乙肝病毒外膜大蛋白與HBV—DNA檢測相關(guān)性分析

郭艷華 王新建 白全召

[摘要]目的探究乙型病毒性肝炎（乙肝）患者血清乙肝病毒外膜大蛋白（HBV-LP）與乙肝病毒的脫氧核糖核酸（HBV-DNA）相關(guān)性及HBV-LP檢測對乙肝患者臨床診斷意義。方法通過酶聯(lián)免疫法、實時熒光定量PCR法檢測HBV感染者血清內(nèi)HBV-LP、HBV-DNA含量。結(jié)果相同模式乙肝病毒血清標志物（HBV-M）患者血清內(nèi)HBV-LP與HBV-DNA檢測情況對比無明顯差異（P<0.05）。HBV-DNA陽性血清中HBV-LP陽性檢出率明顯優(yōu)于HBeAg陽性率，HBV-LP OD值與HBV-DNA拷貝數(shù)呈正相關(guān)聯(lián)（P<0.05）。結(jié)論乙肝病毒外膜大蛋白與HBV-DNA存在較好的相關(guān)性，可以通過檢測HBV-LP水平判斷乙肝病毒復(fù)制情況，對臨床診斷和療效評價有重要意義。

[關(guān)鍵詞]乙肝病毒外膜大蛋白;HBV-DNA;相關(guān)性

目前乙型病毒性肝炎作為臨床常見疾病，由于傳染性強、病死率高，已經(jīng)危害人類健康?，F(xiàn)在臨床診斷此類疾病，主要是依靠檢測乙肝病毒血清標志物，但其僅能判斷病毒入侵，無法準確反映病毒復(fù)制情況及是否有傳染性。目前只有通過檢測HBV-DNA才可以精確判斷乙肝病毒是否有傳染性，而HBV-LP作為乙肝病毒的包膜蛋白，可以用來監(jiān)測乙肝病毒感染、復(fù)制及預(yù)后。這里我們通過測定乙肝患者血清HBV-LP、HBV-DNA含量，探究它們之間的相關(guān)性及HBV-LP檢測對乙肝患者臨床診斷意義。

1 材料與方法

1.1 材料 在2013年3月至2014年3月之間隨機選取150例門診及住院乙肝患者，男性102例，女性48例，年齡在18～66歲，平均45.7歲，均符合2000年國家制定病毒性肝炎診斷標準?？崭谷⊙獦?，離心取上層血清置-80℃冰箱保存。

1.2 方法 HBV-M及HBV-LP檢測均用酶聯(lián)免疫法，試劑盒購于（上海復(fù)興長征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司）;HBV-DNA檢測采用實時熒光定量PCR法，試劑盒購于（珠海賽樂奇生物技術(shù)有限公司）;操作步驟按試劑說明書。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 用SPSS13.0軟件行統(tǒng)計分析，計數(shù)材料用卡方檢驗，組間比較用t檢驗，P<0.05有差異具統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同HBV-M 模式下HBV-LP、HBV-DNA檢出情況 結(jié)果說明在相同HBV-M模式下HBV-LP與HBV-DNA的檢測結(jié)果沒有統(tǒng)計學(xué)意義。

表1 不同HBV-M 模式下HBV-LP、HBV-DNA檢出情況

HBV-M

例數(shù)

HBV-DNA/陽性率

HBV-LP/陽性率

1、4、5

89

42（47.2%）

40（44.9%）

1、3、5

37

32（86.5%）

31（83.8%）

1、5

4

0

0

1、2、4、5

6

0

0

2、4、5

9

0

0

2、5

5

0

0

合計

150

74（49.3%）

71（47.3%）

注：模式中1是HBsAg，2是HBsAb，3是HBeAg，4是HBeAb，5是HBcAb

2.2 血清HBV-DNA和HBV-LP吸光度值（OD）檢測結(jié)果 74例乙肝患者血清內(nèi)HBV-DNA拷貝數(shù)增多，同時HBV-LP OD值也增大，兩者表現(xiàn)正相關(guān)聯(lián)， 其相關(guān)系數(shù)r=0.921。

表2 血清HBV-DNA和HBV-LP吸光度值（OD）檢測結(jié)果

HBV-DVA（例數(shù)）

HBV-DNA（ copies/ml）

HBV-LP（OD值）

HBV-LP（例數(shù)/陽性率）

22

10³

0.65±0.31

16（72.7%）

14

10⁴

0.88±0.20

11（78.6%）

15

10⁵

1.18±0.30

13（86.7%）

12

10⁶

1.40±0.25

11（91.7%）

11

10⁷

1.98±0.33

11（100%）

2.3 HBV-DNA陽性血清HBV-LP與HBeAg陽性率比較 根據(jù)結(jié)果發(fā)現(xiàn)在74例HBV-DNA陽性血清中HBV-LP的陽性率是83.8%（62/74），

HBeAg的陽性率是43.2%（32/74）， HBV-LP陽性率明顯優(yōu)于HBeAg，兩者差異顯著，有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。

3 討論

目前臨床檢測乙肝患者病情情況及預(yù)后主要是通過定量檢測乙肝病毒標志物，但是對病毒早期復(fù)制情況不能準確判斷，這樣對臨床早期診治的造成了較大難度。目前只有HBV-DNA能準確反映乙肝病毒復(fù)制及傳染性情況，是臨床判定乙肝病毒復(fù)制的血清學(xué)指標，特別是對HBeAg陰性乙肝患者有重要的臨床應(yīng)用價值^[1]，但是目前在基層醫(yī)療機構(gòu)尚不能獨立開展核酸檢測，針對乙肝患者只能靠HBeAg轉(zhuǎn)換以及肝功能判斷病毒復(fù)制情況，況且還有部分HBeAg陰性乙肝患者由于病毒基因出現(xiàn)變異，甚至無法合成HBeAg，出現(xiàn)HBeAg 陰性但病毒仍在復(fù)制現(xiàn)象^[2]。HBV-LP是HBV Dane氏顆粒及亞病毒顆粒的主要組成部分，它在HBV病毒感染早期與細胞受體結(jié)合并誘導(dǎo)攝入病毒，直到感染晚期它還參與病毒組裝及分泌，因此檢測HBV-LP能夠反映病毒復(fù)制情況和預(yù)后^[3-5]。有研究發(fā)現(xiàn)在治療乙肝中病毒DNA水平可以呈現(xiàn)快速降低，速度明顯快于HBV-LP，導(dǎo)致血清內(nèi)HBV-LP水平減少速度慢，最終晚于HBV-DNA消失，因此檢測血清內(nèi)HBV-LP水平能反映出臨床治療效果^[6]。

我們研究發(fā)現(xiàn)相同HBV-M模式中HBV-DNA與HBV-LP陽性率沒有差異;72例HBV-DNA陽性血清中，HBV-LP的陽性率是83.8%（62/72），HBeAg的陽性率是43.2%（32/72）。這些結(jié)果表明HBV-LP對判斷乙肝患者病毒復(fù)制情況明顯優(yōu)于HBeAg，并且它與HBV-DNA在陽性檢出率效果類似，因此HBV-LP能準確反映乙肝病毒復(fù)制水平，可以作為臨床判斷乙肝病毒復(fù)制情況的血清學(xué)指標。

總之，HBV-LP作為判斷乙肝病毒復(fù)制的血清學(xué)指標，特別是在HBeAg檢測表現(xiàn)陰性情況下，它能準確反映出乙肝患者體內(nèi)病毒復(fù)制情況，在臨床應(yīng)用中有非常重要的應(yīng)用價值，同時由于它的檢測費用經(jīng)濟、步驟簡便、操作容易可行，也不需要建立專用實驗室及購買昂貴的檢測儀器，特別適合在基層醫(yī)院推廣使用，這對臨床診斷和治療效果評價有重要作用。

參考文獻

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