白番紅花球莖提取物對(duì)小鼠急性毒性的實(shí)驗(yàn)研究

楊元華1劉　靜1韓汝春1陳媛媛1孫　艷2周冬梅2?！￠?1.新疆伊寧衛(wèi)生學(xué)校，新疆　伊寧　835000; 2.新疆伊犁州友誼醫(yī)院，新疆　伊寧　835000

白番紅花球莖提取物對(duì)小鼠急性毒性的實(shí)驗(yàn)研究

楊元華1劉靜1韓汝春1陳媛媛1孫艷2周冬梅2牛榕2
1.新疆伊寧衛(wèi)生學(xué)校，新疆伊寧835000; 2.新疆伊犁州友誼醫(yī)院，新疆伊寧835000

【摘要】目的:觀察白番紅花球莖提取物對(duì)小鼠的急性毒性反應(yīng)，評(píng)價(jià)其安全性，為其新藥開(kāi)發(fā)和臨床安全用藥提供理論依據(jù).方法:采用急性毒性實(shí)驗(yàn)方法，對(duì)小鼠ig不同濃度(88. 80、93. 86、99. 20、104. 86、111. 00g/kg)的白番紅花球莖提取物，觀察并記錄小鼠的活動(dòng)和毒性反應(yīng);采用改良寇氏法計(jì)算白番紅花球莖提取物對(duì)小鼠ig的半數(shù)致死量(LD50)和95%的可信區(qū)間.結(jié)果:白番紅花球莖提取物對(duì)小鼠7d內(nèi)ig的LD50為100. 46g/kg，其95%的可信區(qū)間為91. 42～109. 50g/kg.結(jié)論:白番紅花球莖提取物有較小的毒性，該結(jié)果為其藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)和臨床應(yīng)用提供了科學(xué)依據(jù).

【關(guān)鍵詞】白番紅花球莖;急性毒性;半數(shù)致死量

Acute Toxicity of the Crocus Alatavicus Regel et Sem Sativus Corms Extract on Mice

YANG Yuan-hua1，LIU Jing1，HAN Ru-chun1，CHEN Yuan-yuan1，SUN Yan2，ZHOU Dong-mei2，NIU Rong2

1. Xinjiang Yining health school，Yining 835000，China;

2. Xinjiang Yili Prefecture friendship hospital，Yining 835000，China

Abstract:Objective To observe acute toxicity of the Crocus alatavicus Regel et Sem sativus corms extract in mice，evaluate its safety，provide a theoretical basis for new drug research and clinical safety of medication．Methods To record its activity and toxicity in mice by Acute toxicity test method，The mouse ig with different concentrations(88. 80、93. 86、99. 20、104. 86、111. 00g/kg)of Crocus alatavicus Regel et Sem sativus corms extract; Using Karber method modified to calculate Crocus alatavicus Regel et Sem corms extract on mice ig median lethal dose(LD50)and 95% confidence intervals．Results Crocus alatavicus Regel et Sem sativus corms extract on mice 7d ig LD50is 100. 46g/kg，Its 95% confidence interval 91. 42～109. 50g/kg．ConclusionCrocus alatavicus Regel et Sem sativus corms extract had lower toxicity，It provide a scientific basis for pharmacodynamic experimental and clinical applications．

Key words:Crocus alatavicus Regel et Sem sativus corms; Acute toxicity; Median lethal dose

白番紅花(Crocus alatavicus Regel et Sem)是鳶尾科番紅花屬的多年生草本植物，主要分布在新疆伊犁地區(qū)各縣的山坡上(海拔1200～3000m)，物產(chǎn)資源豐富.白番紅花球莖是白番紅花的地下球莖，又稱(chēng)土馬錢(qián)子，是哈薩克族民間常用藥物，在民間主要是搗碎放入馬奶子中服用，用于治療風(fēng)寒濕痹、跌打腫痛、腰腳無(wú)力等疾病.目前該藥的文獻(xiàn)記載很少，只是對(duì)白番紅花的植物形態(tài)有所描述[1－3]，對(duì)白番紅花球莖提取物毒性研究未見(jiàn)報(bào)道.本實(shí)驗(yàn)對(duì)白番紅花球莖提取物進(jìn)行了小鼠灌胃急性毒性研究[4－6]，為其進(jìn)一步藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)提供理論依據(jù).

1　材料與儀器

1. 1藥材白番紅花球莖采于新疆伊犁察布查爾錫伯自治縣海拔1500米的山坡上，經(jīng)新疆維吾爾自治區(qū)藥品檢驗(yàn)所主任藥師劉勇民鑒定為鳶尾科番紅花屬多年生植物白番紅花的球莖.藥材晾干，粉碎成粗粉備用.

1. 2動(dòng)物昆明小鼠，SPF級(jí)，雌雄各半，18～22g，由新疆醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，許可證號(hào): SCXK(新)2003－001，雌性未產(chǎn)無(wú)孕，自由攝食和飲水，室溫保持18 ～22℃，相對(duì)濕度40%～70%，實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)3d.

1. 3儀器電子天平; RE－2000A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠); SHZ－D(Ⅲ)循環(huán)水式真空泵(上海衛(wèi)凱儀器設(shè)備有限公司衛(wèi)凱);電熱恒溫水浴鍋(北京永光明醫(yī)療儀器廠);注射器;小鼠灌胃器等.

2　方法

2. 1藥物制備稱(chēng)取白番紅花球莖粗粉100g，加1000ml 60%的乙醇于水浴上加熱回流2h，過(guò)濾，提取2次，合并濾液，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮至無(wú)醇味，得濃縮液54ml(每毫升濃縮液相當(dāng)于1. 85g生藥)備用，用時(shí)再用蒸餾水配成相應(yīng)濃度.

2. 2急性毒性實(shí)驗(yàn)預(yù)試驗(yàn)找出藥物對(duì)小鼠的最大不致死量Dn為88. 80g/kg和最小全致死量Dm為111. 00g/kg，共分5組，求出組間比r為1. 057;正式試驗(yàn):選取昆明小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分成5組，每組10只，給藥前12h均禁食不禁水，分別按照預(yù)試驗(yàn)結(jié)果88. 80、93. 86、99. 20、104. 86、111. 00g/kg藥物劑量，依次給5組小鼠灌胃一次，連續(xù)觀察并記錄7d內(nèi)出現(xiàn)的中毒癥狀、死亡情況，并對(duì)死亡小鼠立即解剖，肉眼觀察記錄主要損害的器官及病理變化情況，最后根據(jù)各組動(dòng)物死亡數(shù)，計(jì)算出小鼠口服白番紅花球莖提取物的半數(shù)致死量(LD50)和95%的可信區(qū)間.

3　結(jié)果

3. 1一般癥狀觀察白番紅花球莖提取物隨劑量的升高，小鼠表現(xiàn)為安靜、活動(dòng)減少、飲食減少，未死亡小鼠觀察4 ～6d基本恢復(fù)正常.中毒死亡的小鼠主要在72h內(nèi)，中毒死亡的小鼠外觀主要表現(xiàn)為嘴、鼠尾、眼球等處發(fā)紫;解剖后發(fā)現(xiàn)胃腸脹氣，肝臟發(fā)黑.

3. 2 LD50測(cè)定小鼠ig白番紅花球莖提取物，隨劑量增大死亡率增加，各劑量組小鼠死亡狀況見(jiàn)表1，根據(jù)改良寇氏(Karber)法計(jì)算半數(shù)致死量(LD50)為100. 46g/kg，其95%可信區(qū)間為91. 42～109. 50g/kg.

表1　白番紅花球莖提取物對(duì)小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)死亡率的影響

4　討論

急性毒性實(shí)驗(yàn)是藥物安全性評(píng)價(jià)的第一步，為全身給藥的毒性研究?jī)?nèi)容之一，它可以為今后長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)、特殊毒性實(shí)驗(yàn)和藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)等研究的劑量選擇和指標(biāo)設(shè)計(jì)提供參考依據(jù).本次急性毒性實(shí)驗(yàn)的結(jié)果小鼠ig白番紅花球莖提取物的LD50為100. 46g/kg，其95%可信區(qū)間為91. 42 ～109. 50g/kg，如按白番紅花球莖生藥、藥理實(shí)驗(yàn)中動(dòng)物間和動(dòng)物與人體間的等效劑量換算[7]，相當(dāng)于成人(60kg)用669. 7g生藥量，而該藥材在民間最高用量為9g，則相當(dāng)于成人用量的74倍，根據(jù)化學(xué)物質(zhì)的急性毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，該藥材屬低毒藥材.由于該藥材有一定毒性，因此在哈薩克族民間使用時(shí)一定要注意適應(yīng)癥、劑量、療程等，以防毒性反應(yīng)的發(fā)生.

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組別n凋亡率

注:與對(duì)照組比較，*P＜0. 05，＊＊P＜0. 01.

收稿日期:( 2014. 12. 10)

作者簡(jiǎn)介:楊元華(1969－)，男，高級(jí)講師，主要從事藥理學(xué)教科研工作.

基金項(xiàng)目:伊犁哈薩克自治州科技計(jì)劃項(xiàng)目(YZ201201032).

【文章編號(hào)】1007－8517(2015)05－0023－02

【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A

【中圖分類(lèi)號(hào)】R285. 5