試論臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)

包煥平

摘 要：隨著科技的迅速發(fā)展，化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)已被廣泛應(yīng)用到臨床醫(yī)學(xué)和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域，是繼熒光免疫、繼酶免疫以及發(fā)射免疫等測(cè)定后的一種免疫技術(shù)。在臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)，為臨床檢驗(yàn)提供診斷依據(jù)，提高檢驗(yàn)的準(zhǔn)確度。本文主要探討發(fā)光免疫技術(shù)的概況，并對(duì)臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)進(jìn)行分析。

關(guān)鍵詞：臨床檢驗(yàn)；應(yīng)用；化學(xué)發(fā)光；免疫技術(shù)

化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)具有標(biāo)本用量較少、穩(wěn)定性較高、標(biāo)記物制備較容易、不污染環(huán)境、操作簡(jiǎn)便以及便于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)，主要將免疫分析與化學(xué)反光分析相結(jié)合，被廣泛應(yīng)用到臨床醫(yī)學(xué)和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)中?；瘜W(xué)發(fā)光免疫技術(shù)是繼酶免疫、發(fā)射免疫以及熒光免疫測(cè)定之后的免疫技術(shù)，在臨床檢驗(yàn)中經(jīng)常需要檢測(cè)和分析表征性物質(zhì)，以判斷疾病以及身體病理特征。通過(guò)在臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)，快速分析各種物質(zhì)，能夠提高檢測(cè)的靈敏度與準(zhǔn)確度。

1 化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)的概況

化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)主要包括化學(xué)發(fā)光分析和免疫分析系統(tǒng)，用于抗原、抗體、酶、激素、維生素以及脂肪酸等檢測(cè)分析技術(shù)。化學(xué)發(fā)光分析是根據(jù)免疫反應(yīng)情況，待免疫反應(yīng)完之后加入酶或氧化劑等發(fā)光底物，發(fā)光底物經(jīng)過(guò)氧化會(huì)形成處于激發(fā)狀態(tài)的中間體，通過(guò)發(fā)射光子來(lái)釋放能量，以達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。而免疫分析是在抗體或抗原之上利用標(biāo)記物進(jìn)行直接的標(biāo)記，標(biāo)記物為化學(xué)物質(zhì)或酶，待抗體或抗原發(fā)生反應(yīng)后，會(huì)產(chǎn)生帶有抗體免疫的復(fù)合物。

化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)的原理是以化學(xué)發(fā)光劑對(duì)抗體或抗原進(jìn)行直接標(biāo)記，待磁顆粒性、抗體或抗原發(fā)生反應(yīng)之后，在磁場(chǎng)的作用下，分離處于游離狀態(tài)和結(jié)合狀態(tài)的化學(xué)發(fā)光劑，將發(fā)光促進(jìn)劑加入到結(jié)合狀態(tài)的部分，使其進(jìn)行快速的發(fā)光反應(yīng)，并以定性或定量的方式檢測(cè)處于結(jié)合狀態(tài)的發(fā)光強(qiáng)度?；瘜W(xué)發(fā)光免疫技術(shù)系統(tǒng)具有操作較為簡(jiǎn)單，結(jié)果較為準(zhǔn)確可靠，且自動(dòng)化程度較高以及試劑儲(chǔ)存的時(shí)間較長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn)，可根據(jù)激發(fā)態(tài)分子能量的來(lái)源，將化學(xué)發(fā)光的過(guò)程分為生物發(fā)光、光照發(fā)光和化學(xué)發(fā)光。

2 化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)在臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用的類別

化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)在臨床檢驗(yàn)中，主要分為酶催化化學(xué)發(fā)光的免疫分析、直接標(biāo)記發(fā)光物質(zhì)的免疫分析以及電化學(xué)發(fā)光的免疫分析。酶催化化學(xué)發(fā)光的免疫分析是通過(guò)抗體或抗原在標(biāo)本中發(fā)生反應(yīng)之時(shí)，采用發(fā)光的酶作為標(biāo)記物。直接標(biāo)記發(fā)光物質(zhì)的免疫分析是采用吖啶酯對(duì)體或抗原進(jìn)行直接標(biāo)記，待抗體或抗原發(fā)生免疫反應(yīng)后會(huì)產(chǎn)生一種復(fù)合物，加入氫氧化鈉和帶有雙氧水的氧化劑后呈堿性，出現(xiàn)發(fā)光、分解等現(xiàn)象。而電化學(xué)發(fā)光的免疫分析過(guò)程包括化學(xué)反光和電化學(xué)，將三丙胺作為電子供體，對(duì)抗體或抗原用三聯(lián)吡啶釕進(jìn)行標(biāo)記，在電場(chǎng)的作用下，通過(guò)電子轉(zhuǎn)移而產(chǎn)生發(fā)光反應(yīng)。

3 在臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)的分析

3.1 應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)分析傳染性疾病

乙型肝炎病毒是血清學(xué)的標(biāo)志物，是治療和評(píng)價(jià)機(jī)體免疫功能的重要指標(biāo)。診斷乙型肝炎病毒中的抗體或抗原的表面部分是否受到感染，這樣的診斷為常規(guī)酶法，但常規(guī)酶法會(huì)使低病毒含量的攜帶者出現(xiàn)漏檢的情況?；瘜W(xué)發(fā)光免疫技術(shù)和以前的常規(guī)酶法相比，具有線性范圍寬和高靈敏度等特點(diǎn)，在臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)對(duì)傳染性疾病進(jìn)行分析，如對(duì)于已感染免疫病毒的兒童，應(yīng)對(duì)其體內(nèi)的甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒以及單純皰疹病毒以Bowser等進(jìn)行測(cè)定，檢測(cè)出的靈敏度較高。

3.2 應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)分析腫瘤標(biāo)志物

腫瘤標(biāo)志物指腫瘤腫瘤在發(fā)生與增殖的過(guò)程中，通過(guò)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行合成、釋放或者是機(jī)體與腫瘤細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生酶、激素、白質(zhì)以及癌基因產(chǎn)物等物質(zhì)?；颊叩募?xì)胞、血液以及組織中都會(huì)有腫瘤標(biāo)志物，利用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)能夠快速的尋找到難以發(fā)現(xiàn)的腫瘤標(biāo)志物。通過(guò)對(duì)患者進(jìn)行體外的輔助診斷以及術(shù)后監(jiān)測(cè)，能夠緩解患者的病痛。采用Mac等診斷和監(jiān)測(cè)食管癌患者的病情，如對(duì)血清中的癌胚抗原濃度、鱗狀細(xì)胞癌的抗原濃度等進(jìn)行檢測(cè)。以Raslan和Shabin對(duì)健康孕婦德陰道液和胎膜早破中的人絨毛膜促線性激素和AFP標(biāo)志物進(jìn)行比較，AFP的特異性和敏感度較高。

3.3 應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)分析心臟疾病

在臨床檢驗(yàn)中，經(jīng)常以同丁酶對(duì)心臟疾病患者進(jìn)行定量測(cè)定。心肌損傷的標(biāo)志物包括肌酸激酶、肌紅蛋白和肌鈣蛋白T，應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)分析心臟疾病的標(biāo)記物，能夠提高檢測(cè)的準(zhǔn)確度。通過(guò)采用Dutra等將肌鈣蛋白T（cTnT）的受體分子制成免疫傳感器，應(yīng)用于早期心肌梗死的臨床檢測(cè)，其方法較好，具有相關(guān)性，可以應(yīng)用到臨床中對(duì)標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)。

3.4 應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)分析激素

激素是細(xì)胞和細(xì)胞間進(jìn)行信息傳遞的媒介，主要指散在內(nèi)分泌細(xì)胞中或內(nèi)分泌腺所分泌出來(lái)的高效能的活性物質(zhì)。在臨床檢測(cè)中應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)分析和測(cè)定性激素、甲狀腺激素等激素，能夠?yàn)榕R床診斷和治療提供比較可靠、準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)，提高檢測(cè)的靈敏度和特異性。通過(guò)以Vutyavanich等對(duì)血清中的促黃體生成素、睪丸素、促卵泡生成素以及催乳素等進(jìn)行檢測(cè)，以Karlsson對(duì)患者甲狀旁腺進(jìn)行檢測(cè)，以Gayk和Schmidt對(duì)骨代謝標(biāo)志物中的降鈣素進(jìn)行測(cè)量，并和放射免疫法相比，其精密度和準(zhǔn)確度較高。

3.5 應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)分析其他物質(zhì)

在臨床檢驗(yàn)中，應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)還可以分析細(xì)菌、維生素、免疫球蛋白、細(xì)胞因子、酶以及基因等。通過(guò)Dasgupta等對(duì)血清中高辛含量進(jìn)行檢測(cè)，以Quan等對(duì)食物中含有的鹽曲霉毒素B1進(jìn)行檢測(cè)。

綜上所述，化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)具有不污染環(huán)境、操作簡(jiǎn)便以及便于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用到臨床醫(yī)學(xué)和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)中。在臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)，能夠?yàn)榕R床檢驗(yàn)提供數(shù)據(jù)依據(jù)，提高檢測(cè)的精密度和準(zhǔn)確度。

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