固相凝集試驗檢測血小板抗體的臨床價值分析

宋春萍　劉和平

摘要：目的 對固相凝集試驗檢測血小板抗體的臨床價值進行探討。方法 將我院2012年1月～2013年5月血液科收治的血小板減少患者112例作為臨床觀察對象并進行回顧性分析，探討固相凝集試驗檢測血小板抗體的臨床價值。結果 本組患者中血小板抗體呈陽性患者共79例，占比為70.53%，其中再生障礙性貧血19例，急性白血病15例，慢性白血病9例，骨髓異常增生6例；另外血小板減少癥30例且自身抗體、同種異型抗體以及同種異型抗體與自身抗體時都出現(xiàn)了陽性表現(xiàn)，其他癥狀均表現(xiàn)為單一同種異型抗體陽性。結論 固相凝集試驗檢測血小板抗體對于血小板減少患者的治療有著十分重要的意義，可以此分辨患者出現(xiàn)的不同血小板抗原刺激，在診斷治療中可作為重要臨床參考。

關鍵詞：固相凝集試驗；血小板抗體；血小板抗原

血小板抗原存在于人類血小板之上，對于不同個體而言這些抗原會表現(xiàn)出一定的多態(tài)性，正是由于上述特性導致了擁有不同血小板抗原的群體在進行相互輸血時會出現(xiàn)較為嚴重的免疫反應，從而造成輸血無效以及血小板減少癥狀[1]。我院對2012年1月～2013年5月血液科收治的血小板減少患者112例進行了回顧性分析，采取固相凝集試驗檢測患者血小板抗體情況，取得了一定的成果現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取我院2012年1月～2013年5月血液科收治的血小板減少患者112例作為臨床觀察對象，該組患者中男50例，女62例，年齡7～81歲，平均年齡為（42.3±4.7）歲。造成血小板減少的主要致病因素為血小板減少癥、白血病以及障礙性貧血等。

1.2方法

1.2.1實驗儀器及試劑 TD-3B型血清多用離心機；血小板抗體檢測試劑盒以及血小板抗體篩檢細胞。

1.2.2實驗步驟 ①樣本預處理。收集患者新鮮靜脈血3ml，采用離心機進行離心（離心時間為10min，轉速參數(shù)設定為200r/min），離心完成后取上清液進行抗體篩檢。之后進行血小板提取，收集抗凝新鮮全血3ml作為樣本，采用離心機離心（離心時間為10min，轉速參數(shù)設定為200r/min），取上層血漿進行混合，將濃度調(diào)節(jié)為是適宜范圍內(nèi)，將樣品于20～25℃下保存，然后進行檢測。②血小板抗體檢測。以固相凝集試驗對患者血小板抗體進行檢測。血小板同種/同種異型抗體檢測：在將血小板抗體篩檢細胞置于反應孔底部（采用離心固定），將患者血清加入其中并置入抗人IgG[2]，離心，取樣，觀察結果；自身游離血小板抗體檢測：將患者血小板抗體置于反應孔底部（采用離心固定），置入患者血清反應，加入指示紅細胞以及抗人IgG，離心，取樣，觀察結果；自身結合血小板抗體檢測：將患者血小板抗體懸液置入反應孔底部（采用離心固定），離心，取樣，觀察結果。

1.3結果判定 陽性：若指示紅細胞在反應孔底部平鋪則為陽性；指示紅細胞與反應孔底部部分結合，但結合區(qū)域較陰性更大即為弱陽性。陰性：指示紅細胞并未與反應孔底部結合，在中央位置聚集即為陰性。

2 結果

見表1。

從表1可以看出由血小板減少癥導致的血小板減少患者無論是自身抗體、同種異型抗體還是同種異型抗體與自身抗體同時存在時都出現(xiàn)了陽性表現(xiàn)，而其他病癥表現(xiàn)為單一同種異型抗體陽性。

3 討論

人類血小板抗原主要分為兩類，一類是為非特異性抗原或血小板相關抗原，與AB0血型系統(tǒng)和HLA有關，另一類是血小板特異的抗原[3]。人類血小板特異性抗原（HPA）有5個血型系統(tǒng)和l0個抗原，為HPA-1（Zw）、HPA-2（Ko系統(tǒng)）、HPA-3、HPA-4、HPA-5[4]。正是由于這些特意性抗原的存在導致了不同類型患者相互輸血時會出現(xiàn)排異反應并導致血小板減少癥狀。

從研究結果來看本組患者中血小板抗體呈陽性患者共79例，占比為70.53%，與相關文獻及報道[5]保持一致。其中再生障礙性貧血19例，急性白血病15例，慢性白血病9例，骨髓異常增生6例；另外血小板減少癥30例且自身抗體、同種異型抗體以及同種異型抗體與自身抗體時都出現(xiàn)了陽性表現(xiàn)，其他癥狀均表現(xiàn)為單一同種異型抗體陽性。經(jīng)過分析認為患者之所以出現(xiàn)血小板減少主要是由于血小板輸注過多導致，這會對免疫系統(tǒng)造成刺激從而使患者產(chǎn)生抗體，若抗體分泌過多則會與血小板膜糖蛋白融合，并使得補體系統(tǒng)被激活，這將導致血小板功能紊亂并使得血小板減少。

采取固相凝集試驗檢測血小板抗體主要是通過指示紅細胞形態(tài)進行判別。實驗中將血小板懸液離心后將會于反應孔底部產(chǎn)生血小板單層，然后置入血清并孵育。若血清中存在血小板抗體則會與血小板單層產(chǎn)生結合作用，然后加入指示紅核細胞將能夠與之結合[6]。結合上述研究結果可以看出血小板減少癥所導致的血小板減少患者數(shù)量較多，其中陽性患者共30例，陽性率為78.95%。此類患者出現(xiàn)陽性反應主正是由于自身免疫病導致[7]，當患者自身產(chǎn)生抗體時會造成血小板受到破壞，即便進行正常輸血也無法達到治療目的甚至會加重免疫作用，給患者的生命安全帶來一定程度的威脅[8]。故此借助固相凝集試驗對血小板抗體進行檢測則能夠避免無效輸血情況并排除自身免疫反應，以此來保證患者治療的適應性以及安全性。

綜上固相凝集試驗檢測血小板抗體可作為患者治療方案制定參考并分辨出患者出現(xiàn)的不同血小板抗原刺激，可提高治療安全性并可作為診斷參考依據(jù)，具有重要的臨床價值，值得推廣。

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編輯/許言