采用液相色譜聯(lián)用電化學(xué)反應(yīng)裝置對(duì)藥物氧化加速降解過(guò)程在線監(jiān)測(cè)

楊德輝等

摘 要 采用液相色譜在線聯(lián)用電化學(xué)反應(yīng)裝置（ECI）對(duì)藥物氧化加速降解試驗(yàn)進(jìn)行改進(jìn)。以叔丁基對(duì)苯二酚為模型藥物，對(duì)高壓六通切換閥的切換時(shí)間、庫(kù)侖電化學(xué)檢測(cè)器的操作電壓、輸液泵流速進(jìn)行篩選，并通過(guò)HPLCUV檢測(cè)原型和氧化產(chǎn)物的含量變化，確定最優(yōu)的氧化破壞實(shí)驗(yàn)條件，最后采用高效液相色譜二級(jí)陣列管檢測(cè)法對(duì)氧化產(chǎn)物進(jìn)行初步鑒定。結(jié)果表明，采用ECI系統(tǒng)進(jìn)行藥物氧化降解試驗(yàn)的最優(yōu)條件為：六通閥切換時(shí)間為30 s，庫(kù)侖檢測(cè)器氧化電壓為150 mV，輸液泵流速為0.2 mL/min。氧化產(chǎn)物經(jīng)初步鑒定為叔丁基苯醌（TQ）。此裝置及其方法可有效縮短時(shí)間和簡(jiǎn)化步驟，實(shí)現(xiàn)氧化加速降解試驗(yàn)從樣品處理到分離檢測(cè)的自動(dòng)化和在線化。

關(guān)鍵詞 加速降解實(shí)驗(yàn)； 液相色譜； 電化學(xué)裝置

1 引 言

庫(kù)侖電化學(xué)檢測(cè)器是一種高靈敏度的高效液相色譜（HPLC）檢測(cè)器，它采用多孔石墨工作電極，使所有的流動(dòng)相與被測(cè)物均與電極相接觸，被測(cè)物的理論轉(zhuǎn)化率一般能達(dá)到100%[1]。因此，庫(kù)侖電化學(xué)檢測(cè)器可作為一種優(yōu)良的電化學(xué)微反應(yīng)器。本研究組以庫(kù)侖電化學(xué)檢測(cè)器為反應(yīng)器，通過(guò)高壓六通閥將其與高效液相色譜紫外檢測(cè)系統(tǒng)（HPLCUV）并聯(lián)，設(shè)計(jì)了液相色譜聯(lián)用電化學(xué)反應(yīng)裝置（如圖1）。該裝置成功實(shí)現(xiàn)了碘鹽中碘酸根的高感度檢測(cè)[2]。

氧化降解是藥物在貯存過(guò)程中最常見(jiàn)，同時(shí)也最為復(fù)雜的降解途徑。作為藥物穩(wěn)定性研究的重要內(nèi)容，氧化降解加速實(shí)既可發(fā)現(xiàn)藥物可能的氧化雜質(zhì)，又能了解樣品在氧化條件下的穩(wěn)定性，為包裝及貯藏條件的選擇等提供信息[3～5]。傳統(tǒng)的氧化降解加速實(shí)驗(yàn)采用一定濃度的H2O2處理樣品，模擬藥品在自然貯存條件下可能產(chǎn)生的氧化雜質(zhì)。H2O2對(duì)有機(jī)物有很強(qiáng)的氧化作用，是一種較清潔、高效的氧化劑。但H2O2的氧化作用存在反應(yīng)程度不易控制，操作繁瑣，氧化產(chǎn)物鑒別難度大等不足，因此需要對(duì)現(xiàn)有的氧化降解加速實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行改進(jìn)。

本研究采用液相色譜聯(lián)用電化學(xué)反應(yīng)裝置進(jìn)行藥物氧化降解加速實(shí)驗(yàn)，通過(guò)調(diào)節(jié)庫(kù)侖檢測(cè)器的工作電壓，控制藥物的氧化或還原的反應(yīng)程度，并通過(guò)高壓六通閥將處理后的樣品導(dǎo)入HPLCUV系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)藥物氧化降解加速實(shí)驗(yàn)從樣品處理到色譜檢測(cè)的全過(guò)程在線完成。

叔丁基對(duì)苯二酚（TBHQ）是一種反相液相色譜易于檢測(cè)的物質(zhì)，紫外吸收信號(hào)強(qiáng)，流動(dòng)相體系的篩選比較簡(jiǎn)單[6～9]，本實(shí)驗(yàn)室前期的工作對(duì)其氧化降解進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，所以較適合作為本研究的模型藥物，對(duì)電化學(xué)氧化還原裝置進(jìn)行驗(yàn)證。本研究采用液相色譜聯(lián)用電化學(xué)反應(yīng)裝置對(duì)TBHQ進(jìn)行加速氧化破壞，系統(tǒng)篩選了反應(yīng)條件，并對(duì)氧化產(chǎn)物進(jìn)行了初步鑒定。

4 結(jié) 論

本研究利用高壓六通切換閥將庫(kù)侖檢測(cè)器、輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)串聯(lián)在HPLCUV系統(tǒng)進(jìn)樣器之前，形成在線電化學(xué)反應(yīng)裝置（ECI），既規(guī)避了色譜柱較大反壓對(duì)反應(yīng)裝置中電極和樣品池的破壞，又實(shí)現(xiàn)了樣品反應(yīng)的自動(dòng)化和在線化。用該裝置進(jìn)行藥物的氧化加速實(shí)驗(yàn)，既縮短了反應(yīng)時(shí)間，簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)步驟，又能通過(guò)聯(lián)用不同的色譜系統(tǒng)，對(duì)氧化產(chǎn)物實(shí)現(xiàn)初步鑒定。本研究利用叔丁基對(duì)苯二酚（TBHQ）作為模型藥物，通過(guò)調(diào)節(jié)庫(kù)侖檢測(cè)器的電壓值來(lái)控制藥物的反應(yīng)程度，然后在線注入HPLC系統(tǒng)進(jìn)行分離檢測(cè)，有助于發(fā)現(xiàn)藥物在貯藏條件潛在的氧化產(chǎn)物。

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