染色體異常、染色體多態(tài)性與生殖異常的相關(guān)性分析

唐 芳，陶曉海，盧 航，屈艷霞，楊 燁，李雅文，左連東，陳桂蘭

(廣州市人口和計劃生育科學(xué)研究所，廣東 廣州 510410)

染色體異常、染色體多態(tài)性與生殖異常的相關(guān)性分析

唐 芳，陶曉海，盧 航，屈艷霞，楊 燁，李雅文，左連東，陳桂蘭

(廣州市人口和計劃生育科學(xué)研究所，廣東 廣州 510410)

目的 探討染色體異常、染色體多態(tài)性與不孕不育、不良妊娠等生殖異常的關(guān)系。方法收集本所近5年生殖異常(不孕不育和不良妊娠)患者150例，行外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)及染色體制片，G顯帶分析。結(jié)果檢出染色體異常9例（克氏綜合征2例、特納綜合征2例、平衡易位2例、羅氏易位2例和倒位1例)，染色體異常發(fā)生率為6.0%；檢出染色體多態(tài)性32例，染色體多態(tài)性發(fā)生率為21.33%。其中，D/Gs+和1,9,16qh+是最主要的染色體多態(tài)類型。性染色體異常和性染色體多態(tài)性主要發(fā)生在不孕不育組；常染色體異常和常染色體多態(tài)性主要發(fā)生在不良妊娠組。結(jié)論染色體異常和染色體多態(tài)性是可能導(dǎo)致不孕不育及不良妊娠的重要原因，對生殖異常患者進(jìn)行染色體檢查很有必要。

不孕不育；不良妊娠；染色體異常；染色體多態(tài)性

復(fù)發(fā)性流產(chǎn)、死胎等不良妊娠和不孕不育是婦產(chǎn)科常見疾病，其病因很多，包括內(nèi)分泌因素、免疫因素、解剖因素、遺傳因素等[1-2]，其中染色體異常是一個很重要的遺傳因素。本文對廣州市人口和計劃生育科學(xué)研究所2009年1月至2014年6月收治的150例生殖異?；颊叩娜旧w檢查結(jié)果進(jìn)行分析，報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 150例患者，其中不孕不育者48例，平均年齡(30.63±7.30)歲；不良妊娠者(包括自然流產(chǎn)、死胎、生育病殘兒等)102例，平均年齡(31.14±4.14)歲。男性84例，平均年齡(36.0±5.63)歲；女性66例，平均年齡(29.35±6.72)歲。

1.2 方法 采取所有患者的外周血2～3ml，將外周血無菌接種到培養(yǎng)瓶中，放入37℃培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)，培養(yǎng)72 h后收集細(xì)胞、制作染色體片、染色體G顯帶(必要時加做C帶顯色)具體步驟見參考文獻(xiàn)[3]。每例患者平均計數(shù)30個核型，分析3～5個核型，異常核型則增加計數(shù)和分析核型的量。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，計數(shù)資料的組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 染色體異常和染色體多態(tài)性的核型分布情況 150例患者中共檢出9例染色體異常和32例染色體多態(tài)性。其中不孕不育組檢出5例染色體異常，異常率為10.42%；不良妊娠組檢出4例，異常率為3.92%，兩組之間進(jìn)行比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=2.441，P＞0.05)。不孕不育組檢出11例染色體多態(tài)性，多態(tài)性率為20.59%；不良妊娠組檢出21例染色體多態(tài)性，多態(tài)性率為20.59%，兩組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.218，P＞0.05)。染色體異常的核型和染色體多態(tài)性的核型具體見表1。

表1 41例異常染色體異常和多態(tài)的核型分布情況

2.2 各種類型染色體多態(tài)性的檢出情況 32例染色體多態(tài)性患者中D/Gs+11例、1，9，16qh+10例、Y多態(tài)9例、Inv(9)2例。D/Gs+和1，9，16qh+是最主要的染色體多態(tài)類型。D/Gs+檢出率為7.33%，構(gòu)成比為34.38%；1，9，16qh+檢出率為6.67%，構(gòu)成比為31.25%。

2.3 兩組患者的常染色體異常和多態(tài)性與性染色體異常和多態(tài)性比較 不孕不育組性染色體異常和多態(tài)性總發(fā)生率為20.83%，不良妊娠組為3.92%，兩組比較差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=11.03，P＜0.01)；不孕不育組常染色體異常和多態(tài)性發(fā)生率為12.50%，不良妊娠組為20.58%，兩組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=1.45，P＞0.05)。

3 討論

生殖異?；颊叩牡某Ｒ娙旧w異常包括克氏綜合征、特納綜合征、平衡易位、羅氏異位、倒位等。本文150例患者中發(fā)現(xiàn)9例染色體異常，異常率為6.0%，高于一般人群染色體異常發(fā)生率(0.6%)[4]，可能與選擇的分析對象有關(guān)。不孕不育患者組檢出5例染色體異常(2例克氏綜合征、2例為特納綜合征、1例X染色體倒位)?？耸暇C合征(47，XXY)患者在青春期前癥狀不明顯，難以檢查出，成年后患者多因小睪丸、無精子癥、不育而就診。2例特納綜合征(1例46，X，i(X)、1例46，XY[96]/45，X[4])中前者社會性別為女性，臨床表現(xiàn)為身材矮小、生殖器與第二性征不發(fā)育等；后者社會性別為男性，臨床表現(xiàn)為無精子癥。X染色體倒位[46，Y，inv(X)(p21；q31)]，臨床表現(xiàn)為男性少、弱精癥。不良妊娠史患者組檢出4例染色體異常(2例平衡易位、2例羅氏易位)。平衡易位表型正常，但與正常人婚配后，理論上形成18種配子(1種正常，1種平衡異位攜帶者，其余16種為三體、單體、部分單體等不平衡個體)，當(dāng)配子為三體、單體、部分單體等不平衡個體時，臨床表現(xiàn)多表現(xiàn)為自然流產(chǎn)和胎兒畸形[5]。非同源羅氏易位攜帶，其表型正常，但與正常配子結(jié)合的子代中有1/6正常，1/6為攜帶者，其余4/6為不平衡合子，不平衡合子將流產(chǎn)或死胎[5]。

染色體多態(tài)性主要表現(xiàn)為異染色質(zhì)的變異，過去人們通常認(rèn)為異染色質(zhì)無特殊功用，也無表型效應(yīng)。但近年的研究表明，染色體多態(tài)性不但有臨床效應(yīng)而且極可能與生殖異常等密切相關(guān)[6-7]。本文發(fā)現(xiàn)染色體多態(tài)32例[1，9，16qh+10例、Inv(9)2例、D/Gs+11例、Y多態(tài)9例]，多態(tài)率為21.33%，高于人群中染色體多態(tài)的發(fā)生率(2.6%)[4]。不孕不育組11例，不良妊娠組21例，兩組比較發(fā)生率差異無統(tǒng)計意義(P＞0.05)。說明與染色體多態(tài)相關(guān)的生殖異常臨床表現(xiàn)既可以是不孕不育也可以是不良妊娠。D/Gs+和1，9，16qh+是最主要的染色體多態(tài)類型。D/Gs+是核仁組織者區(qū)(NOR rRNA)高度重復(fù)的結(jié)果。有研究報道rRNA基因的增多可使染色體結(jié)構(gòu)功能發(fā)生改變，引起D/G組隨體區(qū)聯(lián)合，致染色體不分離和重排機(jī)會增多、形成染色體異常的配子和合子，導(dǎo)致早期胚胎發(fā)育異常引起流產(chǎn)、不孕或生育畸形兒[8]。次縊痕增加(qh+)主要發(fā)生在1、9、16號染色體，次縊痕異染色質(zhì)區(qū)是易發(fā)生自發(fā)和誘發(fā)斷裂的部位，它的增加或減少也可能影響到主縊痕區(qū)的CKC，從而在減數(shù)分裂時引起染色體的不分離，導(dǎo)致胎兒染色體異常而流產(chǎn)。男性主要表現(xiàn)為不育，女性主要表現(xiàn)為多次流產(chǎn)[9]。本文檢出Y多態(tài)9例，Y染色體由常染色體區(qū)和Y特異區(qū)組成，在Y特異區(qū)包含著眾多重要的與性別決定及精子發(fā)生有關(guān)的基因，它的結(jié)構(gòu)改變會嚴(yán)重影響精子的發(fā)生[10]。關(guān)于inv(9)與流產(chǎn)的關(guān)系一直爭議比較大。文獻(xiàn)報道9號染色體臂間倒位在人群中的發(fā)生率為1.00%～1.65%[11]，本文的inv(9)發(fā)生率與文獻(xiàn)報道一致。但是本文只檢出2例inv(9)，可能需要增加分析的對象。文獻(xiàn)報道這種多態(tài)導(dǎo)致生殖異常的機(jī)理可能有：①攜帶者在配子形成中形成特有的倒位環(huán)，有2/4的機(jī)會生成不平衡的配子，與正常配子結(jié)合后產(chǎn)生遺傳物質(zhì)不平衡個體，遺傳效應(yīng)取決于重復(fù)和缺失片段的長度以及所含基因的致死效應(yīng)[5]。②9號染色體的pter-q12段為松弛素(RLX)基因所在，在生育調(diào)節(jié)中起重要作用。倒位使q12遠(yuǎn)端發(fā)生位置效應(yīng)，使RLX基因作用減弱致精子發(fā)生障礙，導(dǎo)致少、弱精子癥和畸形精子[12-13]。

一般生殖異常患者女性染色體異常和多態(tài)率多高于男性，本文男性患者24例，發(fā)生率為28.57%；女性異常17例，發(fā)生率為25.75%，男性多于女性?？赡芘c本所的患者來源密切有關(guān)。本文性染色體異常和多態(tài)性共檢出14例，主要發(fā)生在不孕不育組。常染色體異常和多態(tài)性共檢出27例，主要發(fā)生在不良妊娠組。因此常染色體異常和多態(tài)性、性染色體異常和多態(tài)性在生殖異常的臨床表現(xiàn)上存在差異。

綜上所述，不孕不育、不良妊娠患者應(yīng)進(jìn)行染色體檢查，且男女雙方均應(yīng)檢查，有助于查找病因。染色體多態(tài)性有臨床效應(yīng)而且極可能與生精障礙、流產(chǎn)、胚胎停止發(fā)育等生殖異常等密切相關(guān)。

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Correlation between abnormal chromosome,chromosome polymorphism and reproduction abnormality.

TANG Fang,TAO Xiao-hai,LU Hang,QU Yan-xia,YANG Ye,LI Ya-wen,ZUO Lian-dong,CHEN Gui-lan.The Population and Family Planning Science Research Institute of Guangzhou,Guangzhou510410,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo analyze the relationship of abnormal chromosome,chromosome polymorphism with infertility,adverse pregnancy.MethodsOne hundred and fifty patients with reproductive abnormalities were collected in the recent five years.Then the peripheral blood were cultured and the cells were collected for chromosome preparation,G banding,karyotype analysis.ResultsNine cases were detected with chromosomal abnormality (including2 cases of Klinefelter syndrome,2 cases of Turner syndrome,2 cases of balanced translocation,2 cases of Robertsonian translocation,and1 case of inversion),and the abnormal rate was6.0%.Among the150 cases,32 were detected with chromosome polymorphism,with the polymorphism rate of21.33%.Abnormality and polymorphism of sex chromosome mainly influenced infertility rate,and the abnormality and polymorphism of euchromosome mainly influenced adverse pregnancy rate.ConclusionAbnormalities and polymorphism of chromosome is an important reason of infertility and adverse pregnancy.It is necessary to perform chromosome examination for patients with reproductive abnormalities.

Infertility;Adverse pregnancy;Abnormal chromosome;Chromosome polymorphism

R711.6

A

1003—6350（2015）16—2379—03

2014-10-16)

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.16.0858

廣東省人口和計劃生育委員會科研項目(編號：2012256)；廣東省科技廳科技基礎(chǔ)條件建設(shè)項目(編號：2010B060100014)

陳桂蘭。E-mail：chenguilan108@163.com