CypA，BNP，ET-1濃度在老年慢性心衰患者中的表達(dá)及臨床意義*

郭飛波(天門市第一人民醫(yī)院檢驗科，湖北天門 431700)

慢性心衰(即慢性心力衰竭)是老年人群患病風(fēng)險較高的一種危重疾病，患者在發(fā)病時血清相關(guān)蛋白多存在表達(dá)異常[1]。環(huán)親素A(CypA)是生物界中廣泛存在的高度保守的一種蛋白質(zhì)，具有多種生物學(xué)活性，可刺激基質(zhì)重塑，誘導(dǎo)心肌肥厚，減緩細(xì)胞功能衰退。腦鈉肽(BNP)是由心臟分泌的一種利尿鈉肽，具有利尿及調(diào)節(jié)血容量及血壓穩(wěn)定性的作用，是臨床診斷心衰的常用指標(biāo)[2]。內(nèi)皮素-1(ET-1)是由血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的活性多肽，其具有收縮血管的作用，其在多種疾病的發(fā)生、發(fā)展過程中都發(fā)揮著重要的促進(jìn)作用。本研究旨在明確CypA，BNP和ET-1在老年慢性心衰患者中的表達(dá)特征及臨床意義，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象

1.1.1 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)：①納入標(biāo)準(zhǔn)：慢性心衰患者符合《實用內(nèi)科學(xué)》[3]中的慢性心力衰竭診斷標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)心電圖等相關(guān)檢查確診；患者對本次研究知情了解，并簽署了知情同意書。②排除標(biāo)準(zhǔn)：并發(fā)風(fēng)濕免疫性疾病者；伴有先天性心臟病者；伴有血液疾病者；近期有感染病史者；凝血功能障礙者；并發(fā)惡性腫瘤者。

1.1.2 研究對象：根據(jù)上述納入與排除標(biāo)準(zhǔn)，選取湖北省天門市第一人民醫(yī)院在2015年6月～2016年6月收治的56例老年慢性心衰患者作為研究組，另選取同期在我院進(jìn)行健康體檢的46例健康老年人作為對照組。研究組男性31例，女性25例，年齡60～74歲，平均年齡65.3±7.2歲，病程2～28年，平均年齡6.5±2.4年，NYHA心功能分級Ⅰ級6例、Ⅱ級8例、Ⅲ級21例、Ⅳ級21例；對照組男性26例，女性20例，年齡62～73歲，平均年齡64.2±6.3歲。兩組研究對象的性別構(gòu)成比、平均年齡對比差異無統(tǒng)計學(xué)顯著性意義(P>0.05)，有可比性。

1.2 方法 兩組研究對象均進(jìn)行血清BNP，CypA，超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)和ET-1檢測。研究組患者在入院第2天，晨起采集3 ml空腹靜脈血，3 000 r/min離心10 min，留取上層血清，放置于-80℃的冰箱中保存待檢。運(yùn)用ELISA法進(jìn)行BNP，CypA，ET-1檢測，CypA試劑盒由上海源葉生物科技公司提供，ET-1試劑盒由北京中杉生物公司提供，BNP試劑盒由武漢博士德生物工程公司提供。使用HITACH7000-020型全自動生化分析儀，運(yùn)用乳膠免疫比濁法進(jìn)行hs-CRP檢測，hs-CRP試劑盒由日本協(xié)和醫(yī)藥株式會社提供。

2 結(jié)果

2.1 BNP，CypA，hs-CRP，ET-1水平 見表1。研究組患者的BNP，CypA，hs-CRP，ET-1水平均顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

表1 兩組的BNP，CypA，hs-CRP，ET-1水平比較

2.2 不同心功能分級患者的BNP，CypA，hs-CRP，ET-1水平比較 見表2。研究組不同NYHA心功能分級患者的BNP，CypA，hs-CRP，ET-1水平比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。BNP，CypA，hs-CRP，ET-1表達(dá)水平均隨著心功能分級程度的增大而升高。

表2 不同心功能分級患者的BNP，CypA，hs-CRP，ET-1水平比較

2.3 BNP，CypA，hs-CRP三者的相關(guān)性 經(jīng)相關(guān)性分析，研究組患者的血清BNP與CypA呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.49，P<0.05)，hs-CRP與CypA呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.57，P<0.05)，hs-CRP與BNP呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.77，P<0.05)。

2.4 CypA與ET-1表達(dá)的相關(guān)性 相關(guān)性分析結(jié)果顯示，研究組患者血清CypA與ET-1的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.53，P<0.05)。

3 討論

近期有研究發(fā)現(xiàn)[4]，慢性心衰發(fā)生時，患者機(jī)體血漿中的多種蛋白表達(dá)都會發(fā)生變化，而這些蛋白表達(dá)的變化會對病情的進(jìn)展產(chǎn)生重要的促進(jìn)作用。

CypA是屬親環(huán)素家族，在生物界中分布廣泛。CypA主要由細(xì)胞質(zhì)表達(dá)，但也有少數(shù)的細(xì)胞核和高爾基體會表達(dá)CypA，臨床研究發(fā)現(xiàn)CypA在多種病變情況下都會出現(xiàn)表達(dá)上調(diào)，發(fā)揮與細(xì)胞因子類似的作用[5]。CypA在人體中發(fā)揮著多重生物功能[6]：①CypA具有肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶活性，能夠結(jié)合環(huán)孢素A介導(dǎo)免疫抑制。②CypA可刺激血管平滑肌細(xì)胞增殖，促使血管重塑。在機(jī)體發(fā)生血管損傷和氧化應(yīng)激的情況下，CypA表達(dá)會明顯升高。③CypA作為具有趨化功能的細(xì)胞因子，還可趨化損傷因子向炎癥部位聚集，同時促進(jìn)細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶活性，在P13K基因作用下調(diào)節(jié)新生血管平滑肌細(xì)胞生長。④CypA可結(jié)合抗氧化蛋白，影響其抗氧化活性。研究發(fā)現(xiàn)，在慢性心衰的病情進(jìn)展過程中，肌纖維和肌細(xì)胞會被激活，同時還有部分活性氧化物質(zhì)會被激活，從而出現(xiàn)CypA表達(dá)升高。CypA表達(dá)升高后，會誘導(dǎo)多種生物學(xué)反應(yīng)，首先會刺激血管平滑肌細(xì)胞增生，釋放大量的活性氧簇，其次還會激活單核巨噬細(xì)胞表達(dá)的多種炎癥因子(如腫瘤壞死因子等)，另外還會激活金屬基質(zhì)蛋白(MMPs)，調(diào)節(jié)蛋白水解活性，創(chuàng)造有利于炎癥細(xì)胞遷移的外界條件。不少國內(nèi)外學(xué)者[7，8]都認(rèn)為人體在處于強(qiáng)應(yīng)激和強(qiáng)氧化反應(yīng)的狀態(tài)下，CypA表達(dá)均會明顯升高，其與生長因子的信號通路位點可能相同，其能通過激活ERK1/2來促使DNA合成，從而抑制細(xì)胞凋亡。ET-1是一種縮血管物質(zhì)，由21個氨基酸殘基組成，是目前臨床發(fā)現(xiàn)的縮血管能力最強(qiáng)的細(xì)胞因子。人體中ET-1表達(dá)水平的升高往往與炎性介質(zhì)增多、CO2潴留、自由基生成增加、酸中毒、缺氧等因素有關(guān)。ET-1在心衰病變中發(fā)揮著重要作用，其作用機(jī)制包括：ET-1激活了鈣通道，導(dǎo)致心室肌和心房肌超負(fù)荷；ET-1所具有的血管收縮作用，增加了心臟承受負(fù)荷；ET-1作用于冠狀動脈等心臟供血血管時，引起血管收縮，從而影響心臟舒縮功能。通過本次研究發(fā)現(xiàn)，慢性心衰患者的CypA，ET-1水平比正常更高，并且不同NYHA心功能分級心衰患者的CypA，ET-1水平差異顯著，心功能分級越高，CypA，ET-1水平越高。這一結(jié)果與國內(nèi)相關(guān)文獻(xiàn)報道相符，說明在老年慢性心衰的病變過程中，均有CypA和ET-1的參與，CypA，ET-1的高表達(dá)對心衰進(jìn)展具有促進(jìn)作用，CypA和ET-1表達(dá)水平越高預(yù)示著患者的病情越嚴(yán)重。相關(guān)性分析顯示老年慢性心衰患者的CypA水平會隨著ET-1水平的升高而升高，提示ET-1可與CypA發(fā)揮協(xié)同正向作用，促進(jìn)心衰病變進(jìn)展。

BNP是由32個氨基酸殘基組成的多肽，主要由心室壁的神經(jīng)細(xì)胞、肌細(xì)胞分泌，其在多種心臟疾病的發(fā)生與發(fā)展中都發(fā)揮著重要作用。BNP表達(dá)上調(diào)的原因可能有[9]：一方面是炎癥反應(yīng)引起的CO2潴留、酸中毒、缺氧等，增強(qiáng)了機(jī)體內(nèi)皮細(xì)胞對BNP的分泌能力；另一方面是炎癥反應(yīng)會刺激肺巨噬細(xì)胞，促使巨噬細(xì)胞產(chǎn)生大量的白介素和腫瘤壞死因子，而白介素和腫瘤壞死因子的大量分泌，會進(jìn)一步刺激產(chǎn)生BNP，造成BNP表達(dá)上調(diào)。國內(nèi)有文獻(xiàn)報道[10]，慢性心衰的發(fā)生、發(fā)展與BNP有著密切聯(lián)系，BNP水平的高低與心功能分級、左室舒張末壓、LVEF均有著密切聯(lián)系，可將其作為診斷心衰和判斷心衰預(yù)后的可靠指標(biāo)。

hs-CRP是一種急性時相蛋白，主要由肝臟分泌，由IL-6調(diào)控，是一種高度敏感的驗證標(biāo)志物，檢測hs-CRP對于能夠為臨床預(yù)測心血管事件提供一定的參考。本次研究發(fā)現(xiàn)老年慢性心衰患者的BNP，hs-CRP水平比正常人更高，同時心功能分級越高的慢性心衰患者，其BNP，hs-CRP水平越高。說明老年慢性心衰患者存在著明顯的炎癥反應(yīng)，BNP水平的升高可能促進(jìn)了慢性心衰的病情進(jìn)展。相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)心衰患者的BNP水平隨著CypA的升高而升高，hs-CRP水平隨著CypA水平的升高而升高，hs-CRP水平隨著BNP水平的升高而升高。這提示CypA與BNP可能有協(xié)同的正性作用及通路功能，其構(gòu)成心衰發(fā)生、發(fā)展復(fù)雜細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的主要成分，也提示CypA，BNP可能都是通過炎性或前炎癥介質(zhì)來發(fā)揮協(xié)同作用的。

綜上所述，老年慢性心衰患者的血清BNP，CypA，ET-1表達(dá)明顯上調(diào)，且有著密切聯(lián)系，其在心衰的發(fā)生與發(fā)展中發(fā)揮著重要作用，可通過BNP，CypA，ET-1檢測為臨床評估老年慢性心衰患者的病變程度，為指導(dǎo)臨床治療提供可靠依據(jù)。

[1] 叢 歡，李 磊，聶 鑫．老年慢性心衰患者血清中細(xì)胞質(zhì)親環(huán)蛋白A、血清胱抑素C和基質(zhì)金屬蛋白酶-9的表達(dá)及意義[J]．中國老年學(xué)雜志，2013，33(13)：3172-3173．

Cong H，Li L，Nie X．In patients with chronic heart failure in the elderly cytoplasmic protein cyclophilin A，Expression and significance of serum cystatin C and MMP-9[J]．Chinese Journal of Gerontology，2013，33(13)：3172-3173．

[2] 李德璇，王玉明，楊紅玲，等．親環(huán)素A與慢性心力衰竭相關(guān)性的研究[J]．現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2015，30(1)：31-33．

Li DX，Wang YM，Yang HL，et al．Study on the relationship between cyclophilin A and chronic heart failure[J]．Journal of Modern Laboratory Medicine，2015，(1)：31-33．

[3] 楊紅玲，肖本勝，何亞磊，等．慢性心力衰竭的臨床指標(biāo)學(xué)特點研究[J]．中國實用醫(yī)藥，2013，8(18)：22-23．

Yang HL，Xiao BS，He YL，et al．Research on characteristics of clinical indicators in chronic cardiac failure[J]．China Practical Medical，2013，8(18)：22-23．

[4] 王茂林，唐 碧，吳士禮，等．血清親環(huán)素A與慢性心力衰竭關(guān)系的研究[J]．淮海醫(yī)藥，2015，33(2)：111-112．

Wang ML，Tang B，Wu SL，et al．Relation of cyclophilin A and chronic heart failure[J]．J Huaihai Medicine，2015，33(2)：111-112．

[5] 肖本勝，郭 濤．心力衰竭嚴(yán)重程度與生化指標(biāo)的關(guān)系[J]．慢性病學(xué)雜志，2013，14(11)：837-840．

Xiao BS，Guo T．Relationship between the severity of heart failure and biochemical traits[J]．Chronic Pathematology Journal，2013，14(11)：837-840．

[6] 張之栩，魏 群．血清BNP水平與心衰程度相關(guān)性的臨床研究[J]．中國實驗診斷學(xué)，2010，14(8)：1216-1217．

Zhang ZX，Wei Q．The correlation between the serum BNP levels and the degree of heart failure with heart failure[J]．Chinese Journal of Laboratory Diagnosis，2010，14(8)：1216-1217．

[7] 王智明．急性失代償性心衰患者NTpro-BNP/BNP與NTpro-BNP，BNP對患者預(yù)后的預(yù)測價值比較[J]．中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2016，13(2)：16-19．

Wang ZM．Comparison of predicting value of NTpro-BNP/BNP，NTpro-BNP and BNP of patients with acute decompensated heart failure prognosis[J]．China Medical Herald，2016，13(2)：16-19．

[8] Zhang XM，Wang WJ，Yu YL，et al．BNP and NT-proBNP assays for heart-failure diagnosis in patients with cerebral infarction[J]．Laboratory Medicine，2013，44(1)：46-50．

[9] Satoh K．Cyclophilin a in cardiovascular homeostasis and diseases[J]．The Tohoku Journal of Experimental Medicine，2015，235(1)：1-15．

[10] 李永貴，譚華清，楊志遠(yuǎn)．nt-bnp在心衰合并慢性腎功能不全患者中的臨床意義[J]．河北醫(yī)學(xué)，2013，19(6)：893-895．

Li YG，Tan HQ，Yang ZY．Nt-bnp heart failure in patients with chronic renal insufficiency The clinical significance of the merger[J]．Hebei Medical，2013，19(6)：893-895．