無花果多糖的研究進展

宰炎冰趙冰

（1河南中醫(yī)學院科研處，鄭州450008；2河南中醫(yī)學院第三附屬醫(yī)院皮膚科，鄭州450008）

無花果多糖的研究進展

宰炎冰1趙冰2

（1河南中醫(yī)學院科研處，鄭州450008；2河南中醫(yī)學院第三附屬醫(yī)院皮膚科，鄭州450008）

無花果是世界上最古老、也是人類最早栽培的果樹之一，具有很高的營養(yǎng)價值。無花果多糖是無花果中的主要活性成分，具有多種生物學功能，如預防疾病、延緩衰老、提高宿主免疫功能、抑制腫瘤細胞增殖、抑制腫瘤轉移、抗氧化、清除氧自由基等，在食品、醫(yī)藥等領域具有廣闊的用前景。此文對無花果多糖的提取分離、純化及生物活性研究進展進行綜述，為無花果多糖的研究提供參考。

無花果多糖；藥物化學；綜述

無花果（Ficus caria L.）屬?？?，因花小，藏于花托內，又名隱花果，原產(chǎn)于西亞，它不僅甜美富營養(yǎng)，又是一味治病的中藥，具有健胃清腸，消腫解毒，抗腫瘤，降壓，輕瀉，助消化之功能［1，2］。據(jù)報道，其主要成分為多糖、有機酸、蛋白質、維生素等，無花果多糖在無花果中含量高，現(xiàn)代研究表明無花果多糖具有提高免疫力、抗氧化、抗腫瘤等藥理作用［3-6］。目前國內外對無花果多糖的確切結構研究還很少。本文對無花果多糖的提取分離、純化、含量測定及生物活性研究進展進行綜述，為今后進一步研究無花果多糖提供參考。

1 無花果多糖的提取

從無花果中提取多糖，一般先用石油醚、乙醚等有機溶劑除去色素以及脂溶性雜質，然后采用熱水浸提的方法進行提取，劉婭等人采用超聲提取方法對無花果多糖進行了提取，將無花果勻漿后，在pH4.5、50℃水浴條件下用濃度為0.12 g/L果膠酶酶2h后，以多糖得率為指標采用正交設計的方法對提取溫度、提取時間、料液比進行了考察，得出的最佳提取工藝為即浸提溫度55℃、浸提時間20 min、料液比1∶20［7］；余希成等人用微波提取的方法對無花果多糖進行了提取，以料液比、微波功率、pH值、提取時間為考察因素，采用二次回歸正交旋轉組合試驗方法對無花果多糖的提取工藝條件進行優(yōu)化通過SAS數(shù)學軟件分析表明，各因子對浸提率影響的相對大小依次為：提取時間＞提取功率＞料液比（mL/g）＞pH值；通過響應面分析，得到優(yōu)化條件為：pH為8.2，時間20.1 min，微波功率556 W，料液比為10.2∶1（mL/g）［8］。無花果多糖一般是采用三倍量乙醇沉淀后，采用真空或冷凍干燥后得到無花果粗多糖，復溶后進行脫色和脫蛋白處理。

2 無花果多糖的脫色

一般采用大孔樹脂法、雙氧水法、活性炭吸附法脫色素，三種方法各有優(yōu)缺點，大孔樹脂法除色效果不錯，但多糖上樣量小且需要大量的水溶劑進行洗脫，所需時間較長且不太適合大規(guī)模生產(chǎn)，雙氧水法脫色處理操作簡便但雙氧水由于其自身的氧化性可能會影響多糖的藥理活性，活性炭吸附法操作簡便但是活性炭的吸附能力過強，多糖也會被大量吸附，多糖損失率較高。陳運江運用雙氧水法對無花果多糖進行了脫色處理［9］。

3 無花果多糖的脫蛋白

多糖的脫蛋白方法一般采用Sevage法，三氯乙酸法，酶法，Sevage法和三氯乙酸法除蛋白效果較好，但需要大量的有機試劑，實驗成本高且需要反復多次萃取，操作麻煩，也存在有機殘留的可能性。酶法是近幾年普遍采用的方法，酶法效率高，反應迅速但相應的酶類選擇和反應條件要求較高，也有人采用酶法和Sevage法或三氯乙酸法聯(lián)用，使脫蛋白效果更加明顯。郭代英采用了Sevage法和3%三氯乙酸法對無花果多糖進行脫蛋白處理，最終選擇了3%三氯乙酸法，此時蛋白清除率為94.24%，多糖損失率為11.27%［10］。吳亞林等采用了酶法和Sevage法合用的方法進行了脫蛋白處理［11］。

4 無花果多糖的分離、純化和鑒定

多糖經(jīng)過脫色和脫蛋白處理后，為了獲得均一的組分，一般要進行分離、純化，郭代英［10］采用大孔樹脂法對無花果多糖進行分離純化，選擇AB-8樹脂作為最佳純化樹脂，并詳細研究AB-8大孔吸附樹脂純化無花果多糖的過程，確定層析條件為:上柱溶液pH=8，洗脫速度=2 mL/min（柱體積30 mm×300 mm），NaCl濃度=0.03 mg/mL。結果表明，純化后的無花果多糖的純度達到71%，回收率6817%.大孔樹脂法能起到一定的純化效果，但想得到均一的組分，一般采用DEAE柱和葡聚糖凝膠洗脫的方法進行分離、純化，吳亞林［11］等就采用此種方法進行分離純化，稱取粗多糖（FCPS）1.0 g，溶于少量蒸餾水中，離心除去不溶物，上清液過DEAE-Sepharose fast flow陰離子交換柱進行層析分離，用0.1～2.0 mol/L NaCl-PBS溶液梯度洗脫，控制流速為1 mL/min，部分收集體積為5 mL/tub，以苯酚-硫酸法測吸光度值（OD490），作洗脫曲線，合并主峰部分，凍干，獲得兩個粗多糖FCPS-1和FCPS-2，稱取200 mg粗多糖FCPS-1，溶于少量蒸餾水中，上樣，以0.1 mol/ LNaCl溶液洗脫，控制流速為1 mL/min，部分收集體積為5 mL/tub，以苯酚-硫酸法測OD490，作洗脫曲線，合并主峰，凍干，得精多糖FCPS-1（15.3 mg）。同法對粗多糖FCPS-2進行層析純度鑒定，紫外光譜檢測精多糖FCPS-1、FCPS-2在200～400 nm紫外掃描圖譜均顯示為末端吸收，280、260 nm處無紫外吸收，表明多糖中無蛋白、多肽及核酸.紅外光譜檢測紅外光譜圖表明精多糖FCPS-1、FCPS-2具有典型的多糖特征吸收峰。

5 無花果多糖的生物活性

5.1 無花果多糖的抗腫瘤活性朱凡河等人以荷S180實體瘤小鼠為模型，灌胃給藥，連續(xù)10 d，測定小鼠血清中SOD、GSH-PX的活性及MDA的含量，結果表明無花果多糖可提高荷瘤小鼠血中抗氧化酶的活性，降低脂質過氧化物的含量，說明無花果多糖的抗瘤作用可能與提高SOD、GSH-PX活性，和降低自由基水平有關［12］。戴偉娟等人以荷S180實體瘤及艾氏腹水癌（EAC）實體瘤和腹水瘤小鼠為模型，在小鼠右肢腋部皮下或腹腔內接種活瘤細胞，荷瘤前10d連續(xù)灌胃給藥，觀察其抑瘤率、動物存活時間及免疫器官重量的變化，結果無花果多糖能顯著抑制腫瘤的生長，對荷瘤造成的脾和胸腺指數(shù)的降低有一定恢復作用。說明無花果多糖預防性給藥對實體瘤有明顯的抑制作用［13］。

5.2 無花果多糖的免疫增強作用以及對免疫抑制的對抗作用戴偉娟采用荷瘤的方法建立免疫抑制小鼠動物模型，利用巨噬細胞吞噬中性紅、MTT方法及淋巴細胞轉化實驗，遲發(fā)型超敏反應，檢測無花果多糖對荷瘤小鼠免疫反應的影響，結果無花果多糖可提高荷瘤小鼠吞噬細胞的功能，增加抗體形成細胞數(shù)，促進淋巴細胞的轉化，說明無花果多糖具有免疫增強功能［14］。苗明三等人以環(huán)磷酰胺致免疫低下小鼠為研究對象，分為大、小劑量（劑量分別為400，200 mg·kg-1）的無花果多糖水溶液組，香菇多糖組（100 mg·kg-1）及同體積生理鹽水組，另設空白對照組，每組6只。造模同時給藥，連續(xù)7 d，測定小鼠腹腔巨噬細胞IL-1α、脾細胞體外增殖、脾細胞IL-2及血清SIL-2R水平。結果無花果多糖可促進免疫抑制小鼠腹腔巨噬細胞產(chǎn)生和分泌IL-1α，脾細胞產(chǎn)生和分泌IL-2，促進ConA和LPS刺激的脾細胞增殖，降低血清SIL-2R水平，說明無花果多糖有較好的免疫增強作用［15］。戴偉娟等人將無花果多糖分別灌胃給正常小鼠、環(huán)磷酰胺抑制小鼠及應激小鼠，檢測小鼠的遲發(fā)型超敏反應，結果無花果多糖能增強正常小鼠、環(huán)磷酰胺及應激所致免疫功能低下小鼠的遲發(fā)型超敏反應，說明無花果多糖能增強小鼠細胞免疫功能［16］。徐坤等人以氫化可的松所致免疫抑制小鼠為實驗對象，連續(xù)7 d灌服無花果多糖，觀察其對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能、溶血素及溶血空斑形成的影響，結果無花果多糖可顯著提高免疫抑制小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬百分率和吞噬指數(shù)，顯著促進溶血素形成，明顯促進溶血空斑形成說明無花果多糖對氫化可的松致免疫抑制小鼠免疫功能有好的免疫促進作用［17］。戴偉娟等人給環(huán)磷酰胺抑制小鼠及應激小鼠ig FCPS，檢鼠的遲發(fā)型超敏反應（DTH）。FCPS能增強環(huán)磷酰胺、應激所致免疫功能低下小鼠的遲發(fā)型超敏反應，證明FCPS能增強細胞介導的免疫反應［18］。戴偉娟等人將無花果多糖以0、100、200、400 mg/kg劑量灌胃給藥10 d，觀察血清溶血素抗體水平及二硝基氟苯，所致小鼠遲發(fā)型超敏反應的變化，采用體外給藥的方法觀察無花果多糖對腹腔M5吞噬功能的影響。結果無花果多糖灌胃給藥，能明顯提高小鼠血清溶血素抗體水平；增強遲發(fā)型超敏反應的強度；體外實驗在一定劑量范圍能顯著增強小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬活性說明無花果多糖為一較好的免疫增強劑［19］。戴偉娟等人采用體內外給藥的方法，分別測定小鼠單核吞噬細胞清除異物和腹腔巨噬細胞吞噬中性紅的能力，結果表明無花果多糖可增強單核吞噬細胞的吞噬功能［20］。王力男等人以環(huán)磷酰胺（CY）致免疫抑制小鼠為研究對象，觀察無花果多糖對免疫抑制小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能、溶血素及溶血空斑形成和外周血淋巴細胞轉化的影響，結果大、小劑量無花果多糖組可顯著提高免疫抑制小鼠腹腔巨噬細胞吞噬百分率及吞噬指數(shù)，可顯著促進免疫抑制小鼠溶血素形成明顯促進溶血空斑形成，可顯著提高免疫抑制小鼠外周血淋巴細胞轉化百分率，說明無花果多糖對CY所致小鼠免疫抑制有對抗作用［21］。

［1］You CR，KimHR，Yoon CH，et al.Macrophage activation syndrome in juvenile rheumatoid arthritis successfully treated with cyclosporine A:a case report［J］.J Korean MedSci，2006，21（6）:1124-1127.

［2］王振斌，孫亞釗，郭強.超聲波對無花果多糖抗氧化活性的影響［J］.食品工業(yè)科技，2011，27（1）:40-43.

［3］戴偉娟，司端遠，辛勒，等.無花果多糖對小鼠細胞免疫功能的影響［J］.中草藥，2000，30（5）:355-356.

［4］戴偉娟，司端運，王紹紅，等.無花果多糖對荷瘤小鼠免疫功能的影響［J］.時珍國醫(yī)國藥，2001，12（12）:1059-1060.

［5］戴偉娟，司端運，辛勒，等.無花果多糖免疫藥理作用的初步研究［J］.中國民族民間醫(yī)藥雜志2000，（44）:185-186.

［6］戴偉娟，司端運，辛勒.無花果多糖對移植性腫瘤生長及對小鼠免疫功能的影響［M］.中國藥理學會通訊，2000，17（4）:34.

［7］劉婭，戴升健，魯松濤，等.無花果多糖超聲提取技術的研究［J］.食品科技，2006，3（9）:87-89.

［8］余希成，盧俊，曹為民.水溶性無花果多糖的微波提取技術［J］.食品研究與開發(fā)，2009，30（9）:19-23.

［9］陳運江.大孔徑樹脂分離純化無花果多糖工藝研究［J］.江蘇農(nóng)業(yè)科學，2010（2）:320-321.

［10］郭代英.無花果多糖分離、純化工藝的研究［J］.食品工業(yè)科技，2009，30（10）: 270-294.

［11］吳亞林，黃靜，潘遠江.無花果多糖的分離、純化和鑒定［J］.浙江大學學報，2004，31（2）:177-179.

［12］朱凡河，王紹紅，徐麗娟.荷S180小鼠血清MDA、SOD和GSH-PX的變化及無花果多糖對其影響2002（57）:231-232.

［13］戴偉娟，司端運，辛勒，等.無花果多糖預防性給藥對荷瘤小鼠的影響［J］.中成藥，2001，23（10）:740-742.

［14］戴偉娟，司端運，王紹紅，等.無花果多糖對荷瘤小鼠免疫功能的影響［J］.時珍國醫(yī)國藥，2001，12（12）:1059-1060.

［15］苗明三，劉會麗，楊亞蕾，等.無花果多糖對免疫抑制小鼠腹腔巨噬細胞產(chǎn)生IL-1α、脾細胞體外增殖、脾細胞產(chǎn)生IL-2及其受體的影響［J］.中國現(xiàn)代應用藥學雜志，2009，26（7）:525-528.

［16］戴偉娟，司端運，王紹紅，等.無花果多糖對免疫抑制小鼠的免疫調節(jié)作用［J］.中國中醫(yī)藥信息雜志，2002，9（3）:23-24.

［17］徐坤，苗明三.無花果多糖對氫化可的松致免疫抑制小鼠免疫功能的影響［J］.中醫(yī)學報，2011，26（154）:324-325.

［18］戴偉娟，司端運，蘇艾蘭，等.無花果多糖對小鼠遲發(fā)型超敏反應的影響［J］.濟寧醫(yī)學院學報，1999，22（4）:26-27.

［19］戴偉娟，司端運，蘇艾蘭.無花果多糖對正常小鼠免疫功能的影響［J］.濟寧醫(yī)學院學報，1999，29（3）:16-18.

［20］戴偉娟，司端運，仲偉法，等.無花果多糖對小鼠單核吞噬細胞吞噬功能影響的研究［J］.中醫(yī)藥學刊，2002，20（1）:98-99.

［21］王力男，王勤，苗明三.無花果多糖對環(huán)磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫功能的影響［J］.中醫(yī)學報，2010，25（149）:676-678.

識別真假紫蘇子

紫蘇子又稱黑蘇子、鐵蘇子，為唇形科植物皺紫蘇、尖紫蘇等的果實，始載于《名醫(yī)別錄》，原名只稱為“蘇”，至清代本草才采用紫蘇為正名。歷代本草均將紫蘇子列在紫蘇項下。北宋藥物學家蘇頌曰：“蘇，紫蘇也，處處有之，以（葉）背面紫色者佳，夏采莖葉，秋采子?！泵磕昵锛竟麑嵆墒鞎r，割取全株或果穗，打下果實，除去雜質，曬干即可入藥。紫蘇子全國各地均產(chǎn)，以江蘇產(chǎn)量最大，以江寧等地產(chǎn)者質量最佳，為地道藥材。紫蘇子性溫，味辛，入肺、大腸經(jīng)，具有下氣、消痰、潤肺、寬腸的功效，常用于治療痰壅氣逆、咳嗽氣喘、腸躁便秘等癥。近年來，市場上有以同科植物石薺苧的干燥果實冒充紫蘇子，使用時要注意鑒別。

真品紫蘇子：干燥的果實呈卵圓形或類球形，長徑0.6～3毫米，短徑0.5～2.5毫米，野生者粒小，栽培者粒大；表面灰棕色至暗棕色或黃棕色，有隆起的網(wǎng)狀花紋，較尖的一端有明顯的果柄痕跡；果皮薄，硬而脆，易壓碎，種仁黃白色，富油質；壓碎后有一股清香氣，口嘗味微辛。

偽品石薺苧：干燥成熟果實呈卵圓形或類球形，較小，直徑約1毫米，表面灰褐色，具細網(wǎng)紋，無深穴狀雕紋，網(wǎng)間隙淺凹，果皮??；果柄臍扇形，褐色，在放大鏡下觀察，其表面上有白色晶狀物；聞之亦氣清香濃郁，但口嘗味辛、涼。偽品石薺苧亦可入藥，但多用全草，有疏風解表、清暑除溫之功，且其果實也不具備紫蘇子的各項功效，雖與紫蘇子為同科植物，但也不可代替紫蘇子使用，應細辨之。

——摘自《中國中醫(yī)藥報》

Research Progress of Ficus Carica Polysaccharide

ZAI Yanbing1，ZHAO Bing2
（1 Division of Scientific Research，Henan University of Traditional Chinese Medicine，Zhengzhou450008，China；2 Department of Dermatology，the Third Affiliated Hospital of Henan University of Traditional Chinese Medicine，Zhengzhou450008，China）

Ficus carica is one of the oldest and the earliest human cultivated trees in the world，and has high nutritional value.Ficus carica polysaccharide is the main active components in Ficus carica and it has a variety of biological functions，such as preventing disease，deferring senescence，improving the immune function of host，inhibiting tumor cell proliferation and metastasis，anti-oxidant，clearing oxygen radicals.Ficus carica polysaccharide has a broad prospect in food，medicine and other field.In this article，a summary of is given the recent research progress in the extraction，separation，characteristics，purification and bioactive are include.Provide a reference for ficus carica polysaccharide.

ficus carica polysaccharide；pharmaceutical chemistry；review

10.3969/j.issn.1672-2779.2015.06.076

1672-2779（2015）-06-0152-03

張文娟 本文校對：張文娟

2015-01-30）