某院尿路感染病原菌分布及耐藥性分析

廖國林，李江萍，吳 真，孫 沛，王海紅，婁良文

·藥敏分析·

某院尿路感染病原菌分布及耐藥性分析

廖國林，李江萍*，吳 真，孫 沛，王海紅，婁良文

目的 研究尿路感染病原菌的分布及其耐藥性，為臨床使用抗菌藥物提供依據(jù)。方法 收集2011年1月至2014年6月尿培養(yǎng)陽性菌株，應(yīng)用MicroScan WalkAway40細(xì)菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)對分離菌進(jìn)行鑒定及藥敏測定，根據(jù)CLSI 2014版標(biāo)準(zhǔn)判斷藥敏結(jié)果，用WHONET 5.6軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。結(jié)果 共分離出2 028株病原菌，革蘭陰性桿菌占65.3%，革蘭陽性球菌占22.1%，真菌占12.6%。革蘭陰性桿菌對亞胺培南、美洛培南、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦較敏感。屎腸球菌對所測試抗菌藥物耐藥率顯著高于其他腸球菌，未發(fā)現(xiàn)耐萬古霉素、利奈唑胺的革蘭陽性球菌。結(jié)論 尿路感染病原菌分布廣泛，仍以革蘭陰性桿菌為主，細(xì)菌耐藥譜有較大差異，建議臨床醫(yī)生根據(jù)病原學(xué)監(jiān)測資料有針對性地選擇抗菌藥物。

尿路感染；病原菌；耐藥性；抗菌藥物

0 引言

尿路感染是臨床常見的感染性疾病之一，發(fā)病率約占人口的2%，僅次于呼吸系統(tǒng)感染[1-3]。由于廣譜抗菌藥的廣泛使用，越來越多的細(xì)菌出現(xiàn)了耐藥性，從而增加了臨床對尿路感染患者的治療難度。隨著微生物檢測技術(shù)的不斷提高，從尿液中檢出的菌株種類越來越多。為了解我院尿路感染病原菌分布及其耐藥性，筆者對臨床送檢尿標(biāo)本中培養(yǎng)出的2 028株病原菌的分布及其藥敏結(jié)果進(jìn)行回顧性分析，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 收集2011年1月至2014年6月我院住院及門診尿路感染患者的清潔中段尿、引流尿或術(shù)中抽取的尿液標(biāo)本。

1.2 培養(yǎng)及鑒定方法 將收集的合格尿標(biāo)本按定量接種法[4]立即接種血平板、CLED平板，計數(shù)菌落數(shù)，符合尿路感染診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]的菌株用MicroScan WalkAway40全自動細(xì)菌鑒定及藥敏檢測系統(tǒng)進(jìn)行鑒定與藥敏測定，藥敏結(jié)果按美國CLSI 2014版[6]的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定。

1.3 超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的檢測 采用CLSI[6]推薦的紙片篩選與表型確證試驗檢測。

1.4 碳青霉烯酶的檢測 采用改良Hodge試驗[6]檢測。

1.5 質(zhì)量控制 用標(biāo)準(zhǔn)菌株大腸埃希菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC25923、銅綠假單胞菌ATCC27853、肺炎克雷伯菌ATCC700603進(jìn)行質(zhì)量控制。

1.6 統(tǒng)計分析 用WHONET 5.6軟件進(jìn)行統(tǒng)計與細(xì)菌耐藥性分析。

2 結(jié)果

2.1 病原菌分布

2.1.1 菌種分布 共分離出非重復(fù)菌2 028株，其中從男、女性患者分別分離出932株(46%)和1 096株(54%)。2 028株病原菌中革蘭陰性菌1 325株，占65.3%；革蘭陽性菌448株，占22.1%；真菌255株(均為念珠菌)，占12.6%。各菌種分布及構(gòu)成比見表1。

表1 2 028株病原菌分布構(gòu)成比

2.1.2 病區(qū)分布 2 028株病原菌主要分離自泌尿外科，占37.4%；其他病區(qū)依次為重癥醫(yī)學(xué)科、腎內(nèi)科、神經(jīng)內(nèi)科、神經(jīng)外科、內(nèi)分泌科等，見表2。

2.2 2 028株病原菌對各類抗菌藥物的耐藥率

2.2.1 主要革蘭陰性菌 2 028株尿路分離病原菌中，G-菌排前5位的依次為：大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、變形桿菌屬、腸桿菌屬。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs發(fā)生率分別為47.6%(410/862)和25.0%(28/112)。檢測出產(chǎn)碳青霉烯酶大腸埃希菌和產(chǎn)氣腸桿菌各1株，主要G-菌對常用抗菌藥物的耐藥性見表3。

2.2.2 主要革蘭陽性菌 2 028株尿路分離病原菌中G+排前5位的依次為：糞腸球菌、屎腸球菌、凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)、腸球菌屬和金黃色葡萄球菌。MRSA發(fā)生率為4%(1/25)，未發(fā)現(xiàn)耐萬古霉素和利奈唑胺革蘭陽性球菌。主要G+對常用抗菌藥物的耐藥性見表4。

2.2.3 真菌 共分離到255株念珠菌，尿液中念珠菌主要為熱帶念珠菌，其次為白色念珠菌。念珠菌對抗真菌藥物均較敏感，對氟康唑、伊曲康唑、酮康唑、制霉菌素的敏感率分別為92.3%、93.0%、94.0%、99.3%。

3 討論

本研究顯示，引起尿路感染的病原菌菌種繁多，主要為革蘭陰性桿菌(65.3%)，其次為革蘭陽性菌(22.1%)和念珠菌屬(12.6%)。革蘭陰性桿菌檢出率遠(yuǎn)低于深圳鐘馥霞等[7]報道的81%，與?？谑袇嵌鄻s等[8]報道的61.8%一致，表明地區(qū)之間病原菌存在差異。分離出的病原菌多系腸道菌群，女性感染率高于男性(54∶46)，女性尿道短而直，會陰部常有大量細(xì)菌存在，只要有感染的誘因存在，都可能導(dǎo)致上行感染。本院尿液中分離的2 028株病原菌主要來源于泌尿外科(37.4%)，其他病區(qū)依次為重癥醫(yī)學(xué)科、腎內(nèi)科、神經(jīng)內(nèi)科、神經(jīng)外科，這些病區(qū)患者多為危重患者且長時間留置導(dǎo)尿管、長時期使用抗菌藥物，這些侵襲性操作和不規(guī)范使用抗菌藥物是引起醫(yī)院內(nèi)獲得性尿路感染的主要危險因素。

表2 2 028株病原菌在各病區(qū)的分布構(gòu)成比

表3 主要革蘭陰性菌對常用抗菌藥物的耐藥率(%)

注：“—”為無數(shù)據(jù)

表4 主要革蘭陽性菌對常用抗菌藥的耐藥率(%)

注：“—”為無數(shù)據(jù)；“*”不包括糞腸球菌和屎腸球菌

革蘭陰性桿菌以大腸埃希菌最多見，占所分離的革蘭陰性桿菌的65.1%(862/1 325)，這與大腸埃希菌的侵襲性有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，大腸埃希菌表面的傘狀物和菌毛可與尿路上皮細(xì)胞牢固結(jié)合，使輸尿管蠕動減弱并擴(kuò)張，尿液不能沖走細(xì)菌，細(xì)菌的黏附性是導(dǎo)致大腸埃希菌逆行感染的重要原因[9-11]。其他革蘭陰性桿菌依次為肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、變形桿菌屬等，與文獻(xiàn)[12]報道一致。大腸埃希菌ESBLs發(fā)生率(47.6%)較高，其對青霉素類、頭孢類抗菌藥物的耐藥率較高；肺炎克雷伯菌對青霉素類、呋喃妥因、氨芐西林/舒巴坦、復(fù)方新諾明的耐藥率高達(dá)39%以上；變形桿菌屬對氨芐西林、呋喃妥因、復(fù)方新諾明的耐藥率高達(dá)50%～97%；腸桿菌屬高產(chǎn)AmpC酶，主要表現(xiàn)為對青霉素類、頭孢類抗菌藥的耐藥率較高。監(jiān)測到少許腸桿菌科細(xì)菌產(chǎn)碳青霉烯酶，雖不建議對腸桿菌科細(xì)菌常規(guī)檢測碳青霉烯酶，但可從流行病學(xué)角度檢測是否存在碳青霉烯酶。銅綠假單胞菌對所監(jiān)測的抗菌藥物均較敏感。

革蘭陽性菌以腸球菌屬最為多見，腸球菌屬表達(dá)一種表面蛋白，屬于黏附素，其有利于腸球菌屬定植和延長腸球菌屬在膀胱內(nèi)的停留時間。屎腸球菌對所測試抗菌藥物的耐藥率顯著高于其他腸球菌，與筆者前期報道一致[13]；葡萄球菌屬對呋喃妥因、復(fù)方新諾明敏感率大于70%；未發(fā)現(xiàn)耐萬古霉素、利奈唑胺的革蘭陽性球菌。在臨床治療過程中，在未做細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏試驗前，若使用抗革蘭陰性菌藥物無效時，可考慮抗腸球菌藥物治療。同時亦分離到一些少見革蘭陽性菌，例如：無乳鏈球菌、解脲棒桿菌等。無乳鏈球菌對成人侵襲力較弱，腎盂腎炎、子宮內(nèi)膜炎、糖尿病、泌尿生殖道功能失調(diào)、腫瘤和免疫機(jī)能低下者易受其感染。解脲棒桿菌在血瓊脂平板培養(yǎng)基上生長緩慢，形成細(xì)小菌落而容易被忽視，因而應(yīng)延長培養(yǎng)時間，提高檢出率；該菌為革蘭陽性細(xì)小棒桿狀，脂酶、尿酶陽性，不難鑒別。

念珠菌是引起尿路感染的常見真菌，文獻(xiàn)報道多以白色念珠菌為主[14-15]，但本院所分離到的主要為熱帶念珠菌，其次為白色念珠菌，與吳旭麗等[16]報道一致。本院尿液中分離到的念珠菌對氟康唑、伊曲康唑、酮康唑、制霉菌素的敏感率均大于90%，只要規(guī)范、合理使用抗真菌藥物，治療效果應(yīng)該較理想。

綜上所述，尿路感染病原菌分布廣泛，仍以革蘭陰性桿菌為主，細(xì)菌耐藥譜有較大差異，合理使用抗菌藥物，嚴(yán)格規(guī)范無菌操作是預(yù)防醫(yī)院內(nèi)獲得性尿路感染的重要措施，建議臨床醫(yī)生根據(jù)病原學(xué)監(jiān)測資料有針對性地選擇抗菌藥物。

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Analysis of the distribution and drug resistance of pathogenic bacteria causing urinary tract infection in our hospital

LIAO Guo-lin,LI Jiang-ping*,WU Zhen,SUN Pei,WANG Hai-hong,LOU Liang-wen

(Department of Clinical Laboratory,Wuhan Puren Hospital,Wuhan 430081,China)

Objective To investigate the distribution and drug resistance of pathogenic bacteria causing urinary tract infection,in order to further provide the reference for rational use of antibacterial agents.Methods The strains isolated from the urine in our hospital from January 2011 to June 2014 were collected,the identification and antimicrobial susceptibility were performed by MicroScan WalkAway40.Drug resistance was judged according to CLSI 2014 and WHONET 5.6 software was used to analyze the data.Results A total of 2 028 bacterial strains were isolated.Gram-negative bacilli,Gram-positive cocci and Fungus accounted for 65.3%,22.1%and 12.6%,respectively.The susceptible rate of Gram-negative bacilli was higher to imipenem,meropenem,piperacillin/tazobactam,cefoperazone/sulbactam.The resistance rate ofE.faeciumto most of the drugs tested was significantly higher than otherenterococci.No Gram-positive cocci was resistant to vancomycin or linezolid.Conclusion Urinary tract infection pathogens are widely distributed.The main pathogen is still Gram-negative bacilli and bacterial resistance patterns are quite different.Doctors should select the antibiotics based on the etiology of monitoring data.

Urinary tract infection;Pathogenic bacteria;Drug resistance;Antibacterial agents

2014-08-10

武漢市普仁醫(yī)院檢驗科，武漢 430081

*通信作者

10.14053/j.cnki.ppcr.201503022