陽樂 許鵬
(1.西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院,西安710061;2.西安市紅會醫(yī)院關(guān)節(jié)外科,西安710054)
骨關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis,OA)是以關(guān)節(jié)軟骨退行性變和繼發(fā)性骨質(zhì)增生為特征的慢性關(guān)節(jié)疾病。該病累及關(guān)節(jié)軟骨或整個關(guān)節(jié),包括軟骨下骨、關(guān)節(jié)囊、滑膜,其主要病理表現(xiàn)為關(guān)節(jié)軟骨變形破壞、軟骨下骨硬化或囊性變、關(guān)節(jié)邊緣骨質(zhì)增生等。一般認(rèn)為OA的病理變化是多種因素相互作用和影響所造成的最終結(jié)果。隨著研究的深入,OA的分子生物學(xué)機制越來越引起學(xué)者們的關(guān)注。近年來,細(xì)胞因子特別是促炎細(xì)胞因子在OA發(fā)病機制中的作用逐漸成為研究熱點,許多研究證實促炎細(xì)胞因子在OA的發(fā)病進程中起關(guān)鍵性作用。
促炎細(xì)胞因子,也稱為前炎性細(xì)胞因子,是一類主要由免疫系統(tǒng)細(xì)胞產(chǎn)生的具有強大生物學(xué)效應(yīng)的內(nèi)源性多肽,主要包括白細(xì)胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、腫瘤壞死因子-α( tumor necrosis factor,TNF-α)、IL-6、IL-18、IL-17及IL-15等。IL-1β和TNF-α在OA發(fā)病進程中的促炎作用已得到證實[1,2],而IL-6、IL-18、IL-17、IL-15作用于OA的機制尚不完全清楚,本文就IL-6、IL-18、IL-17、IL-15等細(xì)胞因子在OA發(fā)病機制中的作用做一綜述。
IL-6是由184個氨基酸殘基構(gòu)成的一種蛋白質(zhì)[3]。正常情況下,健康軟骨組織可產(chǎn)生少量的IL-6。大量研究證明,OA患者關(guān)節(jié)滑液或血清中的IL-6水平升高。
Monibi等[4]檢測了膝OA患者關(guān)節(jié)滑液中IL-6的表達(dá),結(jié)果顯示IL-6含量相比對照組顯著增加。Imamura等[5]檢測了膝OA患者血清中IL-6的含量,結(jié)果發(fā)現(xiàn)IL-6含量要明顯高于正常對照組。Blumenfeld等[6]通過基因多態(tài)性分析證實,IL-6與放射相關(guān)OA具有一定相關(guān)性,說明IL-6在OA的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。
IL-6在OA發(fā)病機制中主要起促炎作用。IL-6的促炎作用可能有如下機制:①抑制細(xì)胞外基質(zhì)(主要為Ⅱ型膠原和蛋白聚糖)的合成代謝。Porée等[7]通過動物實驗證實,IL-6與其受體sIL-6R結(jié)合后抑制了編碼Ⅱ型膠原的COL2A1基因的轉(zhuǎn)錄與翻譯,從而抑制了軟骨Ⅱ型膠原的合成。Kusano等[8]在大鼠顱骨細(xì)胞培養(yǎng)中加入IL-6,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞金屬基質(zhì)蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)的mRNA水平上調(diào),并且MMPs的生物活性也得到增強。MMPs是降解細(xì)胞外基質(zhì)的主要酶系,包括MMP-1、MMP-3、MMP-13,幾乎能降解所有的軟骨細(xì)胞外基質(zhì),使關(guān)節(jié)軟骨腫脹,最終破壞關(guān)節(jié)正常結(jié)構(gòu)。此實驗說明IL-6依靠上調(diào)MMPs影響骨代謝。Rowan等[9]研究發(fā)現(xiàn),IL-6可以通過與IL-1α聯(lián)合作用,導(dǎo)致軟骨膠原降解及膠原酶合成增加。說明IL-6還可與其他促炎因子(如IL-1等)共同作用,抑制細(xì)胞外基質(zhì)合成。②IL-6可導(dǎo)致軟骨組織中的C反應(yīng)蛋白(acute reactive protein,CRP)增多。Steensberg等[10]給志愿者注射低劑量的IL-6,16 h后志愿者血清中CRP的含量相比對照組明顯升高。Pearle等[11]測量了臨床OA患者血清和滑液中的CRP和IL-6,證明IL-6和CRP與炎癥反應(yīng)具有明顯相關(guān)性。CRP升高可能導(dǎo)致炎癥反應(yīng)加劇,最終使軟骨組織破壞。③IL-6可與前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)聯(lián)合作用。研究證實,OA軟骨組織中,炎癥介質(zhì)PGE2過表達(dá),可以通過cAMP/PKA/NFKB通路誘導(dǎo)IL-6表達(dá)上調(diào)[12]。④IL-6能誘導(dǎo)溶蛋白溶酶產(chǎn)生。Carter等[13]研究表明IL-6可誘導(dǎo)產(chǎn)生蛋白質(zhì)溶酶,在蛋白質(zhì)溶酶的作用下引起骨丟失和軟骨破壞。⑤IL-6可以導(dǎo)致脂聯(lián)素分泌增多,促進炎癥反應(yīng)。Emilie等[14]實驗發(fā)現(xiàn)IL-6過度表達(dá)可導(dǎo)致脂聯(lián)素分泌增多。脂聯(lián)素具有促炎作用,能加劇炎癥反應(yīng),破壞軟骨基質(zhì),最終導(dǎo)致軟骨結(jié)構(gòu)破壞。同時它又可在軟骨合成代謝過程中誘導(dǎo)IL-6的表達(dá),進一步加劇炎癥反應(yīng)。
但I(xiàn)L-6在OA發(fā)病中的作用也存在許多爭議,很多學(xué)者持不同意見。Pejovic等[15]研究認(rèn)為IL-6的分泌具有生理節(jié)律規(guī)律,其研究發(fā)現(xiàn)在輕度睡眠剝奪的患者中,血清IL-6水平也呈明顯升高趨勢。目前
IL-18是近年來學(xué)者們發(fā)現(xiàn)的一種新的致炎細(xì)胞因子,其主要作用為介導(dǎo)組織炎癥反應(yīng),且與一些自身免疫性疾病相關(guān)。
Wang等[16]檢測了OA患者血漿和滑液的IL-18含量,結(jié)果示OA患者血漿和滑液中的IL-18含量與健康對照組相比明顯升高。同時,IL-18表達(dá)水平與關(guān)節(jié)炎的嚴(yán)重程度呈明顯正相關(guān)。Hulin-Curtis等[17]通過單鏈核苷酸多態(tài)性分析證實,IL-18的基因多態(tài)性和OA具有一定相關(guān)性。這些都提示IL-18在OA的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。
目前,IL-18在OA發(fā)生發(fā)展中的具體機制尚未完全闡述清楚。其可能機制可能如下:①是OA最初階段的一種重要的細(xì)胞因子,與其他促炎細(xì)胞因子聯(lián)合作用。Fu等[18]研究IL-18對OA患者滑膜細(xì)胞及軟骨細(xì)胞的影響發(fā)現(xiàn),在IL-18的刺激下,原代滑膜細(xì)胞上清液中TNF-α含量明顯增加,培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞中TNF-α的mRNA表達(dá)也明顯上調(diào),且這些功能不被IL-1受體拮抗劑阻斷,表明IL-18可能與TNF-α促炎因子聯(lián)合作用共同促進OA的發(fā)生發(fā)展。此外,該研究還證實在IL-18的刺激下,原代滑膜細(xì)胞上清液中COX-2含量明顯增加,且PGE2在二代滑膜細(xì)胞中高水平表達(dá),培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞中COX-2的mRNA表達(dá)也明顯上調(diào),說明IL-18還可促進COX-2、PGE2等炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生,并與這些炎癥介質(zhì)共同作用最終導(dǎo)致OA的發(fā)生發(fā)展。②IL-18能誘導(dǎo)產(chǎn)生干擾素(interferon,IFN)。IFN5在關(guān)節(jié)液中能顯著刺激IL-6、IL-l、NO,PGE2等炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生。這些過表達(dá)的炎癥介質(zhì)又可以誘導(dǎo)軟骨組織釋放MMP-1、MMP-3、MMP-13,從而抑制軟骨細(xì)胞外基質(zhì)合成代謝,導(dǎo)致各種炎癥疾病包括OA的發(fā)生與發(fā)展[19]。
IL-6在OA病程中的作用尚存爭議。
IL-17是目前新發(fā)現(xiàn)的主要由T淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞等分泌的一種促炎性細(xì)胞因子。其具有強大的招募中性粒細(xì)胞,促進細(xì)胞釋放多種炎性因子,促進細(xì)胞增殖及抑制部分腫瘤生長等多種生物學(xué)作用。
van Baarsen等[20]研究發(fā)現(xiàn)IL-17在OA患者滑膜組織中表達(dá)增加。Chen等[21]研究了膝OA患者血清及滑膜組織中IL-17的表達(dá),結(jié)果顯示OA患者血清及滑膜組織中IL-17的表達(dá)都呈明顯上調(diào)趨勢,且滑膜組織中IL-17的表達(dá)與OA嚴(yán)重程度具有一定相關(guān)性。Han等[22]利用單鏈核苷酸構(gòu)象多態(tài)性分析表明IL-17與韓國人OA的易感性及發(fā)生發(fā)展都具有一定相關(guān)性。上述均表明IL-17與OA的發(fā)生發(fā)展有一定關(guān)系。
IL-17在OA發(fā)生發(fā)展中的具體機制也尚未完全闡述清楚,其機制可能如下:①誘導(dǎo)IL-1β、TNF-α、IL-6產(chǎn)生,并與這些細(xì)胞因子聯(lián)合作用。Honorati等[23]發(fā)現(xiàn)IL-17在滑液成纖維細(xì)胞和軟骨細(xì)胞中一定程度上促進了IL-1β的合成。LeGrand等[24]發(fā)現(xiàn)IL-17對TNF-α、IL-1β、PGE2的生成起協(xié)同作用。許多實驗都證明IL-17誘導(dǎo)了其他眾多的促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生,這些促炎細(xì)胞因子形成了細(xì)胞因子調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò),發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng),最終導(dǎo)致OA的發(fā)生發(fā)展。②上調(diào)MMPs水平,增強軟骨細(xì)胞及滑膜成纖維細(xì)胞基質(zhì)MMP-1、MMP-3、MMP-13的表達(dá)[25]。MMPs水平的上調(diào),使軟骨蛋白聚糖合成代謝被抑制,最終破壞軟骨正常結(jié)構(gòu)。③IL-17還可以使NO表達(dá)上調(diào)。NO作為一種炎癥介質(zhì),其過量產(chǎn)生可能加劇炎癥反應(yīng),最終誘導(dǎo)OA的發(fā)生發(fā)展。④增強蛋白聚糖酶和膠原酶活性,促進軟骨蛋白多糖及膠降解,抑制軟骨細(xì)胞蛋白多糖的合成,并可增強單核細(xì)胞對軟骨基質(zhì)的破壞[26]。軟骨細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分包括膠原(以Ⅱ型膠原為主)和蛋白聚糖,IL-17的這一作用直接影響軟骨細(xì)胞外基質(zhì)的合成,最終導(dǎo)致關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)破壞以及OA的發(fā)生。⑤IL-17還能促進OA關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞分泌血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VGEF)[27]。VEGF在OA軟骨細(xì)胞、滑膜巨噬細(xì)胞中大量表達(dá),參與滑膜炎癥、軟骨變性、軟骨骨化、骨贅形成等病理過程。
IL-15是一種分子量為14-15KDa的糖蛋白[28],也是新近發(fā)現(xiàn)的一種因子,可由活化的單核巨噬細(xì)胞、表皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞等多種細(xì)胞產(chǎn)生。IL-15具有廣泛的生物學(xué)活性,尤其在參與機體免疫反應(yīng)方面具有重要作用。
Scanzello等[29]發(fā)現(xiàn)早期膝骨OA患者關(guān)節(jié)滑液中IL-15含量相比于晚期OA患者關(guān)節(jié)滑液呈明顯增加趨勢。Sun等[30]研究發(fā)現(xiàn),早期膝OA患者血清中IL-15含量相比對照組呈明顯增加趨勢,且IL-15含量與女性膝OA嚴(yán)重程度正相關(guān),提示IL-15可能參與了OA的發(fā)生發(fā)展。
研究認(rèn)為IL-15與OA的相關(guān)性主要表現(xiàn)在如下幾個方面:①IL-15能增加MMP-15和MMP-3的含量。Scanzello等[29]認(rèn)為IL-15能增加MMP-15和MMP-3的含量。IL-15的這一作用使得軟骨細(xì)胞外基質(zhì)被降解,最終導(dǎo)致關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)破壞并誘發(fā)OA。②IL-15能誘導(dǎo)單核巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的活化,并促使活化的單核巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞分泌TNF-α、IL-1、IL-6和IL-17等多種促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生。同時TNF-α、IL-1β等也能刺激IL-15產(chǎn)生,這些細(xì)胞因子組成了以IL-15為中心的促炎細(xì)胞因子調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò),共同促進了炎癥的發(fā)生發(fā)展,最終導(dǎo)致關(guān)節(jié)正常結(jié)構(gòu)破壞和OA的發(fā)生[31]。③IL-15能增強或促進血管內(nèi)皮細(xì)胞與白細(xì)胞之間的黏附,有助于白細(xì)胞聚集于炎癥局部,從而擴大炎癥反應(yīng),促進OA的發(fā)生發(fā)展。
VEGF最初在垂體濾泡細(xì)胞中發(fā)現(xiàn),是位于不同染色體上不同基因所編碼的相對分子質(zhì)量為46~48 KDa的同源二聚體糖蛋白[32]。VEGF分布于人體內(nèi)眾多細(xì)胞,如成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及滑膜內(nèi)成纖維細(xì)胞,VEGF的主要作用是促進血管生成,改善血管通透性。
研究發(fā)現(xiàn),VEGF參與了OA的發(fā)生發(fā)展過程。Saetan等[33]研究發(fā)現(xiàn)OA患者滑液VEGF相比健康對照組明顯增加,OA患者的滑膜襯里層及關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞都檢測到高濃度的VEGF表達(dá),且OA患者血漿及滑液中的VEGF量和OA放射線表現(xiàn)的嚴(yán)重程度正相關(guān)。Jansen等[34]利用新西蘭大白兔建立早期OA模型,檢測到VEGF的mRNA及VEGF高表達(dá)。Ludin等[35]向健康小鼠的關(guān)節(jié)腔內(nèi)注入外源性VEGF數(shù)周后,觀察到滑膜增厚、關(guān)節(jié)軟骨鈣化增多、骨硬化及軟骨退。這些證明VEGF在OA的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。
關(guān)于VEGF對OA機制中的作用,研究主要集中在如下幾個方面:①VEGF在血管生成中的作用。正常軟骨細(xì)胞由于有血管生成抑制因子存在,是沒有血管或僅有少量血管的。OA患者促血管生長因子與抑血管生長因子平衡狀態(tài)被打破,導(dǎo)致OA患者關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞內(nèi)高表達(dá)VEGF[36]。研究發(fā)現(xiàn),在整個OA的病理過程中,VEGF起促進血管生成和增加血管通透的作用。VEGF的促血管生成作用導(dǎo)致了滑膜細(xì)胞增殖、血管新生、滑膜炎等一系列OA病理過程。而軟骨變性、軟骨基質(zhì)成分發(fā)生改變、抗血管生成因子減少這些病理過程又共同增強了VEGF作用,最終導(dǎo)致OA的發(fā)生發(fā)展。②VEGF在滑膜炎中的作用。Lmbert等[37]研究發(fā)現(xiàn),VEGF在OA滑膜組織的炎性區(qū)域的表達(dá)明顯增多,提示VEGF參與了OA滑膜炎癥的發(fā)生發(fā)展。VEGF對滑膜的作用與其促血管生成的作用密切相關(guān)。一方面,新生血管為滑膜提供了更多的營養(yǎng)物質(zhì)及氧氣,促進滑膜組織的增生和肥厚。另一方面,新生血管中釋放的促炎細(xì)胞因子,如IL-1β、TNF-α也同時促進了滑膜組織炎癥的發(fā)生。③VEGF對OA軟骨細(xì)胞的影響。VEGF通過促進MMPs的生成,影響OA軟骨細(xì)胞的代謝。Studer等[38]發(fā)現(xiàn)肥大的軟骨細(xì)胞通過甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)/Ihh,Wnt/β-連環(huán)蛋白(catenin),TGF-β Smad等信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路介導(dǎo)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子Runx2/肌細(xì)胞增強因子(MEF)2C表達(dá),從而上調(diào)Ⅹ型膠原,MMP-13,VEGF分泌。此外,VEGF還刺激骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞產(chǎn)生MMP-l和MMP-3[39],但VEGF不改變金屬蛋白酶組織抑制劑的水平。MMPs大量表達(dá)后,軟骨基質(zhì)中的Ⅱ型膠原蛋白被大量分解,導(dǎo)致軟骨基質(zhì)被破壞和降解,軟骨細(xì)胞直接暴露于炎性介質(zhì)中,軟骨細(xì)胞發(fā)生變性和死亡[40]。
其他促炎細(xì)胞因子,如趨化因子、白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)等亦參加了OA的發(fā)生發(fā)展。趨化因子主要通過誘導(dǎo)產(chǎn)生一些相關(guān)的酶來參與軟骨的破壞,主要是N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)和MMPs。LIF在調(diào)節(jié)軟骨細(xì)胞代謝活動中具有重要作用。研究發(fā)現(xiàn),OA軟骨細(xì)胞高表達(dá)LIF的mRNA和LIF蛋白,提示LIF參與了OA的發(fā)生發(fā)展[41]。LIF能誘導(dǎo)MMPs產(chǎn)生[42],從而抑制軟骨細(xì)胞合成蛋白聚糖及膠原合成。且促炎因子如IL-1β促進LIF表達(dá)[43],LIF又能促進IL-1β、IL-6、IL-8、MCP-1等分解性細(xì)胞因子產(chǎn)生。另外,抗炎性細(xì)胞因子IL-4還能抑制LIF的合成[44],這些細(xì)胞因子形成一個調(diào)控網(wǎng)絡(luò),共同作用于軟骨細(xì)胞。
綜上,OA的發(fā)生和發(fā)展和炎癥反應(yīng)具有一定相關(guān)性,即使是在OA早期階段[45]。機體在炎癥反應(yīng)過程中產(chǎn)生大量細(xì)胞因子,而細(xì)胞因子在OA發(fā)展過程中扮演著促炎和抗炎的角色,正常情況下在促炎細(xì)胞因子和抗炎細(xì)胞因子共同作用下,骨和軟骨分解代謝與合成代謝保持相對平衡,從而維護關(guān)節(jié)的正常結(jié)構(gòu)和功能。而在OA患者體內(nèi),促炎細(xì)胞因子和抗炎細(xì)胞因子之間的平衡被打破,干擾骨與關(guān)節(jié)的正常代謝,最終導(dǎo)致OA的一系列病理改變。在OA的發(fā)病過程中,與軟骨破壞有關(guān)的促炎細(xì)胞因子的表達(dá)異常與OA的發(fā)病機制有著密不可分的關(guān)系。促炎細(xì)胞因子的繼續(xù)深入研究有望進一步闡明OA的發(fā)病機制,并最終找到更為有效的治療甚至治愈OA的方案。
[1]Ismail HM,Yamamoto K,Vincent TL,et al.Interleukin 1 acts via c-jun N-terminal kinase-2 signalling pathway to induce aggrecan degradation by human chondrocytes.Arthritis Rheumatol,2015,67(7):1826-1836.
[2]Osta B,Roux JP,Lavocat F,et al.Differential Effects of IL-17A and TNF-α on Osteoblastic Differentiation of Isolated Synoviocytes and on Bone Explants from Arthritis Patients.Front Immunol,2015,6:151.
[3]Mabey T,Honsawek S.Cytokines as biochemical markers for knee osteoarthritis.World J Orthop,2015,6(1):95-105.
[4]Monibi F,Roller BL,Stoker A,et al.Identification of Synovial Fluid Bio-markers for knee Osteoarthritis and Correlation with Radiographic Assessment.J Knee Surg,2015 Apr 30.[Epub ahead of print]
[5]Imamura M,Ezquerro F,Marcon Alfieri F,et al.Serum levels of proinflammatory cytokines in painful knee osteoarthritis and sensitization.Int J Inflam,2015,2015:329792.
[6]Blumenfeld O,Williams FM,Valdes A,et al.Association of interleukin-6 gene polymorphisms with hand osteoarthritis and hand osteoporosis.Cytokine,2014,69(1):94-101.
[7]Porée B,Kypriotou M,Chadjichristos C,et al.Interleukin-6(IL-6)and/or soluble IL-6 receptor down-regulation of human type II collagen gene expression in articular chondrocytes requires a decrease of Sp1.Sp3 ratio and of the b-inding activity of both factors to the COL2A1 promoter.J Biol Chem,2008,283(8):4850-4865.
[8]Kusano K,Miyaura C,Inada M,et al.Regulation of matrix metalloproteinase-s(MMP-2,-3,-9,and-13)by interleukin-1 and interleukin-6 in mouse calvaria:association of MMP induction with bone resorption.Endocrinology,1998,139(3):1338-1345.
[9]Rowan AD,Koshy PJ,Shingleton WD,et al.Synergistic effects of glycoprotein 130 binding cytokines in combination with interleukin-1 on cartilage collagen breakdown.Arthritis Rheum,2001,44(7):1620-1632.
[10]Steensberg A,Fischer CP,Keller C,et al.IL-6 enhances plasma IL-1ra,IL-10,and cortisol in humans.Am J Physiol Endocrinol Metab,2003,285(2):E433-437.
[11]Pearle AD,Scanzello CR,George S,et al.Elevated highsensitivity C-reactive protein levels are associated with local inflammatory findings in patients with osteoarthritis.Osteoarthritis Cartilage,2007,15(5):516-523.
[12]Wang P,Zhu F,Konstantopoulos K.Prostaglandin E2 induces interleukin-6 expression in human chondrocytes via cAMP/protein kinase A-and phosphatidylinositol 3-kinasedependent NF-kappaB activation.Am J Physiol Cell Physiol,2010,298(6):C1445-1456.
[13]Carter SD,Barnes A,Gilomore WH.Canine rheumatoid arthritis and inflamm-atory cytokines.Vet Immunol Immunopathol,1999,69(4):201-214.
[14]Distel E,Cadoudal T,Durant S,et al.The infrapatellar fat pad in knee osteoarthritis:an important source of interleukin-6 and its soluble receptor.Arthritis Rheum,2009,60(11):3374-3377.
[15]Pejovic S,Basta M,Vgontzas AN,et al.Effects of recovery sleep after one work week of mildsleep restriction on interleukin-6 and cortisol secretion and daytime sleepiness and performance.Am J Physiol Endocrinol Metab,2013,305(7):890-896.
[16]Wang Y,Xu D,Long L,et al.Correlation between plasma,synovial fluidand articular cartilage Interleukin-18 with radiographic severity in 33 patients with osteoarthritis of the knee.Clin Exp Med,2014,14(3):297-304.
[17]Hulin-Curtis SL,Bidwell JL,Perry MJ.Evaluation of IL18 and IL18R1 polymorphisms:genetic susceptibility to knee osteoarthritis.Int J Immunogenet,2012,39(2):106-109.
[18]Fu Z,Liu P,Yang D,et al.Interleukin-18-induced inflammatory responses in synoviocytes and chondrocytes from osteoarthritic patients.Int J Mol Med,2012,30(4):805-810.
[19]Henrotin YE,Zheng SX,Labasse AH,et a1.Modulation of human chondrecyte metabolism by recombinant human interferon.Osteoarthritis Cartilage,2000,8(6):474-482.
[20]van Baarsen LG,Lebre MC,van der Coelen D,et al.Heterogeneous expression pattern of interleukin 17A(IL-17A),IL-17F and their receptors in synovium of rheumatoid arthritis,psoriatic arthritis and osteoarthritis:possible explanation for nonresponse to anti-IL-17therapy?Arthritis Res Ther,2014,16(4):426.
[21]Chen B,Deng Y,Tan Y,et al.Association between severity of knee osteoarthritis and serum and synovial fluid interleukin 17 concentrations.J Int Med Res,2014,42(1):138-144.
[22]Han L,Lee HS,Yoon JH,et al.Association of IL-17A and IL-17F single nucleotide polymorphisms with susceptibility to osteoarthritis in a Korean population.Gene,2014,533(1):119-122.
[23]Honorati M,Meliconi R,Pulsatelli L,et a1.High in vivo expression of interleukin-17 receptor in synovial endothelial cells and chondrocytes from arthritis patients.Rheumatologi(Oxford),2001,40(5):522-527.
[24]LeGrand A,Fermor B,Fink C,et al.Interleukin-1,tumor necrosis factor alpha,and interleukin-17 synergistically up-regulate nitric oxide and prostaglandin E2 production in explants of human osteoarthritic knee menisci.Arthritis Rheum,2001,44(9):2078-2083.
[25]Martel-Pelletier J,Mineau F,Jovanovic D,et al.Mitogenactivated protein kinase and nuclear factor κB together regu-late interleukin-17-induced nitric oxide production in human osteoarthriti chondrocytes:possible role of transactivating factor mitogen-activated protein kinaseactivated proten kinase(MAPKAPK).Arthritis Rheum,1999,42(11):2399-2409.
[26]Lubberts E,Joosten LA,van de Loo FA,et al.Reduction of interleukin-17-induced inhibition of chondrocyte proteoglycan synthesis in intact murine articular cartilage by interleukin-4.Arthritis Rheum,2000,43(6):1300-1306.
[27]Honorati MC,CattiniL,Facchini A.VEGF production by osteoarthritic chondrocytes cultured in micromass and stimulated by IL-17 and TNF-alpha.Connect Tissue Res,2007,48(5):239-245.
[28]Steel JC,Waldmann TA,Morris JC.Interleukin-15 biology and its therapeutic implications in cancer.Trends Pharmacol Sci,2012,33(1):35-41.
[29]Scanzello CR,Umoh E,Pessler F,et al.Local cytokine profiles in knee osteoarthritis:elevated synovial fluid interleukin-15 differentiates early from end-stage disease.Osteoarthritis Cartilage,2009,17(8):1040-1048.
[30]Sun JM,Sun LZ,Liu J,et al.Serum interleukin-15 levels are associated with severity of pain in patients with knee osteoarthritis.Dis Markers,2013,35(3):203-206.
[31]Badolato R,Ponzi AN,Millesimo M,et al.Interleukin-15(IL-15)induces IL-8 and monocyte chemotactic protein 1 production in human monocytes.Blood,1997,90(7):2804-2809.
[32]Tahara A,Tsukada J,Tomura Y,et al.Vasopressin induces human mesangial cell growth via induction of vascular endothelial growth factor secretion.Neuropeptides,2011,45(2):105-111.
[33]Saetan N,Honsawek S,Tanavalee A,et al.Relationship of plasma and synovial fluid vascular endothelial growth factor with radiographic severity in primaryknee osteoarthritis.Int Orthop,2014,38(5):1099-1104.
[34]Jansen H,Meffert RH,Birkenfeld F,et al.Detection of vascular endothelial growth factor(VEGF)in moderate osteoarthritis in a rabbit model.AnnAnat,2012,194(5):452-456.
[35]LudinA,Sela JJ,SchroederA,et al.Injection of vascular endothelial growth factor into knee joints induces osteoarthritis in mice.Osteoarthritis Cartilage,2013,21(3):491-497.
[36]Lingaraj K,Poh CK,Wang W.Vascular endothelial growth factor(VEGF)is expressed during articular cartilage growth and re-expressed in osteoarthritis.Ann Acad Med Singapore,2010,39(5):399-403.
[37]Lambert C,Mathy-Hartert M,Dubuc JE,et al.Characterization of synovial angiogenesis in osteoarthritis patients and its modulation by chondroitin sulfate.Arthritis Res Ther,2012,14(2):R58.
[38]Studer D,Millan C,?ztürk E,et al.Molecular and biophysical mechanisms regulating hypertrophic differentiation in chondrocytes and mesenchymal stem cells.Eur Cell Mater,2012,24:118-135.
[39]Pufe T,Harde V,Petersen W,et al.Vascular endothelial growth factor(VEGF)induces matrix metalloproteinase expression in immortalized chondrocytes.J Pathol,2004,202(3):367-374.
[40]Kim KS,Choi HM,Lee YA,et al.Expression levels and association of gelatinases MMP-2 and MMP-9 and collagenases MMP-1 and MMP-13 with VEGF in synovial fluid of patients with arthritis.Rheumatol Int,2011,31(4):543-547.
[41]Jiang Y,Xiao Q,Hu Z,et al.Tissue levels of leukemia factorvary by osteoa-rthritis grade.Orthopedics,2014,37(5):e460-464.
[42]Upadhyay A,Sharma G,Kivivuori S,et al.Role of a LIF antagonist in LIF and OSM induced MMP-1,MMP-3,and TIMP-1 expression by primary articular chondrocytes.Cytokine,2009,46(3):332-338.
[43]Fan Z,Bau B,Yang H,et al.IL-1beta induction of IL-6 and LIF in normal articular human chondrocytes involves the ERK,p38 and NFkappaB signaling pathways.Cytokine,2004,28(1):17-24.
[44]Dechanet J,Taupin JL,Chomarat P,et al.Interleukin-4 but not interleukin-10 inhibits the production of leukemia inhibitory factor by rheumatoid synovium and synoviocytes.Eur J Immunol,1994,24(12):322.28.
[45]Felson DT.Clinical practice.Osteoarthritis of the knee.N Engl J Med,2006,354(8):841-848.