細(xì)胞沉渣石蠟包埋、免疫組織化學(xué)染色病理檢查對漿膜腔積液的定性診斷價(jià)值

王炳淑，劉友斌，卜平鳳，王莉

(海南省農(nóng)墾總醫(yī)院，?？?70311)

脫落細(xì)胞學(xué)檢查方法具有微創(chuàng)、簡便、迅速的優(yōu)點(diǎn)，通過觀察細(xì)胞的大小、形態(tài)，進(jìn)行定性診斷［1～3］。但是，細(xì)胞形態(tài)學(xué)診斷在鑒定細(xì)胞來源上有一定的局限性。采用細(xì)胞沉渣石蠟包埋技術(shù)制備細(xì)胞塊后進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，可提高陽性檢出率，對判定細(xì)胞的組織來源有益［4，5］。本研究觀察細(xì)胞沉渣石蠟包埋、免疫組織化學(xué)染色病理檢查對判斷漿膜腔積液良惡性的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2011年11月～2013月12月海南省農(nóng)墾總醫(yī)院收治漿膜腔積液患者881例，男571例、女310例，平均年齡59歲;其中胸腔積液609例，腹腔積液247例，心包腔積液25例。

1.2 觀察方法 新鮮的漿膜腔積液標(biāo)本量靜置30 min后，棄上清液，取近瓶底液體5 mL，置試管中3 000 r/min離心15 min，常規(guī)涂片。剩余液體加入等量95%乙醇，混勻，靜置30 min，瓶底形成白色絮狀物;取近瓶底液體5 mL，放入試管中再次3 000 r/min離心15 min;棄上清液后加等量10%中性甲醛，再次3 000 r/min離心5 min;棄上清液，將沉渣用濾紙包裹，經(jīng)10%中性甲醛固定，脫水，石蠟包埋。將石蠟包埋細(xì)胞塊4 μm厚切片，HE染色，鏡檢。涂片或細(xì)胞塊切片中發(fā)現(xiàn)可疑惡性腫瘤細(xì)胞時(shí)，進(jìn)一步進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色(二步法)。

2 結(jié)果

漿膜腔積液標(biāo)本均進(jìn)行涂片及石蠟包埋細(xì)胞塊HE切片，根據(jù)細(xì)胞形態(tài)學(xué)特點(diǎn)診斷為良性胸腔積液499例、腹腔積液211例、心包積液18例;65例胸腔積液、27例腹腔積液、2例心包積液見可疑惡性腫瘤細(xì)胞，因沉渣石蠟包埋組織中細(xì)胞成分太少，未進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色;58例加做免疫組織化學(xué)染色，1例加做抗酸染色。①胸腔積液中44例發(fā)現(xiàn)可疑惡性腫瘤細(xì)胞，進(jìn)行細(xì)胞塊切片免疫組織化學(xué)染色后，36例明確診斷，包括肺腺癌32例、橫紋肌肉瘤1例、尿路上皮癌1例、乳腺腺癌1例、B細(xì)胞淋巴瘤1例;1例僅提示腺癌細(xì)胞，未提示組織來源信息;7例提示增生的間皮細(xì)胞。②腹腔積液中9例發(fā)現(xiàn)可疑惡性腫瘤細(xì)胞，進(jìn)行細(xì)胞塊切片免疫組織化學(xué)染色后，5例明確診斷，包括卵巢漿液性腺癌2例、肺腺癌1例、消化道來源的腺癌2例;僅提示腺癌細(xì)胞，未提示組織來源信息3例;1例提示增生的間皮細(xì)胞。③心包積液中5例發(fā)現(xiàn)可疑惡性腫瘤細(xì)胞，進(jìn)行細(xì)胞塊切片免疫組織化學(xué)染色后，4例明確診斷，包括肺腺癌2例、涎腺型腺癌1例、乳腺腺癌1例;1例僅提示腺癌細(xì)胞，未提示組織來源。

3 討論

漿膜腔積液可能是多種腫瘤的伴發(fā)癥狀，也可能是腫瘤的首發(fā)癥狀，有的甚至是惟一癥狀［6，7］。但是，細(xì)胞學(xué)特征不典型及臨床特征缺乏時(shí)，漿膜腔積液病理診斷難度增加［8，9］。石蠟包埋組織塊可反復(fù)切片，便于進(jìn)行后續(xù)特殊染色、免疫組織化學(xué)染色及分子生物學(xué)檢測，尤其對于無法進(jìn)行活檢的病例。石蠟包埋組織切片可作為病理學(xué)診斷及治療方案選擇、預(yù)后評估的標(biāo)本［10，11］。沉渣石蠟包埋細(xì)胞塊類似于石蠟包埋組織塊，增加待檢細(xì)胞數(shù)量，并且細(xì)胞經(jīng)過固定后，其形態(tài)與組織學(xué)切片中的細(xì)胞形態(tài)接近，易于診斷。本研究中58例細(xì)胞形態(tài)具有異型性的病例，臨床均以漿膜腔積液性質(zhì)待查為初步診斷。沉渣石蠟包埋細(xì)胞塊免疫組織化學(xué)染色結(jié)果提示腺癌43例，這與轉(zhuǎn)移性腫瘤中以腺癌最多見的報(bào)道符合。

脫落細(xì)胞檢查因缺少組織學(xué)形態(tài)，與炎癥等其他因素導(dǎo)致的間皮細(xì)胞增生的鑒別有時(shí)很困難，免疫組織化學(xué)染色可提供輔助診斷線索，對細(xì)胞來源的判斷有較高的應(yīng)用價(jià)值［12，13］。本研究中7例胸腔積液、1例腹腔積液涂片中查見可疑惡性腫瘤細(xì)胞，但細(xì)胞塊切片經(jīng)免疫組織化學(xué)染色后，提示增生的間皮細(xì)胞。免疫組織化學(xué)染色僅僅是一個(gè)輔助診斷方法，并不能100%表達(dá)，尤其是在細(xì)胞量少或治療后的樣本，因此，免疫組織化學(xué)染色陽性可明確診斷，陰性并非排除診斷，需結(jié)合臨床綜合分析［14，15］。本研究中5例細(xì)胞形態(tài)提示腺癌，但免疫組織化學(xué)染色結(jié)果未能提供組織來源信息。

漿膜腔積液沉渣細(xì)胞塊中細(xì)胞數(shù)量的多少除與病變有關(guān)外，與采集到的漿膜腔積液是否及時(shí)處理、操作是否規(guī)范，如離心時(shí)間是否充足、留取沉渣是否準(zhǔn)確有關(guān)。本研究中涂片中查見可疑惡性腫瘤細(xì)胞94例，因沉渣石蠟包埋切片中細(xì)胞成分太少，未能進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。

總之，細(xì)胞沉渣石蠟包埋、免疫組織化學(xué)染色有助于漿膜腔積液的定性診斷及明確惡性腫瘤細(xì)胞的組織來源。

［1］王秀軍，馬國先.比較腫瘤診斷中細(xì)胞塊的應(yīng)用價(jià)值［J］.山東醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校學(xué)報(bào)，2013，35(1):79-80.

［2］張纓，周瑜，梅佳，等.惡性漿膜腔積液細(xì)胞塊在分子病理診斷中的應(yīng)用［J］.臨床腫瘤學(xué)雜志，2013，18(2):147-150.

［3］張婉儀，羅麗花，劉惠娟，等.胸腹水細(xì)胞塊制作技術(shù)及應(yīng)用［J］.臨床醫(yī)學(xué)工程，2014，21(1):147-150.

［4］孫亞軍，李梅，吳建農(nóng)，等.細(xì)胞塊技術(shù)聯(lián)合免疫細(xì)胞化學(xué)檢測漿膜腔積液中腺癌細(xì)胞的價(jià)值［J］.實(shí)用醫(yī)技雜志，2013，20(9):933-935.

［5］尚士宣，趙曉丹，肖月英.細(xì)胞塊切片免疫組化染色在腫瘤細(xì)胞學(xué)診斷中的應(yīng)用［J］.腫瘤基礎(chǔ)與臨床，2010，23(6):514-515.

［6］郭周慶，王紅霞，吳又名.196例體液惡性腫瘤細(xì)胞學(xué)診斷分析［J］.吉林醫(yī)學(xué)，2012，33(2):292-293.

［7］Pillai SB，Shanthakumari S.The significance of cell block and fine needle aspiration cytology in diagnosing a rare presentation of hepatocellular carcinoma［J］.Indian J Pathol Microbiol，2008，51(3):459-60.

［8］馬博文.漿膜腔積液細(xì)胞病理學(xué)診斷［M］.北京:人民軍醫(yī)出版社，2006:44-47.

［9］楊紅敏，李振芬.細(xì)胞塊切片免疫組化染色在胸腔積液病理診斷中的應(yīng)用價(jià)值［J］.中外醫(yī)療，2014，(1):179-181.

［10］Pandey A，Nandini NM，Jha AK，et al.Fine needle aspiration cytology and cell block in the diagnosis of seminoma testis［J］.J Cytol，2011，28(1):39-41.

［11］黃金長，張功亮，郭廣秀，等.細(xì)胞塊石蠟包埋及免疫細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)在胸腹水細(xì)胞病理學(xué)診斷中的應(yīng)用價(jià)值［J］.實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2013，31(5):489-490.

［12］張麗芳，黃海建，陳建偉，等.免疫細(xì)胞化學(xué)染色和RT-PCR技術(shù)在胸腹腔積液檢測中的應(yīng)用［J］.實(shí)用癌癥雜志，2011，26(5):508-509.

［13］虞紅珍，吳強(qiáng).漿膜腔積液細(xì)胞學(xué)檢查中制片技術(shù)應(yīng)用的現(xiàn)狀與進(jìn)展［J］.臨床與試驗(yàn)病理學(xué)雜志，2014，30(4):434-435.

［14］張纓，李祥周，周瑜，等.非小細(xì)胞肺癌胸腔積液細(xì)胞塊分子病理檢測的意義［J］.醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào)，2013，26(8):429-432.

［15］楊紅，王影，覃勝，等.漿膜腔積液細(xì)胞塊對提高細(xì)胞學(xué)診斷及開展基因檢測的價(jià)值［J］.中華臨床醫(yī)師雜志，2013，7(21):71-73.

［16］劉蘊(yùn)霞，劉玉俠，鐘政榮，等.惡性漿膜腔積液200例細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)的臨床分析［J］.中華全科醫(yī)學(xué)，2012，10(1):111-112.