氯沙坦對慢性腎臟疾病患者血漿中炎癥性細胞因子及TGF-β1的影響

王小麗，劉瑞東

氯沙坦對慢性腎臟疾病患者血漿中炎癥性細胞因子及TGF-β1的影響

王小麗，劉瑞東

目的 研究血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑-氯沙坦對慢性腎臟疾病患者血漿細胞因子濃度及尿轉(zhuǎn)化生長因子β1排泄的影響，探討其保護腎臟的可能機制。方法 選取符合入選標準的慢性腎臟疾病患者32例，觀察6個月，ELISA法檢測血漿TNF-α、IL-6及尿TGF-β1的水平；免疫散射比濁法檢測血漿hsCRP；放射免疫法檢測尿白蛋白的濃度；全自動生化分析儀測定治療前后血尿素氮、肌酐、HDL-C、LDL-C。結(jié)果 與氯沙坦治療前基礎(chǔ)值相比，患者血漿hsCRP水平[(1 403±198)ng/mL vs.(998.1±138)ng/mL]明顯增高(P<0.05)，尿白蛋白/尿肌酐[(73.4±16.5)mg/mmol.Cr vs.(96.5±12.1)mg/mmol.Cr)]和TGF-β1/尿肌酐[(43.56±17.49)mg/mmol.Cr vs.(78.81±40.32)mg/mmol.Cr]水平明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；TNF-α[(1.39±0.03)pg/mL vs.(1.46±0.04)pg/mL]、IL-6[(1.79±0.07)pg/mL vs.(1.81±0.09)pg/mL]水平變化差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。與治療前基礎(chǔ)值比較，LDL-C[(117.0±1.4)mg/dL vs.(126.0±2.7)mg/dL]顯著降低，但BUN[(28.3±0.6)mg/dL vs.(21.1±0.8)mg/dL]明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；血肌酐[(139.4±36.3)μmol/L vs.(124.5±52.5)μmol/L]、HDL-C[(58.6±0.9)mg/dL vs.(56.2±3.0)mg/dL]與治療前比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 氯沙坦對慢性腎臟疾病患者的腎臟有保護作用，其部分機制可能與上調(diào)細胞因子hsCRP和下調(diào)TGF-β1作用有關(guān)。

氯沙坦；蛋白尿；炎癥性細胞因子；轉(zhuǎn)化生長因子-β1

0 引言

慢性腎臟疾病發(fā)病機制復(fù)雜，已成為全球性公共健康問題，其發(fā)病率和病死率高，腎間質(zhì)纖維化幾乎是各種腎臟疾病進展到終末期腎病的共同途徑和主要病理學(xué)基礎(chǔ)[1]。近年來，細胞因子在腎臟疾病進展中所起的作用漸受重視，尤其是TGF-β1(Transforming growth factor-Beta，TGF-β1)是一種多功能細胞因子，對細胞增殖、分化和細胞外基質(zhì)積聚、降解起調(diào)控作用，逐漸成為腎臟纖維化的重要分子學(xué)標志物[2]；血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑(Angiotensin Ⅱ receptor blockers，ARB)氯沙坦能夠阻斷血管緊張素受體(AT1)，避免血管緊張素Ⅱ與受體結(jié)合，最終達到防止血管收縮的目的。對于腎臟疾病患者，有獨立于降壓作用之外減少蛋白尿的作用，且在保護腎功能、延緩腎臟疾病的進展方面起到了極其重要的作用[3]。本研究觀察氯沙坦對慢性腎臟疾病患者血漿hsCRP、TNF-α、IL-6及尿TGF-β1的影響，旨在探討血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑ARB對慢性腎臟疾病患者病情進展和腎臟保護作用的可能機制。

1 材料與方法

1.1 研究對象 我院2012年10月至2014年1月診斷為原發(fā)性慢性腎臟疾病的住院患者，大量蛋白尿[尿蛋白(Upr)>3.5 g/24 h]、有明顯感染癥狀、糖尿病腎病患者、系統(tǒng)性紅斑狼瘡腎炎、過敏性紫癜性腎炎、血管炎等因素引起的蛋白尿者除外，接受氯沙坦治療患者(50～100 mg/d)32例，平均年齡(48±3.5)歲。檢測患者治療前后血漿超敏C反應(yīng)蛋白(High sensitivity C reaction protein，hsCRP)、腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白介素-6(Interleukin-6，IL-6)及尿TGF-β1、尿肌酐(Cr)，觀察4個月結(jié)束時，氯沙坦組2例失訪。退出試驗和失訪者數(shù)據(jù)未納入統(tǒng)計。

1.2 方法

1.2.1 標本收集 留取空腹靜脈血，測定血漿hsCRP、TNF-α、IL-6，同時測定尿素氮、肌酐、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和血鉀；收集受試者24 h尿，準確記錄尿量，標本不加防腐劑，混勻后留取10 mL保存于-40 ℃冰箱待測。檢測指標包括尿TGF-β1、尿白蛋白及尿肌酐。

1.2.2 實驗室檢測 尿TGF-β1、血TNF-α、IL-6的檢測采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)法，試劑盒分別購自上海酶聯(lián)生物耗材有限公司；上海卡努生物科技有限公司；上海恒遠生物科技有限公司；尿白蛋白采用放射免疫法檢測；血尿肌酐、尿素氮、HDL-C、LDL-C及血鉀使用自動生化分析儀測定；尿TGF-β1和尿白蛋白均以其與尿肌酐比值來表示，以消除尿液濃縮、稀釋對結(jié)果的影響。

2 結(jié)果

2.1 患者基礎(chǔ)水平的檢測 實驗開始時有慢性腎臟疾病患者41例，由于患者標本丟失或自身原因拒絕調(diào)查，有9例失訪。共納入符合入選標準的慢性腎臟疾病患者32例，患者年齡(48±3.5)歲，男17例，女15例，其中系膜增生性腎炎(MPG)7例，局灶性腎小球硬化癥(FGS)4例，IgA腎炎11例，其他10例。按腎組織學(xué)診斷患者22例，根據(jù)臨床表現(xiàn)診斷患者10例。

2.2 患者治療前后血、尿炎癥相關(guān)指標比較 治療后hsCRP水平增高，尿TGF-β1水平顯著降低；而TNF-α、IL-6濃度雖有所下降，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(見表1)。

表1 慢性腎臟疾病患者治療前后炎癥相關(guān)細胞因子的變化

注：與治療前比較，*P<0.05

2.3 患者治療前后血、尿其他相關(guān)指標比較 與治療前比較，LDL-C和尿白蛋白/尿肌酐降低，但BUN升高；血壓、血肌酐、血鉀及HDL-C與治療前相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(見表2)。

表2 慢性腎臟疾病患者治療前后其他相關(guān)指標的變化

注：與治療前比較，*P<0.05

3 討論

氯沙坦是ARB，屬二苯四咪唑類，主要優(yōu)勢是其良好的耐受性，副作用少，其保護腎臟疾病患者腎功能的機制為：阻斷血管緊張素Ⅱ受體對腎小管上皮細胞肥大、增殖的刺激作用，減少細胞外基質(zhì)積聚，減輕腎間質(zhì)纖維化，減緩向終末期腎病的發(fā)展；不僅能降低系統(tǒng)高血壓，而且具有非血壓依賴性的腎臟保護作用，可降低腎小球毛細血管內(nèi)壓，改善腎小球濾過膜選擇通透性[4]。有研究表明，氯沙坦能顯著降低高血壓患者尿中的β2微球蛋白(β2-microglobulin，β2-MG)，β2-MG是判斷早期腎功能異常及腎小球濾過率障礙的敏感指標，達到抗高血壓性腎損害的作用[5]。蛋白尿在慢性腎功能衰竭進展中的重要性，大于高血壓本身，氯沙坦可同時降壓與降蛋白尿，對腎臟保護有協(xié)同作用；氯沙坦更能防止心血管系統(tǒng)的發(fā)病率和死亡率[6]。

慢性腎臟疾病最終導(dǎo)致腎小球硬化和腎小管-間質(zhì)纖維化，最終發(fā)展為終末期腎病。一系列生長因子與細胞因子的改變與這些纖維化成分的合成及代謝的調(diào)節(jié)密切相關(guān)，hsCRP、TNF-α、IL-6及TGF-β1是其中重要的細胞因子之一，皮質(zhì)類固醇激素治療IgA腎病可降低尿蛋白的排泄，但增加了尿IL-6和TGF-β的排泄[7]。TGF-β1的作用與腎臟疾病的進展密切相關(guān)。在腎臟病患者中，TGF-β1可調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)；能抑制腎小管上皮細胞、腎小球上皮細胞和內(nèi)皮細胞的增殖；能促進細胞外基質(zhì)(Extracellular matrix,ECM)的合成和沉積，減少ECM的降解，最終引起腎小球硬化和腎間質(zhì)纖維化[8]。有報道，氯沙坦可顯著降低慢性腎臟疾病患者蛋白尿和腎小球濾過率(GFR)[9-12]。血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑和血管緊張素受體阻滯劑聯(lián)合應(yīng)用并不能導(dǎo)致高血鉀、張力過低和急性GFR降低，也不能改變尿TGF-β1的排泄[13]。本研究結(jié)果顯示，氯沙坦治療后，不僅明顯降低患者尿白蛋白的水平，而且顯著降低與腎臟纖維化和硬化密切相關(guān)的細胞因子TGF-β1的水平，從而起到保護腎臟的作用。有報道，高血壓性腎臟疾病患者腎臟損害與強烈的炎癥反應(yīng)無關(guān)[14]，本實驗結(jié)果顯示，氯沙坦治療后血漿炎癥性細胞因子TNF-α、IL-6濃度雖有所下降，但無統(tǒng)計學(xué)意義。

本研究發(fā)現(xiàn)，氯沙坦長期治療非糖尿病腎病患者后，血漿hsCRP明顯增高。慢性腎臟病特別是存在明顯蛋白尿的患者，常常伴有血脂水平的改變；動物試驗結(jié)果提示，脂質(zhì)異?？杉铀倌I臟病程進展[15]。hs-CRP已被證實是由慢性炎癥引發(fā)心血管疾病的獨立危險因素，檢測其濃度對心血管疾病的干預(yù)及預(yù)后起重要作用。由于本研究臨床樣本量較少，隨訪時間較短，入選對象年齡小，使本研究具有一定的局限性，因此，氯沙坦對非糖尿病腎臟疾病各種病理類型的抗代謝作用有待于進一步研究。

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Effects of losartan on inflammatory cytokine and TGF-β1 concentrations in patients with chronic renal disease

WANG Xiao-li,LIU Rui-dong

(Department of Clinical Laboratory,Laiwu Municipal People′s Hospital Affiliated to Taishan Medical College,Laiwu 271100,China)

Objective To investigate the effects of angiotensin receptor blockers Ⅱ-losartan on the concentrations of inflammatory cytokine and urine TGF-β1 in patients with chronic renal disease,in order to evaluate the renoprotective mechanism of losartan.Methods 32 patients with chronic renal disease were selected,following treatment with losartan for 26 weeks.Then the concentration of TNF-α,IL-6 in blood plasma and urinary TGF-β1 were measured by ELISA;blood plasma high sensitivity C-reactive protein(hsCRP) was analyzed by scatting turbidimetric immunoassays;urinary albumin was assayed by radioimmunoassays;the levels of blood urea nitrogen(BUN),creatinine,LDL-C and HDL-C concentrations were measured using an autoanalyzer.Results After treatment,the concentrations of hsCRP [(1 403±198)ng/mL vs.(998.1±138)ng/mL]were significantly improved(P<0.05).The concentrations of urinary albumin/urinary Cr[(73.4±16.5)mg/mmol.Cr vs.(96.5±12.1)mg/mmol.Cr)]and TGF-β1 /urinary Cr[(43.56±17.49)mg/mmol.Cr vs.(78.81±40.32)mg/mmol.Cr] significantly reduced (P<0.05).However,There was no significant difference in the changes of the concentrations of tumor necrosis factor(TNF)-α [(1.39±0.03)pg/mL vs.(1.46±0.04)pg/mL]and interleukin-6(IL-6) [(1.79±0.07)pg/mL vs.(1.81±0.09)pg/mL](P>0.05).After treatment,the concentrations of LDL-C [(117.0±1.4)mg/dL vs.(126.0±2.7)mg/dL] significantly reduced,but BUN [(28.3±0.6)mg/dL vs.(21.1±0.8)mg/dL]were obviously improved(P<0.05).Then,there was no significant difference in the changes of serum creatinine [(139.4±36.3)μmol/L vs.(124.5±52.5)μmol/L]and HDL-C [(58.6±0.9)mg/dL vs.(56.2±3.0)mg/dL](P>0.05).Conclusion The mechanism of renoprotective effects of losartan on patients with chronic renal disease was partly concerned with increasing concentrations of hsCRP and downregulating TGF-β1.

Losartan;Proteinuria;Inflammatory cytokine;TGF-β1

2014-07-18

泰山醫(yī)學(xué)院附屬萊蕪市人民醫(yī)院檢驗科，山東

271100

10.14053/j.cnki.ppcr.201503013