基于證效相關(guān)研究清利濕熱方中醫(yī)功效及降血尿酸作用機(jī)制

劉金蓮　呂美豫　梁唯燦　邸松蕊　南海鵬　王林元　張建軍　趙晉燕　曹春然　王淳

摘要 目的：建立濕熱內(nèi)蘊證候大鼠模型，研究具有降血尿酸作用的清利濕熱方的中醫(yī)功效，以證測效揭示清利濕熱降血尿酸作用機(jī)制。方法：將48只SD大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、四妙丸組以及清利濕熱方低、中、高劑量組，每組8只。采用飼喂高脂高糖飼料，自由飲用蜂蜜水，并隔天灌胃豬油脂或酒，建立濕熱內(nèi)蘊證候大鼠模型，觀察清利濕熱方對大鼠一般狀態(tài)的影響。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血清熱激蛋白70（HSP70）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β），促胃液素（GAS）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）含量以及血漿胃動素（MTL）、肝臟組織Na+-K+-ATP酶含量，免疫組織化學(xué)法檢測胃腸組織水孔蛋白3（AQP3）、水孔蛋白4（AQP4）含量，采用蛋白質(zhì)印跡法檢測結(jié)腸組織中TOLL樣受體4（TLR4）、核因子κBp65表達(dá)量。結(jié)果：模型組體質(zhì)量下降（P<0.05，P<0.01），HSP70、TNF-α、IL-1β升高（P<0.05，P<0.01，P<0.001），胃腸組織中AQP3表達(dá)量下降（P<0.05），AQP4表達(dá)量上升（P<0.01，P<0.001），GAS含量下降（P<0.01），IgM含量升高（P<0.01），結(jié)腸組織TLR4表達(dá)量增加（P<0.01）。清利濕熱方能增加大鼠體質(zhì)量，降低HSP70、TNF-α、IL-1β含量（P<0.05，P<0.01，P<0.001），升高胃腸組織AQP3表達(dá)量（P<0.05，P<0.01，P<0.001），降低AQP4表達(dá)量（P<0.05），升高GAS、Na+-K+-ATP酶含量（P<0.05，P<0.001），降低IgM含量（P<0.05，P<0.01）。結(jié)論：飼喂高脂高糖飼料，自由飲用蜂蜜水，并隔天灌胃油脂/酒，可以成功建立高尿酸血癥濕熱內(nèi)蘊證候模型，清利濕熱方可以從大鼠一般狀態(tài)、體質(zhì)量、熱激蛋白以及炎癥介質(zhì)、水孔蛋白、胃腸激素、免疫等多方面改善大鼠濕熱狀態(tài)，發(fā)揮清利濕熱功效。清利濕熱方具有降血尿酸作用，其作用機(jī)制可能與下調(diào)TLR4，核因子κBp65有關(guān)。

關(guān)鍵詞 清利濕熱方；濕熱內(nèi)蘊；證候模型；高尿酸血癥

Traditional Chinese Medicine Efficacy of Qingli Shire Prescription and Its Mechanism of Lowering Blood Uric Acid Based on Syndrome-efficacy Study

LIU Jinlian1，LYU Meiyu1，LIANG Weican1，DI Songrui1，NAN Haipeng1，WANG Linyuan1，ZHANG Jianjun1，ZHAO Jinyan2，CAO Chunran2，WANG Chun1

（1 Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100029，China; 2 Key Laboratory for Safety Research and Evaluation of Innovative Drugs of National Medical Products Administration，Beijing Institute for Drug Control，Beijing 102206，China）

Abstract Objective：To study the traditional Chinese medicine（TCM） efficacy of Qingli Shire Prescription（QLSR） by establishing a rat model of internal retention of dampness-heat，to reveal its mechanism of lowing blood uric acid based on testing efficacy by syndrome.Methods：A total of 48 SD rats were randomized into blank group，model group，Simiao Pills group and QLSR low-，medium-and high-dose groups，with 8 in each group.A rat model of internal retention of dampness-heat was established by high-fat and high-sugar diet+free honey water+lard/alcohol every other day（ig）.The general state of rats was observed.The serum heat shock protein 70（HSP70），tumor necrosis factor-α（TNF-α），interleukin-1β（IL-1β），gastrin（GAS），immunoglobulin G（IgG），immunoglobulin M（IgM），plasma motilin（MTL） and Na+-K+-ATP in liver tissue were detected by enzyme-linked immunosorbent assay.The contents of aquaporin 3（AQP3） and aquaporin 4（AQP4） in gastrointestinal tissues were determined by immunohistochemistry.Western blot was used to detect the expressions of Toll-like receptor 4（TLR4） and nuclear factor-kappa B（NF-κB） p65 in colon tissues.Results：In the model group，body weight loss was observed（P<0.05，P<0.01）; the levels of HSP70，TNF-α and IL-1β were increased（P<0.05，P<0.01，P<0.001）; the expression of AQP3 was down-regulated（P<0.05），while the expression of AQP4 was up-regulated（P<0.01，P<0.001）; the content of GAS was lowered（P<0.01），while the content of IgM was elevated（P<0.01）; an increase was found in the expression of TLR4（P<0.01）.QLSR increased the body weight of rats，down-regulated the levels of HSP70，TNF-α and IL-1β（P<0.05，P<0.01，P<0.001），the expression of AQP4（P<0.05） and the content of IgM（P<0.05，P<0.01） and up-regulated the expression of AQP3（P<0.05，P<0.01，P<0.001） and the contents of GAS and Na+-K+-ATP（P<0.05，P<0.001）.Conclusion：The syndrome model suitable for evaluating the internal retention of dampness-heat of hyperuricemia can be successfully established by high-fat and high-sugar diet+free honey water+lard/alcohol every other day（ig）.QLSR improves the dampness-heat state of rats from the general state，body weight，heat shock protein，inflammatory factors，aquaporins，gastrointestinal hormones，immunity and other aspects，and exerts the effect of clearing dampness-heat.The prescription lowers blood uric acid，and its mechanism may be related to the down-regulation of TLR4 and NF-κB p65.

Keywords Qingli Shire Prescription; Internal retention of dampness-heat; Syndrome model; Hyperuricemia

中圖分類號：R259文獻(xiàn)標(biāo)識碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2023.01.007

高尿酸血癥發(fā)病率逐年增高且呈低齡化趨勢［1］，是痛風(fēng)的病理生理基礎(chǔ)。中醫(yī)認(rèn)為高尿酸血癥是由于長期嗜食肥甘厚味導(dǎo)致脾胃運化失司，進(jìn)而生濕成痰，郁久化熱，流注于經(jīng)脈形成高尿酸血癥。依據(jù)中醫(yī)辨證可涉及多種證型，其中濕熱內(nèi)蘊型占比最大［2］。中藥治療高尿酸血癥多以健脾化痰、清熱利濕為主要原則［3］。

前期動物實驗表明清利濕熱方具有降血尿酸作用［4］。本研究通過建立濕熱內(nèi)蘊證候模型，以具有清利濕熱降血尿酸作用的四妙丸為陽性對照藥，基于中醫(yī)證候探討清利濕熱方降血尿酸清利濕熱功效機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動物 48只6周齡健康雄性SD大鼠，體質(zhì)量（180±20）g，購自斯貝福（北京）生物技術(shù)有限公司，許可證號：SCXK（北京）2019-0010。飼養(yǎng)于北京中醫(yī)藥大學(xué)無特定病原體（Specific Pathogen-Free，SPF）級動物房。實驗期間大鼠自由飲水，動物房室溫為20～22 ℃，相對濕度60%～70%，12 h燈照、黑暗模擬晝夜交替。實驗符合相關(guān)倫理要求（倫理審批號：BUCM-4-2020100907-4030）。

1.1.2 藥物 清利濕熱方由土茯苓、車前子、茯苓、菊苣、葛根、川牛膝組成，質(zhì)量比為3∶2∶3∶3∶2∶2，土茯苓（安國市一方藥業(yè)有限公司，批號：Y20121015），車前子（安國市一方藥業(yè)有限公司，批號：21011404），茯苓（安國市一方藥業(yè)有限公司，批號：20112013），菊苣（江山市萬里中藥材有限公司，批號：WLJJ191201），葛根（安國市一方藥業(yè)有限公司，批號：Y20121011），川牛膝（安國市一方藥業(yè)有限公司，批號：Y20120102）；四妙丸（吉林紫鑫藥業(yè)股份有限公司，批號：批號：210107）；蜂蜜（上海冠生園蜂制品有限公司，許可證號：SC12731012000317）；紅星二鍋頭酒（北京紅星股份有限公司，許可證號：QS110015010349）；豬油脂（斯貝福（北京）生物技術(shù)有限公司，許可證號：SCXK（北京）2019-0010）。

1.1.3 試劑與儀器 熱激蛋白70（Heat Shock Protein，HSP70）試劑盒（北京康佳宏原生物科技有限公司，批號：20210305），腫瘤壞死因子-α（Tumor Necrosis Factor-α，TNF-α）試劑盒（北京康佳宏原生物科技有限公司，批號：20210305），白細(xì)胞介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）試劑盒（北京康佳宏原生物科技有限公司，批號：20210305），促胃液素（Gastrin，GAS）試劑盒（中尚博奧生物科技有限公司，批號：20210309），胃動素（Motilin，MTL）試劑盒（北京康佳宏原生物科技有限公司，批號：20210301），Na+-K+-ATP酶試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號：20210121）；免疫球蛋白G（Immunoglobulin G，IgG）試劑盒（批號：20210301）、免疫球蛋白M（Immunoglobulin M，IgM）試劑盒（批號：20210301），均購自安徽巧依生物技術(shù)研究所；臺式離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠，型號：TGL-16c）；全自動生化分析儀（深圳雷杜生命科技，型號：Chemray 240）；酶標(biāo)分析儀（無錫華衛(wèi)德朗儀器有限公司，型號：DR-200BS）；電子天平［梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司，型號：PL-203］。

1.2 方法

1.2.1 分組與模型制備 將48只SD大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機(jī)分為6組，空白組、模型組、四妙丸組、清利濕熱方低、中、高劑量組，每組8只。造模方法：空白組普通飼料喂養(yǎng)，自由飲用蒸餾水。其余組均以高脂高糖飼料喂養(yǎng)，給予100 g/Ｌ蜂蜜水自由飲用，分別以油脂（5 g/kg）和52%紅星二鍋頭（5 mL/kg）交替聯(lián)合灌胃，連續(xù)30 d［5］。

1.2.2 給藥方法 將6味藥物加水微沸提取，第1次加12倍量的水，提取時間1.5 h，第2次加10倍量的水，提取時間為1 h；將2次提取的溶液合并，通過濃縮、干燥、粉碎、過篩，得到干膏粉，將干膏粉再溶于水，配置成相應(yīng)濃度的低、中、高劑量灌胃液?？瞻捉M、模型組、四妙丸組（1.2 g/kg，相當(dāng)于人用量12 g/d），以及清利濕熱方低、中、高劑量組，以生藥量換算分別為1.25 g/kg、2.5 g/kg、5 g/kg（分別相當(dāng)于成人每日臨床用量的5倍、10倍、20倍）；四妙丸組下午（15：00）灌胃給予四妙丸，清利濕熱方低、中、高劑量組下午（15：00）灌胃給予稀釋至同體積的不同劑量的受試樣品，灌胃劑量為1 mL/100 g，根據(jù)體質(zhì)量變化調(diào)整灌胃量，連續(xù)給藥30 d。取材前1 d禁食不禁水，戊巴比妥鈉麻醉，腹主動脈采血，靜置2～3 h，以3 500 r/min，離心半徑20 cm，離心15 min后，取血清和血漿，-80 ℃冰箱保存待測。取大鼠結(jié)腸組織（回盲部下1 cm處）、胃組織胃竇部以及肝臟組織，用生理鹽水沖洗干凈，迅速放入液氮罐中，并轉(zhuǎn)入-80 ℃冰箱保存待測。

1.2.3 檢測指標(biāo)與方法

1.2.3.1 一般觀察 記錄各組小鼠飲食、毛發(fā)、精神活動狀態(tài)以及體質(zhì)量的變化。

1.2.3.2 熱激蛋白70以及相關(guān)炎癥介質(zhì) 取血清，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗按試劑盒說明書檢測HSP70、TNF-α、IL-1β含量。

1.2.3.3 水孔蛋白和胃腸激素 免疫組織化學(xué)法檢測大鼠胃組織AQP3、AQP4，腸組織AQP3、AQP4含量。取血清，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗按試劑盒說明書檢測GAS含量。取血漿，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗按試劑盒說明書檢測MTL含量。

1.2.3.4 免疫因子以及Na+-K+-ATP酶 取血清，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗按試劑盒說明書檢測IgG、IgM含量。將肝臟組織解凍后，以3 500 r/min，離心半徑20 cm，離心15 min后，取上清液，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗按照試劑盒說明書檢測Na+-K+-ATP酶含量。

1.2.3.5 檢測結(jié)腸組織中Toll樣受體（Toll-like Receptor，TLR）4、核因子κBp65表達(dá)量 采用蛋白質(zhì)免疫印跡法（Western Blotting）測定結(jié)腸組織中TLR4，核因子κBp65表達(dá)量。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，若符合正態(tài)分布，則使用單因素方差分析，各組間比較方差齊性采用最小顯著性差異法（LSD）進(jìn)行分析；若各組間方差不齊則采用Dunnett′s T3進(jìn)行分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般情況 適應(yīng)性喂養(yǎng)期間，大鼠的飲食、二便以及精神狀況都良好。造模后，隨著油脂、蜂蜜以及乙醇攝入的增加，模型組大鼠出現(xiàn)大便稀溏，肛周污穢，陰囊脫垂，毛發(fā)干枯發(fā)黃，倦怠無力、精神狀態(tài)差等癥狀。與模型組比較，給藥組大鼠大便正常，精神狀態(tài)佳。與空白組比較，模型組體質(zhì)量第7天、第14天、第21、第28天降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。與模型組比較，清利濕熱方低、中、高劑量組差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

2.2 清利濕熱方對濕熱內(nèi)蘊證大鼠血清HSP70、TNF-α、IL-1β含量的影響 與空白組比較，模型組HSP70含量升高（P<0.01）、TNF-α含量升高（P<0.001）、IL-1β含量升高（P<0.05）。與模型組比較，清利濕熱方中、高劑量組HSP70含量下降（P<0.01，P<0.001）。清利濕熱方高劑量組TNF-α含量下降（P<0.05）。清利濕熱方低劑量組、中劑量組、高劑量組IL-1β下降（P<0.05，P<0.01，P<0.001）。見表2。

2.3 清利濕熱方對濕熱內(nèi)蘊證大鼠胃腸組織AQP3平均光密度值的影響 與空白組比較，模型組大鼠胃腸組織中AQP3表達(dá)量下降（P<0.05）；與模型組比較，四妙丸組、清利濕熱方低、中、高劑量組大鼠胃、腸組織AQP3表達(dá)量上升（P<0.05，P<0.01，P<0.001）。見表3。見圖1～2。

2.4 清利濕熱方對濕熱內(nèi)蘊證大鼠胃腸組織AQP4平均光密度值的影響與空白組比較 濕熱模型組大鼠胃腸AQP4表達(dá)量上升（P<0.01，P<0.001）；與模型組比較，四妙丸組、清利濕熱方低、中、高劑量組大鼠胃腸AQP4表達(dá)量下降（P<0.05）。見表4。見圖3～4。

2.5 清利濕熱方對濕熱內(nèi)蘊證大鼠血清GAS、血漿MTL、肝臟Na+-K+-ATP酶含量的影響 與空白組比較，模型組GAS降低（P<0.001），MTL、Na+-K+-ATP酶有降低的趨勢，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。與模型組比較，清利濕熱方中、高劑量組GAS含量提高（P<0.001）。與模型組比較，四妙丸組、清利濕熱方低、中、高劑量組大鼠MTL差異無統(tǒng)計學(xué)意義。清利濕熱方高劑量組Na+-K+-ATP酶含量上升（P<0.05）。見表5。

2.6 清利濕熱方對濕熱內(nèi)蘊證大鼠IgG、IgM含量的影響 與空白組比較，模型組IgG有升高趨勢，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。IgM含量上升（P<0.01）。與模型組比較，四妙丸組、清利濕熱方低、中、高劑量組大鼠IgG含量差異無統(tǒng)計學(xué)意義。清利濕熱方中、高劑量組IgM含量下降（P<0.05，P<0.01）。見表6。

2.7 清利濕熱方對濕熱內(nèi)蘊證大鼠結(jié)腸組織TLR4、核因子κBp65表達(dá)量的影響 與空白組比較，模型組結(jié)腸組織中TLR4表達(dá)量升高（P<0.01），核因子κBp65表達(dá)量升高，但是差異無統(tǒng)計學(xué)意義。與模型組比較，清利濕熱方中劑量組和清利濕熱方高劑量組TLR4表達(dá)量下降（P<0.05，P<0.01）。見表7，圖5。

3 討論

目前濕熱內(nèi)蘊證候總體的建模原則為“外濕＋內(nèi)濕＋疫戾邪氣”［6］，即“人工氣候箱＋高脂高糖飼料＋生物致病因子”，在濕熱內(nèi)蘊證發(fā)病機(jī)制上，從水代謝、免疫功能、胃腸激素等多角度進(jìn)行研究探討［7］。高尿酸血癥的發(fā)生大多由于飲食結(jié)構(gòu)發(fā)生顯著改變，飲食不節(jié)或飲酒，損傷脾胃，水濕內(nèi)停，日久濕熱內(nèi)蘊，而非外來濕邪和客邪所致［8］。因此，本實驗選擇以高脂高糖飲食加蜂蜜水飲用喂養(yǎng)實驗動物，并交替灌胃油脂和酒，以達(dá)到“太陰內(nèi)傷、濕飲停聚”的目的，符合臨床高尿酸血癥的發(fā)病機(jī)制。

清利濕熱方由土茯苓、車前子、茯苓、菊苣、葛根、川牛膝組成，方中土茯苓、車前子共為君藥，土茯苓甘、淡、平，解毒、除濕、通利關(guān)節(jié)［9］，《本草正義》記載土茯苓具有“利濕去熱，能入絡(luò)，搜剔濕熱之蘊毒”功效［10］，數(shù)據(jù)挖掘表明，土茯苓為治療高尿酸血癥使用頻率最高的藥物［3］；車前子甘、寒，清熱利濕［9］，土茯苓、車前子是治療高尿酸血癥常用藥對。茯苓健脾利濕，合以菊苣健胃消食，二者相合，助君藥健脾利濕除痹，共為臣藥。佐藥葛根升發(fā)清陽，助茯苓、菊苣運化。川牛膝補(bǔ)益肝腎，利尿通淋，與茯苓配伍，既可助君祛濕除痹又可補(bǔ)腎健脾，是為使藥，諸藥同用，共奏清利濕熱、運脾泄?jié)嶂Γ?1］。

熱激反應(yīng)是最常見的細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)之一，其作用機(jī)制與中醫(yī)學(xué)“熱證”的發(fā)病機(jī)制相似［12］。HSP在遭受到熱以及其他刺激時，其表達(dá)量明顯增加。HSP70是研究的最為深入的蛋白之一，諸多實驗證實，HSP70可作為濕熱證辨證論治“熱”的量化指標(biāo)［13-14］。清利濕熱方可以通過降低HSP70水平發(fā)揮“清熱”功效。水孔蛋白的正常表達(dá)是運化水濕、津液輸布的分子生物學(xué)基礎(chǔ)，水孔蛋白表達(dá)失?？赡苁菨裥靶纬傻闹匾颉Ｓ醒芯孔C實AQP3低表達(dá)可能引起結(jié)腸黏膜對水的吸收減少而導(dǎo)致腹瀉或便溏［15］，與濕熱病理狀態(tài)下會出現(xiàn)便溏這一癥狀符合。AQP4廣泛分布于腦、眼、骨骼肌等，主要影響胃腸道的水代謝以及營養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收。AQP4的升高，說明體內(nèi)水濕停聚，水代謝發(fā)生紊亂［16］。實驗結(jié)果表明，清利濕熱方能提高AQP3蛋白表達(dá)量，下調(diào)AQP4蛋白表達(dá)量，緩解濕熱內(nèi)蘊證候大鼠便溏的癥狀，發(fā)揮利濕功效。GAS和MTL是2種調(diào)節(jié)胃腸主要的激素。有研究證實，GAS和MTL與脾虛密切相關(guān)［17］。GAS可以促進(jìn)胃酸分泌，對胃黏膜細(xì)胞有營養(yǎng)作用，可以促進(jìn)胃腸運動［18］。脾虛濕盛患者促胃液素含量減少，并伴有消化功能低下［19］。MTL是一種多肽，能夠促進(jìn)胃強(qiáng)力收縮和小腸分節(jié)運動，當(dāng)血漿MTL含量升高，腸蠕動加速，會出現(xiàn)腹痛腹瀉癥狀。濕邪致病一般起病緩慢，病程較長，臨床上高脂血癥、糖尿病等都可表現(xiàn)為中醫(yī)濕滯脾胃證，這些病的共同點是都有胃腸動力減弱。清利濕熱方能提高血清GAS含量，其作用途徑可能是刺激胃腸黏膜G細(xì)胞分泌，這說明清利濕熱方健脾利濕的作用之一體現(xiàn)在增加GAS分泌，以恢復(fù)胃腸功能，達(dá)到利濕功效。

Na+-K+-ATP酶是一種膜結(jié)合蛋白質(zhì)，當(dāng)Na+-K+-ATP酶活性下降時，會造成組織細(xì)胞內(nèi)Na+積聚，而K+減少，引起細(xì)胞、組織水腫，從而導(dǎo)致水電解質(zhì)代謝異常，是中醫(yī)“濕證”的本質(zhì)之一［20］。清利濕熱方可以改善上述濕邪指標(biāo)，發(fā)揮利濕功效。研究表明，濕熱證患者出現(xiàn)免疫功能異常［21］，陳江華等［22］研究發(fā)現(xiàn)，與正常人比較，男性濕熱證患者血清中IgA、IgG、IgM以及C3水平顯著上升。這與本研究結(jié)果一致，說明免疫球蛋白可作為濕熱內(nèi)蘊證候的參考指標(biāo)之一，清利濕熱方可以緩解濕熱證候引起的免疫亢進(jìn)，從而調(diào)節(jié)免疫功能。TLR是免疫反應(yīng)中重要的組成部分［23］，能夠識別病原體、介導(dǎo)跨膜信號轉(zhuǎn)導(dǎo)并誘導(dǎo)活化免疫細(xì)胞而觸發(fā)一系列的炎癥反應(yīng)。TLR4可通過識別外源性病原體相關(guān)分子模式或者內(nèi)源性損傷相關(guān)分子模式形成二聚體，使得Toll/IL-1與MyD88相結(jié)合，然后激活體內(nèi)下游炎癥介質(zhì)核因子κBp65，激活免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)，誘導(dǎo)并釋放出TNF-α、IL-1β等炎癥介質(zhì)，從而發(fā)生炎癥反應(yīng)，當(dāng)IL-1β被激活后，又會進(jìn)一步擴(kuò)大炎癥反應(yīng)，參與高尿酸血癥微炎癥反應(yīng)的進(jìn)展，進(jìn)一步引誘高尿酸血癥疾病的發(fā)生。實驗結(jié)果表明，模型組TLR4/核因子κBp65以及TNF-α、IL-1β升高說明體內(nèi)有炎癥反應(yīng)，清利濕熱方可以下調(diào)結(jié)腸組織TLR4/核因子κBp65表達(dá)量，說明其清熱利濕機(jī)制可能是通過下調(diào)TLR4/核因子κBp65通路實現(xiàn)的，從而起到降尿酸效果。

高尿酸血癥患者逐年增加還會導(dǎo)致各種代謝性疾病，危害廣泛而嚴(yán)重，應(yīng)該提前預(yù)防，降低病痛風(fēng)險，提高生命質(zhì)量［24］。中醫(yī)藥以“整體觀念”和“未病先防”為理論指導(dǎo)具有多途徑、多靶點的優(yōu)勢［25］，因此基于證效相關(guān)理論建立適合中醫(yī)功效的證候動物模型十分必要，未來將以此為基礎(chǔ)開展高尿酸血癥最為常見的濕熱內(nèi)蘊證患者的證候研究，以期從基礎(chǔ)和臨床全面揭示濕熱內(nèi)蘊型高尿酸血癥的本質(zhì)以及清利濕熱法科學(xué)內(nèi)涵。

利益沖突聲明：無。

參考文獻(xiàn)

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（2022-11-15收稿 本文編輯：吳珊）

基金項目：國家重點研發(fā)計劃（2018YFC1706803）作者簡介：劉金蓮（1994.08—），女，博士研究生在讀，研究方向：中藥藥性與藥效作用機(jī)制及物質(zhì)基礎(chǔ)研究，E-mail：947936093@qq.com通信作者：王淳（1970.02—），博士，教授，碩士研究生導(dǎo)師，研究方向：中藥基本理論與臨床應(yīng)用，E-mail：chunwang_2008@163.com；曹春然（1972.08—），女，在職碩士研究生，主任藥師，研究方向：藥理和毒理學(xué)評價，E-mail：chunrancao@bidc.org.cn