人與動物肋骨殘片種屬鑒定方法的研究

李紅彬，陳為龍，費 青，林子清

（1.伊通滿族自治縣公安局，吉林 伊通 130700；2.吉林省公安廳，吉林 長春 130051；3.中國刑事警察學院，遼寧 沈陽 110035）

一、材料與方法

（一）樣本

400例人右側肋骨中段約4cm；13種常見動物右側肋骨中段4cm。其中，每種動物50只共計650只動物。包括：馬、牛、豬、山羊、綿羊、狗、貓、兔、鵝、鴨、雞、龜、鱉。

（二）試劑與儀器

硫瑾（上海國藥集團化學試劑有限公司），苦味酸（沈陽市強華試劑廠），冰凍切片機（Bright Instrument Company LTD Huntingdon England，Made In Britain），Nikon Eclipse 80i高倍顯微鏡（日本尼康），病理圖像處理系統(tǒng)（美國，Motic）。

（三）組織切片的制作

將上述檢材鋸成厚約0.5cm的薄片后，在10%甲醛溶液中固定3天，放入5%硝酸溶液中脫鈣3天（每天更換脫鈣液），水洗12小時后用冰凍切片機切成厚約25μm的切片，經(jīng)硫瑾/苦味酸染色后，用光學顯微鏡在200倍和400倍下拍攝圖片，輸入計算機，并用病理圖像處理系統(tǒng)軟件觀察和測量選定各項指標。

（四）指標的選擇

為了全面研究肋骨的組織學形態(tài)特征，我們從環(huán)層骨板、骨單位、以及骨細胞等多個層次選定了以下25個指標：200倍鏡下一個視野的哈氏系統(tǒng)數(shù)量、面積、直徑，舊骨單位數(shù)量，內(nèi)環(huán)骨板厚度、內(nèi)環(huán)骨板相對厚度、外環(huán)骨板厚度、外環(huán)骨板平均相對厚度，非哈氏管數(shù)量，骨小梁寬度、骨小梁間距、骨小梁面積百分比等12項數(shù)量指標，以及哈氏系統(tǒng)形態(tài)、骨單位排列狀況、舊骨單位的形態(tài)、舊骨單位的排列情況、舊骨單位環(huán)層骨板形態(tài)，以及骨小梁起始部骨單位情況等6項形態(tài)指標；在400倍鏡下哈氏系統(tǒng)的環(huán)層骨板數(shù)量、哈氏管直徑、哈氏管面積，舊骨單位的環(huán)層骨板數(shù)量，骨陷窩的數(shù)量、骨陷窩的面積、骨陷窩的排列狀況等7項指標。每項指標至少觀察4個視野，取4個視野的平均值作為該項指標的測量數(shù)據(jù)。

（五）數(shù)理統(tǒng)計

應用SPSS14統(tǒng)計軟件包對各項數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析，包括每種動物各項指標的平均數(shù)、標準差、兩種動物間各項指標的比較分析、以及二者間的判別分析等。

二、結果

經(jīng)上述切片染色處理后，切片在顯微鏡下顯示骨質(zhì)顏色為深黃色，骨單位、骨陷窩和骨小管被染成紫褐色。在觀察中發(fā)現(xiàn)并經(jīng)統(tǒng)計學分析，在25項觀測指標中，有哈氏系統(tǒng)數(shù)量（X1）、哈氏系統(tǒng)直徑（X2）、哈氏系統(tǒng)面積、環(huán)層骨板數(shù)（X4）、哈氏管直徑（X5）、哈氏管面積（X6）、骨陷窩數(shù)量、以及骨陷窩面積（X16）、骨小梁寬度、骨小梁面積百分比（X18）、骨小梁間距（X19）等11項指標具有明顯的種屬特異性，其他指標沒有明顯差異。依據(jù)這些結果，利用多元判別分析方法，建立了人與動物的股骨種屬鑒別的數(shù)學模型判別公式如下［1］：Y1=人；Y2=動物

Y1=-20.4946+0.0614X1+0.2089X2-0.009X3-0.0373X4+0.0403X5-0.0008X6+0.1425X15+0.1842X16+0.0573X17+0.0007X18+0.0054X19

Y2=-25.7922+0.0899X1+0.2308X2-0.0010X3+0.4454X4+0.0390X5+0.0006X6+0.1406X15+0.2280X16+0.0286X17+0.0070X18+0.0003X19

判別正確率：91.2%

三、討論

人與動物的種屬鑒別歷來是公安實際工作中的熱點之一，也是各國法醫(yī)學家們研究的重點內(nèi)容。藤田等曾對焚燒骨骼進行了種屬鑒別的研究，［2］［3］認為骨骼焚燒后其組織學形態(tài)特征不能被燒毀，可以根據(jù)其形態(tài)特點進行人獸鑒別。Bloom W、Weiss L等對人的骨組織學及常見幾種動物的骨組織學特征進行了描述，［4］［5］但這些研究都存在動物樣本少、不能進行統(tǒng)計學分析的問題，也沒有建立種屬鑒別的數(shù)學判別公式。我們利用人400例和常見動物650例個體的大樣本數(shù)據(jù)，研究改進了骨切片制作方法，選擇肋骨為代表，系統(tǒng)探索了人和動物肋骨的組織學形態(tài)特征，發(fā)現(xiàn)兩者組織學結構存在明顯不同。該結果與張繼宗的報道相近，［6］但二者的觀測指標截然不同，在我們所選擇研究的25項指標中，有11項測量指標具有明顯的差異，具有各自種屬的特點，這些特點為從微觀水平進行人和動物的骨骼種屬鑒別奠定了基礎。

根據(jù)人和動物肋骨的組織學特點，通過多元判別分析，我們建立了鑒別人和動物骨骼碎片種屬鑒別的數(shù)學公式，經(jīng)過盲測分析，其準確判別率可以達到91.2%。該公式的建立，為法醫(yī)學解決可能遇到的需要通過骨骼碎片鑒別是人還是動物的各類刑事案件和民事案件提供了新的有效方法和手段。

［1］林子清，費青，劉維賢.人及常見動物骨骼和牙齒形態(tài)結構特征圖譜［M］.沈陽：遼寧教育出版社，2010.

［1］藤田昌宏，谷井広樹，石橋宏.骨組織の法醫(yī)學的研究（I）焼骨の人獣鑑別［J］.日法醫(yī)誌，1986，（5）.

［2］藤田昌宏，谷井広樹，石橋宏.骨組織の法醫(yī)學的研究（Ⅱ）焼骨の人獣鑑別［J］.日法醫(yī)誌，1988，（6）.

［3］Bloom W，Lon W.A Text book Histology［M］.Tenth Edition，Philadelphia：W.B.SAUNDERS COMPANY，1975.

［4］Weiss L，Greep RQ.Histology［M］.Forth Edition，USA：McGraw-Hill Inc.，1977.

［5］張繼宗.骨骼種屬鑒定的組織學研究［J］.法醫(yī)學雜志，2001，（3）.