PTEN在大腸癌中的表達及臨床病理學(xué)研究

羅賢勇　龐國蓮　尚孔順　錢玉蓮

（云南省曲靖市第一人民醫(yī)院，云南 曲靖 6555000 ）

PTEN在大腸癌中的表達及臨床病理學(xué)研究

羅賢勇龐國蓮尚孔順錢玉蓮

（云南省曲靖市第一人民醫(yī)院，云南 曲靖 6555000 ）

目的 探討PTEN蛋白在大腸癌組織中的表達缺失及與其發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。方法 采用免疫組織化學(xué)S-P法評價PTEN蛋白在大腸癌組織與正常大腸組織中的表達情況。結(jié)果 PTEN蛋白在大腸癌組織中表達率明顯降低，表達率為38.09%（16/42），在正常大腸組織中高表達，表達率為100%（42/42），具有顯著性差異（P＜0.05）；PTEN蛋白的失表達與大腸癌的分化程度、臨床分期及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有相關(guān)性（P＜0.05），而與患者的年齡、性別無相關(guān)性，統(tǒng)計學(xué)無顯著性差異（P＞0.05）。結(jié)論 PTEN蛋白可能與大腸癌的發(fā)生、發(fā)展具有一定的相關(guān)性。

PTEN蛋白；大腸癌；免疫組化

大腸癌是西北歐、北美、澳大利亞最常見的惡性腫瘤之一，然而我國隨著生活方式、生活環(huán)境等因素的改變，大腸癌的發(fā)病率在逐年增加。大腸癌的發(fā)生、發(fā)展與遺傳因素、癌基因的過表達及抑癌基因的失表達有密切關(guān)系。PTEN蛋白即第10染色體缺失與張力蛋白同源的磷酸酶基因是一個具有磷酸酶活性的抑癌基因，可抑制腫瘤的發(fā)生［1］。本文采用免疫組織化學(xué)方法研究大腸癌組織中PTEN蛋白的表達情況，旨在探討PTEN蛋白的失表達與大腸癌的發(fā)生發(fā)展是否具有一定的相關(guān)性。

1　資料與方法

1.1研究對象：收集2014年1月至2015年6月時間段內(nèi)送檢云南省曲靖市第一人民醫(yī)院病理科且經(jīng)病理診斷證實為大腸癌的術(shù)后手術(shù)標本42例，年齡在30～60歲（中位年齡為45歲），男性23例，女性19例。并取此42例標本的正常大腸組織做為對照組。

1.2方法：采用鏈菌素親生物素-過氧化酶法即S-P法：石蠟切片經(jīng)二甲苯脫蠟、高濃度到低濃度梯度乙醇水化后將其置于10 mmol/L檸檬酸鈉緩沖液內(nèi)，高溫高壓抗原修復(fù)2 min，內(nèi)源性過氧化物酶阻斷。一抗采用鼠抗人PTEN單克隆抗體，DAB顯色，蘇木素復(fù)染。低濃度到高濃度乙醇梯度脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。陰性對照采用PBS液代替一抗，用陽性組織切片作陽性對照。在同等條件下對對照組與實驗組標本進行免疫組化染色。

1.3結(jié)果判定：PTEN蛋白陽性部位位于細胞核，陽性細胞呈棕黃色顆粒狀，根據(jù)陽性細胞所占的百分比（＜25%為1分；25%～50%為2分；＞50%為3分）及染色強度（無色為0分；淺黃色為1分；黃色為2分；棕黃色為3分）進行評分。二者相乘，乘積≤3為PTEN蛋白陰性表達；＞3為PTEN蛋白陽性表達［2］。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理：應(yīng)用SPSS17.0 for windows 對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，χ2檢驗做相關(guān)分析，P＜0.05具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)　果

2.1PTEN蛋白的表達情況：PTEN蛋白表達定位于細胞核，呈黃或棕黃色顆粒狀，42例大腸癌組織中有16例陽性表達，陽性率為38.09%（16/42），42例正常腸組織中PTEN均表達為陽性，陽性率為100%（42/42），PTEN蛋白在大腸癌中的陽性表達率明顯低于正常的大腸組織，差異具有顯著性（P=0.00）。

2.2PTEN蛋白在大腸癌組織中的失表達與臨床病理學(xué)的關(guān)系：本研究顯示，在15例高分化大腸癌病例中有13例PTEN蛋白表達，表達率為86.67%（13/15），在27例中低分化大腸癌中有9例PTEN蛋白表達，表達率為33.33%（9/27）。二者相比，差異具有顯著性（χ2=12.13，P=0.00）； 在臨床分期中，判定為Ⅰ+Ⅱ期的18例大腸癌中有10例PTEN蛋白表達，陽性率為55.56%（10/18），判定為Ⅲ期的24例大腸癌組織中有7例PTEN蛋白表達，陽性率為29.17%（7/24），差異具有顯著性（χ2=13.58，P=0.00）；在19例無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的大腸癌中，有11例PTEN蛋白表達，陽性率為57.89%（11/19），在23例有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的大腸癌中，有9例PTEN蛋白表達，其陽性率為39.13%（9/23），差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=8.87，P=0.00）；在23例男性病例與19例女性病例中，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=0.18，P=0.75）；大腸癌患者年齡＜45歲的26例與年齡≥45歲的16例相比較，差異亦無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=0.12，P=0.83）。

由上所述，PTEN蛋白的表達失活與大腸癌的分化程度、臨床分期及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有相關(guān)性（P＜0.05），而與患者的年齡、性別無相關(guān)性（P＞0.05）。

3　討　論

大腸癌是我國消化系統(tǒng)常見的惡性腫瘤，近年來，隨著社會壞境的改變、生活方式及飲食結(jié)構(gòu)的變化等因素，其發(fā)病率、病死率都有所上升。大腸癌的發(fā)生發(fā)展與癌基因的激活、抑癌基因的失活具有一定的相關(guān)性。PTEN蛋白是近年來發(fā)現(xiàn)的一個抑癌基因，其位點位于人染色體10q23.3，包含9個外顯子和8個內(nèi)含子，大小約為218 kb，組成，其編碼由403個氨基酸殘基組成的蛋白質(zhì)［2］，PTEN蛋白表達失活后喪失其抑癌功能，使腫瘤細胞大量增值，PTEN蛋白失活主要表現(xiàn)為突變、丟失及表達降低或不表達［3］。

本研究對42例大腸癌組織標本及正常的大腸組織中PTEN蛋白檢測結(jié)果表明，PTEN蛋白在高分化大腸癌組織中陽性表達率為86.67%（13/15），中～低分化癌中陽性率為陽性率為33.33%（9/27），二者相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=12.13，P=0.00）；在臨床分期中，判定為Ⅰ+Ⅱ期的18例大腸癌中有10例PTEN蛋白表達，陽性率為55.56%（10/18），判定為Ⅲ期的24例大腸癌組織中有7例PTEN蛋白表達，陽性率為29.17%（7/24），差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=13.58，P＜0.05）；在未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病例中，PTEN蛋白表達率為57.89%（11/19），在發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病例中表達率為39.13%（9/23），二者相比差異具有顯著性（χ2=8.87，P=0.00）；PTEN蛋白的表達與患者的性別及年齡無明顯相關(guān)性。

本研究結(jié)果表明，PTEN蛋白在大腸癌組織中的表達率明顯低于正常的大腸組織，隨著大腸癌分化程度的降低PTEN蛋白的表達亦降低，在淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移的病例中低于在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病例，在臨床分期判定為Ⅲ期的大腸癌中低于判定為Ⅰ+Ⅱ期的大腸癌病例，而與患者的年齡、性別無相關(guān)性，由此提示PTEN蛋白的表達與大腸癌的發(fā)生發(fā)展具有一定的相關(guān)性，且參與大腸癌的發(fā)生、浸潤及轉(zhuǎn)移。 總之，大腸癌的發(fā)生、浸潤及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與PTEN蛋白的表達失活關(guān)系較為密切，本研究對臨床大腸癌的治療及預(yù)后判斷能提供一定的幫助。

［1］ 董華承，范麗昕，樸正愛，等.PTEN、nm23-H1和Syk在大腸癌中的表達及意義［J］.臨床腫瘤學(xué)雜志，2013，18（5）:403-407.

［2］ 藍顯明，曾彬，唐淑妮.大腸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與PTEN、COX-2表達的相關(guān)性［J］.實用癌癥雜志，2015，30（9）:1296-1298.

［3］ Sun Y，Tian H，Wang L.Effects of PTEN on the proliferation and apoptosis of colorectalcancer cell via the phosphoinositol-3-kinase/ kt pathway［J］.Oncol Rep，2015，33（4）:1828-1836.

Expression of PTEN and Clinial Pathology Research in Colorectal Cancer

LUO Xian-yong， PANG Guo-lian， SHANG Kong-shun， QIAN Yu-lian
（The First People’s Hospital of Qujing， Qujing 655000， China）

Objective To investigate the non-expression of PTEN in colorectal and the relationship between the non-expression of PTEN and clinincal and pathologic parameters. Methods we evaluated expression of PTEN protein in normal colon tissue by immunohitochemical S-P method. Results Expression of PTEN protein is significantly decreased in colorectal cancer tissues， The expression rate was 38.09% （16/42）， Expression of PTEN protein is increased In normal colon tissue， The expression rate was 100% （42/42）， that has a significant difference （P＜0.05）； PTEN protein expression has correlation with differentiation of colorectal cancer， stage of clinical and lymph node metastasis in colorectal cancer（P＜0.05）. The expression of PTEN protein has not correlation and the patient's age， gender（P＞0.05）. Conclusion PTEN protein may be related to the incidence and the development of colorectal cancer.

PTEN protein； Colorectal cancer； Immunohistochemistry

R735.3+4

B

1671-8194（2016）29-0001-02