化痰祛濁通絡(luò)方對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠血壓一氧化氮、內(nèi)皮素1及血管緊張素Ⅱ的影響 ※

化痰祛濁通絡(luò)方對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠血壓一氧化氮、內(nèi)皮素1及血管緊張素Ⅱ的影響※

李強(qiáng)

(河北省懷安縣中醫(yī)院中醫(yī)科，河北懷安076150)

【摘要】目的觀察化痰祛濁通絡(luò)方對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)血壓及一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素1(ET-1)及血管緊張素Ⅱ(Ang Ⅱ)的影響，探討其降壓作用機(jī)制。方法將15月齡SHR隨機(jī)分為空白對(duì)照組、化痰祛濁通絡(luò)方組和吲達(dá)帕胺組，每組各9只?？瞻讓?duì)照組予0.9%氯化鈉注射液(10 mL/kg)、化痰祛濁通絡(luò)方組予化痰祛濁通絡(luò)方水煎液(生藥10 mL/kg)、吲達(dá)帕胺組予吲達(dá)帕胺溶液(10 mg/kg)，均每日1次灌服，連續(xù)6周。所有大鼠每周測(cè)量尾動(dòng)脈壓，給藥6周腹主動(dòng)脈抽血測(cè)定血清NO、ET-1及AngⅡ含量。結(jié)果給藥6周后，化痰祛濁通絡(luò)方組和吲達(dá)帕胺組給藥后均可降低SHR收縮壓(SP)和舒張壓(DP)，與空白對(duì)照組及本組給藥前比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；化痰祛濁通絡(luò)方組及吲達(dá)帕胺組ET-1和Ang Ⅱ含量均較本組給藥前及空白對(duì)照組明顯降低，NO含量明顯升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論化痰祛濁通絡(luò)方能明顯降低SHR血壓，其機(jī)制可能是通過下調(diào)ET、Ang Ⅱ含量及上調(diào)NO含量來發(fā)揮降壓作用。

【關(guān)鍵詞】大鼠，近交SHR；高血壓；化痰；通絡(luò)；內(nèi)皮縮血管肽1；一氧化氮；血管緊張素II

doi：10.3969/j.issn.1002-2619.2015.08.021

【中圖分類號(hào)】R-332；R544.105.31；R341.6；R392.11；R977.6

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

【文章編號(hào)】1002-2619(2015)08-1179-04

作者簡(jiǎn)介：李強(qiáng)(1967—)，男，副主任醫(yī)師，學(xué)士。從事中醫(yī)內(nèi)科臨床工作。

Abstract【】ObjectiveTo observe the effects of Huatan-quzhuo-quzhuo decoction on blood pressure, nitric oxide (NO), endothelin-1 (ET-1) and angiotensin-Ⅱ(AngⅡ) in spontaneously hypertensive rats (SHR), and to investigate the antihypertensive mechanism.Methods 15-months-old rats were randomly divided into blank control group,Huatan-quzhuo-tongluo decoction group and indapamide group, 9 rats in each group.Rats in blank control group received 0.9% sodium chloride (10 mg/kg).Rats in Huatan-quzhuo-tongluo decoction group received Huatan-quzhuo-quzhuo decoction (10 mg/kg).Rats in indapamide group received indapamide solution (10 mg/kg), and all mice received successive perfusion once daily for 6 weeks.The arterial pressure was measured in all mice weekly, and the contents of serum NO, ET-1 and AngⅡ were detected by abdominal aorta blood-collecting 6 weeks after successive perfusion .ResultsThe systolic pressure (SP) and diastolic pressure (DP) were decreased six weeks after successive perfusion in Huatan-quzhuo-tongluo decoction and indapamide groups, and the decreased in two groups was significantly different from that in blank control group (P<0.05).The contents of ET-1 and Ang-Ⅱafter perfusion were obviously decreased in Huatan-quzhuo-tongluo decoction and indapamide groups, and the content of NO was obviously increased, the differences were statistically significant (P<0.05).The contents of ET-1 and Ang-Ⅱafter perfusion were obviously decreased in Huatan-quzhuo-tongluo decoction and indapamide groups as compared with those in blank control group, and the content of NO was obviously increased, the differences were statistically significant (P<0.05).ConclusionHuatan-quzhuo-tongluo decoction can significantly reduce the blood pressure in SHR rats, and the possible mechanism is to decrease serum levels of ET,AngⅡ and increase NO levels.

收稿日期：(2014-08-08)

※ 項(xiàng)目來源：張家口市科學(xué)技術(shù)和地震局科學(xué)技術(shù)與發(fā)展指導(dǎo)計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào)：1101122D)

Investigation of Huatan-quzhuo-tongluo decoction on blood pressure, NO, ET-1 and AngⅡ in spontaneously hypertensive ratsLIQiang.DepartmentofTraditionalChineseMedicine,Huai'anCountyHospitalofTraditionalChineseMedicineinHebeiProvince,Hebei,Huai'an076150

【Key words】Rats, inbreeding SHR; Hypertension; Dissipate phlegm, dredging collaterals; Endothelin 1; nitric oxide; Angiotensin-II

原發(fā)性高血壓是危害人類健康的常見疾病。臨床研究發(fā)現(xiàn)，高血壓與血清中一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素(ET)和血管緊張素Ⅱ(Ang Ⅱ)含量有關(guān)[1]。已知血管內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂是高血壓發(fā)生的起始環(huán)節(jié)[2]，而NO是血管內(nèi)皮釋放的主要舒張血管物質(zhì)，所以其含量可反映血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能，同時(shí)NO還可以通過阻斷AngⅡ?qū)δI近曲小管鈉的吸收，抑制腎小球旁細(xì)胞分泌，降低血壓[3]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，自發(fā)性高血壓大鼠(spontaneously hypertensive rats，SHR)被公認(rèn)為是最接近人原發(fā)性高血壓的動(dòng)物模型[4]，通過研究15月齡SHR高血壓的相關(guān)指標(biāo)，可以指導(dǎo)臨床用藥?；奠顫嵬ńj(luò)方是河北省懷安縣中醫(yī)院多年來治療原發(fā)性高血壓的協(xié)定處方，降壓效果可靠，能夠解決高血壓發(fā)病的基本因素痰、濁、瘀導(dǎo)致的經(jīng)絡(luò)阻塞。本實(shí)驗(yàn)研究通過觀察化痰祛濁通絡(luò)方對(duì) SHR的降壓效果及對(duì)血清NO、ET、Ang Ⅱ含量的影響，探討其降壓作用機(jī)制。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物雄性SHR 27只，15月齡，體質(zhì)量(305±52) g，由河北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)DK0411-0118。動(dòng)物飼料亦由河北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。飼養(yǎng)室保持空氣新鮮，相對(duì)濕度40%～70%，溫度21～27 ℃，自由進(jìn)食，每周換水2～3次，每日飲水量4～7 mL。

1.1.2實(shí)驗(yàn)藥物化痰祛濁通絡(luò)方藥物組成：桂枝10 g，茯苓12 g，薏苡仁15 g，炮穿山甲6 g，姜半夏10 g，皂角刺6 g，三七6 g，黃連3 g。由河北省懷安縣中醫(yī)院制劑室煎煮、過濾、濃縮成水煎液(1 mL相當(dāng)于生藥1 g)，分裝、滅菌，4 ℃貯存?zhèn)溆谩＿胚_(dá)帕胺片(天津飛鷹制藥股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20080818，規(guī)格25 mg/片)，苯巴比妥鈉注射液(廣東邦民制藥廠有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H44021888，規(guī)格1 mL∶100 mg/支)。

1.1.3實(shí)驗(yàn)試劑ET-1 試劑盒、AngⅡ、NO 試劑盒，由北京北方生物技術(shù)研究所生產(chǎn)，批號(hào)分別為 20110928、20111023、20110916。

1.1.4實(shí)驗(yàn)儀器BP-6無創(chuàng)尾動(dòng)脈血壓測(cè)量分析系統(tǒng)(成都泰P科技有限公司)，722S型可見分光光度計(jì)(上海精密科學(xué)儀器有限公司)，SN-682γ型閃爍計(jì)數(shù)器(上海核福光電儀器有限公司)。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1動(dòng)物分組及給藥將27只雄性SHR隨機(jī)分為3組，即空白對(duì)照組、化痰祛濁通絡(luò)方組及吲達(dá)帕胺組，每組各9只，其中空白對(duì)照組予0.9%氯化鈉注射液10 mL/kg，每日1次灌服，連續(xù)6周；化痰祛濁通絡(luò)方組予化痰祛濁通絡(luò)方水煎液生藥10 mL/kg，每日1次灌服，連續(xù)6周；吲達(dá)帕胺組予吲達(dá)帕胺溶液10 mg/kg(1 mL相當(dāng)于生藥1 mg)，每日1次灌服，連續(xù)6周。

1.2.2標(biāo)本采集及檢測(cè)指標(biāo)所有SHR每周9：00用BP-6無創(chuàng)尾動(dòng)脈血壓測(cè)量分析系統(tǒng)測(cè)量清醒狀態(tài)下大鼠尾動(dòng)脈收縮壓(SP)和舒張壓(DP)，給藥前后測(cè)定并進(jìn)行比較。給藥前和給藥6周后苯巴比妥鈉注射液腹腔內(nèi)注射麻醉，迅速從腹主動(dòng)脈采血3 mL，用分光光度法檢測(cè)血清NO，放射免疫法測(cè)定ET-1和Ang Ⅱ，操作均按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，采用t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.13組SHR給藥前后血壓變化比較見表1。

表1　3組SHR給藥前后血壓變化比較　kPa， ± s

表1　3組SHR給藥前后血壓變化比較　kPa， ± s

組 別n給藥前SPDP給藥后SPDP化痰祛濁通絡(luò)方組919.63±0.4214.72±0.4014.17±0.42*△#10.69±0.43*△#吲達(dá)帕胺組919.44±0.4814.63±0.4315.70±0.43*△11.89±0.41*△空白對(duì)照組919.49±0.4814.68±0.4319.41±0.4614.72±0.48

與本組給藥前比較，*P<0.05；與空白對(duì)照組給藥后比較，△P<0.05；與吲達(dá)帕胺組給藥后比較，#P<0.05

由表1可見，化痰祛濁通絡(luò)方組和吲達(dá)帕胺組給藥后大鼠SP和DP均降低，與給藥前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，空白對(duì)照組給藥前后比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；化痰祛濁通絡(luò)方組、吲達(dá)帕胺組給藥后SP及DP與空白對(duì)照組給藥后比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；化痰祛濁通絡(luò)方組與吲達(dá)帕胺組給藥后SP及DP比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，化痰祛濁通絡(luò)方組降壓效果顯著。

2.23組SHR血清NO、ET-1及AngⅡ含量變化比較見表2。

表2　3組SHR血清NO、ET-1及AngⅡ含量變化比較　 ± s

表2　3組SHR血清NO、ET-1及AngⅡ含量變化比較　 ± s

組 別化痰祛濁通絡(luò)方組(n=9)給藥前給藥后吲達(dá)帕胺組(n=9)給藥前給藥后空白對(duì)照組(n=9)給藥前給藥后NO(μmol/L)32.11±16.2598.50±18.17*△39.55±19.6779.53±17.70*△32.01±8.9333.12±9.13ET-1(pg/mL)90.09±18.4834.90±9.01*△87.61±14.5853.22±11.01*△84.47±8.0985.55±7.99AngⅡ(pg/mL)904.55±26.06434.41±22.98*△891.37±21.09526.33±31.02*△793.17±42.96788.11±44.25

與本組給藥前比較，*P<0.05；與空白對(duì)照組給藥后比較，△P<0.05

由表2可見，3組給藥前各指標(biāo)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；給藥6周后，化痰祛濁通絡(luò)方組及吲達(dá)帕胺組ET-1和AngⅡ含量均較本組給藥前明顯降低，NO含量明顯升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。給藥后化痰祛濁通絡(luò)方組、吲達(dá)帕胺組ET-1和AngⅡ含量與空白對(duì)照組比較均明顯降低，NO含量明顯升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。給藥后化痰祛濁通絡(luò)方組與吲達(dá)帕胺組NO、ET-1、AngⅡ含量變化比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

3討論

原發(fā)性高血壓是以血壓升高為主要臨床表現(xiàn)，伴或不伴有多種心血管危險(xiǎn)因素的綜合征，通常簡(jiǎn)稱為高血壓，是多種心、腦血管疾病的重要病因和危險(xiǎn)因素，影響重要臟器結(jié)構(gòu)和功能，最終導(dǎo)致這些器官功能衰竭，迄今為止仍是心血管疾病死亡的主要原因之一。中醫(yī)理論認(rèn)為，長(zhǎng)期嗜食膏粱厚味，必致臟腑功能受損，尤易損及脾胃，脾失健運(yùn)則升清降濁無權(quán)，留滯為痰，痰濕內(nèi)阻，血行不暢，則瘀血內(nèi)生，進(jìn)而痰瘀互結(jié)，屬中醫(yī)學(xué)頭痛、眩暈等病證范疇[5]。近年來，對(duì)于原發(fā)性高血壓病證結(jié)合的研究多集中于陰虛陽亢證[6]。隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)水平的發(fā)展，人們生活環(huán)境、工作環(huán)境、生活方式和飲食習(xí)慣等的改變，臨床實(shí)踐中偏于痰瘀阻滯證更為普遍，特別是形體肥胖的高血壓患者，過食肥甘厚味、氣血壅滯易產(chǎn)生痰濁、瘀血，痰濁與瘀血互結(jié)，阻滯血脈，使血液運(yùn)行不暢，致眩暈、頭痛、高血壓等發(fā)生。將“痰濕”和“瘀血”作為原發(fā)性高血壓發(fā)病的主要病理因素，針對(duì)病因應(yīng)用“化痰祛濁通絡(luò)”法治療，可闡明其作用機(jī)制，明確其療效和適應(yīng)證，為臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)[7]，為傳統(tǒng)中藥發(fā)揮更大的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益奠定基礎(chǔ)。應(yīng)用化痰祛濁通絡(luò)法治療原發(fā)性高血壓，通過多部位、多靶點(diǎn)作用，不僅降低血壓，而且能消除肥胖，降低血脂、血糖、改善血流，這是治療原發(fā)性高血壓的發(fā)展趨勢(shì)[7]。

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，原發(fā)性高血壓的發(fā)生與肝、腎、脾功能虛弱有關(guān)，肝陰不足，虛火灼絡(luò)，脈絡(luò)損傷，易致經(jīng)絡(luò)濁氣稽留，痰濕不能正常疏泄；腎氣不足，則脾、肺氣機(jī)升降失調(diào)，久之脾失健運(yùn)，津聚成痰，痰濕內(nèi)阻，氣血運(yùn)行不暢，痰瘀內(nèi)阻脈道；脾胃為后天之本，脾氣虛弱，全身氣血津液必然受到影響，痰、濕、濁、瘀等阻滯脈絡(luò)，更加重脾運(yùn)輸功能失調(diào)，形成惡性循環(huán)。如此，逐漸發(fā)生西醫(yī)所指血脂聚集、水鈉潴留、膽固醇升高等，形成高血壓病理改變[8]。因此，原發(fā)性高血壓的本質(zhì)就是濁氣、痰濕、瘀血阻滯脈絡(luò)，治宜化痰，祛濁，通絡(luò)[8]。化痰祛濁通絡(luò)方由桂枝、茯苓、薏苡仁、炮穿山甲、姜半夏、皂角刺、三七、黃連等組成。痰濕發(fā)生在氣分和衛(wèi)分交搏之中，瘀血發(fā)生在營(yíng)分和血分代謝阻滯之時(shí)。患者肺內(nèi)有形之痰為氣體交換的產(chǎn)物，原發(fā)性高血壓患者經(jīng)絡(luò)之痰是體內(nèi)代謝的垃圾。祛痰為有形之肺痰，姜半夏祛痰則為機(jī)體經(jīng)絡(luò)內(nèi)生成的垃圾之痰[8]；祛肺之痰需要宗氣交換順利，祛經(jīng)絡(luò)垃圾之痰必須營(yíng)分血分內(nèi)氣足、血暢。萬病濕為先，先有濕聚，才繼之有氣滯、血瘀、痰凝、熱毒逐漸加重疾病發(fā)生、發(fā)展，所以治療原發(fā)性高血壓之痰，需要首先以茯苓、薏苡仁等祛濕之藥為先導(dǎo)，因?yàn)闈窬蹫橄龋瑲鉁S后導(dǎo)致痰濕積聚，此時(shí)治療相對(duì)容易，在茯苓、薏苡仁的基礎(chǔ)上，加用桂枝溫經(jīng)理氣取效[9]；當(dāng)病情發(fā)展到高血壓癥狀、體征很明確時(shí)，已經(jīng)是濕聚、氣滯基礎(chǔ)上發(fā)生了血瘀，三者形成的垃圾之痰需要在薏苡仁、桂枝、茯苓基礎(chǔ)上加用祛痰之姜半夏；當(dāng)病情繼續(xù)發(fā)展形成頑固性高血壓之表現(xiàn)，則為濕聚、氣滯、血瘀基礎(chǔ)上發(fā)生了痰凝，此時(shí)必須在祛痰之姜半夏之上再加用炮穿山甲破瘀散結(jié)；而病情繼續(xù)發(fā)展導(dǎo)致各種并發(fā)癥時(shí)，這時(shí)即在濕聚、氣滯、血瘀、痰凝的基礎(chǔ)上，熱毒將其堆積的垃圾灼煉成阻塞經(jīng)絡(luò)之動(dòng)脈粥樣硬化，此時(shí)治療更加困難，在祛痰之姜半夏、破瘀散結(jié)之炮穿山甲之上，加能透堅(jiān)托邪之皂角刺、三七、黃連[10]；由于濕聚、氣滯、血瘀、痰凝、熱毒互為消長(zhǎng)，產(chǎn)生新的垃圾，需要不斷給予化痰祛濁通絡(luò)治療，鞏固療效[11]。經(jīng)過多年臨床實(shí)踐，化痰祛濁通絡(luò)方治療原發(fā)性高血壓效果良好，特別是對(duì)肥胖型高血壓患者效果更好[12]。本動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究證明，化痰祛濁通絡(luò)方可降低SHR的SP和DP，與給藥前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且降壓效果優(yōu)于吲達(dá)帕胺(P<0.05)。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明，血管內(nèi)皮功能失調(diào)會(huì)引發(fā)血管痙攣，血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放的正常代謝物質(zhì)減少，其中NO是內(nèi)皮細(xì)胞釋放的舒張血管物質(zhì)，其含量減少則會(huì)導(dǎo)致血壓升高，而血管內(nèi)皮功能下降，同樣會(huì)使Ang Ⅱ分泌量增加，發(fā)生水鈉潴留，形成高血壓病理改變[13]。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，給藥6周后，化痰祛濁通絡(luò)方組、吲達(dá)帕胺組ET-1和Ang Ⅱ含量與空白對(duì)照組比較均明顯降低，NO含量明顯升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)?；奠顫嵬ńj(luò)方組與吲達(dá)帕胺組血漿NO、ET-1、Ang Ⅱ含量變化比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。由此認(rèn)為，化痰祛濁通絡(luò)方降低血壓的機(jī)制可能是通過下調(diào)ET及Ang Ⅱ含量和上調(diào)NO含量來發(fā)揮降壓作用，其具體作用機(jī)制需要進(jìn)一步探討。

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(本文編輯：曹志娟)

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河南中醫(yī)藥博物館開館

日前，位于河南中醫(yī)學(xué)院內(nèi)的河南中醫(yī)藥博物館正式開館。主展區(qū)位于圖書館內(nèi)，由醫(yī)史館、校史館、中藥館、仲景館、古籍館和醫(yī)德館等展館組成。博物館醫(yī)史館主要展示中原中醫(yī)藥的歷史貢獻(xiàn)。仲景館主要通過圖文、實(shí)物和聲光電等多媒體，展示醫(yī)圣張仲景為世界醫(yī)學(xué)發(fā)展、為中醫(yī)藥事業(yè)的發(fā)展做出的杰出貢獻(xiàn)。在中藥館中，觀眾可以觀賞到上千種水浸標(biāo)本、蠟葉植物標(biāo)本、中藥材標(biāo)本、動(dòng)物礦物標(biāo)本。校史館用詳實(shí)材料展現(xiàn)了河南中醫(yī)學(xué)院1958年建校以來的發(fā)展歷程。