膠質(zhì)瘤中FOXO1蛋白的臨床意義

王 琦

河南平頂山市第一人民醫(yī)院神經(jīng)外科 平頂山 467000

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膠質(zhì)瘤中FOXO1蛋白的臨床意義

王 琦

河南平頂山市第一人民醫(yī)院神經(jīng)外科 平頂山 467000

目的 探討 FOXO1在膠質(zhì)瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用和臨床意義。方法 采用 SP法對平頂山市第一人民醫(yī)院神經(jīng)外科的 54例膠質(zhì)瘤手術(shù)切除標本和 12例正常腦組織標本進行免疫組織化學染色，檢測 FOXO1的表達情況，分析其與膠質(zhì)瘤臨床病理各參數(shù)的相關(guān)性，并評價FOXO1蛋白的臨床意義。結(jié)果 FOXO1在膠質(zhì)瘤中的陽性表達率為 22.2%，且與膠質(zhì)瘤的惡性程度相關(guān)(P<0.05)，F(xiàn)OXO1在高度惡性膠質(zhì)瘤(Ⅲ～Ⅳ級)中的 OD值為(0.109±0.010)，低于在低度惡性膠質(zhì)瘤(Ⅰ～Ⅱ級)中的0.128±0.010，兩者有顯著性差異(P=0.000)。FOXO1在正常腦組織中的陽性表達率為 75%，與膠質(zhì)瘤組22.2%(12/54)比較有顯著差異(P<0.05)。結(jié)論 FOXO1 的低表達可能與膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展以及分化相關(guān)，提示預后不良。

膠質(zhì)瘤；FOXO1；病理分級

FOXO1來源于FKHR基因，該基因在調(diào)節(jié)新陳代謝、氧化應激、細胞增殖、細胞凋亡、胚胎干細胞的多能性以及免疫平衡等方面發(fā)揮著重要的作用[1]。翻譯后修飾調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子FOXO1的活性。翻譯后修飾主要包括磷酸化、蛋白化、乙?；?、甲基化和糖基化等[2-3]。P13K/AKT信號通路與很多惡性腫瘤相關(guān)，該信號通路可使FOXO1發(fā)生磷酸化，促使其從細胞核轉(zhuǎn)運至細胞質(zhì)，進而導致其轉(zhuǎn)錄活性的下降，抑制FOXO1調(diào)控的下游基因的表達。FOXO1翻譯后的乙?；揎椏山档推渑c同源DNA序列結(jié)合的能力，而且又能夠促進FOXO1磷酸化，進而降低FOXO1的轉(zhuǎn)錄活性，最終促進腫瘤細胞的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移，抑制其凋亡。FOXO1是大家公認的抑癌基因[4]。本研究采用免疫組織化學方法對膠質(zhì)瘤中FOXO1的表達水平進行檢測，探討其與膠質(zhì)瘤發(fā)生、 發(fā)展和預后的相關(guān)性。

1 資料與方法

1．1 一般資料 選擇2006-12—2014-05平頂山市第一人民醫(yī)院神經(jīng)外科手術(shù)切除的54例腦膠質(zhì)細胞瘤患者(膠質(zhì)瘤組)為研究對象，男30例，女24例；年齡36～75歲。均有病理檢查支持，均屬新診斷病例。腫瘤分類按照2000年修改的WHO神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類標準：Ⅱ級30例，Ⅲ級17例，Ⅳ級7例。另選取12例經(jīng)手術(shù)切除的正常腦組織(正常組)進行對比，男8例，女4例；年齡35～52歲。手術(shù)標本切除后，置于-80 ℃冰箱保存。

1．2 方法

1．2．1 標本制定和免疫組織化學染色：54例膠質(zhì)瘤組織樣本和12例正常腦組織樣本依次經(jīng)10%甲醛溶液的固定、石蠟包埋，最后切成4 μm厚的組織切片。一抗應用FOXO1兔多克隆抗體，染色方法采用鏈霉菌抗生物素過氧化酶(SP)免疫組化法。顯微鏡下觀察組織切片染色情況。

2 結(jié)果

2．1 FOXO1蛋白在膠質(zhì)瘤中的表達 FOXO1蛋白在膠質(zhì)瘤中的陽性染色，主要是呈棕褐色胞漿染色，也有部分胞核染色，陽性表達率為22.2%(12/54)。FOXO1 在高度惡性膠質(zhì)瘤(Ⅲ～Ⅳ級)的OD 值為0.109±0.010，高于在低度惡性膠質(zhì)瘤(Ⅰ～Ⅱ級)中的0.128±0.010，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.000)。

2．2 FOXO1蛋白在正常腦組織中的表達 FOXO1蛋白在在正常腦組織中的陽性表達率為75%(9/12)，在膠質(zhì)瘤中為22.2%(12/54)，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。FOXO1在膠質(zhì)瘤的OD值為0.189±0.011，低于在正常腦組織中的0.653±0.013，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

3 討論

腫瘤是一種多因素、多階段、多基因、多通路的疾病，腦膠質(zhì)瘤亦是如此。與其他腫瘤一樣，膠質(zhì)瘤具體的發(fā)病機制目前尚不明了。研究癌基因和抑癌基因在膠質(zhì)瘤中的表達情況已成為尋求膠質(zhì)瘤發(fā)病、發(fā)展、預后的重要途徑之一，在其中尋找出基因治療的目標基因也是人們努力的方向[5]。人腦膠質(zhì)瘤目前發(fā)病率居高不下，而且發(fā)現(xiàn)時多為中晚期，預后不良，準確客觀的病理診斷是目前臨床工作中的難題[6]。準確判斷膠質(zhì)瘤惡性程度對選擇治療措施、評估預后十分關(guān)鍵。臨床上一般采用組織學標準判斷膠質(zhì)瘤的病理分級。但組織學判斷缺乏客觀的標準，而且腫瘤組織具有異質(zhì)性，即不同部位腫瘤的分化程度可能不一致，這些都會給判斷膠質(zhì)瘤的惡性程度、評估預后帶來困難[5]。

Drosophila于1989年第1次發(fā)現(xiàn)了FOX基因，截止目前，人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了19個家族及亞家族的FOX超家族[7]。FOXO是FOX超家族的一員，目前研究發(fā)現(xiàn)，其在蠕蟲和人類中均有表達。在哺乳動物中FOXO有4種亞型：FOXO1、FOXO3、FOXO4和FOXO6[8-9]，其中FOXO1是最早發(fā)現(xiàn)的成員，F(xiàn)OXO1來源于FKHR基因，該基因在調(diào)節(jié)新陳代謝、氧化應激、細胞增殖、細胞凋亡、胚胎干細胞的多能性以及免疫平衡等方面發(fā)揮著重要的作用[1]。翻譯后修飾調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子FOXO1的活性。翻譯后修飾主要包括磷酸化、蛋白化、乙?；?、甲基化和糖基化等[2-3]。P13K/AKT信號通路與很多惡性腫瘤相關(guān)，該信號通路可使FOXO1發(fā)生磷酸化，促使其從細胞核轉(zhuǎn)運至細胞質(zhì)，進而導致其轉(zhuǎn)錄活性的下降，抑制FOXO1調(diào)控的下游基因的表達。FOXO1翻譯后的乙酰化修飾可降低其與同源DNA序列結(jié)合的能力，而且又能促進FOXO1磷酸化，進而降低FOXO1的轉(zhuǎn)錄活性，最終促進腫瘤細胞的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移，抑制其凋亡。FOXO1是大家公認的抑癌基因，也是目前研究最多的抑癌基因之一[4]。

本研究結(jié)果表示，F(xiàn)OXO1 的低表達可能與膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展以及分化相關(guān)，提示預后不良。目前，免疫組織化學檢測方法在臨床病理上廣泛應用，本研究提示，F(xiàn)OXO1的免疫組化檢測在病理分級中可以輔助組織學分級，能夠避免組織學分級判斷的一些主觀因素，為更加準確地評估腫瘤的病理分級提供客觀依據(jù)。

[1] Maiese K，Hou J，Chong ZZ，et al．A fork in the path：Developing therapeutic inroads with FoxO proteins[J]．Oxid Med Cell Longev，2009，2(3)：119-129．

[2] Obsil T，Obsilova V．Structure/function relationships underlying regulation of FOXO transcription factors[J]．Oncogene，2008，27(16)：2 263-2 275．

[3] Tzivion G，Dobson M，Ramakrishnan G．FoxO transcription factors，Regulation by AKT and 14-3-3 proteins[J]．Biochim Biophys Acta，2011，1813(11)：1 938-1 945．

[4] Greer EL，Brunet A．FOXO transcription factors in ageing and cancer[J]．Acta Physiol(Oxf)，2008，192(1)：19-28．

[5] 王忠誠主編．王忠誠神經(jīng)外科學[M]．武漢：湖北科學技術(shù)出版社，2004：507-556．

[6] 劉承基．細胞分子神經(jīng)外科-神經(jīng)外科的新領(lǐng)域[M]．中華神經(jīng)外科雜志，2004，20(1)：1-5．

[7] Hannenhalli S，Kaestner KH．The evolution of Fox genes and their role in development and disease[J]．Nat Rev Genet，2009，10(4)：233-240．

[8] Puthanveetil P，Wang Y，Zhang D，et al．Cardiac triglyceride accumulation following acute lipid excess occurs through activation of a FoxO1-iNOS-CD36 pathway[J]．Free Radic Biol Med，201l，51(2)：352-363．

[9] Birkenkamp KU，Coffer PJ．FOXO transcription factors as regulators of immune homeostasis：molecules to die for[J]．J Immunol，2003，171(4)：1 623-1 629．

(收稿2016-03-04)

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1673-5110(2016)24-0101-02