• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基因的生物信息學(xué)分析

    2015-10-20 21:02:19高南等
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2015年9期
    關(guān)鍵詞:水稻

    高南等

    摘要:Shaker類型K+通道在植物鉀的吸收、轉(zhuǎn)運及其他生理過程中發(fā)揮著重要作用。AKT2/3是Shaker類型K+通道中唯一既主導(dǎo)K+內(nèi)流,又允許去極化情況下K+滲漏性外流的通道。水稻OsAKT2/3蛋白的生物信息學(xué)分析表明,OsAKT2/3蛋白含有K+通道的標(biāo)志性序列TxxTxGYGD;該基因分子式為C4219H6693N1179O1233S35,理論等電點為664,氨基酸殘基組成中亮氨酸殘基含量最高;有一定的親水性,為跨膜蛋白;可能存在31個翻譯后修飾位點、5種結(jié)構(gòu)域、52個磷酸化位點,不含信號肽;序列主要構(gòu)件為α-螺旋和折疊延伸;該蛋白與其他植物的AKT2/3家族成員具有較高的同源性。試驗結(jié)果為OsAKT2/3基因生理功能的深入研究提供一定依據(jù)。

    關(guān)鍵詞:水稻;二級結(jié)構(gòu);磷酸化位點;三級結(jié)構(gòu);系統(tǒng)進(jìn)化

    中圖分類號:Q785;Q945.12 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A文章編號:1002-1302(2015)09-0025-03

    鉀是植物必需的大量元素,對提高作物產(chǎn)量、改善產(chǎn)品品質(zhì)起著重要作用。水稻(Oryza sativa L.)對鉀素的需求量較大,不同基因型的水稻對土壤中鉀素的吸收利用存在很大差異[1]。缺鉀可影響細(xì)胞滲透壓平衡,進(jìn)而引起器官機能的破壞,影響植物的正常生長;并通過植物激素調(diào)節(jié)破壞植物體內(nèi)的代謝和轉(zhuǎn)運過程,導(dǎo)致作物的產(chǎn)量和品質(zhì)大幅下降[2]。我國大部分耕地土壤供鉀不足,其中嚴(yán)重缺鉀土壤(速效鉀<50 mg/kg)約2 000萬hm2,占耕地面積的20%以上,且主要分布于我國的水稻產(chǎn)區(qū);因此,需施用鉀素化肥以保證水稻的豐產(chǎn)和品質(zhì),而我國鉀礦資源十分匱乏,95%以上的鉀肥供應(yīng)依賴進(jìn)口[3]。K+通道在植物體內(nèi)的表達(dá)能改良植物的鉀素營養(yǎng)性狀[4-5];因此,挖掘植物中鉀吸收利用的基因并研究其生理功能,對水稻鉀營養(yǎng)性狀的改良及現(xiàn)有鉀素資源的利用具有重要意義。Shaker類型K+通道在植物鉀的吸收、轉(zhuǎn)運及其他生理過程中發(fā)揮著重要作用[2,6-7]。AKT2/3是Shaker類型K+通道中唯一既主導(dǎo)K+內(nèi)流、又允許去極化情況下K+滲漏性外流的通道,其電生理特征表現(xiàn)為弱內(nèi)向整流、能夠感應(yīng)K+水平、受Ca2+和H+調(diào)控[8-9]。其獨有的滲漏型電流,在過量K+迅速吸收進(jìn)入細(xì)胞而導(dǎo)致的膜電位去極化情況下,通過胞內(nèi)K+的滲漏從而實現(xiàn)對膜電位的精確微調(diào)作用[10]。目前,水稻的基因組測序已經(jīng)完成,但關(guān)于水稻K+通道的研究尚較少[11-13]。本研究利用生物信息學(xué)的方法對水稻OsAKT2/3蛋白的理化性質(zhì)、核苷酸序列組成、跨膜結(jié)構(gòu)、親水性、疏水性、亞細(xì)胞定位進(jìn)行分析,并對其結(jié)構(gòu)域、磷酸化位點、二級結(jié)構(gòu)、三級結(jié)構(gòu)進(jìn)行預(yù)測,最后進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化分析,以全面了解OsAKT2/3基因,為該基因生理功能的深入研究提供依據(jù)。

    1材料與方法

    1.1材料

    NCBI中GenBank數(shù)據(jù)庫已注冊水稻OsAKT2/3基因(JN989970.1)、擬南芥[Arabidopsis thaliana (L.) Heynh.]的AKT2/3(NP_567651.1)、大麥(Hordeum vulgare L.)的HvAKT2(ABE99811.1)、雨樹[Samanea saman (Jacq.)Merr.]的SPICK1(AAD16278.1)和SPICK2(AAD39492.1)、歐美楊(Populus tremula L.×Populus tremuloides Michx.)的PTK2(CAC05489.1)、玉米(Zea mays L.)的ZMK2(NP_001105120.1)。1.2方法

    OsAKT2/3蛋白的理化性質(zhì)使用ProtParam軟件在線分析;蛋白跨膜結(jié)構(gòu)使用TMHMM軟件在線分析;親水性及疏水性使用ProtScale軟件在線分析;蛋白亞細(xì)胞定位使用TargetP軟件、WoLF PSORT軟件在線分析;蛋白序列上潛在的結(jié)構(gòu)域和功能位點使用MotifScan軟件、CCD軟件預(yù)測;蛋白磷酸化位點使用NetPhos軟件在線分析;蛋白信號序列使用SignalP4.1軟件在線分析;蛋白二級結(jié)構(gòu)使用SOPMA軟件在線分析;蛋白三級結(jié)構(gòu)使用Phyre2軟件在線分析;利用MEGA 6.05軟件,采用Neighbor-Joining法構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹。上述各分析軟件的網(wǎng)址見表1。

    2結(jié)果與分析

    2.1OsAKT2/3蛋白的理化性質(zhì)分析

    由序列分析結(jié)果可知,OsAKT2/3蛋白含有K+通道的標(biāo)志性序列TxxTxGYGD。用ProtParam軟件分析得知,OsAKT2/3 蛋白共有13 359個原子,分子量為94 783.8,蛋白的分子式為C4219H6693N1179O1233S35,理論等電點為6.64。在855個氨基酸殘基組成中,OsAKT2/3蛋白的N端為蛋氨酸,含量較高的氨基酸殘基包括亮氨酸殘基(10.2%)、纈氨酸殘基(8.5%)、甘氨酸殘基(7.3%)、精氨酸殘基(7.1%)、絲氨酸殘基(7.1%);含量較低的氨基酸殘基包括色氨酸殘基(1.1%)、半胱氨酸殘基(1.4%)等。帶負(fù)電荷的氨基酸(天冬氨酸、谷氨酸)殘基為99個;帶正電荷的氨基酸(精氨酸、賴氨酸)殘基為95個。OsAKT2/3蛋白在哺乳動物、酵母、大腸桿菌中的半衰期分別為30 h(體外)、>20 h(體內(nèi))、>10 h(體內(nèi)),不穩(wěn)定指數(shù)為39.03,該蛋白為穩(wěn)定蛋白。

    2.2OsAKT2/3蛋白的親水性、疏水性、亞細(xì)胞定位

    使用ProtScale軟件預(yù)測OsAKT2/3蛋白的親水性及疏水性可知,氨基酸的最低分值為-2.967,最高分值為3.133(圖1)。整體來看,親水性氨基酸殘基分布于整條肽鏈,且多于疏水性氨基酸殘基。使用TMHMM軟件進(jìn)行預(yù)測,將參數(shù)設(shè)置為默認(rèn)值,可知OsAKT2/3蛋白為跨膜蛋白。WolfPsort軟件預(yù)測該蛋白可能在細(xì)胞質(zhì)膜上,TargetP軟件預(yù)測該蛋白在葉綠體膜上的可能性為79.6%。

    2.3OsAKT2/3蛋白結(jié)構(gòu)域、功能位點的預(yù)測

    OsAKT2/3蛋白序列上潛在的結(jié)構(gòu)域、功能位點使用MotifScan軟件、CCD軟件進(jìn)行預(yù)測。結(jié)果表明,該蛋白可能存在的翻譯后修飾位點包括1個酰胺化位點、4個N-糖基化位點、1個cAMP磷酸化位點、11個酪蛋白激酶Ⅱ位點、7個?;稽c、7個蛋白激酶磷酸化位點;發(fā)現(xiàn)5種結(jié)構(gòu)域,分別為錨蛋白重復(fù)(ANK,cd00204)、環(huán)核苷酸結(jié)合結(jié)構(gòu)域(CAP_ED,cd00038)、未知功能的DUF3354超級家族結(jié)構(gòu)域(DUF3354,pfam11834)、離子轉(zhuǎn)運結(jié)構(gòu)域(Ion_trans_2,pfam07885)、電壓依賴的鉀離子通道結(jié)構(gòu)域(PLN03192,PLN03192)(圖2)。該蛋白具有Shaker基因家族的典型特征,即蛋白的N末端包括6個跨膜區(qū)(S1~S6),有電壓感受區(qū)和高度保守的通道孔區(qū)。使用磷酸化位點預(yù)測程序NetPhos 2.0發(fā)現(xiàn)OsAKT2/3蛋白有37個潛在的絲氨酸磷酸化位點、7個潛在的蘇氨酸磷酸化位點、8個潛在的酪氨酸磷酸化位點。使用SignalP 4.1 Server軟件在線分析OsAKT2/3蛋白的信號肽情況,結(jié)果顯示該蛋白不含信號肽序列。

    2.4OsAKT2/3蛋白二級結(jié)構(gòu)、三級結(jié)構(gòu)的分析

    使用SOPMA軟件預(yù)測OsAKT2/3蛋白的二級結(jié)構(gòu),結(jié)果顯示OsAKT2/3蛋白由43.16%的α-螺旋、17.19%的折疊延伸、8.30%的β-轉(zhuǎn)角、31.35%的無規(guī)則卷曲構(gòu)成,其中折疊延伸和β-轉(zhuǎn)角不均勻分布于整個蛋白質(zhì)的多肽鏈上。依據(jù)模板c2ptmA,采用折疊識別法,使用Phyer2軟件在線預(yù)測OsAKT2/3蛋白序列主鏈原子位置,生成預(yù)測蛋白三級結(jié)構(gòu)模型(圖3),并依據(jù)能量最小化原理使側(cè)鏈集團處于能量最小的位置。該蛋白主要由α-螺旋和無規(guī)則卷曲構(gòu)成,與蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)分析結(jié)果相似。

    2.5OsAKT2/3編碼基因的系統(tǒng)進(jìn)化分析

    在NCBI上共選取6種植物的7個AKT2/3基因序列,以擬南芥KAT1基因作為外群,構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹。結(jié)果顯示,水稻OsAKT2/3在進(jìn)化上與單子葉植物玉米的ZMK2、單子葉植物大麥的HvAKT2的親緣關(guān)系較近,與雙子葉植物擬南芥的AKT2/3等有較高的相似度(圖4)。

    3結(jié)論與討論

    蛋白質(zhì)的功能不僅取決于其一級結(jié)構(gòu),在很大程度上也取決于其高級結(jié)構(gòu)。生物信息學(xué)綜合運用數(shù)學(xué)、計算機技術(shù)、生物學(xué)的各種工具,較好地闡明和理解大量數(shù)據(jù)所包含的生物學(xué)意義?;蛐蛄屑捌涮匦苑治觥⒌鞍踪|(zhì)空間結(jié)構(gòu)模擬等是生物信息學(xué)的重要組成部分。利用生物信息學(xué)的原理,通過計算機模擬相關(guān)的輔助信息,可在較短時間內(nèi),用較低成本獲得大量可靠的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能信息[14-15]。本研究通過網(wǎng)絡(luò)資源,在前期獲得水稻OsAKT2/3的基礎(chǔ)上,應(yīng) 用ProtParam、TMHMM等分析軟件,對OsAKT2/3蛋白的亞細(xì)胞定位、結(jié)構(gòu)域、磷酸化位點、二級結(jié)構(gòu)等蛋白特性進(jìn)行預(yù)測,并對其三級結(jié)構(gòu)進(jìn)行初步分析模擬,以期盡可能多地獲得該蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)及功能的信息,為OsAKT2/3基因功能的研究提供更多、更可靠的理論依據(jù)。

    Shaker類型K+通道在植物鉀的吸收、轉(zhuǎn)運及其他生理過程中發(fā)揮著重要作用[2,6,11]。OsAKT2/3蛋白含有K+通道的標(biāo)志性序列TxxTxGYGD;該基因分子式為C4219H6693N1179O1233S35,理論等電點為6.64,氨基酸殘基組成中亮氨酸殘基含量最高;有一定的親水性,為跨膜蛋白;可能存在31個翻譯后修飾位點、5種結(jié)構(gòu)域、52個磷酸化位點,不含信號肽;序列主要構(gòu)件為α-螺旋和折疊延伸;該蛋白與其他植物的AKT2/3家族成員具有較高的同源性。本試驗結(jié)果為OsAKT2/3基因生理功能的深入研究提供一定依據(jù)。然而,同源性僅是基因序列和蛋白結(jié)構(gòu)上的類似,雖然某些典型功能相近,但來源不同的同源通道常表現(xiàn)出獨特之處。在氨基酸序列、關(guān)鍵結(jié)構(gòu)元件上,玉米的ZmK2.1 K+通道與擬南芥的KAT1通道均高度同源,但其功能特征卻存在顯著差異[16]。與其他AKT2/3型K+通道相比,OsAKT2/3的功能特征是否存在獨特之處仍需進(jìn)一步研究。

    參考文獻(xiàn):

    [1]王為木,楊肖娥,魏幼璋,等. 水稻不同基因型吸收利用土壤鉀素的差異[J]. 浙江大學(xué)學(xué)報:農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版,2005,31(1):52-58.

    [2]Wang Y,Wu W H. Potassium transport and signaling in higher plants[J]. Annual Review of Plant Biology,2013,64:451-476.

    [3]李慶逵,朱兆良,于天仁. 中國農(nóng)業(yè)持續(xù)發(fā)展中的肥料問題[M]. 南昌:江西科學(xué)技術(shù)出版社,1998.

    [4]施衛(wèi)明,王校常,嚴(yán)蔚東,等. 外源鉀通道基因在水稻中的表達(dá)及其鉀吸收特征研究[J]. 作物學(xué)報,2002,28(3):374-378.

    [5]Lebaudy A,Vavasseur A,Hosy E,et al. Plant adaptation to fluctuating environment and biomass production are strongly dependenton guard cell potassium channels[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America,2008,105(13):5271-5276.

    [6]Véry A A,Sentenac H. Molecular mechanisms and regulation of K+transport in higher plants[J]. Annual Review of Plant Biology,2003,54:575-603.

    [7]馬小娟,戚金亮,印莉萍,等. 植物鉀離子轉(zhuǎn)運相關(guān)蛋白及基因研究進(jìn)展[J]. 首都師范大學(xué)學(xué)報:自然科學(xué)版,2004,25(2):41-45.

    [8]Marten I,Hoth S,Deeken R,et al. AKT3,a phloem-localized K+channel,is blocked by protons[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America,1999,96(13):7581-7586.

    [9]Lacombe B,Pilot G,Michard E,et al. A shaker-like K+ channel with weak rectification is expressed in both source and sink phloemtissues of Arabidopsis[J]. The Plant Cell,2000,12(6):837-851.

    [10]Gajdanowicz P,Michard E,Sandmann M,et al. Potassium (K+) gradients serve as a mobile energy source in plant vascular tissues[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America,2011,108(2):864-869.

    [11]Fuchs I,Stlzle S,Ivashikina N,et al. Rice K+uptake channel OsAKT1 is sensitive to salt stress[J]. Planta,2005,221(2):212-221.

    [12]Gupta M,Qiu X,Wang L,et al. Kt/HAK/KUP potassium transporters gene family and their whole-life cycle expression profile in rice(Oryza sativa)[J]. Molecular Genetics and Genomics,2008,280(5):437-452.

    [13]Obata T,Kitamoto H K,Nakamura A,et al. Rice shaker potassium channel OsKAT1 confers tolerance to salinity stress on yeast and rice cells[J]. Plant Physiology,2007,144(4):1978-1985.

    [14]Elmasri R,Ji F,F(xiàn)u J,et al. Modelling concepts and database implementation techniques for complex biological data [J]. International Journal of Bioinformatics Research and Applications,2007,3(3):366-388.

    [15]Kelley L A,Sternberg M J. Protein structure prediction on the web:a case study using the Phyre server[J]. Nature Protocols,2009,4(3):363-371.

    [16]Su Y H,North H,Grignon C,et al. Regulation by external K+in a maize inward shaker channel targets transport activity in the high concentration range [J]. The Plant Cell,2005,17(5):1532-1548.

    猜你喜歡
    水稻
    水稻和菊花
    幼兒100(2023年39期)2023-10-23 11:36:32
    什么是海水稻
    機插秧育苗專用肥——機插水稻育苗基質(zhì)
    有了這種合成酶 水稻可以耐鹽了
    水稻種植60天就能收獲啦
    軍事文摘(2021年22期)2021-11-26 00:43:51
    油菜可以像水稻一樣實現(xiàn)機插
    中國“水稻之父”的別樣人生
    金橋(2021年7期)2021-07-22 01:55:38
    海水稻產(chǎn)量測評平均產(chǎn)量逐年遞增
    一季水稻
    文苑(2020年6期)2020-06-22 08:41:52
    水稻花
    文苑(2019年22期)2019-12-07 05:29:00
    久久鲁丝午夜福利片| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 一二三四中文在线观看免费高清| 超碰97精品在线观看| 日韩精品免费视频一区二区三区| 国产成人精品在线电影| 亚洲国产av影院在线观看| 人人澡人人妻人| 亚洲一区中文字幕在线| 国产日韩欧美亚洲二区| 国产精品一区二区在线观看99| av免费观看日本| 丰满迷人的少妇在线观看| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 一个人免费看片子| 亚洲欧美精品自产自拍| 国产亚洲欧美精品永久| 色婷婷久久久亚洲欧美| 欧美精品高潮呻吟av久久| 色94色欧美一区二区| 一区在线观看完整版| 青春草亚洲视频在线观看| a 毛片基地| 老熟女久久久| 叶爱在线成人免费视频播放| 亚洲精品乱久久久久久| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 精品少妇黑人巨大在线播放| 国产黄频视频在线观看| 两个人看的免费小视频| 国产一级毛片在线| 伦理电影大哥的女人| 婷婷色麻豆天堂久久| 各种免费的搞黄视频| 国产片内射在线| 黄片播放在线免费| 校园人妻丝袜中文字幕| 久久久精品94久久精品| 亚洲av福利一区| 国产精品一区二区在线不卡| 又黄又粗又硬又大视频| 老司机影院成人| 中文字幕人妻丝袜制服| 人体艺术视频欧美日本| 国产男女超爽视频在线观看| 中文字幕人妻丝袜一区二区 | 91国产中文字幕| 免费观看av网站的网址| 夫妻性生交免费视频一级片| 女人久久www免费人成看片| 人体艺术视频欧美日本| 满18在线观看网站| 免费av中文字幕在线| 久久久久精品性色| 亚洲欧美成人精品一区二区| 麻豆av在线久日| 国产成人啪精品午夜网站| 亚洲一区中文字幕在线| 国产精品久久久人人做人人爽| 永久免费av网站大全| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 国产精品嫩草影院av在线观看| 丝袜喷水一区| 美女大奶头黄色视频| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 亚洲人成网站在线观看播放| 一区二区三区精品91| 久久久久人妻精品一区果冻| 亚洲成人一二三区av| 高清视频免费观看一区二区| 欧美日韩视频精品一区| 亚洲精品乱久久久久久| 国产熟女欧美一区二区| 性色av一级| 一本久久精品| 天堂中文最新版在线下载| 色94色欧美一区二区| 成年人免费黄色播放视频| 免费不卡黄色视频| 日韩 亚洲 欧美在线| 国产黄频视频在线观看| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 亚洲欧洲国产日韩| 性少妇av在线| 少妇的丰满在线观看| 久久久久人妻精品一区果冻| 黄片播放在线免费| av在线播放精品| 久久97久久精品| 中文字幕精品免费在线观看视频| av不卡在线播放| 久久久久国产精品人妻一区二区| 欧美日韩亚洲高清精品| 青春草视频在线免费观看| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 99re6热这里在线精品视频| 老汉色av国产亚洲站长工具| 99re6热这里在线精品视频| 中文字幕人妻丝袜一区二区 | 一级毛片电影观看| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 免费观看av网站的网址| 欧美精品av麻豆av| 国产成人欧美| 欧美激情高清一区二区三区 | 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 777米奇影视久久| 亚洲国产精品成人久久小说| 熟女av电影| 久久精品亚洲av国产电影网| 好男人视频免费观看在线| 新久久久久国产一级毛片| 制服丝袜香蕉在线| 伦理电影免费视频| 亚洲av综合色区一区| 国产成人精品福利久久| 午夜激情久久久久久久| 国产精品久久久久久精品古装| 捣出白浆h1v1| 国产精品成人在线| 日韩一本色道免费dvd| 免费黄网站久久成人精品| 午夜福利视频在线观看免费| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 国产男女超爽视频在线观看| 久久99精品国语久久久| 少妇人妻久久综合中文| www.熟女人妻精品国产| 天美传媒精品一区二区| 2021少妇久久久久久久久久久| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 人人妻,人人澡人人爽秒播 | 欧美中文综合在线视频| 十分钟在线观看高清视频www| 午夜免费鲁丝| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 伊人久久大香线蕉亚洲五| av网站在线播放免费| 欧美国产精品一级二级三级| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 波野结衣二区三区在线| 午夜福利网站1000一区二区三区| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 丰满乱子伦码专区| av卡一久久| 韩国高清视频一区二区三区| 久久久国产欧美日韩av| 不卡视频在线观看欧美| 18在线观看网站| 久久久国产一区二区| 嫩草影院入口| 欧美日韩av久久| 国产一级毛片在线| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 亚洲欧美成人精品一区二区| 在线看a的网站| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 国产乱来视频区| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 女人精品久久久久毛片| 激情视频va一区二区三区| 亚洲中文av在线| 亚洲国产欧美在线一区| 国产亚洲av高清不卡| 国产在线免费精品| 国产视频首页在线观看| 韩国精品一区二区三区| 色精品久久人妻99蜜桃| 丰满少妇做爰视频| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 国产片内射在线| 国产精品久久久久久久久免| 欧美精品一区二区大全| 中文字幕高清在线视频| 男女无遮挡免费网站观看| 国产精品成人在线| 在线 av 中文字幕| 国产精品.久久久| 久久99热这里只频精品6学生| 最近的中文字幕免费完整| 国产熟女午夜一区二区三区| 七月丁香在线播放| 好男人视频免费观看在线| 国产精品久久久久久精品古装| 国产一区有黄有色的免费视频| 国产成人精品福利久久| 亚洲激情五月婷婷啪啪| xxx大片免费视频| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 自线自在国产av| 日本欧美视频一区| 丝袜美腿诱惑在线| 免费人妻精品一区二区三区视频| 国产成人免费观看mmmm| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 免费日韩欧美在线观看| 人人妻,人人澡人人爽秒播 | 男女午夜视频在线观看| 国产一区二区激情短视频 | 制服丝袜香蕉在线| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 精品人妻一区二区三区麻豆| 免费人妻精品一区二区三区视频| 色婷婷久久久亚洲欧美| 欧美最新免费一区二区三区| 天堂8中文在线网| 亚洲少妇的诱惑av| 免费高清在线观看视频在线观看| 午夜91福利影院| 国产不卡av网站在线观看| 亚洲国产av影院在线观看| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 国产精品.久久久| 男女边吃奶边做爰视频| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 婷婷色综合大香蕉| 国产乱来视频区| 欧美激情高清一区二区三区 | 色网站视频免费| 久久影院123| 久久久国产欧美日韩av| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 热99国产精品久久久久久7| 中文字幕人妻丝袜一区二区 | 男女床上黄色一级片免费看| 国产成人啪精品午夜网站| 亚洲美女搞黄在线观看| 国产精品无大码| 色婷婷久久久亚洲欧美| 99国产综合亚洲精品| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 国产乱人偷精品视频| 最新的欧美精品一区二区| 久久精品国产综合久久久| 男女无遮挡免费网站观看| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 制服丝袜香蕉在线| 日韩欧美精品免费久久| 亚洲精品一二三| 最新在线观看一区二区三区 | 人人妻,人人澡人人爽秒播 | 啦啦啦在线观看免费高清www| 黄色 视频免费看| 亚洲精品aⅴ在线观看| 毛片一级片免费看久久久久| 国产在线视频一区二区| 青春草亚洲视频在线观看| 国产成人系列免费观看| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 日韩制服丝袜自拍偷拍| 香蕉国产在线看| www日本在线高清视频| 99国产精品免费福利视频| 美女扒开内裤让男人捅视频| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 波多野结衣一区麻豆| 丝袜脚勾引网站| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| www.熟女人妻精品国产| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| bbb黄色大片| 国产精品国产三级国产专区5o| 男女之事视频高清在线观看 | 黑人猛操日本美女一级片| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 日韩av免费高清视频| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 丝袜在线中文字幕| 成人亚洲精品一区在线观看| 亚洲国产av新网站| 一本久久精品| 捣出白浆h1v1| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 久久毛片免费看一区二区三区| 爱豆传媒免费全集在线观看| 91成人精品电影| 欧美日韩福利视频一区二区| 97人妻天天添夜夜摸| 免费在线观看完整版高清| 欧美日韩福利视频一区二区| 亚洲欧美一区二区三区久久| 国产色婷婷99| 亚洲av国产av综合av卡| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 亚洲成色77777| 两个人看的免费小视频| a级片在线免费高清观看视频| 大码成人一级视频| 欧美av亚洲av综合av国产av | 午夜福利视频在线观看免费| 免费在线观看黄色视频的| 天堂俺去俺来也www色官网| 高清黄色对白视频在线免费看| 毛片一级片免费看久久久久| 国产不卡av网站在线观看| 色吧在线观看| 晚上一个人看的免费电影| 视频在线观看一区二区三区| a级毛片黄视频| 亚洲人成77777在线视频| 天堂8中文在线网| 男女无遮挡免费网站观看| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 免费看不卡的av| 这个男人来自地球电影免费观看 | 中文字幕亚洲精品专区| 99精国产麻豆久久婷婷| av一本久久久久| 成年av动漫网址| 精品酒店卫生间| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 久久 成人 亚洲| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 亚洲av中文av极速乱| 搡老乐熟女国产| 嫩草影视91久久| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 欧美中文综合在线视频| 亚洲精品成人av观看孕妇| 深夜精品福利| 桃花免费在线播放| 国产精品一区二区精品视频观看| 不卡视频在线观看欧美| 日本vs欧美在线观看视频| 又黄又粗又硬又大视频| 1024香蕉在线观看| 69精品国产乱码久久久| 久久97久久精品| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 美女大奶头黄色视频| 黑人欧美特级aaaaaa片| 九九爱精品视频在线观看| 国产成人精品久久久久久| 美女扒开内裤让男人捅视频| 日韩中文字幕欧美一区二区 | h视频一区二区三区| 久久av网站| av免费观看日本| av卡一久久| 国产xxxxx性猛交| 久久久亚洲精品成人影院| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 永久免费av网站大全| 观看美女的网站| 亚洲专区中文字幕在线 | 亚洲欧洲国产日韩| 久久久精品94久久精品| 婷婷色综合www| 人妻一区二区av| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 毛片一级片免费看久久久久| 涩涩av久久男人的天堂| 叶爱在线成人免费视频播放| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| av女优亚洲男人天堂| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 美女扒开内裤让男人捅视频| 熟妇人妻不卡中文字幕| 尾随美女入室| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产成人精品在线电影| 国产精品一区二区在线不卡| 男人舔女人的私密视频| 交换朋友夫妻互换小说| 久久精品国产亚洲av涩爱| 欧美精品一区二区免费开放| 黄片播放在线免费| 丝袜在线中文字幕| 国产精品二区激情视频| 丝袜喷水一区| 国产成人精品久久久久久| 一边亲一边摸免费视频| 热99国产精品久久久久久7| 日韩免费高清中文字幕av| 久久精品亚洲av国产电影网| 最近手机中文字幕大全| 国产一区二区三区综合在线观看| 爱豆传媒免费全集在线观看| 性色av一级| 叶爱在线成人免费视频播放| 欧美国产精品一级二级三级| 亚洲美女搞黄在线观看| 亚洲美女黄色视频免费看| 亚洲一区中文字幕在线| 五月开心婷婷网| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 一级a爱视频在线免费观看| 亚洲成色77777| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 亚洲专区中文字幕在线 | 99久久人妻综合| 日韩制服骚丝袜av| 少妇精品久久久久久久| 国产精品免费大片| 午夜免费男女啪啪视频观看| 观看美女的网站| 在线天堂中文资源库| 亚洲,一卡二卡三卡| 国产精品.久久久| 好男人视频免费观看在线| 国产av码专区亚洲av| 日本欧美国产在线视频| 1024视频免费在线观看| 激情视频va一区二区三区| 一区在线观看完整版| 国产爽快片一区二区三区| 亚洲伊人久久精品综合| 国产色婷婷99| 国产精品一区二区在线不卡| 在线天堂中文资源库| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 黑丝袜美女国产一区| 高清欧美精品videossex| 国产成人精品无人区| 欧美少妇被猛烈插入视频| 免费少妇av软件| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 久久毛片免费看一区二区三区| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 九草在线视频观看| 毛片一级片免费看久久久久| 黄色视频不卡| 精品一区二区三区av网在线观看 | 国产色婷婷99| 日日撸夜夜添| 欧美成人精品欧美一级黄| 亚洲精品自拍成人| 日韩免费高清中文字幕av| 国产在线免费精品| 两个人看的免费小视频| 人妻 亚洲 视频| 黑人猛操日本美女一级片| 爱豆传媒免费全集在线观看| 亚洲国产精品国产精品| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 国产在线一区二区三区精| 两性夫妻黄色片| 97精品久久久久久久久久精品| 天堂中文最新版在线下载| 热re99久久国产66热| 久久av网站| 亚洲综合色网址| 国产深夜福利视频在线观看| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 热99国产精品久久久久久7| 久久国产精品大桥未久av| 久久精品久久精品一区二区三区| av视频免费观看在线观看| 亚洲综合色网址| 国产又爽黄色视频| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 一级毛片我不卡| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 久久亚洲国产成人精品v| 色综合欧美亚洲国产小说| 波多野结衣av一区二区av| 一区二区三区精品91| 少妇人妻精品综合一区二区| 国产熟女欧美一区二区| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 欧美人与善性xxx| 男女边吃奶边做爰视频| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 少妇人妻 视频| 韩国高清视频一区二区三区| 亚洲国产欧美一区二区综合| 国产精品熟女久久久久浪| 亚洲一区二区三区欧美精品| 国产精品蜜桃在线观看| 亚洲免费av在线视频| 久热这里只有精品99| 天堂8中文在线网| 免费高清在线观看日韩| 亚洲欧美一区二区三区国产| av福利片在线| 精品国产一区二区三区四区第35| 成人漫画全彩无遮挡| 女性生殖器流出的白浆| 亚洲国产精品成人久久小说| 一区在线观看完整版| 久久久国产欧美日韩av| 制服人妻中文乱码| 国产免费现黄频在线看| 下体分泌物呈黄色| av免费观看日本| tube8黄色片| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 亚洲av日韩精品久久久久久密 | 少妇 在线观看| 欧美日韩一级在线毛片| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 国产一区二区 视频在线| 国产免费现黄频在线看| 国产精品一区二区精品视频观看| 少妇被粗大猛烈的视频| 搡老岳熟女国产| 国产一区二区 视频在线| 国产男女超爽视频在线观看| 97精品久久久久久久久久精品| 精品国产乱码久久久久久小说| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 天堂8中文在线网| 香蕉丝袜av| 国产精品国产三级国产专区5o| 日韩制服骚丝袜av| 老熟女久久久| 又大又爽又粗| 99热国产这里只有精品6| 婷婷色av中文字幕| 在线观看免费日韩欧美大片| 婷婷成人精品国产| 婷婷色麻豆天堂久久| 99久国产av精品国产电影| 国产一区二区激情短视频 | 国产探花极品一区二区| 丰满乱子伦码专区| 秋霞伦理黄片| 在线观看三级黄色| 国产成人系列免费观看| 日韩大片免费观看网站| 国产一区有黄有色的免费视频| 精品久久蜜臀av无| 天天影视国产精品| 色综合欧美亚洲国产小说| avwww免费| 天美传媒精品一区二区| 午夜福利免费观看在线| 亚洲欧美一区二区三区久久| 精品国产露脸久久av麻豆| 美国免费a级毛片| 国产成人精品福利久久| 久久国产亚洲av麻豆专区| 国产高清不卡午夜福利| 色播在线永久视频| 黄色一级大片看看| 国产1区2区3区精品| 免费高清在线观看日韩| 嫩草影院入口| 国产高清不卡午夜福利| 九色亚洲精品在线播放| 两性夫妻黄色片| 欧美 日韩 精品 国产| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 伊人久久国产一区二区| 亚洲av男天堂| 欧美av亚洲av综合av国产av | 大香蕉久久网| 午夜激情av网站| 午夜老司机福利片| 1024香蕉在线观看| 一本大道久久a久久精品| 制服诱惑二区| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 亚洲伊人色综图| 国产精品一区二区在线不卡| 精品国产乱码久久久久久男人| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 精品久久蜜臀av无| www.av在线官网国产| 欧美少妇被猛烈插入视频| 成人亚洲欧美一区二区av| 国产亚洲一区二区精品| xxx大片免费视频| 啦啦啦 在线观看视频| av女优亚洲男人天堂| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 久久天堂一区二区三区四区| 一本大道久久a久久精品| 免费观看a级毛片全部| 国产淫语在线视频| 午夜日韩欧美国产| 亚洲av中文av极速乱| 午夜福利视频在线观看免费| 日本爱情动作片www.在线观看| 满18在线观看网站| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 青春草亚洲视频在线观看| 天堂中文最新版在线下载| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 成人国产av品久久久| 国产黄色免费在线视频| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 国产一区二区三区av在线| 亚洲精品国产区一区二| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 午夜久久久在线观看| 欧美黑人欧美精品刺激| 美国免费a级毛片| 亚洲精品aⅴ在线观看| 久久人人爽人人片av| 麻豆av在线久日| 丝袜在线中文字幕| 国产成人91sexporn| 无遮挡黄片免费观看| 国产精品 欧美亚洲| 亚洲精品美女久久av网站| 国产精品久久久久成人av| a级毛片在线看网站| 久久久精品区二区三区| 国产极品粉嫩免费观看在线| tube8黄色片| 久久ye,这里只有精品| 在线天堂中文资源库| av国产久精品久网站免费入址| 满18在线观看网站| 在线观看www视频免费| 欧美日韩福利视频一区二区|