危險(xiǎn)因素對(duì)胃黏膜癌前病變中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)的影響

王 銳，于永強(qiáng)

河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院消化科，河北 張家口075000

預(yù)防和延緩胃黏膜癌前病變(precancerous lesions of gastric cancer，PLGC)是減少胃癌發(fā)病率的重要途徑，但對(duì)于胃黏膜的惡變機(jī)制尚未完全清楚，癌前病變的預(yù)防及治療效果還不是很理想。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial grouth factor，VEGF)與胃癌的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后相關(guān)，參與胃黏膜演變過(guò)程的因子之一，研究比較透徹，但是在癌前病變中研究相對(duì)較少，且與胃癌危險(xiǎn)因素關(guān)系的研究未見(jiàn)報(bào)道。本文旨在探討PLGC 的危險(xiǎn)因素與VEGF 表達(dá)的關(guān)系，了解不同危險(xiǎn)因素的致病途徑，以幫助我們制定更好的臨床干預(yù)方案。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012 年12 月-2013 年12 月河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院消化科門(mén)診胃鏡室就診患者，根據(jù)胃鏡及病理結(jié)果提示腸上皮化生組和異性增生的患者120 例，并對(duì)個(gè)體情況進(jìn)行詢(xún)問(wèn)。排除有嚴(yán)重心腦血管、肝、腎疾病，腫瘤，血液系統(tǒng)疾病，胃部手術(shù)病史等基礎(chǔ)疾病患者。120 例PLGC 患者男68 例、女52 例，年齡35 ～72 歲，中位年齡58.9 歲。

1.2 方法 (1)胃黏膜活檢標(biāo)本置于10%甲醛溶液中固定，常規(guī)石蠟包埋、切片，應(yīng)用免疫組化進(jìn)行VEGF 檢測(cè)(鼠抗人VEGF 單克隆抗體，北京中杉金橋生物有限公司)。閱片由專(zhuān)業(yè)病理科醫(yī)師來(lái)進(jìn)行判斷。(2)本研究列入的危險(xiǎn)因素有吸煙(平均每天＞5 支且超過(guò)1 年)、飲酒(每周超過(guò)2 次且每次超過(guò)500 ml 啤酒或250 ml 黃酒或50 ml 白酒;高鹽飲食(定義為每日鹽量＞6 g);經(jīng)常食用煙熏炙烤食品(平均每周超過(guò)2 次)，阿司匹林等非甾體抗炎藥的使用即連續(xù)服用超過(guò)3 個(gè)月;腫瘤家族史包括一、二、三級(jí)親屬在病例被調(diào)查患消化道腫瘤情況);H. pylori 感染史。對(duì)每個(gè)入組患者進(jìn)行調(diào)查問(wèn)卷。(3)以上危險(xiǎn)因素發(fā)生賦值為1，未發(fā)生賦值為0。

1.3 結(jié)果判斷 VEGF 陽(yáng)性判定:VEGF 主要位于細(xì)胞漿，免疫組化陽(yáng)性反應(yīng)為黃棕褐色顆粒。陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)計(jì)算方法為:每張切片隨機(jī)觀察5 個(gè)高倍視野，每個(gè)視野計(jì)100 個(gè)細(xì)胞中的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，取均值，以百分?jǐn)?shù)表示細(xì)胞陽(yáng)性指數(shù)。染色強(qiáng)度:無(wú)染色為0 分;淺黃色為1 分;黃色為2 分;棕黃或棕褐色為3 分。陽(yáng)性細(xì)胞百分率:無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞為0 分;陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＜25%為1分;陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)25% ～50%為2 分;50% ～75%為3分;陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≥75% 為4 分。2 項(xiàng)相加:0 分為(-);1 ～2 分為(+)，3 ～4 分為(+ +)，5 ～7 分為(+ + +)，+ ～+ + +均為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 19.0 軟件分析，單因素分析組間分類(lèi)資料比較用χ2檢驗(yàn)。將單因素分析中確定有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的變量進(jìn)行多元Logistic 回歸分析方法，P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 單因素分析結(jié)果 有5 項(xiàng)危險(xiǎn)因素包括吸煙、膽汁反流、腫瘤家族史、慢性萎縮性胃炎個(gè)人史和H.pylori 感染，VEGF 表達(dá)陰性組、陽(yáng)性組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05);兩組在飲酒、高鹽飲食、經(jīng)常食用煙熏炙烤食品和長(zhǎng)期服阿司匹林等比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＞0.05，見(jiàn)表1)。

表1 不同危險(xiǎn)因素對(duì)PLGC 中VEGF 表達(dá)影響Tab 1 Effects of different risk factors on the expression of VEGF in PLGC

2.2 Logistic 回歸分析 對(duì)吸煙、膽汁反流、腫瘤家族史、慢性萎縮性胃炎個(gè)人史和H.pylori 感染5 項(xiàng)因素進(jìn)行多元Logistic 回歸分析。結(jié)果表明，吸煙、膽汁反流、H.pylori 感染對(duì)PLGC 中VEGF 表達(dá)有影響，Exp(B)值分別是3.386、3.027、3.884，Exp(B)195%CI 分別為. 373 ～8. 349、1. 176 ～7. 795、1. 345 ～11.212(見(jiàn)表2)。

表2 不同危險(xiǎn)因素的Logistic 回歸分析結(jié)果Tab 2 Results of Logistic regression analysis of different risk factors

3 討論

PLGC 包括胃黏膜腸化生和異性增生［1］，是胃癌發(fā)生的關(guān)鍵點(diǎn)。但目前癌前病變演變?yōu)槲赴┑木唧w機(jī)制尚不清楚。研究顯示VEGF 是目前研究較明確的參與胃黏膜演變過(guò)程，與胃癌的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后相關(guān)。了解不同危險(xiǎn)因素與VEGF 高表達(dá)的相關(guān)性，可為我們制定有效的預(yù)防措施及尋找有效的干預(yù)手段。既往研究發(fā)現(xiàn)不良生活飲食習(xí)慣增加PLGC 的危險(xiǎn)性，包括吸煙、飲酒、高鹽飲食、經(jīng)常食用煙熏炙烤肉類(lèi)食品、家族史、慢性萎縮性胃炎個(gè)人史、H.pylori 感染等［2-3］。

個(gè)人習(xí)慣方面，本研究顯示，吸煙是誘發(fā)癌前病變VEGF 高表達(dá)的危險(xiǎn)因素，單因素分析差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，多元Logistic 回歸分析OR 值為3.386。吸煙對(duì)影響VEGF 表達(dá)情況報(bào)道不一。國(guó)內(nèi)王戀等［4］發(fā)現(xiàn)吸煙可誘發(fā)VEGF 表達(dá)升高。而B(niǎo)erent 等［5］報(bào)道VEGF 的表達(dá)未受吸煙的影響。本研究顯示吸煙是相關(guān)危險(xiǎn)因素，提示吸煙能夠通過(guò)VEGF 途徑促進(jìn)胃黏膜癌變。飲酒經(jīng)單因素分析差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，不屬于誘發(fā)癌前病變VEGF 高表達(dá)的危險(xiǎn)因素。Lu 等［6］研究發(fā)現(xiàn)酒精可以通過(guò)刺激VEGF 依賴(lài)性的血管生成促進(jìn)乳腺腫瘤的生長(zhǎng)。Tan 等［7］實(shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)期飲酒會(huì)刺激VEGF 的表達(dá)，促進(jìn)腫瘤血管生成，與酒精攝入量相關(guān)，與本文研究結(jié)果不一致，究其原因，可能本研究未對(duì)患者的飲酒量進(jìn)行分類(lèi)等因素有關(guān)。同時(shí)，高鹽飲食、經(jīng)常食用煙熏炙烤肉類(lèi)食品無(wú)相關(guān)性，表明其可能通過(guò)其他因子途徑促進(jìn)胃黏膜惡變，而非VEGF。

個(gè)體情況包括服阿司匹林等非甾體藥、膽汁反流、慢性萎縮性胃炎個(gè)人史、H. pylori 感染。其中服用阿司匹林等非甾體藥物單因素分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，研究報(bào)道［8］在體外實(shí)驗(yàn)中阿司匹林對(duì)骨髓瘤細(xì)胞具有抗增殖和抗凋亡的作用，其機(jī)制為通過(guò)調(diào)控Bcl-2和Bax 途徑抑制VEGF 的表達(dá)。本研究發(fā)現(xiàn)膽汁反流、慢性萎縮性胃炎個(gè)人史.H.pylori 感染經(jīng)單因素分析差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但多元Logistic 回歸分析顯示慢性萎縮性胃炎個(gè)人史不是誘發(fā)VEGF 表達(dá)升高的危險(xiǎn)因素。膽汁反流、H.pylori 感染是誘發(fā)癌前病變VEGF高表達(dá)的危險(xiǎn)因素。并且發(fā)現(xiàn)脫氧膽酸比熊去氧膽酸在食管癌細(xì)胞中的表達(dá)有更強(qiáng)的促進(jìn)作用，提示該膽汁鹽具有更強(qiáng)的潛在致癌性［9］。H.pylori 是人類(lèi)胃癌的Ⅰ類(lèi)(即肯定的)致癌原。H. pylori 感染是觸發(fā)PLGC 的重要致病因子，與胃癌發(fā)生密切相關(guān)，H. pylori感染可上調(diào)胃癌患者VEGF 的表達(dá)［10］。H.pylori 感染可能誘導(dǎo)COX-2 在PLGC 中的表達(dá)，COX-2 高表達(dá)進(jìn)一步又上調(diào)VEGF 的表達(dá)［11］。而且H. pylori 在胃上皮細(xì)胞通過(guò)低氧誘導(dǎo)因子1α(hypoxia-inducible factor-1α，HIF-1α)依賴(lài)性途徑誘導(dǎo)VEGF 的產(chǎn)生［12］。

綜上所述，本研究結(jié)果提示吸煙、膽汁反流、H.pylori 感染是PLGC 中VEGF 表達(dá)升高的危險(xiǎn)因素。不過(guò)，本研究樣本量相對(duì)較小，可能存在研究結(jié)果的代表性不夠和選擇性偏倚。因此，尚需臨床進(jìn)行大樣本前瞻性試驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證本研究結(jié)果。相信不久的將來(lái)，隨著研究的深入，各種危險(xiǎn)因素的致病途徑明確，對(duì)臨床治療和預(yù)防癌前病變有重要指導(dǎo)意義。

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