血清免疫學檢測在原發(fā)性膽汁性肝硬化診斷中的應(yīng)用

連 旭 吳艷凌 周麗娟 林 月（通訊作者）

（揚州大學附屬蘇北人民醫(yī)院檢驗科，江蘇 揚州 225001）

原發(fā)性膽汁性肝硬化是以慢性肝內(nèi)膽汁淤積為臨床特征，屬于肝內(nèi)膽管進行性非化膿性損害的疾病。90%以上患者表現(xiàn)為血清抗線粒體抗體（AMA）陽性。該病可呈現(xiàn)急性發(fā)作、慢性發(fā)作、爆發(fā)性發(fā)作。原發(fā)性膽汁性肝硬化是通過臨床癥狀和血清特異抗體來進行分型，以往臨床存在較高的誤診率。當前關(guān)于原發(fā)性膽汁性肝硬化的確切病因尚不清晰，可能與患者自身免疫系統(tǒng)有關(guān)，發(fā)病機制也可能與免疫、遺傳、化學物質(zhì)、環(huán)境、感染等因素有關(guān)[1]。隨著診斷技術(shù)的發(fā)展，原發(fā)性膽汁性肝硬化的確診率得到了提升。特別是對于原因不明的持續(xù)肝功能異常的黃疸患者，開展抗原檢測，可以提高診斷準確率?；谠\斷標準，患者無需進行肝穿刺活檢即可確診。本研究分析免疫血清學檢測在原發(fā)性膽汁性肝硬化患者中的診斷效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2022 年6 月至2023 年6 月原發(fā)性膽汁性肝硬化患者100 例，作為觀察組，并選擇同期慢性病毒性肝炎患者100 例，作為對照組。其中，觀察組男56 例，女44 例；年齡37～78 歲，平均（54.51±2.04）歲；對照組男51 例，女49 例；年齡36～78 歲，平均（53.81±2.14）歲。兩組資料對比，無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

1.2 方法 （1）肝功能檢測：檢測患者肝功能，取4 mL空腹靜脈血，用全自動生化分析儀檢測血液樣本，統(tǒng)計樣本中的丙氨酸轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）等。（2）免疫學血清檢測：取患者4 mL 空腹靜脈血，經(jīng)3000 r/min 的10 min 離心處理后，取上層血清，保存-70 ℃環(huán)境下。用全自動生化儀，檢測血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM。使用配套試劑盒檢測Ⅲ型前膠原蛋白（PCⅢ）、Ⅳ型膠原（Ⅳ-C）以及血清透明質(zhì)酸（HA）。

1.3 觀察指標 比較兩組的肝纖四項、肝功能、免疫指標差異。

1.4 統(tǒng)計學方法 使用軟件SPSS21.0 分析研究數(shù)據(jù)，計數(shù)資料用（%）表示，用χ2檢驗；用（）表示計量資料，用t檢驗，P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組肝功能與肝纖三項對比 各項指標對比，觀察組明顯高于對照組（P＜0.05）。但AST 對比，兩組之間無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 患者肝功能與肝纖三項情況對比 （）

表1 患者肝功能與肝纖三項情況對比 （）

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2.2 免疫球蛋白水平對比 IgM 指標比較，觀察組高于對照組患者，IgG、IgA 指標對比，兩組之間無統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 患者肝功能與肝纖四項情況對比 （）

表2 患者肝功能與肝纖四項情況對比 （）

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3 討論

原發(fā)性膽汁性肝硬化是慢性自身免疫性肝病，隨著臨床對該病的研究不斷深入及AMA 檢查的推廣，使確診率在不斷上升。原發(fā)性膽汁性肝硬化根據(jù)生化指標、臨床癥狀、組織病理學等，劃分成以肝炎為主型的自身免疫性肝炎、原發(fā)性硬化性膽管炎以及以膽系損害為主的原發(fā)性膽汁性肝硬化等。原發(fā)性膽汁性肝硬化患者多是在皮膚瘙癢出現(xiàn)后6 個月～2 年間發(fā)生黃疸，約有1/4 的患者同時發(fā)生瘙癢和黃疸。對原因不明的皮膚搔癢，應(yīng)考慮原發(fā)性膽汁性肝硬化的可能[2]。皮膚瘙癢主要原因是患者長時間肝內(nèi)膽汁淤積導致膽汁酸分泌和排泄減少。后期可影響脂肪吸收與消化，出現(xiàn)皮膚粗糙、骨軟化、骨質(zhì)疏松、夜盲癥、出血傾向等癥狀。以往人們對于該病的認識不夠，臨床誤診和漏診情況比較常見，導致患者錯過最佳治療時間。確診時已發(fā)展到肝硬化程度，所以對于原發(fā)性膽汁性肝硬化患者的早診斷、早治療非常重要。利用酶聯(lián)免疫吸附法和免疫印跡法可檢測，但有部分患者血清指標檢測準度不高。原發(fā)性膽汁性肝硬化早期血清ALP等水平升高，是突出的實驗室異常表現(xiàn)，升高幅度可達3 倍以上，而ALT 與AST 水平大多僅從輕度升至中度，常伴有血脂異常，以膽固醇升高為主。ALT 與AST 是肝組織中含量最高的酶，大部分處于肝細胞的細胞質(zhì)中[3]。當肝細胞膜通透性增加或肝細胞受損后，肝細胞內(nèi)的谷丙轉(zhuǎn)氨酶會進入血液中，導致血清酶活性增加。原發(fā)性膽汁性肝硬化患者可能發(fā)生肝細胞廣泛纖維化，肝細胞損傷顯著減少，ALT 和AST 活性增加。由于肝臟中血漿凝血因子的合成，肝臟疾病也可能表現(xiàn)出凝血功能障礙，甚至嚴重情況下可能會出血。HA、PC III 和IV-C 水平可反映慢性肝炎的病理性肝損傷程度，是慢性肝炎和肝纖維化患者的可靠指標。PC III 是由前膠原分泌到細胞外減少的氨基錐肽，肽酶水平直接反映肝臟中活躍的增殖纖維，在急性肝炎中也可能增加。HA 是反應(yīng)肝纖維化敏感的指標之一，也可反映炎癥程度[4]。

在肝臟纖維化中，PCⅢ、HA、Ⅳ-C 水平是十分可靠的監(jiān)測指標，聯(lián)合檢測HA、Ⅳ-C 、PCⅢ等指標水平，能作為臨床診斷慢性肝病、肝纖維化等疾病的輔助指標，有利于預防肝硬化的發(fā)生和發(fā)展。肝實質(zhì)損傷可導致免疫球蛋白水平不同程度的升高，升高程度與肝實質(zhì)損傷直接相關(guān)。IgM 的顯著增加可能表明，在血清免疫球蛋白監(jiān)測的原發(fā)性膽汁性肝硬化患者中，預后較差，可以識別和診斷疾病，并可以觀察詳細的進展。本研究結(jié)果顯示，觀察組的IV-C、HA、PC III、IgM 和ALT 指標均高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。Ig 是高等動物免疫系統(tǒng)中淋巴細胞分泌的一種具有抗體活性的蛋白質(zhì)。IgG 是血清免疫球蛋白的主要成分。它在機體的被動免疫反應(yīng)中非常重要，還具有調(diào)節(jié)吞噬作用的功能。另一方面，IgM 是由抗原刺激的引誘劑的免疫反應(yīng)釋放的Ig，分布在血清中，是一種具有抗病毒作用的抗微生物抗體，抗菌、吞噬、聚集功能要比IgG 高500～1000 倍，具有重要作用；IgA 可調(diào)節(jié)吞噬細胞，抑制上皮組織中附著病原微生物，避免病毒繁殖，是黏膜的一道安全屏障[5]。

綜上，本研究通過對于原發(fā)性膽汁性肝硬化患者血清免疫球蛋白和肝纖維化的指標進行檢測，其指標可以有效評估患者的早期風險，對預后的診斷具有重要意義，因此值得臨床支持。