• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    加工番茄田列當(dāng)致病菌的篩選與鑒定

    2018-08-30 11:41:48許建軍孫曉軍
    新疆農(nóng)業(yè)科學(xué) 2018年6期
    關(guān)鍵詞:變褐懸浮液鐮刀

    何 偉,許建軍,楊 華,孫曉軍

    (新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所/農(nóng)業(yè)部西北荒漠作物有害生物綜合治理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,烏魯木齊 830091)

    0 引 言

    【研究意義】列當(dāng)是一類寄生在植物根部寄生生活的列當(dāng)科(Orobanchaceae) 列當(dāng)屬(OrobancheL.) 植物的總稱。列當(dāng)寄主范圍非常廣泛,可寄生在豆科、十字花科、葫蘆科、亞麻科、茄科、菊 科、禾本科和大麻科等植物根上[1]。近年來(lái)新疆加工番茄受到列當(dāng)嚴(yán)重危害,造成大量減產(chǎn),遭受列當(dāng)危害加工番茄減產(chǎn)30%~80%,嚴(yán)重時(shí)甚至絕產(chǎn)。列當(dāng)已成為制約新疆加工番茄生產(chǎn)主要因素之一。篩選適宜本地自然環(huán)境的強(qiáng)致病性菌株可為列當(dāng)生防菌提供菌株資源。研究將從新疆加工番茄田間自然發(fā)病列當(dāng)上分離獲得致病性強(qiáng)的菌株,為新疆加工番茄列當(dāng)生防菌提供菌種資源。【前人研究進(jìn)展】利用致病菌防除列當(dāng)多為鐮刀菌。如Thomas 等[2]報(bào)道的尖孢鐮刀菌[F.oxysporumf. sp.orthoceras(Appel & Wollenw.) Bilay]和Nemat Alla 等[3]報(bào)道尖孢鐮刀菌(F.oxysporumSchl.) Foxy I和Foxy II的孢子懸浮液分別對(duì)向日葵列當(dāng)、鋸齒列當(dāng)和分枝列當(dāng)具有一定防治效果。而其他鐮刀菌包括彎角鐮刀菌(F.camptocerasWollenw.&Reink.)、厚垣鐮刀菌(F.chlamydosporumWollenw. & Reinking)[4]和輪狀鐮刀菌(F.verticillioidesNirenb.)[5]等也均具有防除列當(dāng)?shù)臐撃?。除鐮刀菌外,熒光假單胞?PseudomonasfluorescensFlügge)[6]、UlocladiumbotrytissPreuss.[7]和洋蔥曲霉[8]也具有類似的防除作用。國(guó)內(nèi)研究者也從發(fā)病列當(dāng)植株上分離獲得多種鐮刀菌菌株,如王之樾等[9]從新疆瓜列當(dāng)獲得一個(gè)鐮刀菌并試制成“生防劑F798;孔令曉等[10]從向日葵列當(dāng)上分離獲得的鐮刀菌L2菌株;丁麗麗等[11]從新疆瓜列當(dāng)上分離的菌株中篩選出4個(gè)對(duì)列當(dāng)高致病性菌株;柴阿麗等[12]從新疆加工番茄田采集列當(dāng)病樣分離獲得銳頂鐮刀菌(Fusariumacuminatum)。【本研究切入點(diǎn)】采用生防菌防治列當(dāng)是當(dāng)前研究熱點(diǎn),研究篩選對(duì)加工番茄列當(dāng)具有強(qiáng)致病力的菌株。【擬解決的關(guān)鍵問題】研究采集新疆加工番茄田間自然發(fā)病列當(dāng),組織分離獲得菌株,菌株發(fā)酵液和粗毒素提取液抑制列當(dāng)種子萌芽及活體接種,篩選致病性強(qiáng)的菌株,采用形態(tài)學(xué)特征并輔以分子生物學(xué)方法鑒定。為加工番茄列當(dāng)生防菌的開發(fā)應(yīng)用提供菌株資源。

    1 材料與方法

    1.1 材 料

    樣本:2016年加工番茄坐果期,在呼圖壁縣、昌吉市、吉木薩爾縣、和碩縣、焉耆縣和博湖縣等加工番茄田間采集自然發(fā)病列當(dāng)植株。

    馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA):去皮馬鈴薯200 g,葡萄糖20 g,瓊脂15 g,蒸餾水1 000 mL,pH 6.8。

    馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基(PDB):去皮馬鈴薯200 g,葡萄糖20 g,蒸餾水1 000 mL,pH 6.8。

    1.2 方 法

    1.2.1 病原菌分離與純化

    使用消毒剪刀將列當(dāng)病健交界處剪成3~5 mm的小塊,將小塊在70%酒精中消毒1 min,轉(zhuǎn)移至3%次氯酸鈉溶液中消毒5 min,轉(zhuǎn)至PDA平板上。培養(yǎng)2~3 d后,挑取菌落邊緣菌絲轉(zhuǎn)移至新的PDA平板上。菌落長(zhǎng)成后挑單孢進(jìn)行純化,并試管保存菌株。

    1.2.2 菌株發(fā)酵液和粗毒素提取液對(duì)列當(dāng)種子萌芽抑制作用測(cè)定

    (1)列當(dāng)種子預(yù)處理

    將列當(dāng)種子在70%酒精消毒1.5 min后轉(zhuǎn)移至1%次氯酸鈉消毒12 min,晾干使用。

    (2)菌株發(fā)酵液對(duì)列當(dāng)種子萌芽抑制效果測(cè)定

    將列當(dāng)致病菌接入PDA培養(yǎng)培養(yǎng)基中,7 d后打孔4~5個(gè)轉(zhuǎn)入100 mL PDB液體培養(yǎng)基中,搖床培養(yǎng)7 d,26℃,160 r/min。將一張whatman濾紙(GA/A)置于培養(yǎng)皿中,用無(wú)菌水浸濕,將20粒列當(dāng)種子置于濾紙上,每處理4次重復(fù)。在每個(gè)培養(yǎng)皿中依次加入5 mL GR24和5 mL發(fā)酵液,對(duì)照處理是5 mL GR24和5 mL滅菌水。在室溫25℃,遮光條件下培養(yǎng)7~10 d后,體式顯微鏡下觀察列當(dāng)種子萌芽數(shù)量并記錄。

    (3)菌株粗毒素的提取

    將列當(dāng)致病菌轉(zhuǎn)到PDA培養(yǎng)基中,待菌落長(zhǎng)滿整個(gè)培養(yǎng)基,采用直徑0.6 cm打孔器打孔。用灼燒過(guò)的接種針挑取4~5片接種于裝有250 mL PDB液體培養(yǎng)基的三角瓶?jī)?nèi),每個(gè)菌株接種兩瓶。置于恒溫?fù)u床培養(yǎng)7 d(26℃,160 r/min)后取培養(yǎng)液15 mL離心10 min,轉(zhuǎn)速為10 000 r/min,取上清液,高壓滅菌后得到粗毒素提取液。

    (4)菌株粗毒素提取液對(duì)列當(dāng)種子萌芽抑制效果測(cè)定

    將20粒列當(dāng)種子中置于Whatman玻璃濾紙(GA/A),加入5 mL GR24和5 mL菌株粗毒素提取液,每個(gè)菌株3次重復(fù),空白對(duì)照為5 mL GR24和5 mL滅菌水。在室溫25℃,遮光條件下培養(yǎng)7~10 d后,體式顯微鏡下觀察列當(dāng)種子萌芽數(shù)量并記錄。將抑制列當(dāng)種子萌芽抑制效果高的菌株粗毒素提取液稀釋500和1 000倍進(jìn)行實(shí)驗(yàn),方法同上。

    1.2.3 盆栽試驗(yàn)

    (1)菌株致病性測(cè)定

    盆栽試驗(yàn)采取以下三種方式進(jìn)行接種,接種菌株孢子懸浮液濃度在106~107個(gè)孢子/mL(每200 mL中滴兩滴Tween20)。

    針刺法:每株列當(dāng)分三段,莖基部、莖中部、莖頂端,用無(wú)菌牙簽沾取菌液(無(wú)菌水稀釋過(guò)的),針刺列當(dāng)植株,傷口用濕潤(rùn)的脫脂棉覆蓋保濕24 h后摘下。

    涂抹法:每株列當(dāng)分三段,莖基部、莖中部、莖頂端,用無(wú)菌牙簽挑取菌絲,涂抹列當(dāng)植株,涂抹的地方用濕潤(rùn)的脫脂棉覆蓋保濕24 h后摘下。

    噴霧法:用無(wú)菌水稀釋過(guò)的菌液倒入噴壺中,噴灑剛出土的列當(dāng),最后整株列當(dāng)用地膜覆蓋保濕24 h后摘下??瞻讓?duì)照為清水處理。接種3 d后觀察列當(dāng)病情并記錄。

    (2)菌株孢子懸浮液對(duì)列當(dāng)出土抑制作用測(cè)定

    選擇對(duì)列當(dāng)植株致病性較強(qiáng)的菌株進(jìn)行孢子懸浮液對(duì)盆栽列當(dāng)防治效果實(shí)驗(yàn),將土壤高溫消毒后裝盆,每盆裝約3.2 kg,將50 mg列當(dāng)種子與土混勻后撒播與番茄苗根部。將30 d苗齡的番茄苗移入盆中,每盆一株苗,每盆澆灌200 mL菌懸液,每菌株4次重復(fù),空白對(duì)照澆灌清水。孢子懸浮液濃度在106~107個(gè)孢子/mL。15 d后調(diào)查列當(dāng)出土數(shù)量并計(jì)算抑制效果。

    1.2.4 菌株鑒定

    (1)形態(tài)學(xué)鑒定

    將從列當(dāng)致病植株上分離得到的菌株接種于PSA培養(yǎng)基上,培養(yǎng)7 d后觀察菌落形態(tài)和產(chǎn)生色素情況。在PSA上25℃培養(yǎng)4 d后測(cè)量菌落生長(zhǎng)直徑。大型和小型分生孢子形態(tài)、厚垣孢子形態(tài)以及分生孢子梗形態(tài)培養(yǎng)11 d后觀察大型孢子分生孢子大小、形態(tài)、分隔數(shù)以及小型分生孢子的大小、形態(tài),并觀察厚垣孢子的形態(tài)和大小以及分生孢子梗形態(tài)。

    (2)分子生物學(xué)鑒定

    采用真菌DNA試劑盒提取菌株DNA基因組,引物為真菌通用引物ITS1:TCCGTAGGTGAACCTGCGG,ITS4:TCCTCCGCTTATTGATATGC,真菌DNA提取試劑盒與引物合成均為北京鼎國(guó)昌盛生物科技有限公司。反應(yīng)體系為50 μL,其中2XMix 25 μL、ITS1 (10 μM) 1 μL、ITS4 (10 μM)1 μL、DNA模板2 μL,ddH2O加至50 μL。反應(yīng)條件,94℃預(yù)變性5 min,94℃變性30 s,54℃退火30 s,72℃延伸50 s,72℃延伸10 min,35cycles。PCR產(chǎn)物回收,2.0%瓊脂糖凝膠電泳,切取目的片斷,加入回收試劑溶液A 300 μL/0.1 g,60℃水浴至膠完全溶化,加入50 μL回收試劑溶液B,混勻 ,將溶液置于離心柱中,靜置5 min,12 000 r/m,1 min,棄液體,加入500 μL 80%乙醇,12 000 r/m,離心1 min,棄液體,重復(fù)一次,12 000 r/m,離心5 min,甩干余液,棄液體,晾干5~8 min,將離心柱置于新的離心管中,加入30 μL滅菌雙蒸水,靜置10 min,13 000 r/m,離心3 min,管底即為純化產(chǎn)物。純化產(chǎn)物在北京鼎國(guó)昌盛生物科技有限公司進(jìn)行測(cè)序。以NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中的Blast程序比對(duì)分析,采用MEGA6.0軟件中鄰接法進(jìn)行聚類分析鑒定。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 列當(dāng)致病菌的分離與純化

    加工番茄田間采集自然發(fā)病寄生性雜草列當(dāng)106株典型病樣,帶回實(shí)驗(yàn)室采用常規(guī)組織分離,共計(jì)獲得60個(gè)菌株。

    2.2 分離菌株發(fā)酵液對(duì)列當(dāng)種子萌發(fā)抑制作用

    研究表明,菌株發(fā)酵液對(duì)列當(dāng)種子萌芽抑制效果最好的菌株為2016-22和2016-51,抑制效果均為100%,其次是菌株2016-26、2016-44、2017-6,抑制效果分別為92.86%、90.48%、92.86%。表1

    表1 不同菌株發(fā)酵液對(duì)列當(dāng)種子萌芽抑制效果比較

    Table 1 Comparison of inhibition effect of different strains fermented liquid to broomrape seed germination

    菌株編號(hào)Strain number萌發(fā)率(%)Germination rate抑制率(%)Inhibition rate抑制效果(%)Inhibition effect2016-150.0050.0028.57a2016-516.6783.3376.192016-836.6763.3347.62bc2016-1025.0075.0064.29de2016-1335.0065.0050.00c2016-1435.0065.0050.00c2016-1721.6778.3369.05ef2016-220100100i2016-265.0095.0092.86hi2016-2730.0070.0057.14cd2016-2813.3386.6780.95g2016-2911.6788.3383.33g2016-3618.3381.6773.81fg2016-3710.0090.0085.71gh2016-4213.3386.6780.95g2016-4336.6763.3347.62bc2016-446.6793.3390.48h2016-4618.3381.6773.81fg2016-4915.0085.0078.57g2016-510100.00100i2016-5525.0075.0064.29de2017-65.0095.0092.86hiCK70.0030.00

    注:不同小寫字母代表差異顯著,P<0.05

    Note:The different small letters represent significant difference at 5% level

    2.3 菌株粗毒素提取液對(duì)列當(dāng)種子萌芽抑制作用

    研究表明,2016-14、2016-27、2016-28、2016-36、2016-37、2016-42、2016-46等8個(gè)菌株粗毒素提取液對(duì)列當(dāng)種子的萌發(fā)抑制效果達(dá)到100%。2016-17、2016-22、2016-44、2016-51、2016-55、2017-6等6個(gè)菌株粗毒素提取液對(duì)列當(dāng)種子的萌芽抑制效果均在90%以上,分別為95.24%、96.83%、96.83%、95.24%、92.06%、92.06%。在500倍粗毒素提取液濃度下,2016-14、2016-27、2016-42、2016-46等4個(gè)菌株粗毒素提取液對(duì)列當(dāng)?shù)拿劝l(fā)抑制效果均在40%以上,分別為40.48%、45.24%、59.52%、42.86%。在1 000倍粗毒素濃度下,2016-27、2016-42、2016-46、2016-51等4個(gè)菌株粗毒素提取液對(duì)列當(dāng)?shù)拿劝l(fā)抑制效果分別為2.38%、7.14%、4.76%、2.38%,其余菌株對(duì)列當(dāng)種子無(wú)抑制效果。表2

    表2 不同菌株粗毒素提取液對(duì)列當(dāng)種子萌芽抑制效果比較

    Table 2 Comparison inhibition effect of different strains of crude toxin extract to broomrape seed germination

    菌株母液 Mother liquor500倍 500 times1 000倍 1,000 times抑制率(%)Inhibition rate抑制效果(%)Inhibition effect抑制率(%)Inhibition rate抑制效果(%)Inhibition effect抑制率(%)Inhibition rate抑制效果(%)Inhibition effect2016-193.3389.47bc2016-591.6786.84b2016-891.6786.84b2016-1085.0076.32a2016-1388.3381.58ab2016-14100100d58.3340.48gh30.0002016-1796.6794.74c48.3326.19e30.0002016-2298.3397.37cd53.3333.33ef30.0002016-2691.6786.84b2016-27100100d61.6745.24h31.672.382016-28100100d41.6716.67d30.0002016-2988.3381.58ab2016-36100100d36.679.52c30.0002016-37100100d51.6730.95ef30.0002016-42100100d71.6759.52i35.007.142016-4386.6778.95a2016-4498.3397.37cd30.000a30.0002016-46100100d60.0042.86h33.334.762016-4988.3381.58ab2016-5196.6794.74c55.0035.71fg31.672.382016-5595.0092.11c35.007.14bc30.0002017-695.0092.11c33.334.76b30.000CK36.6730.0030.00

    注:不同小寫字母代表差異顯著,P<0.05

    Note:The different small letters represent significant difference at 5% level

    2.4 不同接種方式菌株對(duì)列當(dāng)致病性

    研究表明,供試的7個(gè)菌株針刺法都可引起列當(dāng)明顯發(fā)病。其中菌株2016-14、2016-36接種3 d后即發(fā)病并迅速引起萎蔫、腐爛和莖基部褐變,接種7 d后整株腐爛,死亡。在涂抹法中,菌株2016-36、2016-42和2017-6對(duì)列當(dāng)?shù)那秩拘宰顝?qiáng),接種3 d表現(xiàn)明顯發(fā)病,接種7 d后整株腐爛,死亡。在噴灑霧中,菌株2016-42和2017-6的致病效果最好,接種3 d后發(fā)病,7 d后整株腐爛,死亡。采用針刺、涂抹和噴霧等3種接種方式進(jìn)行接種,不同菌株在不同接種方式下,發(fā)病情況具有明顯差異。表3,圖1

    表3 不同接種方式菌株致病性比較

    Table 3 Comparison of pathogenic of strains by different ways of inoculation

    菌株編號(hào)Strain number針刺接種Acupuncture inoculation涂抹接種Daub inoculation噴霧接種Spray inoculation2016-14傷口變褐,整株萎蔫,變腐死亡莖基部變褐無(wú)癥狀2016-27傷口及周圍變褐傷口及周圍變褐無(wú)癥狀2016-28傷口及周圍變褐,整株萎蔫傷口及周圍變褐無(wú)癥狀2016-29傷口變褐無(wú)癥狀無(wú)癥狀2016-36傷口變褐,整株萎蔫,變腐死亡傷口變褐,整株萎蔫,變腐死亡輕微褐變2016-42傷口及周圍變褐莖基部變褐,整株變腐死亡莖基部變褐,整株變腐死亡2017-6傷口變褐,整株萎蔫,變腐死亡整株萎蔫死亡整株萎蔫死亡

    A:針刺接種;B:噴霧接種;C:涂抹接種;D空白對(duì)照

    A:Acupuncture inoculation;B:Spray inoculation;C:Daub inoculation;D:CK

    圖1 菌株2016-42不同接種方式下列當(dāng)發(fā)病情況

    Fig.1 The infection situation of Broomrape use different inoculation by Strain 2016-42

    2.5 菌株孢子懸浮液對(duì)列當(dāng)出土抑制作用

    研究表明,供試的3個(gè)菌株中,菌株2016-36和2016-42孢子懸浮液處理列當(dāng)出土?xí)r間最早,較空白對(duì)照提前10 d,菌株2017-6孢子懸浮液列當(dāng)出土?xí)r間最晚,較空白對(duì)照延遲22 d。3個(gè)菌株孢子懸浮液處理列當(dāng)出土抑制效果具有顯著差異,菌株2017-6孢子懸浮液對(duì)列當(dāng)出土抑制效果最好,抑制效果為94.65%,其次是菌株2016-42,抑制效果為25.05%,菌株2016-36最低,抑制效果為19.70%。表4

    表4 不同菌株孢子懸浮液對(duì)列當(dāng)出土抑制效果比較

    Table 4 Comparison of broomrape inhibition effect of different strains spore suspension

    菌株Strains平均單盆列當(dāng)出土數(shù)量 The number average single basin unearthed broomrape (strain/pot)9月25日10月6日10月18日10月28日總計(jì) Sum抑制效果(%)Inhibition effect2017-60000.250.2594.65b2016-361.2502.503.7519.70a2016-4211.251.2503.525.05aCK01.672.670.334.67

    注:不同小寫字母代表差異顯著,P<0.05

    Note:The different small letters represent significant difference at 5% level

    2.6 菌株鑒定

    2.6.1 菌株形態(tài)學(xué)鑒定

    菌株2017-6培養(yǎng)性狀:在 PSA上25℃、4 d的菌落直徑為3.0~4.5 cm。氣生菌絲白色,羊毛狀。形態(tài)特征:小型分生孢子數(shù)目多,橢圓形,腎形,0~1隔,大小(6.65~17.48) μm×(2.49~4.51) μm。大型分生孢紡錘形或鐮刀形,基胞足跟明顯,2~6分隔,多為2~3分隔,大小(3.50~4.51) μm×(17.41~39.46) μm。分生孢子梗長(zhǎng),單瓶梗,厚垣孢子頂生或串生。根據(jù)上述培養(yǎng)性狀和形態(tài)特征,參考王拱辰等的《常見鐮刀菌鑒定指南》[13],將菌株2017-6鑒定為尖孢鐮刀菌Fusariumoxysporum。

    2.6.2 菌株18S rDNA的ITS序列分析

    通過(guò)GenBank中進(jìn)行Blast比對(duì),應(yīng)用MEGA6.0軟件中鄰接法構(gòu)建聚類分析樹狀圖,bootstrap檢驗(yàn)值≥50%,1 000次重復(fù)。基于數(shù)據(jù)庫(kù)中18個(gè)菌株的ITS序列,采用鄰接法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹,以確證菌株2017-6的分類歸屬。菌株2017-6與菌株KF751873.1Fusariumoxysporum在同一分支上,且兩個(gè)菌株ITS序列相似性為99%,這與形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果一致。圖2

    圖2 菌株2017-6的系統(tǒng)發(fā)育樹狀圖

    Fig.2 The phylogenetic tree of strain 2017-6

    3 討 論

    目前提出的防除列當(dāng)?shù)拇胧┲饕ㄈ斯ぐ纬?、化學(xué)防除、農(nóng)藝措施、培育抗性品種和昆蟲防除等[14],但上述措施生產(chǎn)上應(yīng)用存在缺陷,很難有效控制列當(dāng)為害,因此,篩選對(duì)列當(dāng)致病使其自然死亡的致病菌作為生防因子已成為研究熱點(diǎn)。國(guó)內(nèi)外已有很多關(guān)于從微生物防除列當(dāng)?shù)膱?bào)道,主要有鐮刀菌(Fusariumspp.)[15]、根瘤菌[16]、叢枝菌根真菌[17]和假單胞桿菌[18]等。已報(bào)道的從列當(dāng)植株上分離獲得的致病菌多為鐮刀菌。研究中篩選出的菌株為鐮刀菌,但由于鐮刀菌中的許多種為多種植物病害的致病菌,因此,此類病原菌在使列當(dāng)致病的同時(shí)也可能對(duì)寄主或其他農(nóng)作物造成危害。要開發(fā)出對(duì)加工番茄安全且對(duì)列當(dāng)高度致病的生防菌劑,還需要對(duì)已篩選菌株的寄主范圍、安全使用濃度以及使用方法等做進(jìn)一步的研究。

    列當(dāng)種子萌芽至寄生在寄主根部階段是防治列當(dāng)最佳時(shí)期[19]。研究中鐮刀菌菌株發(fā)酵液對(duì)列當(dāng)種子萌芽抑制效果較菌株粗毒素提取液差,菌株粗毒素提取液隨著稀釋倍數(shù)增加對(duì)列當(dāng)種子萌芽抑制效果降低,當(dāng)稀釋倍數(shù)達(dá)到1 000倍時(shí),菌株粗毒素提取液對(duì)列當(dāng)種子萌芽無(wú)抑制效果。采用濃縮或添加助劑提高菌株毒素對(duì)列當(dāng)種子萌芽抑制效果可作為進(jìn)一步研究方向。

    土壤中存在多種對(duì)植物土傳病害有防治作用的有益微生物,而寄主植物對(duì)列當(dāng)?shù)目剐詸C(jī)理與植物對(duì)病原菌的抗性機(jī)理十分類似,因此,有益土壤微生物可能也可以防除列當(dāng)[14]。此外,與從列當(dāng)植株上分離的微生物相比,分離自土壤中微生物易在土壤中存活繁殖,且能夠在列當(dāng)種子萌芽和侵染寄主時(shí)發(fā)揮作用,因此,從該地加工番茄田間發(fā)病列當(dāng)植株根際土壤中分離防除列當(dāng)微生物可作為篩選列當(dāng)生防菌的一個(gè)研究方向。

    國(guó)內(nèi)研究者從不同區(qū)域多種列當(dāng)上分離獲得對(duì)列當(dāng)植株致病性強(qiáng)的菌株[10-13],但未見菌株孢子懸浮液對(duì)列當(dāng)出土抑制效果的報(bào)道。研究篩選的菌株對(duì)列當(dāng)出土具有較好抑制效果,但其作用機(jī)理、土壤中定殖能力及其與土壤中微生物群落相互作用需要進(jìn)一步深入研究。

    4 結(jié) 論

    篩選出的菌株2017-6粗毒素提取液對(duì)列當(dāng)種子萌芽抑制效果在90%以上,其孢子懸浮液對(duì)列當(dāng)植株具有強(qiáng)致病性。目前,多數(shù)列當(dāng)生防菌均是在列當(dāng)出土后進(jìn)行防治,此時(shí)作物已經(jīng)遭受危害,且由于列當(dāng)出土多在作物生育中后期,不易被發(fā)現(xiàn),防治較為困難。菌株2017-6孢子懸浮液對(duì)列當(dāng)出土抑制效果達(dá)94.65%,且可有效延緩列當(dāng)出土?xí)r間。

    猜你喜歡
    變褐懸浮液鐮刀
    烤煙新品系烘烤特性研究
    云煙87烤煙品種上部葉烘烤特性研究
    重介質(zhì)懸浮液中煤泥特性對(duì)分選的影響分析
    云南化工(2020年11期)2021-01-14 00:51:00
    噴霧干燥前驅(qū)體納米Al 懸浮液的制備及分散穩(wěn)定性
    含能材料(2020年8期)2020-08-10 06:44:20
    分選硫鐵礦用高密度重介懸浮液特性的分析研究
    酷蟲學(xué)校再遇鐮刀幫(一)
    烘烤變黃溫度對(duì)煙葉變黃變褐特性的影響
    苦菊收獲前葉片邊緣變褐咋辦
    一把鐮刀
    鴨綠江(2013年12期)2013-03-11 19:42:10
    鐮刀與鐵錘
    国产男靠女视频免费网站| 久久久久久伊人网av| av在线亚洲专区| 免费看日本二区| 校园人妻丝袜中文字幕| 亚洲精品成人久久久久久| 日本成人三级电影网站| 成人综合一区亚洲| 又爽又黄无遮挡网站| 午夜精品久久久久久毛片777| 淫秽高清视频在线观看| 国产成年人精品一区二区| 亚洲成人中文字幕在线播放| 熟女电影av网| 国产伦一二天堂av在线观看| 精品久久久久久久久久免费视频| 成年免费大片在线观看| 亚洲欧美日韩高清专用| 亚洲七黄色美女视频| 哪里可以看免费的av片| 国产高清激情床上av| 久久精品人妻少妇| 身体一侧抽搐| 成人国产综合亚洲| 国产激情偷乱视频一区二区| 国产综合懂色| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 毛片女人毛片| 69av精品久久久久久| 亚洲精品色激情综合| 少妇被粗大猛烈的视频| 嫩草影视91久久| 女同久久另类99精品国产91| 在线播放无遮挡| 久久久久久久久久久丰满 | 乱人视频在线观看| 国产精品一区二区三区四区久久| 少妇人妻一区二区三区视频| 亚洲成人久久性| 欧美激情久久久久久爽电影| 久久久久久久久久成人| 久久人妻av系列| xxxwww97欧美| 亚洲av免费高清在线观看| 成人无遮挡网站| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 亚洲精品色激情综合| 少妇被粗大猛烈的视频| 午夜福利18| 国产av在哪里看| 日本五十路高清| 女同久久另类99精品国产91| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 天美传媒精品一区二区| 99久久中文字幕三级久久日本| 亚洲国产精品sss在线观看| 国产高清视频在线播放一区| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 99在线视频只有这里精品首页| 色播亚洲综合网| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 国产高清视频在线观看网站| 精品乱码久久久久久99久播| 国产主播在线观看一区二区| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 中国美白少妇内射xxxbb| 中文字幕av在线有码专区| 99久久精品一区二区三区| 久久人妻av系列| 春色校园在线视频观看| 美女cb高潮喷水在线观看| 麻豆国产av国片精品| 一边摸一边抽搐一进一小说| 一个人观看的视频www高清免费观看| 深爱激情五月婷婷| 99久久无色码亚洲精品果冻| 69av精品久久久久久| 黄色视频,在线免费观看| 久久久久久久午夜电影| 久久精品影院6| 他把我摸到了高潮在线观看| 日本色播在线视频| 亚洲 国产 在线| 成人毛片a级毛片在线播放| av.在线天堂| 亚洲性久久影院| 色综合婷婷激情| 国产综合懂色| 国产欧美日韩一区二区精品| 嫁个100分男人电影在线观看| 亚洲精品影视一区二区三区av| 最近中文字幕高清免费大全6 | 国产亚洲精品久久久com| 性插视频无遮挡在线免费观看| 性色avwww在线观看| 午夜福利在线观看吧| 亚洲精品影视一区二区三区av| 麻豆国产av国片精品| 两人在一起打扑克的视频| 成人二区视频| 日韩欧美在线二视频| 国产综合懂色| 久久久久久久亚洲中文字幕| 国产综合懂色| 看片在线看免费视频| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片 | 亚洲最大成人av| 嫩草影院精品99| 久久6这里有精品| 国产精品久久久久久av不卡| 给我免费播放毛片高清在线观看| 精品人妻熟女av久视频| 欧美丝袜亚洲另类 | 999久久久精品免费观看国产| 日韩人妻高清精品专区| 午夜a级毛片| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 欧美日韩乱码在线| 亚洲精华国产精华精| 亚洲va在线va天堂va国产| 亚洲人成伊人成综合网2020| 99热这里只有精品一区| 精品国内亚洲2022精品成人| 中文资源天堂在线| 精品福利观看| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 91在线精品国自产拍蜜月| 在现免费观看毛片| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 久久久久性生活片| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 久久精品国产鲁丝片午夜精品 | 国产黄a三级三级三级人| 亚洲国产精品成人综合色| 亚洲欧美激情综合另类| 乱码一卡2卡4卡精品| 最近最新中文字幕大全电影3| 中文字幕免费在线视频6| 国产高清三级在线| 久久草成人影院| 国产精品爽爽va在线观看网站| 嫩草影院新地址| 久久久久国内视频| 久久精品国产亚洲网站| 天堂影院成人在线观看| 久久久久久久久久成人| 女同久久另类99精品国产91| 国产三级中文精品| 美女免费视频网站| 亚洲av.av天堂| 亚洲熟妇熟女久久| 日韩欧美免费精品| 亚洲欧美清纯卡通| 亚洲欧美激情综合另类| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 亚洲中文日韩欧美视频| 精品福利观看| 成人国产一区最新在线观看| 在线观看一区二区三区| АⅤ资源中文在线天堂| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 久久九九热精品免费| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 中文字幕高清在线视频| 久久香蕉精品热| 日韩中字成人| 日韩欧美三级三区| 免费看美女性在线毛片视频| a在线观看视频网站| 又爽又黄无遮挡网站| 成人美女网站在线观看视频| 久久久久性生活片| 五月玫瑰六月丁香| 成人国产一区最新在线观看| 免费av观看视频| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 又黄又爽又免费观看的视频| 成人特级黄色片久久久久久久| 少妇被粗大猛烈的视频| 国产精品爽爽va在线观看网站| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 一本一本综合久久| 亚洲avbb在线观看| 在线国产一区二区在线| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 3wmmmm亚洲av在线观看| 国产一区二区在线av高清观看| 亚洲精品久久国产高清桃花| 色视频www国产| 国产探花在线观看一区二区| 国产黄片美女视频| 国产人妻一区二区三区在| 国产在线精品亚洲第一网站| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 日本-黄色视频高清免费观看| 国内揄拍国产精品人妻在线| 舔av片在线| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 久久久久久久久中文| 精品国内亚洲2022精品成人| 欧美一级a爱片免费观看看| 欧美国产日韩亚洲一区| 国产精品久久久久久久久免| 日本黄色片子视频| 如何舔出高潮| 婷婷丁香在线五月| 老司机午夜福利在线观看视频| 成年女人毛片免费观看观看9| 久久久久性生活片| 在线看三级毛片| 最新在线观看一区二区三区| 国产成人aa在线观看| 久久午夜亚洲精品久久| 欧美激情在线99| 国产黄色小视频在线观看| 色综合站精品国产| 丰满乱子伦码专区| 一个人观看的视频www高清免费观看| 啦啦啦啦在线视频资源| 可以在线观看毛片的网站| 亚洲成人免费电影在线观看| 在线观看一区二区三区| av天堂中文字幕网| 国内精品美女久久久久久| 香蕉av资源在线| 毛片一级片免费看久久久久 | 级片在线观看| 老司机深夜福利视频在线观看| 亚洲精品在线观看二区| 少妇的逼好多水| 国产欧美日韩一区二区精品| 久久人妻av系列| 成人特级黄色片久久久久久久| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 亚洲最大成人av| 久9热在线精品视频| 黄色丝袜av网址大全| 亚洲av五月六月丁香网| 亚洲自偷自拍三级| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 床上黄色一级片| 1024手机看黄色片| 中文在线观看免费www的网站| 国产黄片美女视频| 最新中文字幕久久久久| 日日撸夜夜添| 欧美成人性av电影在线观看| 亚洲一区高清亚洲精品| av在线亚洲专区| 此物有八面人人有两片| 99在线人妻在线中文字幕| 国产淫片久久久久久久久| 亚洲在线观看片| 国产精品一区二区性色av| 我的女老师完整版在线观看| 亚洲精品久久国产高清桃花| 真实男女啪啪啪动态图| 又紧又爽又黄一区二区| 国产私拍福利视频在线观看| 性色avwww在线观看| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 网址你懂的国产日韩在线| av国产免费在线观看| 亚洲黑人精品在线| 亚洲图色成人| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 一个人免费在线观看电影| bbb黄色大片| 在线国产一区二区在线| 日日啪夜夜撸| 欧美一区二区亚洲| 女人被狂操c到高潮| 久久久久久久久久成人| av国产免费在线观看| 日本a在线网址| 成熟少妇高潮喷水视频| 日韩精品中文字幕看吧| 精品国产三级普通话版| 成人无遮挡网站| av在线老鸭窝| 亚洲精华国产精华液的使用体验 | 欧美丝袜亚洲另类 | 有码 亚洲区| 欧美色欧美亚洲另类二区| 欧美激情国产日韩精品一区| 深夜a级毛片| 久久久久久大精品| 99热这里只有是精品在线观看| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 97碰自拍视频| 亚洲内射少妇av| 国产精品一区www在线观看 | 麻豆国产97在线/欧美| 午夜精品久久久久久毛片777| 联通29元200g的流量卡| 成人av一区二区三区在线看| 精品久久国产蜜桃| 午夜激情福利司机影院| 韩国av一区二区三区四区| 久久久午夜欧美精品| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 国产单亲对白刺激| 看片在线看免费视频| 又粗又爽又猛毛片免费看| 免费大片18禁| 特大巨黑吊av在线直播| 搡老熟女国产l中国老女人| 亚洲成人中文字幕在线播放| 久久午夜福利片| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 九九在线视频观看精品| 欧美精品国产亚洲| 亚洲国产色片| 国产精品电影一区二区三区| 免费av不卡在线播放| 婷婷精品国产亚洲av在线| 欧美精品国产亚洲| 久久精品国产亚洲网站| 少妇熟女aⅴ在线视频| 国产精品一及| 免费观看的影片在线观看| 免费看日本二区| 欧美日韩国产亚洲二区| 村上凉子中文字幕在线| 亚洲精品影视一区二区三区av| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 精品人妻1区二区| 亚洲性夜色夜夜综合| 老司机福利观看| 精品福利观看| 五月玫瑰六月丁香| 亚洲人与动物交配视频| 天天一区二区日本电影三级| 日本 av在线| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 嫩草影院入口| 亚洲在线观看片| 久久国产乱子免费精品| 久久午夜福利片| 99精品在免费线老司机午夜| 欧美日本亚洲视频在线播放| 日本 欧美在线| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 神马国产精品三级电影在线观看| 国产黄色小视频在线观看| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 成人特级黄色片久久久久久久| 亚洲国产欧美人成| 极品教师在线视频| 国产毛片a区久久久久| 97超视频在线观看视频| 三级毛片av免费| 国产伦一二天堂av在线观看| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| av女优亚洲男人天堂| 国产伦一二天堂av在线观看| www.色视频.com| 久久久久性生活片| 一级黄色大片毛片| 他把我摸到了高潮在线观看| 国产麻豆成人av免费视频| 国产精品乱码一区二三区的特点| 草草在线视频免费看| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 99久久成人亚洲精品观看| 亚洲一区二区三区色噜噜| 黄色视频,在线免费观看| 日韩欧美在线二视频| 国产高潮美女av| 精品免费久久久久久久清纯| 国产综合懂色| 日日啪夜夜撸| 国模一区二区三区四区视频| 99热精品在线国产| 亚洲成人精品中文字幕电影| 午夜老司机福利剧场| 波多野结衣巨乳人妻| 国产伦精品一区二区三区视频9| 精品欧美国产一区二区三| 尾随美女入室| 亚洲精品色激情综合| 色视频www国产| 亚洲中文字幕日韩| 日本免费a在线| 国产aⅴ精品一区二区三区波| av在线观看视频网站免费| 免费人成视频x8x8入口观看| 真人做人爱边吃奶动态| 国产高清激情床上av| 午夜激情福利司机影院| 看十八女毛片水多多多| 精品久久国产蜜桃| 九九爱精品视频在线观看| 日韩一本色道免费dvd| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 国产精品一区二区免费欧美| 成人国产一区最新在线观看| 亚洲精华国产精华精| 赤兔流量卡办理| 久久99热这里只有精品18| 国产麻豆成人av免费视频| 欧美日韩综合久久久久久 | 国产美女午夜福利| h日本视频在线播放| 成年女人永久免费观看视频| 中出人妻视频一区二区| av.在线天堂| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国产精品伦人一区二区| 欧美三级亚洲精品| 两个人视频免费观看高清| 免费人成在线观看视频色| 婷婷六月久久综合丁香| 午夜激情福利司机影院| 欧美日韩综合久久久久久 | 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 亚洲专区国产一区二区| 欧美一区二区国产精品久久精品| av黄色大香蕉| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 久久午夜亚洲精品久久| 亚洲最大成人中文| 长腿黑丝高跟| 久久久久久久久久久丰满 | 国产精品爽爽va在线观看网站| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 欧美不卡视频在线免费观看| 他把我摸到了高潮在线观看| 麻豆av噜噜一区二区三区| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 久久久精品大字幕| 五月伊人婷婷丁香| 一级黄片播放器| 国产一区二区三区视频了| 男女视频在线观看网站免费| 中文字幕av在线有码专区| 欧美黑人欧美精品刺激| 色av中文字幕| 日本五十路高清| 亚洲欧美日韩高清专用| 亚洲av二区三区四区| 嫩草影院新地址| 国产色婷婷99| 日本 av在线| 国产69精品久久久久777片| 三级国产精品欧美在线观看| 一区二区三区免费毛片| 少妇熟女aⅴ在线视频| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 99热精品在线国产| 国产免费av片在线观看野外av| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 联通29元200g的流量卡| 亚洲中文日韩欧美视频| 日日撸夜夜添| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 亚洲国产精品sss在线观看| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 不卡一级毛片| 日韩欧美精品免费久久| 在线国产一区二区在线| 长腿黑丝高跟| 内地一区二区视频在线| 最好的美女福利视频网| 久久久久九九精品影院| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 黄色视频,在线免费观看| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 国产成人影院久久av| 亚洲经典国产精华液单| 校园人妻丝袜中文字幕| 真人做人爱边吃奶动态| 日韩欧美三级三区| 亚洲av电影不卡..在线观看| 亚洲精品一区av在线观看| 午夜精品久久久久久毛片777| 国产熟女欧美一区二区| 午夜亚洲福利在线播放| 国产精品电影一区二区三区| 久久99热这里只有精品18| 乱系列少妇在线播放| 国产精品久久久久久久电影| 搡老妇女老女人老熟妇| 亚洲午夜理论影院| 亚洲av成人av| av在线老鸭窝| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 尤物成人国产欧美一区二区三区| www日本黄色视频网| 国产单亲对白刺激| 神马国产精品三级电影在线观看| 最近在线观看免费完整版| 波野结衣二区三区在线| 两个人视频免费观看高清| 亚洲无线观看免费| 久久精品综合一区二区三区| 黄色欧美视频在线观看| 精品乱码久久久久久99久播| 中文字幕免费在线视频6| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 很黄的视频免费| 国产爱豆传媒在线观看| 在现免费观看毛片| 国产午夜福利久久久久久| 国产精华一区二区三区| 在线观看66精品国产| 啪啪无遮挡十八禁网站| 国产午夜精品论理片| 九九热线精品视视频播放| 久久久久久久亚洲中文字幕| 99热只有精品国产| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 国产91精品成人一区二区三区| 内地一区二区视频在线| 亚洲成人中文字幕在线播放| 男人狂女人下面高潮的视频| 色在线成人网| 国模一区二区三区四区视频| 伦理电影大哥的女人| 狠狠狠狠99中文字幕| 不卡视频在线观看欧美| 亚洲七黄色美女视频| 国产精品国产高清国产av| 欧美成人性av电影在线观看| 国内精品一区二区在线观看| 亚洲七黄色美女视频| 伦理电影大哥的女人| 色播亚洲综合网| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 久久亚洲真实| 国产高清不卡午夜福利| 97热精品久久久久久| 在线天堂最新版资源| 男插女下体视频免费在线播放| 亚洲电影在线观看av| 国产精华一区二区三区| 999久久久精品免费观看国产| 久久九九热精品免费| 12—13女人毛片做爰片一| 1024手机看黄色片| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 亚洲国产色片| 一区二区三区高清视频在线| 国产真实乱freesex| 一区二区三区高清视频在线| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 一区二区三区高清视频在线| 亚洲av免费高清在线观看| 日本黄色视频三级网站网址| 国产亚洲精品久久久com| 国产高清视频在线播放一区| 午夜亚洲福利在线播放| 国产精品乱码一区二三区的特点| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 色综合色国产| 成人av一区二区三区在线看| 亚洲国产色片| 国产三级中文精品| 亚洲成a人片在线一区二区| 国产真实伦视频高清在线观看 | 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 亚洲精华国产精华精| 亚洲专区国产一区二区| 亚洲精品久久国产高清桃花| 一区二区三区激情视频| 国产欧美日韩一区二区精品| 久久久久久九九精品二区国产| 亚洲国产色片| 精品人妻偷拍中文字幕| xxxwww97欧美| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | .国产精品久久| 97热精品久久久久久| 白带黄色成豆腐渣| 99riav亚洲国产免费| 永久网站在线| 1024手机看黄色片| 久久精品人妻少妇| 一级黄片播放器| 午夜影院日韩av| 校园春色视频在线观看| 久久久久久伊人网av| 黄色欧美视频在线观看| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 成人一区二区视频在线观看| 男女边吃奶边做爰视频| 韩国av一区二区三区四区| 亚洲av第一区精品v没综合| 波野结衣二区三区在线| 亚洲av免费高清在线观看| ponron亚洲| 两人在一起打扑克的视频| 少妇丰满av| 亚洲天堂国产精品一区在线| 亚洲内射少妇av| 中国美白少妇内射xxxbb| 欧美在线一区亚洲| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 日韩亚洲欧美综合| 日韩精品青青久久久久久| 美女高潮的动态| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 久久人妻av系列| 有码 亚洲区| 老司机深夜福利视频在线观看| 91久久精品国产一区二区成人| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 精品人妻熟女av久视频|