藏藥結(jié)血蒿揮發(fā)油提取工藝研究

許涼涼　伊辛　魏文浩　尹雪雁　蔡程科

藏藥結(jié)血蒿揮發(fā)油提取工藝研究

許涼涼伊辛魏文浩尹雪雁蔡程科

【摘要】目的通過正交設計優(yōu)選藏藥結(jié)血蒿揮發(fā)油提取工藝，確定結(jié)血蒿揮發(fā)油提取最佳工藝。方法采用水蒸氣蒸餾法提取結(jié)血蒿揮發(fā)油，設計L9(34)的正交表，以出油率作為考察指標，考察加水量、浸泡時間、提取時間三個因素對結(jié)血蒿揮發(fā)油提取的影響。由于結(jié)血蒿浸膏也是所需功效成分，因此同時考察三個因素對浸膏得率的影響。結(jié)果對結(jié)血蒿揮發(fā)油出油率，浸泡時間和提取時間有顯著影響(P<0.05)，有統(tǒng)計學意義，而加水量對其沒有顯著影響(P>0.05)；對結(jié)血蒿浸膏得率，加水量對其具有顯著影響(P<0.05)，而浸泡時間、提取時間對其無顯著影響(P>0.05)，無統(tǒng)計學意義。經(jīng)驗證最終確定結(jié)血蒿揮發(fā)油最佳提取工藝為加水量18倍，浸泡1小時，提取5小時，出油率可達0.66%，浸膏得率可達23.0%。結(jié)論通過實驗研究證明該提取工藝可靠合理，可用于結(jié)血蒿揮發(fā)油的提取。

【關(guān)鍵詞】結(jié)血蒿；藏藥；揮發(fā)油；正交實驗

結(jié)血蒿為菊科植物毛蓮蒿ArtemisiavestitaWall.ex Bess的地上部分，是常用藏藥之一，其味辛、苦，性寒，具有清熱解毒，殺蟲利濕的功效，《藍琉璃》記載其具有“抗菌解毒，治腫塊及瘡瘍”的作用；《晶珠本草》記載了其具有“消炎，治蟲病”的作用；《新編藏醫(yī)學》載其“治療腦炎等炎癥及寄生蟲引起的腸絞痛、瘡瘍等癥”[1-3]。本實驗對結(jié)血蒿提取工藝進行研究，采用水蒸汽蒸餾法提取結(jié)血蒿揮發(fā)油，設計L9(3)4的正交表，以出油率作為指標，考察加水量、浸泡時間、提取時間三個因素對揮發(fā)油提取的影響，同時考察三個因素對浸膏得率的影響，確定結(jié)血蒿揮發(fā)油最佳提取工藝。

1儀器與試藥

1.1儀器

98-1-B型電子調(diào)溫電熱套(天津市泰析特儀器有限公司)；BB89-2000揮發(fā)油提取器(北京中西遠大科技有限公司)；DT-200A電子天平(常熟市金羊砝碼儀器有限公司)。

1.2試藥

結(jié)血蒿，西藏采集，經(jīng)西藏藏醫(yī)學院尼瑪次仁教授鑒定為菊科植物毛蓮蒿ArtemisiavestitaWall.ex Bess的地上部分。

2方法與結(jié)果

2.1揮發(fā)油測定方法

本實驗采用水蒸汽蒸餾法提取結(jié)血蒿揮發(fā)油。根據(jù)預實驗確定結(jié)血蒿揮發(fā)油的密度<1.0g/cm3，采用《中華人民共和國藥典》(一部)2010版附錄XD揮發(fā)油測定法項下的甲法進行測定揮發(fā)油量[4]。

2.2預實驗

2.2.1提取時間考察稱取結(jié)血蒿藥材50.0 g，置5000 ml圓底燒瓶中，加入16倍去離子水，浸泡3小時，加熱至沸后測定1～5小時揮發(fā)油提取量，重復3次，取平均值，結(jié)果見表1。

表1　結(jié)血蒿揮發(fā)油提取時間考察

由表1結(jié)果可知水蒸氣蒸餾提取結(jié)血蒿4小時揮發(fā)油相對累積出油率即達到96.8%。由于50 g藥材揮發(fā)油出油量少，因此確定稱取100 g藥材進行正交試驗，考察提取時間4小時、5小時、6小時。

2.2.2浸泡時間考察

取結(jié)血蒿藥材50.0 g(3份)，各置5000 ml圓底燒瓶中，加入16倍去離子水，分別浸泡0小時，1小時，2小時，加熱至沸后讀取4小時后揮發(fā)油量，結(jié)果見圖1。

圖1　結(jié)血蒿揮發(fā)油浸泡時間考察圖

由圖1可知浸泡時間對結(jié)血蒿揮發(fā)油的提取有影響，隨著浸泡時間增加，出油率增加。因此正交試驗考察浸泡時間(浸泡1小時、2小時、3小時)。

2.3正交設計

根據(jù)預實驗，以加水量(A)、浸泡時間(B)、提取時間(C)作為影響因素，設計L9(3)4的正交表，以出油率作為考察指標，同時考察其對浸膏得率的影響，優(yōu)選結(jié)血蒿揮發(fā)油最佳提取工藝。稱取結(jié)血蒿藥材100.0 g按正交表進行實驗，具體見表3和表4。

表3　結(jié)血蒿提取工藝因素水平表

2.4結(jié)果

2.4.1結(jié)血蒿揮發(fā)油以出油率為考察指標，用SPSS 16.0進行正交設計結(jié)果分析得浸泡時間、提取時間對結(jié)血蒿揮發(fā)油的提取均有顯著影響(PB=0.025，PC=0.008<0.05)，具有統(tǒng)計學意義；而加水量對結(jié)血蒿揮發(fā)油的提取無顯著影響(P=0.117>0.05)，不具有統(tǒng)計學意義。影響大小為提取時間>浸泡時間>加水量。確定最佳工藝為A3B3C3，即藥材加20倍量水，浸泡3小時，蒸餾提取6小時；其次為A2B1C2，即藥材加18倍水，浸泡1小時，蒸餾提取5小時。

2.4.2結(jié)血蒿浸膏得率以浸膏得率為考察指標，用SPSS 16.0進行正交設計結(jié)果分析得加水量對其具有顯著影響(PA=0.046<0.05)，而浸泡時間、提取時間對其無顯著影響(PB=0.446，PC=0.111>

表4　結(jié)血蒿提取正交試驗結(jié)果

注：a為出油率；b為浸膏得率；出油率=揮發(fā)油體積/藥材質(zhì)量×100%；浸膏得率=浸膏量/生藥投入量×100%

0.05)，無統(tǒng)計學意義；影響大小為加水量>提取時間>浸泡時間。

3工藝驗證

稱取結(jié)血蒿藥材6份，各100.0 g，按正交試驗設計優(yōu)選的最佳工藝，第二佳工藝分別進行工藝驗證，各重復3次，測定出油率，結(jié)果取3次試驗的平均值。試驗結(jié)果出油率分別為0.72%、0.66%，由結(jié)果知最佳工藝與第二佳工藝僅相差0.06%，浸膏得率沒有差異，因此從節(jié)約資源、成本和更好地保留結(jié)血蒿有效成分等方面考慮，選擇第二佳工藝即藥材加18倍水，浸泡1小時，蒸餾提取5小時，作為結(jié)血蒿揮發(fā)油的最佳提取工藝。

4討論

結(jié)血蒿是西藏的常用藏藥之一，其氣味芳香，目前對其揮發(fā)油的研究較少，周麗娟等[5]對毛蓮蒿等蒿屬菊科的植物殺蟲抑菌活性進行了研究，研究發(fā)現(xiàn)大部分蒿屬菊科植物都具有抗炎解毒作用，而且大部分活性成分為其中的芳香性成分，因此本實驗研究結(jié)血蒿，不僅以結(jié)血蒿濃縮提取液作為藥效部分，也保留其芳香性成分，使其更好地發(fā)揮抗炎抑菌作用，以制備藏藥牙膏。

本實驗采用水蒸汽蒸餾法，通過設計L9(34)正交表對結(jié)血蒿揮發(fā)油的提取工藝進行了優(yōu)選，工藝驗證正交表試驗結(jié)果中的最佳方案和第二佳方案，從資源保護，節(jié)約成本等方面考慮，確定結(jié)血蒿揮發(fā)油提取的最佳工藝為藥材加18倍水，浸泡1小時，蒸餾提取5小時。工藝驗證結(jié)果與正交試驗結(jié)果基本一致，說明采用此工藝提取結(jié)血蒿揮發(fā)油合理可靠。

在實驗中發(fā)現(xiàn)夏季提取結(jié)血蒿揮發(fā)油時，當提取一定揮發(fā)油時，揮發(fā)油有下沉現(xiàn)象；而秋季提取時此現(xiàn)象不再出現(xiàn)。分析其原因有可能結(jié)血蒿揮發(fā)油中包含重油和輕油，當外界溫度高時原本混合油中的輕油揮發(fā)快，導致?lián)]發(fā)油下沉；當外界溫度較低時則混合油中的輕油揮發(fā)慢，輕油所占比重較重油大，因此提取過程中應注意外界溫度。另外，由于結(jié)血蒿藥材質(zhì)輕，加水浸泡時要進行攪拌使其充分浸泡。

參考文獻

[1]巴桑德吉，次尼貢布.藏藥結(jié)血蒿膏質(zhì)量標準的研究[J].中國民族醫(yī)藥雜志，2010，16(12):52.

[2]王聚樂，李長山，頓珠，等.藏藥結(jié)血蒿水提取物的免疫抑制作用研究[J].四川大學學報(醫(yī)學版)，2006，37(6):908-912.

[3]強巴赤烈，占堆，次仁巴珠.中華本草藏藥卷[M].上海:上?？萍汲霭嫔纾?002:202-203.

[4]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010:附錄63.

[5]周利娟，桑曉清，孫永艷，等.蒿屬植物的農(nóng)藥活性及其有效成分[J].江西農(nóng)業(yè)大學學報，2012，34(4):699-705.

(本文編輯：董歷華)

·論著·

作者單位：100029北京中醫(yī)藥大學基礎醫(yī)學院[張軒(博士研究生)、費占洋、郝宇、連易、王鴻、賀娟]

Extraction process study for essential oil ofArtemisiavestitaWall. ex BessXULiang-liang,YIXin,WEIWen-hao，etal.SchoolofChinesePharmacy,BeijingUniversityofChineseMedicine,Beijing100102,China

【Abstract】ObjectiveTo optimize the extraction press for essential oil of Artemisia vestita Wall through orthogonal design and to determine the best extraction process. MethodsArtemisia vestita Wall oil was extracted by steam distillation extraction, Orthogonal test was used to evaluate the volume of added water, soaking time and extracting time using oil extraction rate as the evaluating indicator. Because extract of Artemisia vestita Wall is also the functional component needed, to investigating the influence of three factors on the extraction rate. ResultsAs for oil extraction rate, soaking time and extracting time had obvious significance(P<0.05)with statistical significance, while the volume of added water had not statistical significance(P>0.05);As for extraction rate, only the volume of added water had obvious significance(P<0.05)with statistical significance, soaking time and extracting time had not obvious significance. The best extraction press for essential oil of Artemisia vestita Wall was as follows:18-fold water added, soaked for 1 hour, extracted for 5 hours. Oil extraction rate was 0.66%, extraction rate was 23.0%. ConclusionThe experimental study showed that the extraction process was reliable and reasonable, it can be used for essential oil of Artemisia vestita Wall.

【Key words】Artemisia vestita Wall；Tibetan medicine；Essential oil；Orthogonal design

通訊作者：賀娟(1964- )，女，博士，教授，博士生導師。研究方向：《內(nèi)經(jīng)》五運六氣理論研究。E-mail:hejuan6428@sina.com

作者簡介:張軒(1987- )，女，2013級在讀博士研究生。研究方向：五運六氣學說。E-mail:1205230037@qq.com

基金項目：國家自然科學基金(81072896)

(收稿日期：2014-04-27)

Corresponding author：CAI Cheng-ke，E-mail:cck98@126.com

【中圖分類號】R284.2

【文獻標識碼】A

doi:10.3969/j.issn.1674-1749.2015.03.016