祛痰化瘀方藥對心血管疾病中內(nèi)皮細胞保護作用的研究評述

陳冰 胡鏡清 馬雅鑾 杜松 柏冬 陶旭光

心血管疾病在中國發(fā)病率逐年上升，其發(fā)生發(fā)展過程與內(nèi)皮細胞(endothelial cells，EC)功能密切相關(guān)［1］。血管內(nèi)皮細胞功能失調(diào)不僅被認為是冠狀動脈粥樣硬化起始環(huán)節(jié)，而且與冠心病、高血壓發(fā)生、發(fā)展相關(guān)。中醫(yī)辨證分型發(fā)現(xiàn)，痰瘀互結(jié)證是心血管疾病的主要證型之一。痰瘀互結(jié)是心血管疾病的重要病機，祛痰、活血治法已經(jīng)成為心血管疾病的常用治法。本文就祛痰化瘀方藥對內(nèi)皮細胞的保護作用簡述如下。

1 血管內(nèi)皮細胞功能及與痰瘀證的相關(guān)性

EC 為血管最內(nèi)層的連續(xù)細胞結(jié)構(gòu)，具有以下作用:屏障功能，血管調(diào)節(jié)功能，凝血功能，分泌內(nèi)皮源性細胞生長因子功能，代謝功能，免疫功能。

近年來有學(xué)者對痰瘀相關(guān)證與EC 功能相關(guān)性做了大量研究。袁肇凱等［2］對冠心病心血瘀阻證組112 例、冠心病非心血瘀阻證組108 例、非冠心病心血瘀阻證組110 例和健康人對照組100 名檢測分析血管EC 產(chǎn)生的一氧化氮(nitric oxide，NO)、內(nèi)皮素(endothelin，ET)、血管緊張素(angiotensin，Ang)Ⅱ、可溶性細胞間黏附分子(soluble intercellular adhesion molecule，sⅠCAM)-1 和可溶性血管細胞黏附分子(soluble vascular cell adhesion molecule，sVCAM)-1 等血管活性物質(zhì)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，ET、AngⅡ、sⅠCAM-1 和sVCAM-1 的異常程度均呈心血瘀阻證組＞非血瘀證組＞健康人對照組的趨勢;而心血瘀阻證組和非冠心病心血瘀阻證組之間差異無顯著性。由此得出結(jié)論:血管內(nèi)皮細胞分泌的ET、AngⅡ、sⅠCAM-1 和sVCAM-1 等血管活性物質(zhì)可能是冠心病“血瘀”病理重要標志物。

王師菡等［3］將96 例冠心病血瘀證患者辨證進行血管內(nèi)皮因子的測定，同時采用血瘀證積分評定血瘀證程度，采用Gensini 評分系統(tǒng)評價冠脈造影的結(jié)果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，患者血清血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、ET-1 水平隨血瘀證積分及Gensini 積分增高而增高，由此判斷，冠脈Gensini 積分與血管內(nèi)皮因子及血瘀證積分相關(guān)。朱明軍等［4］對100 例經(jīng)冠狀動脈造影診斷為冠心病心絞痛患者參照一定的標準進行證候要素提取，并測定患者血清白介素(interleukinⅠL，ⅠL)-6、ET-1 水平，作相關(guān)性分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，證型分布以本虛標實證居多，證候分布中氣虛、痰濁、血瘀三型所占比例較大，關(guān)系為血瘀＞痰濁＞氣虛;實證較虛實夾雜證ⅠL-6 水平明顯升高;夾痰夾瘀證較夾痰證和夾瘀證ET-1 水平明顯升高。由此認為，冠心病心絞痛中醫(yī)證型以本虛標實證居多，冠心病心絞痛的基本證候是血瘀、痰濁、氣虛;ⅠL-6、ET-1 與中醫(yī)證型分布具有相關(guān)性，兩者均能作為辨證的客觀參考依據(jù)。上述研究說明，內(nèi)皮功能與痰瘀證候密切相關(guān)。

2 祛痰化瘀方藥對內(nèi)皮細胞的保護作用

近年來，在對高脂血癥與動脈粥樣硬化、高血壓、冠心病等心血管疾病的治療中，有大量學(xué)者從祛痰化瘀方藥對EC 功能保護作用方面進行了研究。

2.1 高脂血癥與動脈粥樣硬化

韓學(xué)杰等［5-7］采用高脂飼料制造家兔動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)模型，給予痰瘀同治方(全瓜蔞30 g、薤白10 g、水蛭5 g 等)進行治療，觀察主動脈變化。之后觀察高脂血清損傷EC 后痰瘀同治方的保護作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，痰瘀同治方可顯著調(diào)節(jié)AS 家兔血漿NO 含量，防止血管痙攣和血小板的聚集，可顯著降低AS 家兔血漿ET;電鏡及熒光顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)，給藥組動物主動脈EC 變化基本趨向正常組。提示痰瘀同治方可減輕血管內(nèi)膜脂斑形成，對血管內(nèi)皮損傷有明顯的保護作用。宋劍南等［8-13］采用高脂血癥大鼠模型，發(fā)現(xiàn)祛痰化瘀方藥(半夏、陳皮、川芎、水蛭等)可顯著抑制高脂組大鼠主動脈EC 通透性的增加，明顯升高高脂狀態(tài)下主動脈血管壁NO 合酶(nitricoxide synthase，NOS)活性及其mRNA 表達，降低ET mRNA 表達，保持血漿6 酮前列腺素F1α(6-keto-prostaglandin1α，6-keto-FGF1α)的正常水平及6-keto-FGF1α/血栓素B2(thromboxane B-2，TXB2)平衡，具有保護EC 功能的作用;進一步研究發(fā)現(xiàn)健脾祛痰化瘀方(瀝水調(diào)脂膠囊:半夏、陳皮、茯苓、甘草、水蛭、川芎、竹瀝)含藥血清可抑制氧化型低密度脂蛋白引起的EC 胞質(zhì)Ca2+濃度升高，降低細胞凋亡率，使G0-G1 期細胞明顯減少，S 期細胞增多;可抑制P 選擇素的表達，上調(diào)Bcl-2蛋白水平，下調(diào)P53 和Caspase-3 蛋白表達水平。提示健脾祛痰化瘀方可能通過上述途徑進而抑制EC凋亡、減輕血管炎性反應(yīng)和血栓形成，達到阻止AS發(fā)生的作用。

黎鵬程等［13］觀察舒心穩(wěn)斑顆粒(血竭、虎杖、瓜蔞殼、明礬等)對兔AS 斑塊中VEGF 表達的影響，發(fā)現(xiàn)舒心穩(wěn)斑顆粒能明顯降低VEGF 在主動脈粥樣斑塊中的面密度。從而認為舒心穩(wěn)斑顆粒通過抑制VEGF 在AS 斑塊中的表達達到抑制AS 斑塊形成的作用。楊自生［14-15］等觀察痰瘀通膠囊含藥血清對EC 增殖及內(nèi)皮型NOS(endothelial nitric oxide synthase，eNOS)蛋白及環(huán)氧合酶-2(cyclo-oxygenase，COX-2)蛋白表達的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)痰瘀通膠囊含藥血清能促進EC 增殖，上調(diào)eNOS 的蛋白表達水平，抑制損傷的EC 活性的下降，下調(diào)COX-2 的蛋白表達。由此認為痰瘀通膠囊通過上調(diào)eNOS 的蛋白表達水平，下調(diào)COX-2 的蛋白表達，從而促進EC增殖、抑制炎癥反應(yīng)，達到抗動脈粥樣硬化和防治高脂血癥的作用。

劉建勛等［16-19］發(fā)現(xiàn)痰瘀同治方(人參、丹參、黃連、川芎等)能夠明顯減輕小型豬AS 斑塊負荷，抑制管腔狹窄，減少炎細胞侵潤，降低血清高敏C 反應(yīng)蛋白(high sensitivity C reactive protein，hs-CRP)，腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor-α，TNF)-α 和ⅠL-6 等炎癥細胞因子水平并抑制冠脈核因子-κB(nuclear factor kappa B，NF-κB)p65 核移位。痰瘀同治方含藥血清可使EC 活力顯著升高，細胞上清中NO 含量明顯提高，可下調(diào)NF-κB p65 mRNA 和蛋白表達，降低ⅠCAM-1 mRNA 和蛋白表達，上調(diào)eNOS mRNA 及其蛋白表達。認為痰瘀同治方具有明顯抑制冠狀動脈粥樣斑塊發(fā)展、降低動脈血管斑塊負荷和管腔狹窄等作用，具有多靶點AS 的效應(yīng)。

2.2 高血壓

盧焯明等［20］發(fā)現(xiàn)調(diào)肝腎、祛痰瘀中藥(熟地黃25 g、龜甲30 g、丹參15 g、三七5 g、鉤藤15 g、瓜蔞12 g)作用于SHR 大鼠后，大鼠血漿NO 水平顯著高于空白組，全程給藥組ET/NO 比值顯著低于空白組，三個中藥組的血壓上升趨勢均隨周齡增長而明顯減緩。從而認為調(diào)肝腎、祛痰瘀治法能提高NO水平，改善內(nèi)皮分泌舒縮因子的功能，在一定程度上延緩SHR 9 ～12 周齡的高血壓發(fā)展。歐奇?zhèn)サ龋?1］應(yīng)用化痰通絡(luò)中藥(法半夏15 g、陳皮15 g、茯苓10 g、白術(shù)10 g、丹參10 g、益母草15 g、澤蘭10 g、川牛膝10 g、天麻10 g、鉤藤10 g、夏枯草10 g、炙甘草5 g)治療痰瘀互結(jié)型高血壓病患者，結(jié)果發(fā)現(xiàn)治療后患者血清VEGF 水平均較治療前明顯下降，且不良反應(yīng)發(fā)生例數(shù)少。認為化痰通絡(luò)中藥可降低血清VEGF 水平，在一定程度上改善血管內(nèi)皮功能。葉穗林等［22］探討加味溫膽湯(半夏，竹茹，陳皮，茯苓，澤瀉，甘草，生姜，加味:丹參，枳實)對痰瘀證高血壓病患者內(nèi)皮功能障礙的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)治療組患者ET、血管性血友病因子(von willebrand factor，vWF)比治療前下降，NO 比治療前升高，血管內(nèi)皮舒張功能指標有改善。認為加味溫膽湯有一定的血管內(nèi)皮保護作用。趙永華等［23］觀察頤年降壓飲(雙鉤藤20 g、石決明25 g、醋龜板20 g、法半夏10 g、廣陳皮8 g、炒枳殼12 g、懷牛膝25 g、益母草15 g、桑寄生20 g、制首烏20 g)對南粵地區(qū)早期原發(fā)性高血壓患者血管內(nèi)皮功能的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)治療后患者血漿ET-1、vWF 明顯降低，由此得出結(jié)論:頤年降壓飲的作用機制與保護血管內(nèi)皮功能，進而改善動脈彈性有關(guān)。

2.3 冠心病

薛亞軍等［24］發(fā)現(xiàn)復(fù)方蔞薤合劑(瓜蔞24 g、薤白12 g、丹參15 g、水蛭0.3 g、玉竹10 g、澤瀉10 g、五味子6 g、麥冬9 g、杜仲10 g)可降低冠心病穩(wěn)定型心絞痛患者血管ET-1 的水平，認為復(fù)方蔞薤合劑具有恢復(fù)內(nèi)皮功能，拮抗動脈粥樣硬化的作用。劉莉等［25］發(fā)現(xiàn)，在常規(guī)治療基礎(chǔ)上聯(lián)用瓜蔞皮注射液能明顯改善穩(wěn)定型心絞痛痰瘀互結(jié)證患者NO 及ET-1 水平。朱偉等［26］觀察應(yīng)用痰瘀同治方藥后心肌缺血大鼠血清中NO 水平，以及血漿中TXB2與6-Keto-PGF1α 的變化情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與化痰法、活血化瘀法相比，痰瘀同治法能顯著增強心肌缺血大鼠的NO 活性，改善PGⅠ2/TXA2的失衡狀態(tài)。認為痰瘀同治法抗急性心肌缺血的作用機制可能與其增強NO 活性，抑制血漿TXA2釋放，糾正PGⅠ2/TXA2失衡，從而促進缺血心肌功能恢復(fù)，緩解冠脈痙攣有密切關(guān)系。李軍等［27］在常規(guī)治療基礎(chǔ)上加用穩(wěn)心湯治療痰瘀阻絡(luò)型不穩(wěn)定型心絞痛患者，發(fā)現(xiàn)穩(wěn)心湯可明顯降低患者ⅠL-6、ⅠL-8 水平。李鵬等［28-29］發(fā)現(xiàn)心痛寧加味方(全瓜蔞、薤白、當(dāng)歸、丹參、紅花、川芎、厚樸、桔梗、新塔花、阿里紅)能顯著降低冠心病痰瘀互結(jié)證患者血漿ET 含量，提高血漿NO 含量水平，調(diào)節(jié)二者平衡。動物實驗結(jié)果表明，心痛寧加味方能有效抑制急性心肌缺血大鼠血清ET 分泌，促進NO 的合成和釋放。提示其抗心肌缺血作用機理可能與調(diào)節(jié)內(nèi)源性血管活性物質(zhì)NO、ET 平衡，保護血管內(nèi)皮損傷有關(guān)。

3 結(jié)語

內(nèi)皮細胞損傷是高脂血癥與動脈粥樣硬化、高血壓及冠心病等常見心血管疾病的共同基礎(chǔ)，內(nèi)皮損傷會導(dǎo)致脂質(zhì)代謝紊亂、分泌NO、TNF-α、NF-κB等炎性物質(zhì)，參與炎癥反應(yīng)。脂質(zhì)代謝紊亂是痰濁的物質(zhì)基礎(chǔ)，NO 等炎性因子與血瘀密切相關(guān)，因此，內(nèi)皮損傷與心血管疾病痰瘀互結(jié)證密切相關(guān)。

對上述祛痰化瘀方藥配伍組成與內(nèi)皮細胞功能對應(yīng)關(guān)系研究發(fā)現(xiàn)，藥物作用主要集中在影響內(nèi)皮細胞增殖、凋亡，以及調(diào)節(jié)內(nèi)皮細胞分泌活性物質(zhì)如NO、ET、VEGF、白介素等方面。其中，全瓜蔞在方藥中應(yīng)用最多，有較多證據(jù)證明其對NO、ET 有調(diào)節(jié)作用，也有研究發(fā)現(xiàn)其對ET/NO、NOS、VEGF、COX-2 及內(nèi)皮細胞增殖有影響;次之為薤白，除對ET 有調(diào)節(jié)作用，也發(fā)現(xiàn)其對NO、ET/NO、VEGF、vWF 有影響;再次為半夏、陳皮、川芎、水蛭、竹瀝等，對Ca2+、細胞凋亡率、Bcl-2、P53、Caspase-3 等有調(diào)節(jié)作用;人參、丹參、黃連等對細胞增殖、hs-CRP、TNF-α、ⅠL-6、NF-κB、ⅠCAM-1 等有影響，這些可能是祛痰化瘀方藥通過調(diào)節(jié)內(nèi)皮細胞功能治療心血管疾病的有效機制之一。

心血管疾病的發(fā)病機制較為復(fù)雜，還涉及到平滑肌細胞增殖、巨噬細胞泡沫化、以及二者與內(nèi)皮細胞相互作用等因素，目前祛痰化瘀方藥在心血管疾病中作用的研究主要集中于內(nèi)皮細胞的損傷方面，對內(nèi)皮細胞、平滑肌細胞、巨噬細胞三者相互作用的研究較少。開展祛痰化瘀方藥對多種病理機制之間關(guān)系影響的研究可能是今后心血管疾病痰瘀互結(jié)證的重要研究方向之一。

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