血清膽紅素水平在激素敏感型原發(fā)性腎病綜合征患兒中的研究

龔俊華，楊志娜，賁學(xué)芳，宋明輝，潘 濤

(北京軍區(qū)北戴河療養(yǎng)院281醫(yī)院體檢中心檢驗(yàn)科，s河北秦皇島 066100)

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·論 著·

血清膽紅素水平在激素敏感型原發(fā)性腎病綜合征患兒中的研究

龔俊華，楊志娜，賁學(xué)芳，宋明輝，潘 濤

(北京軍區(qū)北戴河療養(yǎng)院281醫(yī)院體檢中心檢驗(yàn)科，s河北秦皇島 066100)

目的 應(yīng)用糖皮質(zhì)激素治療激素敏感型原發(fā)性腎病綜合征(SSINS)患兒蛋白尿，觀察膽紅素、血脂、尿蛋白水平的變化。方法 遴選該院65例SSINS患兒作為治療組，50例健康兒童作為健康對照組。治療組采用潑尼松藥物治療，分別在治療前，治療后第2周、第4周、第6周、第8周、第10周、第12周檢測6種生化指標(biāo)：總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、總膽紅素(TBIL)、直接膽紅素(DBIL)、清蛋白(ALB)以及24 h尿蛋白(24 hUpr)。結(jié)果 治療前，膽紅素水平較健康對照組偏低，2組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且經(jīng)相關(guān)性分析，TBIL與24 hUpr水平呈負(fù)相關(guān)(t=13.341，r=-0.299)；治療后，TC水平在第8周接近正常，ALB在第10恢復(fù)至正常，TG在第12周降至正常，但TBIL、DBIL和24 hUpr均在第2周恢復(fù)至正常水平。治療前、后比較膽紅素水平，2組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 膽紅素在SSINS臨床早期治療診斷及疾病預(yù)后評價(jià)中具有重要臨床價(jià)值。

原發(fā)性腎病綜合征； 激素敏感型； 糖皮質(zhì)激素； 膽紅素； 兒童

大量的研究證實(shí)膽紅素與腎臟疾病的腎損傷程度有關(guān)，與24 h尿蛋白(24 hUpr)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系[1-3]。但目前膽紅素在腎病綜合征患者中的變化研究甚少。有關(guān)研究表明蛋白尿是原發(fā)性腎病綜合征(INS)臨床診斷的必備條件，如果把膽紅素作為INS診斷的輔助或必需條件，是否具有臨床應(yīng)用價(jià)值?，F(xiàn)對膽紅素與激素敏感型原發(fā)性腎病綜合征之間的關(guān)系進(jìn)行研究，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 遴選該院腎病中心65例2012年10月至2014年8月首診治療的激素敏感型原發(fā)性腎病綜合征(SSINS)兒童，作為治療組，其均符合2001年中華醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會腎臟病學(xué)組在珠海制定的小兒腎小球疾病的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]。其中男36例，女29例，年齡3～12歲，平均年齡(7.2±4.5)歲，同時(shí)選取50例健康兒童作為健康對照組。

1.2 排除標(biāo)準(zhǔn) 患兒均排除紅細(xì)胞、血紅蛋白、血小板水平均異常，家族性高膽固醇血癥、肝膽疾病、血液疾病、腎功能不全、乙型肝炎、丙型肝炎及嚴(yán)重感染，以及系統(tǒng)性紅斑狼瘡，過敏性紫癜和急、慢性腎炎。

1.3 敏感判斷標(biāo)準(zhǔn)[5]足量的潑尼松[2 mg/(kg·d)或60 mg/(m2·d)]治療小于或等于4周的尿蛋白轉(zhuǎn)陰者。

1.4 治療方法 參照國內(nèi)中華醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會腎臟病學(xué)組制定的激素敏感、復(fù)發(fā)/依賴腎病綜合征診治循證指南(試行)治療方案[5]：給予潑尼松2 mg/(kg·d)(按身高、體質(zhì)量計(jì)算)，最大劑量不超過80 mg/d,分次口服，待尿蛋白轉(zhuǎn)陰后，晨起1次頓服，口服6周，再隔日晨起1次頓服1.5 mg/kg(最大劑量為60 mg/d)，共6周，然后逐漸減量。

1.5 標(biāo)本采集方法 (1)血標(biāo)本收集方法：用藥治療前后，患者全部禁食12 h以上，于次日早晨靜脈采取血標(biāo)本。(2)24 h尿收集方法：收集標(biāo)本前1 d早晨6：00以前把尿液排空，以后每次排尿收集至清潔容器，直至次日早晨6：00止，記錄總尿量，搖勻,5 mL送檢。

1.6 觀察指標(biāo)和方法 觀察治療時(shí)間為12周，觀察指標(biāo)包括：血清總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、總膽紅素(TBIL)、直接膽紅素(DBIL)、清蛋白(ALB)、24 hUpr。TC和TG均使用酶聯(lián)免疫比色法，TBIL采用氧化法，ALB應(yīng)用溴甲酚綠法，24 hUpr采用鄰苯二酚紫色鉬酸鹽法。使用全自動奧林巴斯AU640生化儀檢測，試劑全部由Randox公司提供，嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行操作。

2 結(jié) 果

2.1 2組研究對象各指標(biāo)結(jié)果比較 治療前，比較2組研究對象血清TBIL和DBIL水平，糖皮質(zhì)激素治療組較健康對照組偏低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。治療后(第2周)血清TBIL和DBIL水平較治療前均明顯上升，而24 hUpr水平較治療前明顯下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；治療后12周血清TBIL和DBIL水平均在第2周恢復(fù)正常水平，血、尿蛋白隨治療時(shí)間的延長逐漸恢復(fù)，其中，24 hUpr在第2周降至正常水平，血清ALB在第10周恢復(fù)至正常水平，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 2組研究對象各項(xiàng)檢測指標(biāo)的結(jié)果比較

注：與健康對照組比較，△P<0.05；與治療前比較，#P<0.05。TC治療后第8周與健康對照組比較，aP<0.05；TG治療12周后與健康對照組比較，bP<0.05；TBIL治療2周后與健康對照組比較，cP<0.05；DBIL治療2周后與健康對照組比較，dP<0.05；ALB治療10周后與健康對照組比較，eP<0.05；24 hUpr治療2周后與健康對照組比較，fP<0.05。

2.2 24 hUpr與血清TBIL的相關(guān)性 24 hUpr與血清TBIL水平經(jīng)相關(guān)性分析，表明兩者呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(t=13.341，r=-0.299，P=0.000)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見圖 1。

圖1 24 hUpr與血清TBIL水平散點(diǎn)圖

3 討 論

膽紅素是一種亞鐵血紅素的降解終產(chǎn)物，具有保護(hù)潛在的內(nèi)源性強(qiáng)抗氧化劑作用[6]。眾多研究已證實(shí)膽紅素具有保護(hù)腎臟的作用，Ryu等[7]認(rèn)為低水平的膽紅素可以降低慢性腎病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)；Zelle等[8]報(bào)道膽紅素在糖尿病腎病患者中有保護(hù)作用；Boon等[9]研究表明輕度升高的膽紅素可以減少腎臟和心腦血管疾病的發(fā)生率。本研究結(jié)果顯示，INS患者膽紅素水平較健康對照者偏低，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與胡鵬等[10]和Song等[11]的研究結(jié)果相符。

本組數(shù)據(jù)表明，經(jīng)潑尼松治療12周后，治療組血脂隨治療時(shí)間的延長明顯下降，其中，TC在第8周接近正常水平，TG在第12周降至正常水平；膽紅素隨治療時(shí)間的延長明顯上升，且TBIL和DBIL均在第2周接近正常水平；血、尿蛋白隨治療時(shí)間的延長逐漸恢復(fù)，其中24 hUpr也在第2周降至正常水平，血清ALB在第10周恢復(fù)至正常水平，說明24 hUpr與膽紅素水平幾乎同時(shí)下降，藥物在改善蛋白尿的同時(shí)，膽紅素也得到同步改善。治療后第2周血脂、膽紅素與血、尿蛋白水平的變化，本組結(jié)果顯示僅膽紅素水平較治療前明顯上升，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。進(jìn)一步對膽紅素與24 hUpr進(jìn)行相關(guān)性分析，表明兩者呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.299，P=0.000)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，與Okada等[12]的研究結(jié)果基本一致。

分析其他有關(guān)影響膽紅素的因素，膽紅素代謝最常見的正常通道是腸肝循環(huán)形成膽素原經(jīng)腎臟排出，但是否腎病綜合征血清ALB減少，促使肝臟代償性合成增加，膽紅素代謝加快致其水平降低，尚待論證。膽紅素受腎病綜合征病理變化的影響也應(yīng)引起關(guān)注，該疾病在發(fā)生高脂血癥時(shí)，低密度脂蛋白(LDL)升高易氧化，沉積于動脈內(nèi)膜致動脈粥樣硬化，但是膽紅素可以減少LDL形成氧化型LDL(OX-LDL)，增加膽固醇的清除。Kinra等[13]報(bào)道腎病綜合征發(fā)生時(shí)，產(chǎn)生大量的氧自由基損傷腎小球毛細(xì)血管壁，膽紅素對抗其氧化損傷；Dogra等[14]研究表明腎病綜合征抗氧化能力是下降的，都說明了具有抗氧化性物質(zhì)的膽紅素消耗是導(dǎo)致其水平下降。膽紅素受脂肪酸水平的影響研究甚少，正常生理情況下，ALB是與膽紅素和脂肪酸結(jié)合的，當(dāng)脂肪酸增高，易競爭膽紅素與ALB的結(jié)合部位,致游離膽紅素增加并滲透到各組織細(xì)胞中，而腎病綜合征TG升高，分解代謝產(chǎn)生的脂肪酸增多，可能易發(fā)生上述生理變化，致使膽紅素游離于組織細(xì)胞而檢測水平相對偏低[15-16]。分析本組尿蛋白對膽紅素的影響因素，正常生理?xiàng)l件下，ALB是膽紅素的主要運(yùn)輸載體，在血漿中主要以膽紅素-清蛋白復(fù)合體形式存在和傳遞，而腎病綜合征蛋白尿主要以ALB尿丟失最高[17]。本組證實(shí)這種膽紅素與尿蛋白水平的變化關(guān)系，所以，若腎病綜合征腎小球?yàn)V過膜的分子屏障及電荷屏障受損，在腎病綜合征患者代謝過程中，膽紅素水平會隨尿蛋白的丟失而快速下降。

綜上所述，雖然影響膽紅素的代謝有諸多方面，但是本研究結(jié)果表明，膽紅素與24 hUpr水平呈負(fù)相關(guān)且兩者水平呈同步平行變化關(guān)系，所以，膽紅素與尿蛋白類似，對腎病綜合征臨床診斷及預(yù)后評價(jià)有著重要的臨床價(jià)值。

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Practice value of serum bilirubin patients with steroid-sensitive idiopathic primary nephrotic syndrome in children*

GONGJun-hua,YANGZhi-na,BENXue-fang,SONGMing-hui,PANTao

(DepartmentofLaboratory,PLA281HospitalofBeijingMilitaryArea,Qinhuangdao,Hebei066100,China)

Objective To study the chang of total cholesterol，triglyeride，albumin，bilirubin and urine protein in the patients with steroid-sensitive idiopathic nephrotic syndrome in childrenMethods 65 patients with steroid-sensitive idiopathic nephrotic syndrome were chose as a group.A control group comprised 50 health children.After the treatment of prednisone,the levels of total cholesterol，triglyeride，albumin，bilirubin and 24 hour urinary protein were analysized at 2 week,4 week,6 week,8 week,10 week and 12 week.Results Compared with control group,the bilirubin declined in the patients with steroid-sensitive idiopathic nephrotic syndrome.There was significant statistical difference between them (P<0.05).After the treatment of prednisone,the total bilirubin were negatively correlated with 24 hour urinary protein.The total cholesterol,serum albumin and triglyeride decreased the level of the health children at 8 week,10 week and 12 week，respectively.But total bilirubin and direct bilirubin get recover at 2 week.Pre-and posttreatment the total bilirubin were significant statistical difference (P<0.05).Conclusion The level change of bilirubin can be applied to patients with idiopathic nephrotic syndrome for clinical diagnosis and assession and the change can be similar to 24 hour urinary protein.

idiopathic nephrotic syndrome; steroid-sensitive; glucocorticoid; bilirubin; children

河北省秦皇島市科技計(jì)劃項(xiàng)目(201401A283)。

龔俊華，男，碩士，主管技師，主要從事生物化學(xué)研究。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.12.008

A

1672-9455(2015)12-1678-03

2014-12-25

2015-02-18)