脾亢患者冷凝集素干擾致交叉配血不合的處理1 例

胡曉玲，汪新明，鄧淑芬，葉 蕾

冷凝集素會(huì)給交叉配血及血型鑒定帶來干擾，因其為IgM 類完全抗體， 在低溫時(shí)可使自身紅細(xì)胞、O 型紅細(xì)胞及獻(xiàn)血員相同血型的紅細(xì)胞發(fā)生凝集[1]。 在溫度達(dá)到20 ℃以上時(shí)，冷凝集素效價(jià)逐漸降低，凝集消失。 筆者在工作中遇到1 例脾功能亢進(jìn)患者，在手術(shù)用血時(shí)因冷凝集素干擾導(dǎo)致交叉配血不合， 采用37 ℃加溫鹽水洗滌紅細(xì)胞及37 ℃水浴血清的方法快速消除干擾，及時(shí)準(zhǔn)確地為患者發(fā)放了相合的血液， 保證了輸血治療的安全有效，現(xiàn)將處理過程報(bào)告如下。

1 病例摘要

患者，女，59 歲，既往無輸血史，臨床診斷為巨脾并脾功能亢進(jìn)，實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果：Hb 79 g/L，RBC 0.56×1012/L，WBC 2.24×109/L，血型鑒定為AB 型；在手術(shù)備血時(shí)血型正反定型為AB 型， 抗體篩選試驗(yàn)陰性；次日術(shù)中提血時(shí)，與AB 型血液交叉配血不相合。

2 試劑與檢測(cè)方法

2.1 主要試劑和儀器 戴安娜全自動(dòng)配血儀、戴安娜抗人球蛋白檢測(cè)卡、戴安娜血型檢測(cè)卡，反定型標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞、抗體篩選細(xì)胞（長春博迅生物制品），強(qiáng)生抗人球蛋白檢測(cè)卡、強(qiáng)生血型檢測(cè)卡，強(qiáng)生半自動(dòng)配血專用孵育器、離心機(jī)。

2.2 術(shù)前備血的血清學(xué)試驗(yàn) 此患者輸血目的為手術(shù)備血，在術(shù)前1 d 接到手術(shù)備血申請(qǐng)單，后即為該患者做血型鑒定和抗體篩選試驗(yàn)，所用試劑為反定紅細(xì)胞及抗體篩選細(xì)胞，戴安娜血型鑒定卡及戴安娜抗人球蛋白檢測(cè)卡。 因戴安娜試劑卡所要求的紅細(xì)胞濃度為0.8%的紅細(xì)胞懸液，標(biāo)準(zhǔn)反定紅細(xì)胞及抗篩細(xì)胞的濃度均為3%～5%，經(jīng)過反復(fù)的試驗(yàn)得出我實(shí)驗(yàn)室所使用的反定紅細(xì)胞及抗篩細(xì)胞最適配制方法為：2 ml 生理鹽水加入3 滴標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞（以標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞試劑瓶的滴管為標(biāo)準(zhǔn)） 或是抗體篩選細(xì)胞，0.8%的紅細(xì)胞懸液配制完成后， 放入戴安娜全自動(dòng)配血儀內(nèi)備用，將患者樣本及檢測(cè)卡放入儀器內(nèi)，20 min 后試驗(yàn)結(jié)束， 血型鑒定結(jié)果為正反定型均為AB 型，RH（D）陽性，抗體篩選試驗(yàn)陰性。備血完成，標(biāo)本放入4 ℃冰箱保存。

2.3 術(shù)中用血交叉配血試驗(yàn) 在次日為該患者做交叉配血試驗(yàn)時(shí)，與AB 型獻(xiàn)血員交叉配血不相合，此次試驗(yàn)所用試劑卡為強(qiáng)生交叉配血卡，其方法為微柱凝膠法.取配血卡1 張，撕開錫箔紙兩孔，取干燥潔凈試管2 只，將受血者及供血者的紅細(xì)胞各取30 μl，加入1 ml 生理鹽水配制成3%的紅細(xì)胞懸液待用。 主側(cè)加入患者血清40 μl 和獻(xiàn)血員紅細(xì)胞懸液10 μl，次側(cè)加入患者紅細(xì)胞懸液10 μl 及獻(xiàn)血員血清40 μl，放入孵育器孵育10 min，離心5 min，取出觀察結(jié)果，主次側(cè)均凝集，交叉配血不相合。

2.4 復(fù)查ABO 血型及抗體篩選試驗(yàn)結(jié)果 核對(duì)標(biāo)本及患者信息、復(fù)查血型，取強(qiáng)生血型卡1 張，前4孔內(nèi)加入患者紅細(xì)胞懸液10 μl，后2 孔加入患者血清40 μl， 離心5 min 后觀察結(jié)果， 正定型為AB 型RH（D）陽性，反定型為O 型，正反定型結(jié)果不一致。再次復(fù)查抗體篩選，取強(qiáng)生交叉配血卡1 張，撕開錫箔紙4 孔，分別加入患者血清40 μl，前面3 孔依次加入抗體篩選細(xì)胞1、2、3 號(hào)細(xì)胞， 第4 孔加入患者紅細(xì)胞懸液10 μl，孵育10 min，離心5 min 后觀察結(jié)果，抗體篩選試驗(yàn)陽性，自身對(duì)照陽性。 結(jié)合術(shù)前備血試驗(yàn)結(jié)果，考慮該患者可能為冷凝集素干擾。

2.5 紅細(xì)胞及血清的處理及結(jié)果 將患者的血清放入37 ℃水浴箱中，水浴10 min，患者紅細(xì)胞用37 ℃溫鹽水反復(fù)洗滌3～5 次， 鏡下觀察無凝集后，再次做ABO 血型鑒定及交叉配血[2]，經(jīng)過37 ℃水浴后的血清及加溫洗滌后的紅細(xì)胞與AB 型獻(xiàn)血員交叉配血相合，血型鑒定為AB 型RH（D）陽性，正反定型結(jié)果一致。 發(fā)血時(shí)告知臨床該患者血液冷凝集素效價(jià)高，輸注時(shí)需保溫緩慢輸注，并密切觀察，室內(nèi)溫度需控制到25～30 ℃。 本例術(shù)中輸注紅細(xì)胞3 U，普通冰凍血漿300 ml，未出現(xiàn)不良反應(yīng)。

3 討論

冷凝集素存在于正常人血清中， 但效價(jià)很低，一般情況對(duì)交叉配血及血型鑒定不會(huì)造成干擾。 在溫度較寒冷的冬天及室溫降至4 ℃時(shí)作用最強(qiáng)，但此種凝集反應(yīng)是可逆的，在恢復(fù)室溫至20 ℃以上時(shí)即可消失。 此例手術(shù)備血時(shí)為新鮮抽取標(biāo)本，在檢測(cè)時(shí)未產(chǎn)生冷凝集素。 而次日交叉配血時(shí)，由于標(biāo)本在4 ℃冰箱中保存， 使患者血液中的冷凝集素效價(jià)增高，導(dǎo)致交叉配血不相合。 此例是手術(shù)患者，在術(shù)前1 d 已做了輸血相關(guān)的血清學(xué)試驗(yàn)， 在術(shù)中用血時(shí)配血不合，結(jié)合術(shù)前試驗(yàn)結(jié)果，就能準(zhǔn)確判斷是由于冷凝集素干擾所致，所以在重復(fù)交叉配血實(shí)驗(yàn)時(shí)，采用37 ℃水浴血清及加溫鹽水洗滌紅細(xì)胞的方法，就能快速消除冷凝集素對(duì)試驗(yàn)的干擾。

在臨床上易出現(xiàn)冷凝集素干擾的病例一般為：老年、兒童、長期反復(fù)輸血的慢性病、肺炎、多發(fā)性骨髓瘤、血液病及造血干細(xì)胞移植后、腎臟疾病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、腫瘤、嚴(yán)重的肝臟疾病等患者。 如交叉配血試驗(yàn)時(shí)僅次側(cè)發(fā)生凝集， 抗體篩選試驗(yàn)陰性，自身對(duì)照陽性，可判斷為自身抗體。 在確認(rèn)供血者和受血者血型均正確的情況下，可以發(fā)血，但應(yīng)囑緩慢輸注、密切觀察。 如在交叉配血試驗(yàn)時(shí)主側(cè)凝集，抗體篩選試驗(yàn)陽性，在排除是否為ABO 以外的血型抗體時(shí)，即可用37 ℃水浴血清及加溫鹽水洗滌紅細(xì)胞的方法來確認(rèn)是否為冷凝集素干擾，如此種方法后交叉配血相合，才能發(fā)血，反之則不能輸注。 針對(duì)此類患者的輸血原則是，需搶救生命時(shí)才選擇輸注；交叉配血標(biāo)本應(yīng)采用新鮮血，無溶血、無脂肪血、無污染；輸注時(shí)血液必須在室溫復(fù)溫，調(diào)高室內(nèi)溫度至20～30 ℃，密切觀察。

[1] 劉引霞, 潘俊均, 李雪瑩. 紅細(xì)胞冷凝集素現(xiàn)象2 例臨床分析[J]. 國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2014, 35(8)：75.

[2] 王靜, 徐鳳娟, 葉紅輝. 高效價(jià)冷凝集素對(duì)血型鑒定和交叉配血的影響相關(guān)分析[J]. 臨床血液學(xué)雜志, 2014, 27(6)：23.