母血中胎兒DNA、胎盤mRNA對于診斷前置胎盤并胎盤粘連的臨床意義

馮會

摘要：目的 探討母血中胎兒DNA、胎盤mRNA對于診斷前置胎盤合并胎盤粘連意義。方法 選取我院自2012年4月～2014年4月收治的60例經(jīng)B超檢查確診為胎盤前置的單胎孕婦作為本次研究的觀察組研究對象，其中胎盤粘連的觀察A組孕婦30例，胎盤未粘連的觀察B組患者30例，選取同期的30例正常接受身體檢查的妊娠期孕婦作為對照組，對比三組患者的母血中胎兒DNA含量以及胎盤內(nèi)mRNA含量。結(jié)果 觀察A組患者的母血中胎兒DNA含量明顯高于對照組，數(shù)據(jù)對比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.05；觀察A組患者的mRNA含量明顯高于觀察B組和對照組，三組數(shù)據(jù)對比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0，.05；觀察B組的DNA含量明顯高于對照組，觀察B組中胎盤的mRNA含量與對照組對比差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義，P>0.05。結(jié)論 孕婦外周血中胎兒DNA含量直接影響患者胎盤是否發(fā)生粘連情況，胎盤內(nèi)mRNA含量直接反應(yīng)胎盤是否出現(xiàn)粘連情況。因此在產(chǎn)前檢查中測定母血中胎兒DNA、胎盤mRNA含量情況能夠有效的預(yù)測胎盤前置以及粘連情況。

關(guān)鍵詞：胎兒DNA；胎盤mRNA；前置胎盤；胎盤粘連

前置胎盤是指胎盤的附著位置比較靠子宮下段或者下緣部位，或者覆蓋宮頸內(nèi)口位置，該位置明顯低于胎兒的顯露部位。前置胎盤孕婦妊娠期比較嚴(yán)重的并發(fā)癥，一般發(fā)病率為0.24%～1.57%，在妊娠晚期很容易導(dǎo)致孕婦大出血，影響母嬰的生命安全[1]。我院在是通過實時熒光定量PCR法來測定孕婦外周血液中胎兒DNA含量以及胎盤中mRNA含量來測定前置胎盤以及胎盤粘連情況，現(xiàn)將研究結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取我院自2012年4月～2014年4月收治的60例經(jīng)B超檢查確診為胎盤前置的單胎孕婦作為本次研究的觀察組研究對象，其中胎盤粘連的觀察A組孕婦30例，年齡在24～33歲，平均年齡為（26.7±1.6）歲，平均妊娠時間為（31.4±1.2）w；胎盤未粘連的觀察B組患者30例，孕婦年齡在25～35歲，平均年齡為（31.0±0.4）歲，平均妊娠時間為（32.5±0.3）w；選取同期的30例正常接受身體檢查的妊娠期孕婦作為對照組，年齡在27～32歲，平均年齡為（29.7±1.4）歲，平均妊娠時間為（32.3±1.4）w。

1.2試劑和設(shè)備的選擇 試劑的選擇：德國的QLAamp DNAmini Kit、Qiagen Protease、Buffer AL；PCR反應(yīng)試劑，由上海博亞生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的引物SRY-109F： RY-254R5'-CCCCCTAGTACCCTGACAATGTATT-3'；探針由上海博雅生物技術(shù)有限公司提供，RY-142T：5'-（FAM）AGCAGTAGAGCAGTCAGGGAGGCAGA（TAMRA） -3'設(shè)備的選擇：由上海醫(yī)療器械五廠提供的型號為H.H.S11-2型號的電熱恒溫水浴鍋，由上海醫(yī)用分析儀器廠制造型號為TGL-16的臺式高速離心機；由德國Biometra公司生產(chǎn)的型號為FTC-2000的熒光定量PCR儀。

1.3方法 收集三組研究對象外周血液8ml，胎盤血液8ml，然后分別放入EDTA抗凝管內(nèi)，經(jīng)3000g的離心處理10min，將上層的離心出來的血漿取出，然后在進行3000g離心處理10min，再將上層的血漿提取出來，保存于溫度在零下20℃的冰箱內(nèi)；DNA和mRNA的提取，按照DNA和mRNA的提取盒說明進行操作，分別從離心并冷藏處理的血漿中提取50uL的DNA和mRNA提取物[2]。

1.4統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS18.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行處理分析，計數(shù)資料用率表示，采用χ2檢驗，計量資料采用（x±s）表示，用t檢驗，P<0.05為差異顯著，具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

觀察A組、觀察B組和對照組孕婦的外周血液中胎兒DNA含量（copies/ml），胎盤中mRNA含量（copy/ug）對比，觀察A組的孕婦胎兒DNA含量明顯高于觀察B組和對照組孕婦，三組數(shù)據(jù)對比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.05，見表1。

胎盤位置的不同對于胎盤內(nèi)mRNA和孕婦外周血液中DNA的含量（copies/ml）變化情況，檢測顯示孕婦外周血液中胎兒DNA含量（copy/ug），胎盤中mRNA含量與胎盤是否前置影響不大，見表2。

3 討論

前置胎盤嚴(yán)重影響了母嬰在分娩時的生命安全，雖然其發(fā)病率較低，同時出現(xiàn)胎盤粘連的情況也較低，但是其危害性較大所以一直是婦產(chǎn)科中非常關(guān)注的研究重點，本次研究中觀察A組的孕婦外周血液中胎兒DNA含量和胎盤中mRNA含量均明顯高于對照組和觀察B組，三組數(shù)據(jù)對比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.05。

前置胎盤合并胎盤粘連的孕婦外周血液中胎兒的DNA來源有3點：①在胎盤粘連的過程中母胎界面需要重新塑造，在重塑的過程中細胞會出現(xiàn)凋亡現(xiàn)象，這樣壞死細胞便會釋放出胎兒的DNA進入到母體的血液中[3]；②胎兒細胞由于胎盤粘連的原因，然后直接進入母體的組織并進行血液循環(huán)，但是會出現(xiàn)免疫組織排斥的情況，然后將細胞殺死釋放出胎兒的DNA；③胎盤內(nèi)處于游離狀態(tài)的DNA沿著粘連組織直接進入母體的血液循環(huán)系統(tǒng)。

mRNA即信使核糖核酸，該物質(zhì)也攜帶由遺傳信息的蛋白質(zhì)合成物[4]，它能夠從脫氧核糖核酸（簡稱DNA）中轉(zhuǎn)錄合成攜帶遺傳信息的核糖核酸，本次研究中胎盤組織中基質(zhì)金屬蛋白酶（簡稱MMP）在胎盤粘連的組織中mRNA的表達水平高于未發(fā)生粘連的觀察B組和對照組，因此表示胎盤界面的MMP增加了子宮細胞外基質(zhì)的彈力蛋白以及膠原蛋白的水解，從而導(dǎo)致細胞過度的侵入從而造成組織的粘連現(xiàn)象[5]。

綜上所述，孕婦產(chǎn)前檢查時一定要詳細檢查孕產(chǎn)婦外周血液中胎兒DNA含量以及胎盤內(nèi)組織的mRNA含量，從而預(yù)測胎盤發(fā)生粘連情況，做好相應(yīng)的準(zhǔn)備工作，盡可能的降低分娩時產(chǎn)婦和嬰兒的危險。

參考文獻：

[1]徐愛群，邊旭明.胎兒游離RNA在產(chǎn)前診斷中的研究進展[J].國際婦產(chǎn)科學(xué)雜志， 2010，30（4）：442.

[2]段濤，黃一穎.母血中胎兒DNA預(yù)測前置胎盤合并粘連的探討[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展，2010，15（11）：854-855.

[3]李凌.人工流產(chǎn)與前置胎盤、胎盤粘連及胎盤植入的臨床發(fā)生率研究[J].醫(yī)學(xué)信息，2013，（18）：71-71.

[4]張瀟瀟，陳廉.前置胎盤的病因研究及分類[J].實用婦產(chǎn)科雜志，2009，25（10）：577-578.

編輯/哈濤