掛金燈藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

張雪峰，徐岳鑫，董賽文，胡生俊

(宿遷市食品藥品檢驗所，江蘇 宿遷 223800)

·基礎(chǔ)研究·

掛金燈藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

張雪峰*，徐岳鑫，董賽文，胡生俊

(宿遷市食品藥品檢驗所，江蘇 宿遷 223800)

目的：建立和完善掛金燈藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法：采用性狀鑒別、顯微鑒別及薄層色譜法對掛金燈藥材進(jìn)行定性鑒別；同時根據(jù)2010年版《中華人民共和國藥典》規(guī)定的方法對其水分、總灰分、酸不溶性灰分及浸出物進(jìn)行測定。結(jié)果：掛金燈藥材顯微特征、 薄層色譜斑點均清晰明顯；5批掛金燈樣品的水分測定結(jié)果為7.9%～10.1%，總灰分為8.8%～14.6%，酸不溶性灰分為0.3%～3.8%，浸出物測定結(jié)果為11.9%～17.4%。結(jié)論：本研究為掛金燈藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的提高提供參考。

掛金燈；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；顯微鑒別；薄層鑒別

掛金燈為茄科植物苦蘵PhysalisangulataL.的干燥成熟帶宿萼的果實，主產(chǎn)于江蘇，生于山坡、田野、路邊等地[1]。具有清熱解毒，利咽、化痰、利尿的功效。用于咽痛音啞，痰熱咳嗽，小便不利；外治天皰瘡，濕疹[2]。民間常用掛金燈鮮品搗汁搽患處，治毒蛇咬傷，皮膚起皰[2]。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明掛金燈水煎劑對小鼠具有明顯的鎮(zhèn)痛作用，但其鎮(zhèn)痛作用能被納洛酮所翻轉(zhuǎn)[3]。掛金燈藥材為《江蘇省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》1989版收載品種，是江蘇省習(xí)慣用藥。但原有的標(biāo)準(zhǔn)檢驗項目較少，不能科學(xué)評價和全面控制掛金燈的質(zhì)量，為了完善該標(biāo)準(zhǔn)，提高藥材質(zhì)量，保證中醫(yī)臨床用藥的安全有效，實現(xiàn)對藥材及其成方制劑質(zhì)量的有效監(jiān)控，本實驗對5批不同產(chǎn)地掛金燈的藥材性狀、顯微特征、薄層鑒別及各檢查項進(jìn)行了深入研究，完善了掛金燈的質(zhì)量控制方法，為掛金燈藥材標(biāo)準(zhǔn)的提高提供參考。

1 儀器與試藥

奧林巴斯BX51光學(xué)顯微鏡(日本Olympus公司)；CAMAG ATS4全自動點樣儀(瑞士CAMAG公司)；CAMAG SCH-GR-BE型紫外觀察箱(瑞士CAMAG公司)；AL104電子分析天平(瑞士Mettler公司)；SK8200LHC超聲波清洗器(上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司)；HH-6恒溫水浴鍋(金壇市宏華儀器廠)；101-A電熱恒溫干燥箱(杭州藍(lán)天化驗儀器廠)；SGM28型智能箱式電阻爐(洛陽市西格馬儀器制造有限公司)。

硅膠G預(yù)制板(德國Merck公司)；水為超純水，其他試劑均為分析純；掛金燈對照藥材(江蘇省食品藥品監(jiān)督檢驗研究院提供)及5批掛金燈藥材(產(chǎn)地收集)，經(jīng)江蘇省食品藥品監(jiān)督檢驗研究院胡浩彬主任藥師鑒定為茄科植物苦蘵PhysalisangulataL.的干燥成熟帶宿萼的果實。

2 方法與結(jié)果

2.1藥材性狀

宿萼膨大略似燈籠狀，膜質(zhì)，常皺縮或壓扁，長1.5～2.5cm，直徑1.0～1.5cm。表面淡黃綠色，有五條明顯突出的縱棱，棱間有縱脈及網(wǎng)狀的細(xì)脈紋，被細(xì)毛，頂端漸尖而開裂，基部略平截，中心凹陷處著果梗。體輕，質(zhì)柔韌。內(nèi)有果實1枚或中空。果實類球形，多壓扁，直徑5～8mm，果皮皺縮，棕黃色或淡黃綠色；種子多數(shù)。氣微，宿萼味苦，果實味甘、微酸。

2.2顯微特征

粉末黃棕色。宿萼上表皮細(xì)胞垂周壁略平整，下表皮細(xì)胞垂周壁波狀彎曲。氣孔不等式或不定式，副衛(wèi)細(xì)胞3～4個。非腺毛長108～1350μm，由2～6～(10)個細(xì)胞組成，壁具疣狀突起。偶見腺毛，單細(xì)胞柄，腺頭4個細(xì)胞，直徑33μm。種皮石細(xì)胞較多，數(shù)個成群，類方形，排列緊密，壁作“U”字形增厚。胚乳細(xì)胞多角形，含有大量糊粉粒及脂肪油滴。見圖1。

注：A.下表皮細(xì)胞；B.氣孔；C.上表皮細(xì)胞及非腺毛；D.腺毛；E.種皮石細(xì)胞；F.胚乳細(xì)胞。圖1 掛金燈顯微圖

2.3薄層色譜鑒別

2.3.1供試品溶液的制備 取本品粉末2.5g，加二氯甲烷20mL，超聲提取30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加二氯甲烷2mL使溶解，作為供試品溶液。

2.3.2對照藥材溶液制備 取掛金燈對照藥材2.5g，同法制成對照藥材溶液。

2.3.3薄層色譜的展開 照薄層色譜法(《中華人民共和國藥典》2010年版一部附錄ⅥB)試驗，吸取上述兩種溶液各5μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60～90℃)-丙酮(4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干。

2.3.4檢視 將硅膠G板置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。

2.3.5樣品檢識 按上述條件對5批不同產(chǎn)地掛金燈進(jìn)行薄層色譜鑒別，代表性TLC圖譜見圖2。由圖2可見，按上述的薄層色譜條件試驗，分離效果佳，斑點顯色穩(wěn)定、清晰一致。

注：1～5.掛金燈供試品；6.掛金燈對照藥材。圖2 掛金燈薄層色譜圖(19℃，相對濕度：57%)

2.4檢查

2.4.1水分的測定 取各產(chǎn)地掛金燈藥材細(xì)粉約2g(過2號篩)，精密稱定，照《中華人民共和國藥典》2010年版一部附錄ⅨH水分測定法第一法進(jìn)行測定，每批平行測定2份，結(jié)果見表1。

單純CRC組，在男性≤60歲、61～70歲和≥71歲時，IGF-1聯(lián)合CEA對CRC早期患者(A期和B期)篩查靈敏度分別為67.1%、65.7%和60.4%。合并組，在男性≤60歲、61～70歲和≥71歲時，IGF-1聯(lián)合CEA對CRC早期患者(A期和B期)篩查靈敏度分別為71.2%、68.4%和61.3%。篩查靈敏度較CEA單獨檢測提高。

2.4.2總灰分的測定 取各產(chǎn)地掛金燈藥材細(xì)粉約3g(過2號篩)，精密稱定，照《中華人民共和國藥典》2010年版一部附錄ⅨK總灰分測定法測定，每批平行測定2份，結(jié)果見表1。

2.4.3酸不溶性灰分 取總灰分項下所得的灰分，照《中華人民共和國藥典》2010年版一部附錄ⅨK酸不溶性灰分測定法測定，每批平行測定2份，結(jié)果見表1。

2.5浸出物的測定

取各產(chǎn)地掛金燈藥材細(xì)粉約2g(過2號篩)，精密稱定，以75%乙醇為溶劑，照《中華人民共和國藥典》2010年版一部附錄XA醇溶性浸出物測定法項下的熱浸法測定，每批平行測定2份，結(jié)果見表1。

表1 不同批次掛金燈水分、總灰分、酸不溶性灰分和浸出物的測定(n=2) (%)

3 討論

3.1薄層色譜鑒別

實驗研究中，對不同提取溶劑(甲醇、二氯甲烷、三氯甲烷)和不同提取方式(冷浸過夜、超聲處理30min、水浴加熱回流30min)分別進(jìn)行了考察，確立了最佳樣品前處理方法。經(jīng)考察，供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

3.2浸出物的測定

因作者查閱資料發(fā)現(xiàn)，與掛金燈化學(xué)成分相關(guān)的報道較少，僅有文獻(xiàn)[4-7]中簡要提及到果實含酸漿紅色素、檸檬酸、植物甾醇類成分等，種子含脂肪油，油中主要含亞油酸和油酸。其中植物甾醇類化合物具有消炎退熱、抗病毒、類激素功能等作用[8]。因未能建立其有效成分的含量測定方法，故綜合上述化學(xué)成分的特性，建立浸出物檢查項作為控制藥品質(zhì)量的指標(biāo)之一。實驗考察了不同浸出方法(熱浸法、冷浸法)和不同溶劑(水、75%乙醇、95%乙醇)，結(jié)果表明，各種溶劑熱浸法浸出量均高于冷浸法，其中水作溶劑熱浸法浸出量最高，但考慮到掛金燈有效化學(xué)成分的特性，因此，確定以75%乙醇為溶劑，采用熱浸法來測定本品浸出物的含量。

3.3掛金燈的易混淆品種

收集掛金燈樣品的過程中，發(fā)現(xiàn)與江蘇省掛金燈易混淆的商品有兩種[9-10]，分別是來源于茄科酸漿屬酸漿PhysalisalkekengiL.var.franchetii(Mast.)Makino的干燥宿萼或帶果實的宿萼和茄科假酸漿屬假酸漿Nicandraphysaloides(L.)Gaertn.的干燥成熟帶宿萼的果實。前者藥材名為錦燈籠，是2010年版《中華人民共和國藥典》收載品種，也是市場上最為常見的易混淆品種，在藥材市場上很容易購買，而后者和掛金燈在藥材市場上極少有銷售，作者實驗用掛金燈樣品均為自己產(chǎn)地收集所得。

錦燈籠與掛金燈外形相似，宿萼均略呈燈籠狀，但二者大小和顏色不同，錦燈籠宿萼長3.0～4.5cm，寬2.5～4.0cm，表面橙紅色或橙黃色，內(nèi)有棕紅色或橙紅色果實，直徑1.0～1.5cm，與上述2.1項下描述的掛金燈性狀不同。錦燈籠中含有甾醇類化合物及甾醇的阿拉伯糖苷[11]、有機(jī)酸、酸漿苦素和黃酮類化合物[12]等主要有效成分，其中酸漿苦味素L和木犀草苷可分別作為錦燈籠定性和定量控制的兩大指標(biāo)性成分[12]。作者參照《中華人民共和國藥典》2010年版錦燈籠項下的TLC法和HPLC法，分別對掛金燈和錦燈籠進(jìn)行了對比試驗，結(jié)果表明，掛金燈中不含酸漿苦味素L和木犀草苷兩個重要的指標(biāo)性成分。

錦燈籠的功效[9]與前言中描述的掛金燈功效基本類似，二者在功能主治上差別不大。在實際應(yīng)用中，為了防止誤用和混淆，可從上面所講的性狀、化學(xué)成分測定等方面的不同來加以區(qū)分鑒別。

[1] 謝宗萬.全國中草藥匯編[M].第二版.北京：人民衛(wèi)生出版社，1996：215-216.

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[12] 程雪梅，張初航，侴桂新，等.錦燈籠藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中國中藥雜志，2010，35(16)：2103-2105.

StudyonQualityStandardofPhysalisangulataeFructus

ZHANGXuefeng*，XUYuexin，DONGSaiwen，HUShengjun

(SuqianInstituteforFoodandDrugControl，Suqian223800，China)

Objective：To establish and revise the quality standard of Physalis Angulatae Fructus.Methods：Physalis Angulatae Fructus was identified by macroscopic，microscopic and TLC methods. And referring to Chinese Pharmacopoeia of 2010 edition，water content，total ash，acid-insoluble ash and extract were also determined.Results：The microscopic characteristics and the spots of TLC were clear and evident. The water content，total ash，acid-insoluble ash and extract of 5 Physalis Angulatae Fructus samples varied in the ranges of 7.9%-10.1%，8.8%-14.6%，0.3%-3.8% and 11.9%-17.4%，respectively.Conclusion：The established quality control method is comprehensive and controllable，which can be used to improve the quality standard of Physalis Angulatae Fructus.

Physalis Angulatae Fructus；quality standard；microscopic identification；TLC

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張雪峰，主管中藥師，研究方向：中藥檢驗和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；Tel：(0527)84355869，E-mail：116954485@qq.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2015.12.013

2015-01-10)