（14.6 ±0.17）g/100 g。結(jié)論 本法簡便靈敏，精密度高，重現(xiàn)性好，穩(wěn)定性強(qiáng)，能對即溶靈芝的實(shí)際樣品進(jìn)行質(zhì)量檢測。

即溶靈芝；靈芝多糖；含量測定；質(zhì)量控制

△并列第一作者

靈芝為多孔菌科真菌赤芝Ganoderma lucidum （Leyss.ex.Fr.）Karst.或紫芝Ganoderma sinense Zhao， Xu et Zhang的干燥子實(shí)體，具有增強(qiáng)人體免疫力、延年益壽等功效。即溶靈芝是由靈芝提取物制成的細(xì)膩、疏松、無結(jié)塊的粉狀物，一般為棕色或棕褐色，具有靈芝特有的香氣，味苦，無異味。

靈芝多糖作為靈芝的一類重要活性成分，主要由D-葡萄糖，D-半乳糖等構(gòu)成，具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗氧化等功效。植物體的碳素營養(yǎng)性狀常以可溶性多糖的含量作為重要指標(biāo)，因此本文以即溶靈芝的靈芝多糖作為含量測定指標(biāo)。

1 材 料

D-無水葡萄糖（0833-9501，含量≥99.0%）對照品購于中國藥品生物制品鑒定所；蒽酮購于國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司（分析純，30015014，技術(shù)條件符合Q/CYDZ 855-2008，批號20111207）；即溶靈芝供試品（批號分別為：20130310，20130311，20130312）。

2 方法與結(jié)果

2.1 含量測定原理：糖在濃硫酸作用下，可經(jīng)脫水反應(yīng)生成糠醛或羥甲基糠醛，生成的糠醛或羥甲基糠醛可與蒽酮反應(yīng)生成藍(lán)綠色糠醛衍生物。在一定范圍內(nèi)，糠醛衍生物的顏色深淺與糖的含量成正比，采用紫外分光光度法（北京普析1901型紫外-可見分光光度計(jì)）測定吸光度值，計(jì)算葡萄糖的含量，測定方法參照中國藥典2010年版一部附錄VA［1］。

2.2 溶液的配制：精密稱取蒽酮0.1 g，加80%的硫酸溶液100 mL使之溶解，搖勻，即得硫酸蒽酮溶液。精密稱取干燥至恒重的D-無水葡萄糖對照品13.75 mg，加水制成每1 mL含有0.1375 mg的對照品溶液。

取本品粉末約0.1 g，精密稱定，置索氏提取器中，加水90 mL，電加熱器加熱回流提取至提取液無色，提取液轉(zhuǎn)移至100 mL量瓶中，加水至刻度，搖勻，精密量取10 mL，加入乙醇150 mL，搖勻，4 ℃放置12 h，取出，離心，傾去上清液，沉淀加水溶解，轉(zhuǎn)移至50 mL量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

2.3 最大吸收波長的確定：精密量取對照品溶液0.6 mL（2.2項(xiàng)下），置10 mL具塞試管中，加水1.4 mL，加入硫酸蒽酮溶液6 mL，搖勻，置水浴中加熱15 min，取出，加入冰浴中冷卻15 min，照紫外-可見分光光度法（附錄V A），在400～800 nm波長范圍內(nèi)掃描。樣品在625 nm處有最大吸收峰，故選擇625 nm為測定波長。

2.4 方法學(xué)考察

2.4.1 線性關(guān)系考察：分別精密吸取對照品溶液（2.2項(xiàng)下）0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 mL，操作步驟同上，測定吸光度，以吸光度y為縱坐標(biāo)，葡萄糖重量m為橫坐標(biāo)進(jìn)行回歸，得到線性方程為：y=5.4036m+0.0370（r=0.9996）。在3.44～17.19 μg/mL范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。

2.4.2 精密度試驗(yàn)：取對照品溶液（2.3項(xiàng)下），平行測定6次，吸光度的RSD為0.2%。精密度良好，能夠滿足定量分析的一般要求。

2.4.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)：精密量取供試品溶液（2.2項(xiàng)下）（批號20130310）2.0 mL，操作步驟同上，測定吸光度，放置不同時間后（0，10，20，30，60，120，240，480 min）重復(fù)測定，8次測定吸光度的RSD為0.44%，說明供試品溶液在8 h內(nèi)較為穩(wěn)定，能夠滿足定量分析的一般要求。

2.4.4 重現(xiàn)性試驗(yàn)：制備6份供試品溶液（2.2項(xiàng)下）（樣品批號20130310），操作步驟同上，測定吸光度，計(jì)算含量及RSD。試驗(yàn)結(jié)果的RSD值為1.6%，滿足定量分析的一般要求。

2.4.5 加樣回收率試驗(yàn)：精密稱取樣品（樣品批號20130310，葡萄糖含量189.0 mg/g）6份，分別精密加入無水葡萄糖對照品適量，操作步驟同上，測定吸光度，計(jì)算回收率和RSD。由試驗(yàn)結(jié)果可知（n=6），平均加樣回收率為（101.8±1.27）%，RSD值為1.2%，滿足定量分析的一般要求。

2.5 含量測定：分別精密稱取樣品（批號分別為20130310，20130311，20130312）各3份，按2.2項(xiàng)下制備供試品溶液，操作步驟同上，測定吸光度，計(jì)算樣品中葡萄糖的含量。由試驗(yàn)結(jié)果可知，三批即溶靈芝樣品，以無水葡萄糖計(jì)（n=3），含量分別為（19.0 ±0.25），（24.1±0.93），（14.6±0.17）g/100 g，RSD值分別為1.3%，3.9%，1.2%。

3 討 論

采用紫外分光光度法能有效地測定即溶靈芝中靈芝多糖的含量。該法具有精密度高，重現(xiàn)性好，穩(wěn)定性強(qiáng)的特點(diǎn)。在檢測中，未溶解樣品的殘?jiān)?xì)胞壁中的纖維素、半纖維素等）可與蒽酮試劑發(fā)生反應(yīng)，因此檢測中需將殘?jiān)コ?，避免測定誤差。

［1］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）［M］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010.

R282

B

1671-8194（2016）14-0052-01

“山西省自然科學(xué)基金（No.2014011027-1）、山西省科技攻關(guān)項(xiàng)目（20130313021-9）和山西省高等學(xué)校和山西醫(yī)科大學(xué)教學(xué)改革項(xiàng)目“藥學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心本科生SRT實(shí)踐教學(xué)培養(yǎng)模式的研究”）

E-mail： liyunlanrr@163.com