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    青藤堿對(duì)偏頭痛模型大鼠中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)區(qū)NF-κB和COX-2表達(dá)的影響

    2015-10-18 05:58:58易桂標(biāo)郝仁方張中菊
    中成藥 2015年3期
    關(guān)鍵詞:導(dǎo)水管撓頭中腦

    易桂標(biāo), 楊 麗, 郝仁方, 張中菊

    (1.遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科,貴州 遵義 563003;2.遵義醫(yī)學(xué)院研究生院,貴州 遵義 563003;3.遵義市第一人民醫(yī)院,貴州 遵義 563002)

    青藤堿對(duì)偏頭痛模型大鼠中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)區(qū)NF-κB和COX-2表達(dá)的影響

    易桂標(biāo)1,2, 楊 麗1*, 郝仁方1, 張中菊3

    (1.遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科,貴州遵義563003;2.遵義醫(yī)學(xué)院研究生院,貴州遵義563003;3.遵義市第一人民醫(yī)院,貴州遵義563002)

    目的 研究青藤堿對(duì)偏頭痛大鼠中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)區(qū)(PAG)核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)和環(huán)氧化酶-2(COX-2)表達(dá)的影響,探討青藤堿治療偏頭痛的可能機(jī)制。方法 60只健康SD大鼠隨機(jī)分成對(duì)照組、模型組、尼美舒利組、青藤堿低、中、高劑量組,復(fù)制硝酸甘油型偏頭痛大鼠。尼美舒利為陽(yáng)性對(duì)照組,在制模、藥物干預(yù)后,免疫組化檢測(cè)大鼠PAG區(qū)NF-κB和COX-2陽(yáng)性表達(dá)。結(jié)果 ①與對(duì)照組比較,模型組PAG區(qū)NF-κB、COX-2表達(dá)明顯增多,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);②與模型組比較,尼美舒利組和青藤堿高劑量組PAG區(qū)NF-κB、COX-2表達(dá)明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);③與尼美舒利組比較,青藤堿高劑量組PAG區(qū)NF-κB、COX-2表達(dá)無(wú)明顯差異(P>0.05)。結(jié)論 NF-κB、COX-2參與了偏頭痛發(fā)病過(guò)程;青藤堿能較好地緩解硝酸甘油型偏頭痛大鼠行為學(xué)變化,推測(cè)其作用機(jī)制可能是通過(guò)抑制PAG區(qū)NF-κB和COX-2的表達(dá)。

    青藤堿;偏頭痛;中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì);核轉(zhuǎn)錄因子-κB;環(huán)氧化酶-2

    中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)(PAG)是參與中樞內(nèi)源性鎮(zhèn)痛調(diào)控的重要結(jié)構(gòu),內(nèi)含有多種與偏頭痛發(fā)作密切相關(guān)的炎性因子、神經(jīng)肽類、神經(jīng)遞質(zhì)以及雌激素及其相關(guān)受體[1-2]。青藤堿(正清風(fēng)痛寧主要成分)是目前臨床上用于治療風(fēng)濕類疾病的中成藥,鎮(zhèn)痛、抗炎療效顯著。將青藤堿注入家兔腹腔、靜脈所能產(chǎn)生鎮(zhèn)痛效應(yīng)的劑量是側(cè)腦室的12 000倍、13 000倍,表明其作用部位主要位于中樞[3]。青藤堿的鎮(zhèn)痛、抗炎效應(yīng)是否也可作用于PAG區(qū),用于治療偏頭痛未見文獻(xiàn)報(bào)道,故取其鎮(zhèn)痛抗炎的療效,觀察其對(duì)偏頭痛模型大鼠行為癥狀的改變和鎮(zhèn)痛效果,來(lái)探討作用于偏頭痛的可能機(jī)制與途徑,為臨床使用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

    1 材料和方法

    1.1材料

    1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 清潔級(jí)SD大鼠(雌雄等數(shù))60只,體質(zhì)量(270±30)g,從第三軍醫(yī)大學(xué)附屬大坪醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心購(gòu)得,許可證號(hào)為SCXK(渝)20070005。

    1.1.2藥物和主要試劑 青藤堿(正清風(fēng)痛寧主要成分)由湖南正清制藥提供;硝酸甘油注射液從河南潤(rùn)弘制藥購(gòu)得;尼美舒利從海南新中正制藥有限公司購(gòu)得;NF-κB p65檢測(cè)試劑盒從北京中衫金橋試劑公司購(gòu)得;COX-2檢測(cè)試劑盒從武漢博士德試劑公司購(gòu)得。

    1.2方法

    1.2.1實(shí)驗(yàn)大鼠分組及制模與干預(yù) SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、尼美舒利組、青藤堿低、中、高劑量組,每組10只,分籠飼養(yǎng)。除對(duì)照組不作特殊處理外,余各組均皮下注射硝酸甘油注射劑2 mL(10 mg/kg)制備偏頭痛大鼠模型,隔天注射1次,共5次。在第2次造模后,尼美舒利按每日每次6 mg/kg灌服尼美舒利組,青藤堿按每日每次50 mg、100 mg、200 mg/kg灌服青藤堿低、中、高劑量組,每天灌服1次,連續(xù)7 d。

    1.2.2硝酸甘油型偏頭痛大鼠模型制備及行為學(xué)評(píng)價(jià) 造模:遵從Tassorelli將硝酸甘油注射液以10 mg/kg在大鼠頸部皮下注射制模,約4 min左右大鼠出現(xiàn)兩耳充血發(fā)紅,前肢不停撓頭,爬籠明顯,煩躁不安等被視作造模成功[4]。

    評(píng)估:①耳紅即記錄大鼠制模后耳紅開始及消失時(shí)間。②撓頭即記錄大鼠制模后撓頭開始及消失時(shí)間。撓頭開始時(shí)間,以連續(xù)撓頭達(dá)5次以上為準(zhǔn),消失時(shí)間,則以一個(gè)時(shí)間段中大鼠撓頭次數(shù)少于5次并出現(xiàn)倦怠、疲乏為準(zhǔn)。③撓頭次數(shù)即從制模后開始,每30 min為一個(gè)時(shí)間段,持續(xù)分段記錄撓頭次數(shù)[5]。

    1.2.3切片制備及免疫組織化學(xué) 大鼠最后一次造模、灌服藥后3 h,10%水合氯醛(0.4 mL/100 g)腹腔內(nèi)注射麻醉后,仰臥固定,剪開胸、腹腔,從心尖部緩慢置入穿刺針達(dá)主動(dòng)脈并固定,剪破右心房。先快速灌注無(wú)菌生理鹽水100~200 mL,隨后灌注4℃4%多聚甲醛液100~200 mL,至大鼠肢體強(qiáng)直變硬、尾巴豎立后,終止灌注。斷頭后,依據(jù)諸葛啟釧主譯的《大鼠腦立體定位圖譜》剝離中腦PAG區(qū)域的位置組織,于4%多聚甲醛液浸泡固定24 h,常規(guī)脫水、石蠟包埋。于石蠟切片機(jī)對(duì)其行連續(xù)冠狀面切片,切片厚度25μm,貼于多聚賴氨酸處理過(guò)的載玻片,烤片機(jī)中58℃2 h烤干備用。石蠟切片,取1張貼于普通載玻片行常規(guī)HE染色,顯微鏡下觀察確定組織結(jié)構(gòu)未被破壞,行切片免疫組化染色。采用SABC法。操作步驟嚴(yán)格按說(shuō)明書進(jìn)行。

    1.2.4陽(yáng)性細(xì)胞記數(shù) 在光學(xué)顯微鏡下:NF-κB陽(yáng)性細(xì)胞為卵形或梭形,細(xì)胞漿呈棕褐色。COX-2陽(yáng)性細(xì)胞,染色較淡,主要為細(xì)胞核染色,隨著染色程度的不同呈現(xiàn)棕灰色或棕色。每張切片40倍鏡下取左上、下,右上、下和中央5個(gè)鏡野,計(jì)數(shù)每個(gè)鏡野陽(yáng)性細(xì)胞總數(shù),取均值。

    2 結(jié)果

    2.1大鼠行為癥狀學(xué)變化 硝酸甘油造模約30 min后,大鼠除對(duì)照組外,其余各組均出現(xiàn)兩耳發(fā)赤,前肢不停搔頭,爬籠、活動(dòng)明顯,煩躁不安等現(xiàn)象,此過(guò)程延續(xù)約3 h,繼而出現(xiàn)倦怠、蜷臥,活動(dòng)減少。在藥物干預(yù)后,藥物干預(yù)組與模型組耳紅及撓頭開始時(shí)間比較,無(wú)明顯差異;青藤堿高劑量及尼美舒利干預(yù)組耳紅及撓頭消失的時(shí)間較模型組大鼠明顯縮短;藥物干預(yù)組大鼠各時(shí)間段撓頭次數(shù)與模型組比較差異明顯,具體結(jié)果見表1~2。

    表1 各組大鼠耳紅、撓頭時(shí)間比較(±s,m in)

    表1 各組大鼠耳紅、撓頭時(shí)間比較(±s,m in)

    注:與模型組比較,*P<0.05

    組別動(dòng)物數(shù)耳紅開始時(shí)間耳紅結(jié)束時(shí)間撓頭開始時(shí)間撓頭結(jié)束時(shí)間模型組10 3.47±0.36 179.58±3.64 4.33±0.53 182.12±13.11尼美舒利組10 3.52±0.53 162.36±7.39*4.17±0.75 163.28±8.10*青藤堿低劑量組10 3.54±0.50 178.49±6.06 4.37±0.68 177.34±8.27青藤堿中劑量組10 3.50±0.92 177.08±3.99 4.47±0.52 176.16±2.43青藤堿高劑量組10 3.63±0.91 162.94±11.34*4.22±0.85 158.60±7.79*

    表2 大鼠不同時(shí)間段撓頭次數(shù)的比較(±s,次數(shù)/30m in)

    表2 大鼠不同時(shí)間段撓頭次數(shù)的比較(±s,次數(shù)/30m in)

    注:與對(duì)照組比較,*P<0.05;與模型組比較,#P<0.05

    0~30 min 31~60 min 61~90 min 91~120 min 121~150 min 151~180 min對(duì)照組組別動(dòng)物數(shù)10 1.70±1.06 1.10±0.99 1.20±1.03 1.00±0.94 1.00±0.94 0.90±0.57模型組10 35.70±4.79*43.10±5.70*42.90±4.31*31.80±6.07*25.20±4.96*3.70±1.89*尼美舒利組10 24.00±5.98*#26.80±3.79*#27.00±3.37*#26.70±6.78*#14.90±2.99*#1.40±0.84*#正清風(fēng)痛寧低劑量組10 32.90±5.17*33.90±2.92*#34.10±2.33*#29.40±4.22*24.65±5.37*2.90±1.73*正清風(fēng)痛寧中劑量組10 30.00±2.94*#33.30±3.92*#32.90±3.57*#21.10±3.21*#16.3±4.03*#2.70±0.95*正清風(fēng)痛寧高劑量組10 26.37±5.09*#29.90±4.01*#31.30±3.65*#19.5±4.14*#15.50±1.58*#1.70±1.06*#

    2.2免疫組化檢測(cè) 結(jié)果見表3及圖1。

    表3 各組大鼠中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)區(qū)NF-κB與COX-2陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)結(jié)果

    圖1顯示了各組大鼠中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)區(qū)NF-κB與COX-2陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)結(jié)果:模型組PAG區(qū)NF-κB、COX-2表達(dá)與對(duì)照組比較,明顯增多;尼美舒利組和青藤堿高劑量組(PAG)區(qū)NF-κB、COX-2表達(dá)與模型組比較,明顯減少;青藤堿高劑量組PAG區(qū)NF-κB、COX-2表達(dá)與尼美舒利組比較,無(wú)明顯差異。

    3 討論

    NF-κB是許多靶因的多效性轉(zhuǎn)錄因子,廣泛存在于細(xì)胞胞漿中,習(xí)慣上NF-κB主要為p50/p65異源二聚體,參與不少同炎癥、免疫功能相關(guān)基因的調(diào)控。運(yùn)用電刺激上矢狀竇區(qū)硬腦膜復(fù)制的偏頭痛大鼠,在其PAG內(nèi)NF-κB蛋白表達(dá)明顯增強(qiáng)[2,6]。預(yù)防性予以含NF-κB抑制劑的龍牙草,已被證明,可使偏頭痛爆發(fā)頻率減少、減緩其癥狀[7]。COX-2被稱為“炎癥反應(yīng)基因”,并且是偏頭痛發(fā)作時(shí)的重要炎性介質(zhì)前列腺素(PG),尤其是前列腺素-E2(PGE2)合成的關(guān)鍵酶。研究還發(fā)現(xiàn),環(huán)氧化酶(COX)抑制劑能緩解偏頭痛發(fā)作,現(xiàn)已被試用于偏頭痛的臨床治療[8]。COX-2的表達(dá)受NF-κB調(diào)控,NF-κB、COX-2是否與偏頭痛聯(lián)系密切,值得進(jìn)一步研究。

    硝酸甘油偏頭痛大鼠模型能較好地模擬人類偏頭痛發(fā)病時(shí)的表現(xiàn),其行為癥狀變化是能用于客觀且能量化評(píng)價(jià)偏頭痛治療藥物療效的合理指標(biāo)[5],其造模的主要原理之一是硝酸甘油在機(jī)體內(nèi)通過(guò)一系列生理、生化反應(yīng),從而介導(dǎo)神經(jīng)源性炎癥引發(fā)偏頭痛,所以還適于進(jìn)行神經(jīng)源性炎癥機(jī)制研究。無(wú)先兆偏頭痛是偏頭痛中最主要的類型,參照國(guó)際頭痛協(xié)會(huì)(2004年)制訂的無(wú)先兆偏頭痛診斷標(biāo)準(zhǔn),其中之一是至少發(fā)作5次,故本實(shí)驗(yàn)共造模5次。

    圖1 各組大鼠中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)區(qū)NF-κB與COX-2表達(dá)

    中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)(PAG)內(nèi)炎性因子(如核轉(zhuǎn)錄因子-κB、環(huán)氧化酶-2、白介素-1等)、神經(jīng)肽類,神經(jīng)遞質(zhì)(如5-羥色胺、一氧化氮等)、雌激素等及其相關(guān)受體的含量變化及其功能異常,??墒筆AG的結(jié)構(gòu)與功能發(fā)生紊亂,進(jìn)而影響了其對(duì)偏頭痛中樞疼痛的調(diào)控,在一定程度上可能促進(jìn)了偏頭痛的發(fā)作。

    神經(jīng)源性炎癥機(jī)制是目前闡述偏頭痛病理機(jī)制學(xué)說(shuō)的主流。該學(xué)說(shuō)認(rèn)為NF-κB的激活是神經(jīng)源性炎癥反應(yīng)中的主要內(nèi)容之一。靜息狀況時(shí),NF-κB通常以非活化狀態(tài)存于胞漿中,遇到傷害性刺激后,NF-κB迅速轉(zhuǎn)位入胞核并結(jié)合特異性κB序列,進(jìn)而被激活,誘導(dǎo)調(diào)控炎癥反應(yīng)相關(guān)基因(如COX-2、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、iNOS等)產(chǎn)生與轉(zhuǎn)錄,繼而造成腦血管周圍組織的炎癥反應(yīng),從而引發(fā)偏頭痛發(fā)作。

    本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn):硝酸甘油復(fù)制的偏頭痛模型大鼠PAG區(qū)NF-κB、COX-2表達(dá)相比于對(duì)照組明顯增多,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示硝酸甘油誘發(fā)了模型組PAG區(qū)的炎癥反應(yīng),促使了NF-κB神經(jīng)元的激活,進(jìn)而誘導(dǎo)了COX-2基因轉(zhuǎn)錄的大量增加,從而啟動(dòng)了神經(jīng)性炎癥反應(yīng),同時(shí)也可導(dǎo)致PAG的功能紊亂,從而失去了對(duì)中樞疼痛的調(diào)控,由此引發(fā)了大鼠偏頭痛樣癥狀發(fā)作,同時(shí)也較好地驗(yàn)證神經(jīng)源性炎癥在偏頭痛中的作用。并同時(shí)觀察到在予以青藤堿、尼美舒利干預(yù)后,大鼠行為學(xué)改變與模型組相比,緩解明顯,且青藤堿高劑量組和尼美舒利組PAG區(qū)NF-κB、COX-2表達(dá)與模型組相比明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示兩者對(duì)NF-κB、COX-2的抑制效應(yīng)相當(dāng),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示正青藤堿與尼美舒利一樣,對(duì)治療偏頭痛有效,其作用機(jī)制可能與抑制PAG區(qū)神經(jīng)細(xì)胞NF-κB、COX-2表達(dá)有關(guān)。

    尼美舒利是環(huán)氧化酶-2抑制劑,故本研究選取尼美舒利為陽(yáng)性對(duì)照組。同時(shí)其抗炎、鎮(zhèn)痛作用顯著,臨床上用尼美舒利治療偏頭痛療效也不錯(cuò)[9-10]。青藤堿(Sin)化學(xué)結(jié)構(gòu)與嗎啡類似,和腦的阿片受體或許有特殊的親和力,并可透過(guò)血腦屏障[11];研究證實(shí)青藤堿在小鼠中腦分布濃度較在大腦和小腦的濃度升高顯著[12];這些都是青藤堿具有中樞鎮(zhèn)痛作用的有力證據(jù)。其抗炎效應(yīng)與皮質(zhì)類激素氟美松相當(dāng)[13],作用機(jī)理可能是干預(yù)了NF-κB激活通路,從而抑制炎癥局部前列腺素的合成或釋放[3]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示這兩者在緩解硝酸甘油誘發(fā)的偏頭痛大鼠的行為癥狀學(xué)方面效果明顯。

    綜上所述,本實(shí)驗(yàn)顯示青藤堿能夠明顯緩解偏頭痛模型大鼠的行為癥狀學(xué)變化,因此推測(cè)可能對(duì)偏頭痛治療有效。前期研究表明:青藤堿可下調(diào)偏頭痛模型大鼠腦干炎性因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)的表達(dá),抑制c-fos、c-jun基因表達(dá)及5-HT能系統(tǒng)的激活[14-16],本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示在偏頭痛模型大鼠PAG區(qū)NF-κB、COX-2表達(dá)增高,用一定劑量的青藤堿干預(yù)偏頭痛大鼠其行為癥狀學(xué)變化有較好的改善作用,其機(jī)制可能是通過(guò)抑制腦干PAG區(qū)神經(jīng)NF-κB、COX-2的表達(dá),下調(diào)炎癥因子(IL-1β、TNF)的釋放[17],從而抑制了神經(jīng)源性炎癥反應(yīng),而達(dá)到緩解行為癥狀學(xué)的作用,以達(dá)到止痛目的。由此推測(cè)青藤堿對(duì)偏頭痛治療有一定的療效,到底有沒有效,還需要大樣本的臨床觀察才能定論。

    [1] 張紅巖,于挺敏.中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)與偏頭痛[J].中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志,2008,25(2):253-254.

    [2] 王蓉飛,于生元.氟桂利嗪對(duì)偏頭痛模型大鼠中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)區(qū)NF-κB蛋白表達(dá)的影響[J].中國(guó)疼痛醫(yī)學(xué)雜志,2011,17(2):107-110.

    [3] 羅 娟.青藤堿的結(jié)構(gòu)修飾及其抗炎活性研究[D].成都:四川大學(xué),2007.

    [4] Tassorelli C,Rreco R,Wang D,et al.Nitroglyerin induces hyperalgesia in rat-a time-coure study[J].Eur J Pharmacol,2003,464(2-3):159-162.

    [5] 付先軍,宋旭霞,周永紅,等.硝酸甘油型實(shí)驗(yàn)性偏頭痛大鼠模型行為癥狀學(xué)評(píng)價(jià)[J].中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志,2005,5(4):449-451.

    [6] Anselmi B,Tarquini R,Panconesi A,et al.Serum beta-endorphin increase after intravenous histamine treatment of chronic daily headache[J].Recenti Prog Med,1997,88(7-8):321-324.

    [7] da Silva J A,de Freitas R L,Eichenberger G C,et al. Chemical neuroanatomical and psychopharmacological evidence thatκreceptor-mediated endogenous opioid peptide neurotransmission in the dorsal and ventralmesencephalon modulates panic-like behaviour[J].Eur J Pharmacol,2013,698(1-3):235-245.

    [8] Welch K M,Nagesh V,Aurora S K,et al.Periaqueductal graymatter dysfunction in migraine:cause or the burden of illness?[J].Headache,2001,41(7):629-637.

    [9] 于洪波.尼美舒利分散片聯(lián)合鹽酸氟桂利嗪治療偏頭痛55例療效觀察[J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué),2010,13(2):185-186.

    [10] 金 晶,曾繁典.尼美舒利的新用途[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2011,30(9):1194-1196.

    [11] 葉木榮,劉 良,曾元兒,等.青藤堿在大鼠體內(nèi)分布與臟器毒理的關(guān)系研究[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào),2001,17(1):65-9.

    [12] 張斯?jié)h.青藤堿的藥代動(dòng)力學(xué)研究[D].重慶:重慶醫(yī)科大學(xué),2008.

    [13] 趙明新,張鐵明.正清風(fēng)痛寧止痛效果觀察[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,1999,8(10):1646-1647.

    [14] 楊 麗,羅國(guó)標(biāo),劉曉麗,等.青藤堿對(duì)偏頭痛模型大鼠血漿CGRP、SP含量及腦干5-HT表達(dá)的影響[J].中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志,2013,30(1):60-63.

    [15] 張中菊.青藤堿對(duì)偏頭痛大鼠腦干炎性細(xì)胞因子表達(dá)的影響[D].貴州:遵義醫(yī)學(xué)院,2013.

    [16] 羅國(guó)標(biāo),劉曉麗,楊 麗,等.青藤堿對(duì)偏頭痛模型大鼠腦干c-fos、c-jun表達(dá)的影響[J].中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志,2013,30(6):513-515.

    [17] 王 勇,方勇飛,周 新,等.青藤堿對(duì)佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠腹腔巨噬細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞因子的影響[J].中華風(fēng)濕病學(xué)雜志,2003,7(7):415-419.

    R285.5

    B

    1001-1528(2015)03-0678-04

    10.3969/j.issn.1001-1528.2015.03.051

    2014-01-18

    遵義市科技局基金(201133)

    易桂標(biāo)(1984—),男,碩士生,主要從事神經(jīng)病學(xué)研究。Tel:15200203825,E-mail:451241950@qq.com

    楊 麗(1957—),女,教授,主任醫(yī)師,碩士生導(dǎo)師,主要從事偏頭痛及腦血管疾病研究。Tel:(0852)28608747,E-mail:yangli1668@126.com

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