北京某奶牛場新孢子蟲病血清學(xué)調(diào)查

韓芳潔，劉 晶，南匯株，劉 群

（中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，北京海淀100193）

北京某奶牛場新孢子蟲病血清學(xué)調(diào)查

韓芳潔，劉 晶，南匯株，劉 群

（中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，北京海淀100193）

新孢子蟲病是由新孢子蟲（Neospora caninum）引起的多種動物共患寄生原蟲病，廣泛流行于世界各地，主要引起懷孕母畜的流產(chǎn)、死胎以及木乃伊胎等，對畜牧業(yè)造成巨大經(jīng)濟損失，對牛的危害最為明顯。新孢子蟲可通過水平傳播和垂直傳播兩種途徑感染，一旦牛群中有牛食入新孢子蟲卵囊，新孢子蟲將會通過垂直傳播在該牛群中散播，感染可持續(xù)存在多年。

已有報道，我國多地的奶牛中普遍存在新孢子蟲感染。牛群中新孢子蟲的傳播來源較多，養(yǎng)殖方式、飼養(yǎng)管理等諸多因素影響著牛群新孢子蟲的感染。我們隨機采集北京某規(guī)?；膛雠Ｖ谎?，利用間接ELISA方法檢測新孢子蟲抗體，結(jié)合該奶牛群體資料信息，分析血清抗體陽性與奶牛年齡、流產(chǎn)發(fā)生以及奶牛之間血緣關(guān)系相關(guān)性，了解該牛場新孢子蟲感染現(xiàn)狀和感染來源，為進一步掌握新孢子蟲在牛群中的感染規(guī)律以及防控牛新孢子蟲病提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 血清某奶牛場奶牛存欄數(shù)約2 400頭，牛場全群牛布魯菌抗體陰性。一年四季均有流產(chǎn)發(fā)生，2014年3月有一流產(chǎn)高峰期，流產(chǎn)多發(fā)于妊娠5～6個月，死胎時有發(fā)生，沒有明確原因。該奶牛場有3只犬和15只左右流浪貓。2014年8月至10月從該奶牛場隨機采集不同年齡奶牛血樣283份。

1.2 檢測方法采用本實驗室建立的檢測牛血清新孢子蟲抗體的間接ELISA試劑盒。

1.3 統(tǒng)計分析應(yīng)用SPSS軟件對不同年齡、流產(chǎn)發(fā)生史和母-犢奶牛的新孢子蟲血清抗體陽性率進行差異性分析。

2 結(jié)果

所采集的283份血清新孢子蟲陽性率為61.84%，其中成年母牛60.82%，后備牛為68.42%，二者差異不顯著。見表1。

表1 奶牛新孢子蟲血清抗體檢測

2.1 不同年齡奶牛血清新孢子蟲抗體檢測對283頭奶牛的血清新孢子蟲抗體檢測結(jié)果進行分析，發(fā)現(xiàn)各年齡段奶牛血清中均可檢測到新孢子蟲抗體，其中4歲齡奶牛的抗體陽性率最低，為41.79%，與其他各年齡組奶牛之間抗體陽性率差異極顯著（P＜0.01）；其他各年齡段奶牛的血清抗體陽性率差異不顯著（P＞0.05），見表2。

表2 各年齡組奶牛新孢子蟲血清抗體檢測

2.2 新孢子蟲血清抗體與奶牛流產(chǎn)相關(guān)性283頭被檢奶牛中，有245頭成年母牛，其中43頭有流產(chǎn)史，202頭無流產(chǎn)史，有流產(chǎn)史奶牛新孢子蟲抗體陽性率高達81.40%，無流產(chǎn)史的奶牛陽性率為56.44%，見表3。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，抗體陽性率與奶牛流產(chǎn)之間存在極顯著差異（P＜0.01），說明奶牛感染新孢子蟲是流產(chǎn)發(fā)生的主要因素。

表3 奶牛新孢子蟲血清抗體陽性與奶牛流產(chǎn)相關(guān)性

2.3 母奶牛與其子代奶牛之間新孢子蟲感染的相關(guān)性比對該牛場68對具有直系親緣關(guān)系的母奶牛與其子代奶牛血清新孢子蟲抗體的檢測結(jié)果，發(fā)現(xiàn)新孢子蟲抗體陽性奶牛所產(chǎn)子代牛的抗體陽性率為93.94%，明顯高于新孢子蟲抗體陰性奶牛所產(chǎn)子代牛的抗體陽性率20.00%，見表4。這一結(jié)果充分表明，垂直傳播是該牛場新孢子蟲感染的主要途徑。

表4 母牛和子代牛血清抗體陽性的相關(guān)性

3 分析與討論

自1988年新孢子蟲被確認以來，世界各地陸續(xù)有關(guān)于各種動物新孢子蟲感染的報道，由于新孢子蟲對奶牛的危害最大，對奶牛新孢子蟲感染的研究報道較多。劉群等（2003）首次報道了其對北京及山西5個奶牛場的40份新孢子蟲血清抗體的檢測結(jié)果，發(fā)現(xiàn)血清抗體陽性率為26.67%［2］。其后，國內(nèi)有數(shù)篇關(guān)于奶牛新孢子蟲感染和檢測的報道，發(fā)現(xiàn)不同區(qū)域不同飼養(yǎng)方式的奶牛新孢子蟲感染率變化較大，姚雷等2009年報道，北京地區(qū)奶牛新孢子蟲抗體陽性率為43.4%，天津某養(yǎng)殖小區(qū)奶牛新孢子蟲抗體陽性率為5.7%［3］。夏惠焰等2011年報道，我國南方某地奶牛新孢子蟲抗體陽性率為18.9%［4］。郝攀等2013年報道，南京某奶牛場新孢子蟲抗體陽性率為12.2%［5］。本試驗利用前期構(gòu)建的間接ELISA法檢測了北京某奶牛場的部分血清樣品，被檢奶牛新孢子蟲抗體陽性率為61.84%。該牛場建于上世紀50年代，設(shè)施較為陳舊，2013年之前，場內(nèi)養(yǎng)殖多條犬并有多條流浪犬自由出入，為新孢子蟲感染和傳播創(chuàng)造了條件。

對照被檢牛的背景資料，發(fā)現(xiàn)不同年齡奶牛的新孢子蟲抗體陽性率不同，年齡較大的奶牛和后備牛的感染率較高，4歲齡奶牛的抗體陽性率最低。究其原因，可能是由于后備牛初次感染新孢子蟲后抗體水平較高，隨著年齡增長，抗體水平逐漸下降，機體處于隱性感染狀態(tài)，導(dǎo)致不易檢出，但隨著年齡增長、妊娠增多或同時感染其他疾病，隱性感染蟲體再次活躍，以致血清抗體水平升高；其次，隨著奶牛飼養(yǎng)時間的增長，與環(huán)境中病原接觸的機會越多，感染機會隨之增加。已有研究表明，動物感染新孢子蟲后可很快轉(zhuǎn)為隱性狀態(tài)，當抗體水平降至一定程度后，會持續(xù)保持較長時間，而當其他因素具備時，可引發(fā)隱性感染蟲體繁殖，導(dǎo)致機體的抗體水平升高［6］。

奶牛感染新孢子蟲的主要臨床癥狀是流產(chǎn)，大量報道顯示，奶牛流產(chǎn)與新孢子蟲血清抗體陽性率密切相關(guān)，新孢子蟲抗體陽性牛比抗體陰性牛更容易發(fā)生流產(chǎn)［7-8］。Koiwai等的研究發(fā)現(xiàn)，血清抗體陽性奶牛的流產(chǎn)率比陰性牛高9.2倍［9］。姚雷等（2009）對北京和天津奶牛研究發(fā)現(xiàn)，新孢子蟲感染奶牛流產(chǎn)率是未感染新孢子蟲奶牛的1.5倍到2.0倍［3］。本研究對比有流產(chǎn)史和無流產(chǎn)史奶牛的新孢子蟲抗體檢測結(jié)果，發(fā)現(xiàn)有流產(chǎn)史的?？贵w陽性率81.40%，無流產(chǎn)史的?？贵w陽性率56.44%，再次證明新孢子蟲感染與奶牛流產(chǎn)的發(fā)生密切相關(guān)。

新孢子蟲是機會性原蟲，一般情況下感染牛并不表現(xiàn)可見癥狀。牛群中新孢子蟲最有效的傳播方式是經(jīng)胎盤垂直傳播給胎兒，一旦新孢子蟲感染牛群，高達90%的子代?？梢越?jīng)胎盤獲得感染［10］，有報道可高達95%［7］。因此，環(huán)境中少量的卵囊就能導(dǎo)致新孢子蟲在牛群中的散播。我們比較了有血緣關(guān)系的奶牛檢測結(jié)果，血清抗體陽性母牛的子代牛陽性率高達93.94%，而血清抗體陰性母牛的子代陽性率為20.00%，二者之間差異極顯著（P＜0.01）。推測該場奶牛群體最初的感染來源于犬，之后通過母代牛與子代牛之間的垂直傳播進一步播散，因此該牛場當前的主要傳播方式是垂直傳播。

本次調(diào)查表明，該牛場存在嚴重的新孢子蟲感染，奶牛流產(chǎn)與新孢子蟲感染密切相關(guān)，垂直傳播是新孢子蟲感染奶牛的主要途徑。

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S852.72+3

B

0529-6005（2015）12-0050-02

2015-07-20

國家奶牛產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系（CARS-37-02A）

韓芳潔（1989-），女，碩士，研究方向為預(yù)防獸醫(yī)學(xué)，E-mail：hanfangjie7549@163.com

劉群，E-mail：qunliu@cau.edu.cn