正天丸對(duì)戊巴比妥鈉及巴比妥鈉催眠作用的影響*

胡偉 周新衛(wèi) 王德才(.棗莊職業(yè)學(xué)院醫(yī)學(xué)院，山東棗莊77800;.泰山醫(yī)學(xué)院附屬新泰醫(yī)院，山東新泰700; .泰山醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，山東泰安706)

正天丸對(duì)戊巴比妥鈉及巴比妥鈉催眠作用的影響*

胡偉1周新衛(wèi)2王德才3
(1.棗莊職業(yè)學(xué)院醫(yī)學(xué)院，山東棗莊277800;2.泰山醫(yī)學(xué)院附屬新泰醫(yī)院，山東新泰271200; 3.泰山醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，山東泰安271016)

目的通過觀察正天丸對(duì)戊巴比妥鈉及巴比妥鈉催眠作用的影響，了解正天丸對(duì)肝微粒體細(xì)胞色素P450活性的影響。方法將60只小鼠隨機(jī)分為溶媒組(2%吐溫-80，20 ml/kg)、氯霉素組(25 mg/kg)及正天丸低、高劑量組(3，6 g/kg)，每組15只，連續(xù)等容灌胃3d，末次給藥1h后，再給小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉40 mg/kg或巴比妥鈉180mg/kg，觀察小鼠的睡眠潛伏期和睡眠時(shí)間。結(jié)果氯霉素組和低、高劑量的正天丸組使戊巴比妥鈉對(duì)小鼠的催眠時(shí)間分別延長(zhǎng)222.2%、123.1%、42.6%，其中氯霉素組和小劑量正天丸組與溶媒組比較，小鼠的睡眠時(shí)間顯著延長(zhǎng)，均P＜0.01。與溶媒組比較，高劑量的正天丸能顯著延長(zhǎng)巴比妥鈉催眠潛伏期(P﹤0.01)，并縮短催眠時(shí)間(P﹤0.01)。結(jié)論正天丸可能抑制小鼠肝微粒體細(xì)胞色素P450活性，同時(shí)對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)有興奮作用。

正天丸;戊巴比妥鈉;巴比妥鈉;催眠作用;細(xì)胞色素P450

正天丸系由第一軍醫(yī)大學(xué)南方醫(yī)院中醫(yī)科陳寶田教授和趙新先主任藥師根據(jù)祖國(guó)醫(yī)藥理論研制的純中藥制劑。以鉤藤平肝息風(fēng)，白芍養(yǎng)血斂陰、柔肝止痛，輔以細(xì)辛、防風(fēng)、獨(dú)活、羌活等祛風(fēng)勝濕，川芎活血化瘀止痛，當(dāng)歸補(bǔ)血活血調(diào)經(jīng)止痛，紅花、雞血藤以活血、補(bǔ)血、通絡(luò)，附子散寒除濕等，臨床上用于治療各種慢性頭痛，療效顯著［1］。半個(gè)多世紀(jì)以來，一直深受患者青睞，其主要有效成分包括鉤藤堿、阿魏酸、川芎嗪、芍藥苷、紅花苷、當(dāng)歸素、苦杏仁苷、偽麻黃堿等［2］。組方中的獨(dú)活、羌活、白芷、防風(fēng)、當(dāng)歸等藥材含有大量的香豆素類化合物［3］，有資料表明香豆素類化合物可抑制肝微粒體細(xì)胞色素P450(cytochrome P450，CYP)的活性從而干擾許多藥物的藥動(dòng)學(xué)過程［4］。中成藥正天丸對(duì)CYP活性有何影響，尚未見資料報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)以戊巴比妥鈉催眠時(shí)間作為CYP體內(nèi)活性的指標(biāo)，觀察正天丸對(duì)戊巴比妥鈉及巴比妥鈉催眠作用的影響，以了解正天丸對(duì)CYP活性的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 藥品和試劑

正天丸，三九醫(yī)藥股份有限公司，批號(hào)0708272 (研碎，在不斷攪拌下滴加2%吐溫-80溶液，配制成0.15 g/ml和0.30 g/m l的正天丸混懸液，備用);氯霉素，南京白敬宇制藥有限公司，批號(hào)060626;巴比妥鈉，天津市港通化工有限公司，批號(hào)070628;戊巴比妥鈉，北京化學(xué)試劑公司，批號(hào)061206;其它試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.2 動(dòng)物

昆明種小鼠，體重20±2g，♀♂各半，由本院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.3 方法

1.3.1 正天丸對(duì)戊巴比妥鈉催眠作用的影響取小鼠60只，隨機(jī)分為4組，每組15只，分別給予5%吐溫-80(溶媒對(duì)照組)、0.125%氯霉素、0.15 g/ml和0.30 g/ml的正天丸混懸液20 m l/kg灌胃，每日給藥1次，連續(xù)3天。末次給藥1h再分別腹腔注射(ip)0.4%戊巴比妥鈉溶液10 ml/kg(40 mg/kg)。室溫23～25℃，ip戊巴比妥鈉時(shí)間均在上午9時(shí)左右。以小鼠翻正反射消失和恢復(fù)作為“入睡”和“蘇醒”的指標(biāo)，計(jì)算戊巴比妥鈉對(duì)小鼠的催眠潛伏期(從ip戊巴比妥鈉至翻正反射消失的間隔時(shí)間)和催眠時(shí)間(從翻正反射消失至恢復(fù)的間隔時(shí)間)［5］。

1.3.2 正天丸對(duì)巴比妥鈉催眠作用的影響取小鼠60只，隨機(jī)分為4組，每組15只，實(shí)驗(yàn)條件、給藥劑量和方法同1.3.1。末次給藥1h再分別ip 0.18%巴比妥鈉溶液10 ml/kg(180 mg/kg)。同上法觀察巴比妥鈉對(duì)小鼠的催眠潛伏期和催眠時(shí)間。

1.3.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理運(yùn)用SPSS15.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用方差分析。

2 結(jié)果

2.1 正天丸對(duì)戊巴比妥鈉催眠作用的影響

ip戊巴比妥鈉溶液或巴比妥鈉溶液后小鼠表現(xiàn)為共濟(jì)失調(diào)和自發(fā)活動(dòng)減少，2小時(shí)內(nèi)翻正反射未消失，視為“未睡眠”，催眠時(shí)間以“0”計(jì)。觀察小鼠睡眠時(shí)間為6個(gè)小時(shí)，即360 min，在360 min后仍沒“蘇醒”的小鼠，為便于組間比較，睡眠時(shí)間以360 min計(jì)算。發(fā)生睡眠的小鼠潛伏期最長(zhǎng)為110 min。為便于組間比較，將“未睡眠”鼠的潛伏期以110 min計(jì)算。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)，氯霉素組和低、高劑量的正天丸組使戊巴比妥鈉對(duì)小鼠的催眠時(shí)間分別延長(zhǎng)222.2%、123.1%、42.6%，其中氯霉素組和小劑量正天丸組與溶媒對(duì)照組比較，小鼠的睡眠時(shí)間顯著延長(zhǎng)，均P＜0.01。各組催眠潛伏期的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。

表1 正天丸對(duì)戊巴比妥鈉催眠作用的影響

表1 正天丸對(duì)戊巴比妥鈉催眠作用的影響

注:與溶媒組比較，*P＜0.01。

組別劑量n催眠潛伏期(min)催眠時(shí)間(min)催眠時(shí)間變化率(% -15 10.7±6.2 103.5±29.0-氯霉素組25 mg/kg 15 7.5±1.7 333.5±62.7*222.2正天丸低劑量組3 g/kg 15 6.9±2.9 230.9±55.7*123.1正天丸高劑量組)溶媒組6 g/kg 15 7.9±3.9 147.6±34.4 42.6

2.2 正天丸對(duì)巴比妥鈉催眠作用的影響

催眠潛伏期和催眠時(shí)間的計(jì)算方法同上。各組小鼠末次灌胃1 h后再分別ip巴比妥鈉180 mg/ kg，結(jié)果發(fā)現(xiàn)溶媒組、氯霉素組和低、高劑量正天丸組2 h內(nèi)翻正反射未消失的“未睡眠”鼠數(shù)分別是1只、3只、4只和9只，催眠時(shí)間以“0”計(jì)，潛伏期以110 min計(jì)算。與溶媒組比較，正天丸高劑量組催眠潛伏期顯著延長(zhǎng)，且顯著縮短巴比妥鈉對(duì)小鼠的催眠時(shí)間。氯霉素組和正天丸低劑量組對(duì)催眠潛伏期和催眠時(shí)間的影響，與溶媒組比較均無顯著性差異。見表2。

表2 正天丸對(duì)巴比妥鈉催眠作用的影響

表2 正天丸對(duì)巴比妥鈉催眠作用的影響

注:與溶媒組比較，*P＜0.01。

組別劑量n催眠潛伏期(min)催眠時(shí)間(min)催眠時(shí)間變化率(%) -15 46.8±18.9 143.3±53.2-氯霉素組25mg/kg 15 60.3±22.3 113.3±60.9-20.9正天丸低劑量組3 g/kg 15 55.7±19.9 105.3±51.2-26.5正天丸高劑量組6 g/kg 15 88.3±26.1*42.5±49.6*溶媒組-70.3

3 討論

肝微粒體CYP酶系統(tǒng)是藥物代謝的關(guān)鍵酶，俗稱肝藥酶。藥物對(duì)CYP活性的影響是藥物間相互作用最重要的機(jī)制。戊巴比妥鈉主要由CYP代謝滅活，故其催眠時(shí)間的長(zhǎng)短反應(yīng)了戊巴比妥鈉在體內(nèi)代謝速度的慢或快，對(duì)其催眠作用的影響可以反映對(duì)CYP的作用［5］。但是具有中樞抑制作用或興奮作用的藥物也可能延長(zhǎng)或縮短戊巴比妥鈉的催眠時(shí)間。巴比妥鈉脂溶性低，主要以原形經(jīng)腎臟排泄，對(duì)小鼠催眠時(shí)間的長(zhǎng)短主要受藥物中樞作用的影響，基本不受CYP抑制或誘導(dǎo)的影響。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果看出，高劑量的正天丸組能延長(zhǎng)巴比妥鈉的催眠潛伏期，并顯著縮短巴比妥鈉對(duì)小鼠的催眠時(shí)間，提示正天丸對(duì)小鼠的中樞神經(jīng)系統(tǒng)有興奮作用。有資料表明，正天丸組方中的白芷含有大量的香豆素類組分，大劑量時(shí)具有中樞興奮作用［6］。麻黃堿和偽麻黃堿是正天丸中抗炎鎮(zhèn)痛的有效成分之一，二者均是腎上腺素受體激動(dòng)劑，具有興奮中樞神經(jīng)和類腎上腺素樣作用，顯示血管收縮、心臟興奮等效應(yīng)［7］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示的正天丸的中樞興奮作用可能與香豆素類、麻黃堿、偽麻黃堿等化學(xué)成分有關(guān)。

各組小鼠戊巴比妥鈉的催眠潛伏期差異不明顯，但氯霉素和正天丸低劑量組與溶媒組比較，對(duì)小鼠的催眠時(shí)間具有顯著的差異，提示正天丸對(duì)小鼠CYP有抑制作用。因CYP的抑制作用，致使戊巴比妥鈉在體內(nèi)代謝滅活減慢，血藥濃度降低變緩，呈現(xiàn)睡眠時(shí)間的顯著延長(zhǎng)。抑制CYP表現(xiàn)為催眠時(shí)間延長(zhǎng)，中樞興奮則縮短催眠時(shí)間。正天丸對(duì)戊巴比妥鈉催眠作用的影響則是兩個(gè)因素綜合作用的結(jié)果，即影響CYP的藥動(dòng)學(xué)因素和中樞興奮作用的藥效學(xué)因素共同作用的結(jié)果。正天丸大劑量組對(duì)戊巴比妥鈉催眠作用的影響不明顯，可能與大劑量正天丸的中樞興奮作用加強(qiáng)則抵消CYP抑制引起催眠時(shí)間延長(zhǎng)有關(guān)。正天丸主要方藥組成有白芍、白芷、川芎、當(dāng)歸、地黃、獨(dú)活、防風(fēng)、附片、鉤藤、紅花、雞血藤、麻黃、羌活、桃仁、細(xì)辛等，其中白芷、獨(dú)活、防風(fēng)、羌活、川芎等中藥材均富含香豆素類化合物，正天丸對(duì)CYP的抑制作用可能與香豆素類化合物有關(guān)。

CYP同工酶種類繁多，本實(shí)驗(yàn)采用的陽性對(duì)照藥氯霉素對(duì)參與臨床常用藥物代謝的多種CYP同工酶均有很強(qiáng)的抑制作用，選擇性不明顯［8］。正天丸對(duì)CYP的抑制作用是否有選擇性，對(duì)臨床常用藥物代謝和療效的影響等問題，尚需進(jìn)一步的探討。

［1］李濤，范吉平，曹克剛.正天丸組方配伍及功效特點(diǎn)解析［J］.中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2013，19(6):65-66.

［2］黃瀾，黃惠瓊，李玲玲.正天丸的HPLC特征圖譜研究［J］.中國(guó)藥房，2015，26(12):1713-1715.

［3］張恭孝，李聚倉，王德才.獨(dú)活中總香豆素組分的含量測(cè)定［J］.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2010，28(12):2647-2648.

［4］李聚倉，鄭輝，王德才.中藥有效成分對(duì)細(xì)胞色素P450影響的研究進(jìn)展［J］.醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2011，30(3):342-244.

［5］徐叔云，卞如濂，陳修.藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法［M］.第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社，1991:489.

［6］張富強(qiáng)，聶紅，韋藝.白芷的化學(xué)與藥理研究進(jìn)展［J］.南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版，2002，18(3):109-192.

［7］李明，劉志剛.正天丸對(duì)小白鼠心臟等基因的影響及治療各種頭痛可能的機(jī)理［J］.藥品評(píng)價(jià)，2005，2(1):31-37.

［8］汪輝，彭仁繡.P450特異性化學(xué)抑制在外源化合物代謝中的作用［J］.藥學(xué)學(xué)報(bào)，1999，34(11):877-880.

Influence of Zheng-tian pill on the hypnotic effects of pentobarbital sodium and barbital sodium in m ice

H
UWei1ZHOU Xin-wei2WANG De-cai3
(1.Medical School of Zaozhuang Vocational College，Zaozhuang 277800，China; 2 Affiliated Xintai Hospital of Taishan Medical Univeisity，Xintai271200，China; 3 Pharmacy College of Taishan Medical Univeisity，Taian 271016，China)

Objective:To observe the influence of Zheng-tian pill on the hypnotic effects of pentobarbital sodium and barbital sodium.Methods:Mice were randomly divided into solvent(5%Tween-80，20ml/kg)，chloromycetin(25 mg/ kg)and Zheng-tian pill(3，6 g/kg)groups，which were administered orally with equivalent volume，once a day and for three days.An hour later at the last administration，all the animalswere given pentobarbital sodium(40mg/kg，ip)or barbital sodium(180mg/kg，ip)，and then the latent period and duration of hypnosiswere observed.Results:Hypnotic duration of pentobarbital sodium was prolonged by 222.2%，123.1%and 42.6%in chloromycetin and two Zheng-tian pill groups respectively，chloromycetin group and Zheng-tian pill group at the lower dose compared with solvent group，there were evident difference(P﹤0.01)，and yet the large dose of Zheng-tian pill prolonged evidently hypnotic latentperiod(P﹤0.01)and shortened obviously hypnotic duration(P﹤0.01)of barbital sodium.Conclusion:The findings in this study suggest that Zheng-tian pill is likely to inhibit livermicrosomal cytochrome P450 activity and to excite the central nervous system at a higher dose in mice.

Zheng-tian pill;pentobarbital sodium;barbital sodium;hypnotic effect;cytochrome P450

R285.5

A

1004-7115(2015)09-0982-03

10.3969/j.issn.1004-7115.2015.09.001

2015-04-05)

胡偉(1974—)，男，山東棗莊人，講師，主要從事藥理學(xué)教學(xué)與科研工作。

王德才(1962—)，男，教授，主要從事中藥藥理學(xué)研究。