洋蔥提取物抑菌活性研究

常亞飛，黃淑萍，劉京鑫

(長安大學 環(huán)境科學與工程學院 化工系，陜西 西安 710054)

洋蔥(Onion)又名球蔥、圓蔥、玉蔥、蔥頭，屬百合科蔥屬，為二年生草本植物［1］，在我國分布很廣，2006 年我國洋蔥的種植面積達到90.1 萬公頃，洋蔥的干產(chǎn)量達到1 904.7 萬t［2］，是目前我國主栽蔬菜之一。

作為天然的食品和保健原料，洋蔥中含有很少量的精油物質(zhì)，主要是各種含硫化合物［3-4］，約0.05%，雖然量很少，但卻構成了洋蔥特有的風味和催淚作用。洋蔥還含有少量的類黃酮化合物［5］、各種苯丙素酚類化合物［6］、甾體皂苷類化合物［7-8］、含氮化合物、前列腺素類及其它成分，這類化合物大多數(shù)具有顯著的生理藥理活性，在營養(yǎng)保健和預防、治療慢性病等方面具有多種功效［9-10］。隨著人們對自身保健意識的增強，對洋蔥生理活性的研究成為了焦點。

據(jù)悉，國外對洋蔥的研究主要集中在日本、印度、德國和美國等國家，但由于洋蔥的特有氣味，在臨床試驗時往往被西方國家禁止使用。隨著中草藥市場的國際化，許多中草藥將走向國際藥品市場，因此對洋蔥抑菌性的研究將會為降血糖、降血脂［11］、抗血栓、預防癌癥、維護心血管健康、降低膽固醇、抗氧化、防止老化、預防感冒、幫助消化、殺菌等［12-13］天然藥物的開發(fā)利用提供新的線索。目前，國內(nèi)對洋蔥的研究較少，主要集中于含硫化合物研究，而抑菌、抗菌等作用研究還有待進一步發(fā)展。本研究采用乙醇提取紅皮洋蔥，其提取物再以石油醚、乙酸乙酯和正丁醇分段萃取，通過進行各段萃取物對土壤細菌、真菌及放線菌影響的分析，研究探討紅皮洋蔥的抑菌活性［14］，以期為開發(fā)天然、安全的功能性食品及提升紅皮洋蔥的藥用價值提供數(shù)據(jù)支持。

1 實驗部分

1.1 材料與儀器

新鮮紅皮洋蔥2 個，購于西安市翠華路菜市場，并將去皮、洗凈、烘干脫水、粉碎備用;無水乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、牛肉膏、蛋白胨、KH2PO4MgSO4·7H2O、葡萄糖、氯化鈉、KNO3、FeSO4·7H2O、K2HPO4、淀粉、孟加拉紅(Rose Bebgal)、鉻酸鉀、乳酸等均為分析純;卡拉膠，工業(yè)品。

RE-52A 型旋轉蒸發(fā)儀;KDM 型調(diào)溫電熱套;DHP120 型恒溫培養(yǎng)箱;SHZ-82 型恒溫振蕩器;YX-280 型高壓滅菌鍋;CS102-2 型電熱干燥箱;BS224S電子天平。

1.2 實驗方法

1.2.1 洋蔥提取物的制備 以料液比1∶5，采用70%的乙醇提取50 g 脫水干紅皮洋蔥3 次，每次1 h，過濾、合并3 次濾液。濾液減壓濃縮得浸膏，浸膏加水分散后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，萃取液分別用旋轉蒸發(fā)儀濃縮蒸發(fā)，最后分別用蒸餾水定容至50 mL，經(jīng)高壓濕熱滅菌后，置冰箱待用。

1.2.2 菌懸液的制備 采用多點法于雁塔校園的草坪上取土樣500 g，過2 mm 篩，并測定其含水量。準確稱取該土樣2 g，在超凈工作臺上，將其裝入含有9 mL 蒸餾水和7 ～8 顆玻璃珠的50 mL 錐形瓶里(錐形瓶、蒸餾水及玻璃珠事先已滅菌)，用滅過菌的紗布將錐形瓶瓶口包好，置于搖床上振蕩10 min得土壤懸液原液，并按照一定的梯度將其稀釋至所需濃度即可用于接種。

1.2.3 洋蔥不同溶劑萃取物抑菌活性研究

1.2.3.1 培養(yǎng)基的制備 細菌;真菌;放線菌。

1.2.3.2 抑菌活性測定 在無菌實驗臺上將合適稀釋梯度的土壤稀釋懸液1 mL 和1 mL 不同溶劑萃取液置于培養(yǎng)皿中，再倒入適量的培養(yǎng)基并迅速混合均勻，每組設3 個重復，并做無提取物的土壤空白對照組。將培養(yǎng)皿置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，實驗研究的細菌、真菌、放線菌都來自土壤懸液經(jīng)過不同菌種的選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，其中細菌采用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基［15］，于37 ℃下培養(yǎng)3 d 后計數(shù);真菌采用馬丁氏(Martin)培養(yǎng)基［16］于28 ℃下培養(yǎng)3 d 后計數(shù)，放線菌采用改良高氏一號培養(yǎng)基［17］于28 ℃下培養(yǎng)5 d 后計數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)處理

實驗數(shù)據(jù)均為3 個平行的平均值，采用SPSS15.0 結合Excel 軟件進行數(shù)據(jù)處理。

2 結果與討論

2.1 紅皮洋蔥石油醚萃取物抑菌活性

紅皮洋蔥石油醚萃取物抑菌活性，見圖1。

圖1 紅皮洋蔥石油醚萃取物抑菌活性Fig.1 Antibacterial activity of petroleum ether extract from red onion

由圖1 可知，紅皮洋蔥的石油醚萃取物無論是對土壤細菌、真菌還是放線菌抑制性都極顯著(p ＜0.01)，且對土壤放線菌抑制性最強，其抑制率達到51.1%，其次為細菌，抑制率為47.3%，對土壤真菌抑制率為40.0%。

2.2 紅皮洋蔥乙酸乙酯萃取物抑菌活性

紅皮洋蔥乙酸乙酯萃取物抑菌活性，見圖2。

圖2 紅皮洋蔥乙酸乙酯萃取物抑菌活性Fig.2 Antibacterial activity of ethyl acetate extract from red onion

由圖2 可知，紅皮洋蔥的乙酸乙酯萃取物對土壤細菌、真菌和放線菌抑制性也極顯著(p ＜0.01)，且對不同的菌體抑菌率也不相同，對土壤細菌抑制性最強，其抑菌率為75.1%，對真菌抑制率為71.1%，對放線菌抑制率64.8%。

2.3 紅皮洋蔥正丁醇萃取物抑菌活性

紅皮洋蔥正丁醇萃取物抑菌活性，見圖2。

圖3 紅皮洋蔥正丁醇萃取物抑菌活性Fig.3 Antibacterial activity of n-butanol extract from red onion

由圖3 可知，紅皮洋蔥正丁醇萃取物對土壤細菌、真菌和放線菌抑制性極顯著(p ＜0.01)，且對真菌抑制率最高，為77.3%，對細菌抑制率為73.7%，對放線菌抑制率為64.6%。

2.4 紅皮洋蔥不同萃取物抑菌活性比較

紅皮洋蔥不同萃取物抑菌活性比較，見表1。

表1 紅皮洋蔥不同萃取物抑菌活性比較Table 1 Antibacterial activity of different extracts from red onion

由表1 可知，紅皮洋蔥乙酸乙酯和正丁醇萃取物對土壤微生物的抑制性顯著(p ＜0.01)高于石油醚萃取物，且乙酸乙酯萃取物對土壤細菌和放線菌抑制率最高，對真菌抑制率最高的是正丁醇萃取物;這可能與不同極性溶劑的萃取物成分不同有關，其中石油醚部分極性最低，可能主要是洋蔥中的脂溶性成分，而微生物對脂類具有一定的利用能力，故這部分表現(xiàn)出較低的抑菌能力;隨著萃取溶劑極性的增加，乙酸乙酯部分活性成分種類和含量較石油醚部分增加，這部分可能主要是一些酚酸類、黃酮類等物質(zhì)，而這部分物質(zhì)能被微生物利用的種類不多，對微生物主要起化感作用，因此，表現(xiàn)出了極強的抑菌性;同樣，正丁醇萃取部分的極性最大，主要成分可能會有一些黃酮類、生物堿類、香豆素類等化合物，這些化合物均對微生物有明顯的抑制性，因此，紅皮洋蔥的正丁醇萃取物亦表現(xiàn)出了明顯的抑制土壤微生物活性。

3 結論

(1)紅皮洋蔥不同萃取物對土壤微生物的抑制性不同，其中石油醚萃取物抑菌性較乙酸乙酯和正丁醇萃取物低。

(2)對土壤放線菌抑制率最高的是乙酸乙酯萃取物，對真菌抑制率最高的是正丁醇萃取物，但乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物對土壤真菌和放線菌抑制率差異不顯著。

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