農(nóng)用灌溉水中7種農(nóng)藥殘留高效液相色譜分析方法

熊佳梁，唐加敏，胡曉旭，趙偉良，劉營(yíng)仙，馬榮憲

（1.云南省大理州農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心，大理 671000；2.云南省大理市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)站，大理 671000）

由于農(nóng)藥的大量使用，農(nóng)用灌溉水中的農(nóng)殘污染問題已經(jīng)影響了人們的生活和生產(chǎn)[1]。目前國(guó)家在農(nóng)用灌溉水中農(nóng)藥殘留檢測(cè)的方法和依據(jù)也不完善。有關(guān)高效液相色譜測(cè)定農(nóng)藥殘留的報(bào)道已有很多[2]，但這些方法的前處理都較為復(fù)雜。直接利用溶劑萃取機(jī)進(jìn)行液液萃取，萃取效率高，而且無需用SPE小柱凈化，節(jié)省了實(shí)驗(yàn)材料很適于實(shí)際批量樣品的分析。該文建立了農(nóng)用灌溉水中7種農(nóng)藥殘留的分析方法，優(yōu)化了相關(guān)的實(shí)驗(yàn)條件，對(duì)方法的線性范圍、最低檢出限、回收率及變異系數(shù)等進(jìn)行了考察。

1 材料與方法

1.1 藥品與溶液配制

農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品 （吡蟲啉、啶蟲脒、多菌靈、除蟲脲、滅幼脲、辛硫磷、阿維菌素）農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所，以上農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品純度均≥99%，濃度均為1000mg/L。甲醇、乙腈和二氯甲烷均為色譜純。將上述標(biāo)品的質(zhì)量濃度配制為5.0mg/L，在4℃條件下保存。

1.2 儀器設(shè)備

AgilentHPLC-1290,配有紫外檢測(cè)器 （UV）；色譜柱：75mm×2.1mm×2.7μm；全自動(dòng)溶劑萃取機(jī) （APLE-2000）；氮吹儀；漩渦混合儀；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。

1.3 樣品的前處理

量取50.0ml的水樣于全自動(dòng)溶劑萃取機(jī)中，用50.0ml的二氯甲烷萃取，收集全部萃取液于100ml雞心瓶中，然后水浴溫度為36℃的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上旋至近干，加入2.0ml甲醇。將上述溶液完全轉(zhuǎn)移到10ml離心管中，在用甲醇少量多次的沖洗雞心瓶，并完全轉(zhuǎn)移至離心管中，大約6ml左右。將離心管放到水浴溫度為42℃的氮吹儀上，氮吹蒸發(fā)至2.5ml以下，用甲醇定容至2.5ml,在漩渦混勻器上混勻，將定容后的溶液過0.22μm有機(jī)膜微孔濾膜裝入進(jìn)樣瓶中，等待下一步儀器分析。

1.4 色譜條件

流動(dòng)相為甲醇+乙腈 （7+3）和水;梯度洗脫程序：0～6min，甲醇+乙腈由 30%線性升至 35%；6～6.5min，甲醇+乙腈由35%線性升至 80%；6.5～7.9min,甲醇+乙腈由80%線性升至100%；7.9～12min，甲醇+乙腈保持100%。檢出波長(zhǎng)：0～12min，245nm、254nm、275nm、280nm全掃。柱溫：40℃。進(jìn)樣量：2.5μl。

2 結(jié)果與討論

2.1 樣品液的提取與凈化

樣品液的提取與凈化是實(shí)驗(yàn)極為重要的環(huán)節(jié)，要是過程比較復(fù)雜容易引起樣品的損失。該文篩選了可以進(jìn)行液液萃取的3種溶劑：石油醚、二氯甲烷和正己烷進(jìn)行了提取回收率的比較。選擇了二氯甲烷作為提取溶液，在全自動(dòng)溶劑萃取機(jī)上提取，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，然后用甲醇定容，過0.22μm有機(jī)膜微孔濾膜，直接上儀器，過程較為簡(jiǎn)便，省去了凈化步驟，而且能滿足檢測(cè)需要。

2.2 色譜條件的優(yōu)化

2.2.1 流動(dòng)相的選擇

該文嘗試了選用甲醇和水、乙腈和水、不同配比的甲醇+乙腈和水為流動(dòng)相，通過實(shí)驗(yàn)對(duì)比后發(fā)現(xiàn)只有以甲醇+乙腈 （7+3）和水為流動(dòng)相時(shí)，分離度能達(dá)到要求，并能獲得較為理想的色譜圖，如圖1所示。

注：BCL-吡蟲啉:3.162min,DCM-啶蟲脒:4.240min,DJL-多菌靈:4.628min,CCN-除蟲脲:8.413min,MYN-滅幼脲:8.478min,XLL-辛硫磷:8.558min,AWJS-阿維菌素:8.980min

2.2.2 流速的選擇

按照以上色譜條件比較了不同流速對(duì)分析的影響，當(dāng)流速為1.0ml/min時(shí)，吡蟲啉的出峰時(shí)間太快，啶蟲脒和多菌靈的分離度達(dá)不到要求；當(dāng)流速為0.8ml/min時(shí)，吡蟲啉的出峰時(shí)間還是太快且靠近死時(shí)間，從而會(huì)影響定量分析；當(dāng)流速為0.5ml/min時(shí)，能夠得到理想的分離度；當(dāng)流速繼續(xù)減小時(shí)，吡蟲啉出現(xiàn)平頭峰，而且延長(zhǎng)了分析時(shí)間，綜合考慮上述的情況，選擇流速為0.5ml/min。

表1 不同處理土壤pH的測(cè)定結(jié)果

2.2.3 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

在上述色譜條件下，用AgilentUPLC-1290型所配的紫外檢測(cè)器對(duì)分離后的7種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液在190～400nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，得到了各農(nóng)藥的紫外—可見吸收光譜圖以及最佳紫外—可見吸收光譜波長(zhǎng)，吡蟲啉、啶蟲脒、多菌靈、除蟲脲、滅幼脲、辛硫磷、阿維菌素的最佳紫外—可見吸收光譜波長(zhǎng)分別為：275nm、245nm、280nm、275nm、254nm、280nm、245nm。

表2 回收率及精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.4 方法的線性關(guān)系和檢出限

配制5個(gè)不同濃度的7種農(nóng)藥混合標(biāo)樣，按1.4的色譜條件分析，外標(biāo)法定量。以峰面積y對(duì)濃度x做線性回歸分析，線性方程和檢出限 （S/N=3）見表1。

2.5 方法的準(zhǔn)確度與精密度

在水空白樣品中添加3種濃度的農(nóng)藥混標(biāo)，進(jìn)行回收實(shí)驗(yàn)，每個(gè)樣品在同一添加水平重復(fù)3次，回收率及精密度如表2所示。

2.6 樣品的測(cè)定

對(duì)云南省賓川縣拉烏鄉(xiāng)有機(jī)煙葉地的灌溉用水，按本方法進(jìn)行分析。結(jié)果顯示，7種農(nóng)藥均未檢出。

3 結(jié)論

該文建立了7種農(nóng)藥在農(nóng)用灌溉水中殘留量的測(cè)定方法，操作簡(jiǎn)單，無需進(jìn)行SPE小柱的凈化處理，回收率與精密度均能達(dá)到要求，結(jié)果令人滿意。