高效液相色譜法測定咳得寧糖漿中鹽酸麻黃堿含量

高 潔 ，曲素欣 ，隋 娟

(1.山東省青島市市南區(qū)社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心，山東 青島 266002;2.山東省青島市婦女兒童醫(yī)院，山東 青島 266034;3.山東大學(xué)齊魯醫(yī)院＜青島＞，山東 青島 266040)

咳得寧糖漿為醫(yī)院制劑，由麻黃、杏仁、遠志、甘草等中藥組方，具有止咳、化痰、平喘功效，用于治療咳嗽、急慢性支氣管炎。方中麻黃為君藥，其含量直接影響該制劑的療效。鹽酸麻黃堿是麻黃中的主要活性成分。為控制該制劑質(zhì)量，筆者采用高效液相色譜法對咳得寧糖漿中鹽酸麻黃堿的含量進行測定，現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

LC－1200型高效液相色譜儀(安捷倫儀器有限公司)。鹽酸麻黃堿對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號為171241－201007);乙腈(美國fisher公司)為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純;咳得寧糖漿(山東大學(xué)齊魯醫(yī)院＜青島＞醫(yī)院自制，批號為 20130923，20130924，20130925)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱:Phenomenex C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流動相:乙腈 － 0.1% 磷酸溶液(10 ∶90);流速:1.0 mL/min;柱溫:30℃;進樣量:10 μL;檢測波長:210 nm。理論板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計算應(yīng)不低于3 000。

2.2 溶液制備

精密量取咳得寧糖漿(批號為20130923)5 mL，加1%磷酸溶液定容至50 mL，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液[1－2]。取鹽酸麻黃堿對照品10mg，精密稱定，加1%磷酸制成每1 mL含50 μg的溶液，即得對照品溶液。取除麻黃的其余藥材，按制備工藝和處方比例制備陰性制劑，按2.2項下方法制備陰性對照品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

陰性干擾試驗:取2.2項下3種溶液，依法進樣測定，結(jié)果見圖1。可見，其他成分對鹽酸麻黃堿的測定無干擾。

圖1 高效液相色譜圖

線性關(guān)系考察:精密吸取鹽酸麻黃堿對照品溶液1，3，5，10，15，20 μL，注入液相色譜儀，按擬訂色譜條件測定峰面積積，以峰面積積分值(Y)為縱坐標(biāo)、進樣量(X)為橫坐標(biāo)進行線性回歸，得回歸方程 Y=139 755 X －1 709，r=1.000 0(n=6)。結(jié)果鹽酸麻黃堿進樣量在0.058 30～0.374 4 mg范圍內(nèi)與峰面積積分值線性關(guān)系良好。

精密度試驗:精密吸取同一對照品溶液10 μL，重復(fù)進樣5次，測定鹽酸麻黃堿峰面積積分值。結(jié)果的 RSD為0.21%(n=5)，表明儀器精密度良好。

重復(fù)性試驗:取同一批(批號為20130923)樣品6份，依法制備供試品溶液，進樣測定鹽酸麻黃堿含量。結(jié)果的 RSD為1.07%(n=6)，表明方法重復(fù)性良好。

穩(wěn)定性試驗:取同一供試品溶液，于12 h內(nèi)每隔2 h進樣1次，依法測定鹽酸麻黃堿的峰面積。結(jié)果的 RSD為0.91%(n=6)，表明供試品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定。

加樣回收試驗:精密量取已知含量的咳得寧糖漿(批號為20130923)適量，精密加入0.005 0 g/L鹽酸麻黃堿對照品溶液，依法進樣測定，計算回收率，結(jié)果見表1。

2.4 樣品含量測定

按擬訂方法對 3批樣品(批號為 20130923，20130924，20130925)進行測定，結(jié)果樣品中鹽酸麻黃堿的含量分別為標(biāo)示量的101%，102%，101%。

表1 鹽酸麻黃堿加樣回收試驗結(jié)果(n=9)

3 討論

取鹽酸麻黃堿對照品適量，加1%磷酸溶解，于200～400 nm波長結(jié)果掃描，結(jié)果鹽酸麻黃堿在210 nm波長處的吸收峰強度大，基線平直，同時參考文獻[3－5]的測定結(jié)果，故選用210 nm波長作為檢測波長。經(jīng)反復(fù)試驗并參考文獻[6－8]，以乙腈－0.1%磷酸(5 ∶95)、乙腈 －0.1%磷酸(15 ∶85)作為流動相進行試驗比較，結(jié)果以乙腈－0.1%磷酸溶液(10∶90)為流動相時，鹽酸麻黃堿與其他組分的分離度能達到要求，空白試驗也無干擾，故以此為流動相。在供試品溶液制備過程中，曾用氯仿[9]提取，經(jīng)試驗，回收率達不到要求，參考文獻[10－11]采用甲醇溶解供試品溶液，峰形達不到要求。

文中建立的方法采用1%磷酸溶解供試品，無需提取，操作簡便易行，峰形好，無干擾，重復(fù)性好，可為咳得寧糖漿的質(zhì)量控制提供可靠方法。

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