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    肝酶安膠囊中五味子提取工藝的研究

    2015-12-23 02:57:34童學(xué)飛
    中國(guó)醫(yī)藥指南 2015年1期
    關(guān)鍵詞:肝酶浸膏五味子

    童學(xué)飛 王 正

    (十堰市中醫(yī)醫(yī)院,神農(nóng)武當(dāng)中醫(yī)藥研究所,湖北 十堰 442012)

    肝酶安膠囊中五味子提取工藝的研究

    童學(xué)飛 王 正

    (十堰市中醫(yī)醫(yī)院,神農(nóng)武當(dāng)中醫(yī)藥研究所,湖北 十堰 442012)

    目的優(yōu)選肝酶安膠囊中五味子的提取工藝研究。方法應(yīng)用正交設(shè)計(jì)法,篩選最佳工藝條件。結(jié)果最佳提取工藝是加12倍量45%乙醇,以每分鐘1~3 kg/mL的速度進(jìn)行滲漉。結(jié)論優(yōu)選出的肝酶安膠囊中五味子的最佳提取工藝穩(wěn)定可行。

    肝酶安膠囊;五味子;五味子醇甲;提取工藝

    肝酶安膠囊來(lái)源于我院近20年臨床應(yīng)用的知名中醫(yī)經(jīng)驗(yàn)方,是由白芍、丹皮、五味子、龍膽草、虎杖等組成的復(fù)方中藥制劑,具有清熱涼血,柔肝斂陰,解毒降酶,降低血清轉(zhuǎn)氨酶的作用,適用于急慢性肝炎,尤其是慢性肝炎轉(zhuǎn)氨酶反復(fù)升高者,療效顯著[1]。其中五味子是君藥,制劑中采用的工藝是醇提,而五味子醇甲為其有效成分之一[2-4]。為了降低生產(chǎn)成本,提高五味子醇甲提取效率,該研究以干浸膏和五味子醇甲的含量為指標(biāo),應(yīng)用正交設(shè)計(jì)法,對(duì)五味子的最佳提取工藝進(jìn)行了研究。

    1 儀器與試藥

    1.1 儀器:Waters高效液相色譜儀;十萬(wàn)分之一電子天平(Mettler Toledo AG285型);Kudos SK3200H超聲儀(上??茖?dǎo)超聲儀器有限公司)。

    1.2 試藥:五味子醇甲(中國(guó)藥品生物制品檢定所提供,批號(hào)

    120505-200311),五味子(批號(hào):2014001,由十堰市中醫(yī)醫(yī)院副主任中藥師代全奎鑒定),甲醇購(gòu)自天津福晨化學(xué)試劑廠(chǎng),SDS購(gòu)自上海英鵬添加劑化工有限公司,超純水。

    2 方 法

    2.1 提取方法設(shè)計(jì):按處方工藝,取五味子80 g,加入適量45%乙醇,攪拌均勻,悶潤(rùn)2 h后裝入滲漉筒內(nèi),加入45%乙醇浸漬24 h,選用45%乙醇按2010版《中國(guó)藥典》流浸膏劑與浸膏劑項(xiàng)下的滲漉法進(jìn)行試驗(yàn)。以藥材的粒度(A)、滲漉的溶劑用量(B)、滲漉液的流速(C)為考察因素,應(yīng)用L9(34)正交法,所選因素水平見(jiàn)表1。

    表1 因素水平表

    2.2 五味子醇甲含量測(cè)定

    2.2.1 色譜條件:色譜柱為Inertil ODS-3(4.6nm×100nm,5 μm),流動(dòng)相為甲醇-水(13∶7),檢測(cè)波長(zhǎng)250 nm,流速1 mL/min,進(jìn)樣量10 μL。

    2.2.2 供試品溶液的制備:精密稱(chēng)取滲漉液濃縮真空干燥后的干浸膏0.1 g于20 mL量瓶中,加甲醇約18 mL,超聲處理(設(shè)定功率250 W,頻率20 kHz)20 min,加甲醇至刻度,搖勻,過(guò)濾,離心,取上清液為供試品溶液。

    2.2.3 對(duì)照品溶液的制備:取五味子醇甲對(duì)照品適量,加甲醇制成1 mg/mL的對(duì)照品儲(chǔ)備液。

    2.2.4 方法學(xué)考察

    2.2.4.1 線(xiàn)性關(guān)系考察:精密吸取對(duì)照品儲(chǔ)備液,加入適量甲醇制成濃度為0.1 mg/mL的中間液,分別精密吸取中間液1、2、4、8、10 μL,按擬定色譜條件注入HPLC中測(cè)定。以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo),繪制工作曲線(xiàn),計(jì)算得回歸方程y=4E+06x-13487,r=0.9998。表明五味子醇甲在線(xiàn)性范圍內(nèi)線(xiàn)性良好。

    2.2.4.2 精密度考察:取同一供試品溶液,按色譜條件,連續(xù)進(jìn)樣5次,測(cè)得五味子醇甲峰面積的RSD為1.35%,表明試驗(yàn)精密度良好。

    2.2.4.3 重復(fù)性考察:取同一批干浸膏5份,按照“供試品溶液的制備”項(xiàng)制成供試品,按色譜條件,分別進(jìn)樣,測(cè)得五味子醇甲峰面積的RSD為1.02%,表明試驗(yàn)重復(fù)性良好。

    2.2.4.4 穩(wěn)定性考察:取同一供試品溶液,按色譜條件,分別于0、2、4、8、12、24 h分別進(jìn)樣,測(cè)得五味子醇甲峰面積的RSD為1.38%,表明樣品24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

    2.2.4.5 加樣回收率考察:精密稱(chēng)取6份已知含量的同一批干浸膏0.05 g,分別加入一定量的對(duì)照品溶液,制成供試品,分別進(jìn)樣,計(jì)算回收率,平均回收率為100.8%,RSD值為1.41%。

    3 結(jié) 果

    精密吸取供試品溶液10 μL,按色譜條件進(jìn)樣,結(jié)果見(jiàn)表2,并采用SPSS18.0進(jìn)行方差分析,結(jié)果見(jiàn)表3。方差分析結(jié)果顯示:以五味子醇甲為評(píng)價(jià)指標(biāo),由表2極差R值顯示,各因素作用主次為C>A>B,表3方差分析結(jié)果顯示C因素影響具有顯著差異(P<0.05),因此確定五味子最佳滲漉工藝為A2B1C3,即五味子粉碎成粗粉,加45%乙醇12倍量,以每分鐘1~3 kg/mL的速度進(jìn)行滲漉。

    4 討 論

    本研究采用正交試驗(yàn),以五味子中的有效成分五味子醇甲含量為指標(biāo)考察了提取工藝的合理性,最終確定了最佳提取方案,該方法穩(wěn)定可行,為后續(xù)的生產(chǎn)工藝提升提供了理論支持。

    表2 L9(34)計(jì)算及含量結(jié)果表

    表3 五味子滲漉工藝五味子醇甲量方差分析表

    [1]童學(xué)飛,胡耀斐.肝酶安膠囊中五味子乙素的含量測(cè)定[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2012,31(1):89-90.

    [2]張明華,陳虹,李靈芝,等.五味子甲素和五味子醇甲對(duì)四氯化碳所致肝臟損傷的保護(hù)作用[J].武警醫(yī)學(xué),2002,13(7):395-396.

    [3]徐健.對(duì)五味子有效成分提取分離方法的分析[J].中國(guó)科技博覽,2012,(27):290-290.

    [4]高雁,李廷利.五味子有效成分的藥理作用研究進(jìn)展[J].中醫(yī)藥學(xué)報(bào),2011,39(6):104-106.

    Study on the Extraction Process of Schisandra Chinensis in Ganmeian Capsule

    TONG Xue-fei, WANG Zheng
    (Shiyan Hospital of Traditional Chinese Medicine, Shennong Wudang Institute of Traditional Chinese Medicine, Shiyan 442012, China)

    ObjectiveTo optimize the extraction process of Schisandra chinensis in Ganmeian capsule.MethodsTaking the content of schisandrol as index, orthogonal experiments was designed with four factors like the granularity of traditional medicine, the amount of percolation solvent and the flow rate of percolation fluid to select the optimized extracting technology.ResultsThe optimized extracting technology is added 12 times 45% ethanol, carried on the diacolation with the speed of 1-3 kg/mL of every minute.ConclusionsThis optimized extraction process stable and feasible.

    Ganmeian capsule; Schisandra chinensis; Schisandrol; Extraction process

    R282.710.5

    B

    1671-8194(2015)01-0004-02

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