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    橙皮苷對D-氨基半乳糖小鼠急性肝損傷氧化應激的影響

    2016-01-29 05:15:39龔子恒荊州中學高三6班湖北荊州434000
    長江大學學報(自科版) 2015年36期
    關鍵詞:肝損傷氧化應激

    龔子恒 (荊州中學高三6班,湖北 荊州 434000)

    范瑞琴 (荊州市第二人民醫(yī)院肝病科,湖北 荊州 434000)

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    橙皮苷對D-氨基半乳糖小鼠急性肝損傷氧化應激的影響

    龔子恒(荊州中學高三6班,湖北 荊州 434000)

    范瑞琴(荊州市第二人民醫(yī)院肝病科,湖北 荊州 434000)

    [摘要]目的:研究橙皮苷對D-氨基半乳糖(D-GalN)小鼠急性肝損傷氧化應激的影響。方法:40只小鼠隨機分為正常組、模型組、橙皮苷低、高劑量組,各組分別灌胃給藥7d后,通過腹腔注射D-GalN誘導急性肝損傷模型,計算小鼠肝指數(shù),測定血清中谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)以及肝組織中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛 (MDA)。結果:模型組與正常組比較小鼠肝指數(shù)顯著升高,血清ALT、AST及ALP水平顯著升高,肝組織勻漿中GSH-Px 、SOD活性顯著降低,MDA含量顯著升高。橙皮苷低、高劑量組與模型組比較,降低了D-GalN致肝損傷小鼠肝指數(shù),降低血清中ALT、AST及ALP水平,提高肝組織勻漿中GSH-Px 、SOD活性,降低MDA含量。結論:橙皮苷對D-GalN誘導的小鼠急性肝損傷具有明顯保護作用,其機制可能與減輕小鼠肝損傷氧化應激反應有關。

    [關鍵詞]橙皮苷;D-氨基半乳糖;肝損傷;氧化應激

    橙皮苷是橙皮素與蕓香糖形成的二氫黃酮苷類化合物,廣泛存在于豆科、蕓香科、柑橘屬等植物之中,在柑橘類植物果皮內含量尤為豐富[1]。研究發(fā)現(xiàn),橙皮苷具有抗菌、抗氧化、抗血栓形成及抗腫瘤等多種藥理學作用[2,3]。本實驗采用D-GalN致小鼠急性肝損傷模型,研討橙皮苷對急性肝損傷氧化應激的影響。

    1材料與方法

    1.1動物

    昆明種雄性小鼠40只,體重18~20g,由武漢大學動物實驗中心提供。

    1.2藥物

    橙皮苷和D-氨基半乳糖(D-GalN)均購于Sigma公司;羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)購于上海國藥集團;谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)等購于南京建成生物工程研究所。

    1.3方法

    1)分組與給藥將小鼠隨機分為4組,即正常組、模型組、橙皮苷低劑量組(150mg/kg)及高劑量組(300mg/kg)。正常組及模型組給予0.5%CMC-Na灌胃,橙皮苷低、高劑量組將橙皮苷溶于0.5%CMC-Na配成不同劑量的溶液灌胃,持續(xù)7天。末次給藥2h 后,除正常組外,剩余各組腹腔注射10%D-GalN生理鹽水溶液600mg/kg誘導小鼠急性肝損傷。末次處理后各組動物禁食24h,不禁水。

    2)標本檢測指標小鼠摘眼球取血,靜置后離心分離血清,嚴格參照試劑盒說明檢測ALT、AST及ALP水平。小鼠處死后立即摘取肝臟,生理鹽水漂洗,吸干準確稱重,肝指數(shù)(%)=(肝臟重量/ 體重)×100%。取部分肝左葉組織制備10% 肝勻漿,檢測GSH-Px 、SOD及MDA水平。

    1.4統(tǒng)計學分析

    2結果

    2.1橙皮苷對肝指數(shù)的影響

    表1 橙皮苷對肝指數(shù)的影響

    注:與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01,下同。

    模型組與正常組比較肝指數(shù)顯著升高(P<0.01),而橙皮苷低、高劑量組與模型組比較肝指數(shù)顯著降低(P<0.01),見表1。

    2.2橙皮苷對血清ALT、AST及ALP的影響

    模型組與對照組比較,ALT、AST及ALP水平顯著升高(P<0.01)。橙皮苷低、高劑量組與模型組比較,ALT、AST及ALP水平顯著降低(P<0.05或P<0.01),其中高劑量組作用更明顯(P<0.01),見表2。

    表2 橙皮苷對血清ALT、AST及ALP的影響

    2.3橙皮苷對肝組織中GSH-Px 、SOD及MDA的影響

    模型組與正常組比較,肝組織勻漿中GSH-Px 、SOD的活性顯著降低(P<0.01),MDA的含量顯著升高(P<0.01);橙皮苷低、高劑量組與模型組比較,顯著升高肝組織中GSH-Px 、SOD活性,顯著降低MDA含量(P<0.01),見表3。

    表3 橙皮苷對肝組織中GSH-Px、SOD及MDA的影響

    3討論

    D-GalN導致小鼠急性肝損傷是一種經(jīng)典的篩選保肝藥物的動物模型,與人類急性肝炎的病理學變化相似[4]。D-GalN作為一種磷酸尿嘧啶核苷酸干擾劑,通過競爭生成二磷酸尿苷半乳糖使磷酸尿苷耗竭,引起肝細胞代謝障礙,導致肝細胞凋亡或死亡;同時過量自由基的產生和膜脂過氧化反應,損傷細胞膜結構,改變膜的通透性,影響肝細胞功能,最終導致肝損傷[5]。本研究發(fā)現(xiàn),模型組肝功能指標ALT、AST、ALP水平及肝指數(shù)顯著升高,表明肝損傷模型誘導成功;肝組織勻漿中GSH-Px 、SOD的活性顯著降低,MDA的含量顯著升高,提示模型組肝損傷與氧化應激反應有關。

    橙皮苷給藥干預結果顯示,低、高劑量組與模型組相比,顯著降低了小鼠肝指數(shù),降低ALT、AST及ALP水平,且有一定的劑量依賴關系,明顯改善肝組織病變程度,表明橙皮苷對D-GalN導致的急性肝損傷有一定的保護作用。研究還發(fā)現(xiàn),肝組織勻漿中GSH-Px、SOD活性顯著升高,MDA含量顯著下降,機體內抗氧化體系包括酶和非酶系統(tǒng)兩類,酶系統(tǒng)中重要的抗氧化酶有GSH-Px和SOD等,能有效清除代謝過程中產生的自由基,MDA是膜脂過氧化的終產物,傷害細胞膜結構,其含量高低可以判斷肝細胞損傷程度及氧化應激水平[6],提示橙皮苷對肝損傷的保護機制可能與提高肝臟抗氧化酶活性,清除氧自由基,防止過度的氧化應激反應有關。

    本研究證實中藥有效成分橙皮苷對D-GalN誘導的急性肝損傷有較好的保護作用,其機制可能與減輕小鼠肝損傷氧化應激反應有關,此結果為開發(fā)有效的病毒性肝炎防治藥物奠定實驗基礎,但橙皮苷藥理學作用廣泛,是否還有其他保肝作用機理尚需進一步探究。

    [參考文獻]

    [1]李榮,胡成穆,姜輝,等.橙皮苷的提取及其抗炎活性研究[J].安徽醫(yī)科大學學報,2007,42(5):546~549.

    [2]Morand C, Dubray C, Milenkovic D, et al.Hesperidin contributes to the vascular protective effects of orange juice: a randomized crossover study in healthy volunteers[J].Am J Clin Nutr, 2011,93(1):73~80.

    [3]Pradeep K, Ko K C, Choi M H, et al.Protective effect of hesperidin, a citrus flavanoglycone, against γ-radiation-induced tissue damage in Sprague-Dawley rats[J].J Med Food, 2012, 15(5):419~427.

    [4]Keppler D,Lesch R,Reutter W,et al.Experimental hepatitis induced by D-galactosamine[J].Exp Mol Pathol,1968,9(2):279~290.

    [5]Decker K,Keppler D.Galactosamine hepatitis: key role of the nucleotide deficiency period in the pathogenesis of cell injury and cell death[J].Rev Physiol Biochem Pharmacol,1974,71:77~106.

    [6]Zheng S,Sanada H,Dohi H,et al.Suppressive Effect of Modified Arabinoxylan from Rice Bran (MGN-3) on D-Galactosamine-Induced IL-18 Expression and Hepatitis in Rats[J].Biosci Biotechnol Biochem,2012,76(5):942~946.

    [編輯]方多

    [引著格式]龔子恒,范瑞琴.橙皮苷對D-氨基半乳糖小鼠急性肝損傷氧化應激的影響[J].長江大學學報(自科版),2015,12(36): 98~99,107.

    [中圖分類號]R285.5

    [文獻標志碼]A

    [文章編號]1673-1409(2015)36-0098-02

    通信作者:

    [作者簡介]龔子恒(1998-),男,在讀學生;范瑞琴,fanruiqing79@163.com。

    [收稿日期]2015-09-04 2015-08-25

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