膽紅素濃度對血漿凝血酶原時(shí)間和活化部分凝血活酶時(shí)間檢測的影響

潘俊輝

（廣東省惠州市第三人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 惠州 516002）

凝血酶原時(shí)間（prothrombin time，PT）和活化部分凝 血 活 酶 時(shí) 間（activated partial thromboplastin time，APTT）是臨床上比較常用的檢驗(yàn)?zāi)δ苤笜?biāo)，可以鑒別因凝血因子異常導(dǎo)致的出血性或血栓性疾病，從而了解患者在術(shù)前凝血狀態(tài)及應(yīng)用抗凝藥物監(jiān)測等起著重要作用［1］。在檢驗(yàn)過程中，膽紅素濃度是影響檢測凝血功能因素。本研究探討不同膽紅素濃度對檢測血漿PT 及APTT 結(jié)果的影響。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器 PT 和APTT 檢測試劑由德國西門子公司（Siemens）生產(chǎn)，膽紅素的檢測試劑由上海華臣生物試劑有限公司生產(chǎn)。凝血質(zhì)控品由德國西門子公司（Siemens）生產(chǎn)，膽紅素的校準(zhǔn)品由上海華臣生物試劑有限公司公司生產(chǎn)。全自動的凝血分析儀SYS-MEX CA7000由日本希森美康公司生產(chǎn)，全自動的生化分析儀HITA-CHI7600 由日立公司（日本）生產(chǎn)。

1.2 方法 根據(jù)臨床化學(xué)實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)化委員會關(guān)于體外診斷相關(guān)試劑干擾的評估指南要求，凝血質(zhì)控樣品由1.0ml的蒸餾水溶解成對照組血漿；將不同濃度膽紅素的校準(zhǔn)品加入5瓶裝有凝血質(zhì)控的血漿中為實(shí)驗(yàn)組血漿，應(yīng)用生化式分析儀測定實(shí)驗(yàn)組與對照組血漿中的膽紅素3次，取其平均值；并應(yīng)用凝血分析儀（凝固法）測定不同濃度的膽紅素下血漿PT 及APTT各5次，取其平均值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，回歸方程的二次項(xiàng)分析用來表示血漿PT 及APTT 的檢測與膽紅素的關(guān)系，以P ＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同膽紅素濃度血漿PT 及APTT 的檢測結(jié)果 血漿膽紅素的濃度分別為20.12、41.51、65.23、83.60、101.98μmol／L，對照組的血漿膽紅素濃度為8.02μmol／L，膽紅素濃度為65.30、83.60、101.98 μmol／L組的PT 時(shí)間長于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，膽紅素濃度為45.51、65.30、83.60μmol／L 組的APTT 時(shí)長于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表1。

表1 不同膽紅素濃度的血漿PT 及APTT 比較結(jié)果 （±s）

表1 不同膽紅素濃度的血漿PT 及APTT 比較結(jié)果 （±s）

組別 膽紅素濃度（μmol／L）PT t P APPT t P實(shí)驗(yàn)組20.12 12.21±0.15 1.448 0.186 27.19±0.63 1.141 0.287 41.51 12.32±0.25 1.884 0.096 34.19±0.35 20.263＜0.001 65.3 14.19±0.31 11.858＜0.001 51.59±1.01 44.258＜0.001 83.60 18.35±0.37 30.95＜0.001 65.74±1.13 64.383＜0.001 101.98 24.32±0.19 83.374＜0.001---對照組8.02 12.01±0.27--26.69±0.75--

2.2 不同濃度的膽紅素和血漿PT 及APTT 回歸分析 膽紅素的濃度作為自變量，以X 表示；血漿PT 及APTT 相應(yīng)檢測均值為因變量，Y1表示血漿PT，Y2表示血漿APTT，進(jìn)行相關(guān)性回歸分析，見表2。

表2 膽紅素的濃度與血漿PT 及APTT 的回歸分析

3 討論

檢測血漿PT 及APTT 一般應(yīng)用凝固法，其原理為反應(yīng)杯或者試劑預(yù)溫到37.0 ℃，充分混勻試劑和血漿，散射光強(qiáng)度在混勻瞬間很弱，設(shè)定此時(shí)散射光強(qiáng)度0%；隨著標(biāo)本中纖維蛋白的凝固，散射光強(qiáng)度在反應(yīng)杯中逐漸增加，在樣品完全凝固時(shí)穩(wěn)定在最高強(qiáng)度，此時(shí)的散射光強(qiáng)度是100%。散射光強(qiáng)度在0%～100%變化表現(xiàn)為一條曲線，設(shè)定曲線中一點(diǎn)其對應(yīng)時(shí)間為凝固時(shí)間。檢測的樣品達(dá)一定散射光強(qiáng)度時(shí)，與其對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線相比后轉(zhuǎn)化成血漿PT 及APTT 檢測結(jié)果［2］。如標(biāo)本混有膽紅素及其他干擾物質(zhì)，可以影響樣品的散射光強(qiáng)度，可能對血漿PT 及APTT 的檢測結(jié)果產(chǎn)成影響。黏度法凝血分析可以減少黃疸對檢測結(jié)果的干擾，但活化凝血因子作用不容易控制［3］。

健康人群的血漿膽紅素含量為1.71～17.1 μmol／L，當(dāng)紅細(xì)胞發(fā)生過多破壞、肝臟疾病或膽道梗阻等，可以使膽紅素超過正常水平，血中的膽紅素越高，黃疸程度越重［4］。本研究中通過不同濃度膽紅素形成不同黃疸程度的血漿，結(jié)果示黃疸越嚴(yán)重，血漿PT 及APTT 檢測值越高。血漿PT 及APTT 的檢測結(jié)果在膽紅素為20.12μmol／L 時(shí)與對照組相比，其差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05），表明血漿PT 及APTT檢測結(jié)果不受較低膽紅素的影響；當(dāng)膽紅素為41.51 μmol／L 時(shí)，血漿PT 檢測結(jié)果和對照組相比，其差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05），PT 檢測結(jié)果不受影響，但APTT 檢測結(jié)果與對照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001），而此時(shí)APTT 檢測結(jié)果受膽紅素濃度的影響；膽紅素的濃度＞66μmol／L 時(shí)，PT 和APTT 檢測結(jié)果與對照組均值相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.001），說明血漿PT 及APTT 的檢測結(jié)果受高濃度的膽紅素影響。因?yàn)楫?dāng)標(biāo)本中含有高濃度的膽紅素時(shí)，色澤變深的血漿散射光至基線上移，使PT 及APTT 檢測時(shí)間變長［5］。

本研究以膽紅素濃度作為自變量，其對應(yīng)的血漿PT 及APTT 檢測結(jié)果作為因變量，做回歸曲線。膽紅素濃度與PT 和APTT 檢測結(jié)果的二次項(xiàng)方程相關(guān)系數(shù)要比線性方程的高，分別為0.991與0.993，表明膽紅素濃度與PT 和APTT 檢測結(jié)果相關(guān)性較好。根據(jù)相關(guān)系數(shù)最高的曲線得出PT 及APTT 檢測結(jié)果隨膽紅素濃度變化回歸方程。因而，如發(fā)現(xiàn)標(biāo)本PT 及APTT 檢測結(jié)果不正常升高，應(yīng)注意標(biāo)本有無存在黃疸，從而減少黃疸對PT 及APTT 檢測結(jié)果的影響。血漿PT 及APTT 檢測結(jié)果除受黃疸的標(biāo)本影響外，還受溶血、標(biāo)本量和放置時(shí)間等多種因素影響［6-7］。應(yīng)用大劑量青霉素等會使PT 及APTT 延長。重度肝炎、肝硬化和肝功能不全等患者的抗凝血蛋白和凝血因子合成減少，也可以使血漿PT 及APTT 延長［8-9］。當(dāng)排除以上因素，且膽紅素的濃度高，可依據(jù)相關(guān)回歸方程所得的校正公式對標(biāo)本PT 及APTT 檢測結(jié)果校正，以得到更準(zhǔn)確結(jié)果［10］。

綜上所述，對于重度黃疸標(biāo)本需加強(qiáng)和臨床科室溝通，如標(biāo)本的顏色深黃可能是攝入含有色素的藥物所致，應(yīng)停藥一段時(shí)間后重新檢測；如果是因?yàn)榛颊咦陨硪蛩厮?，可?yīng)用回歸方程以校正，從而為臨床提供更為準(zhǔn)確的凝血相關(guān)檢測結(jié)果。

［1］ 孫磊.凝血酶原時(shí)間和活化部分凝血活酶時(shí)間測定的問題［J］.中國醫(yī)藥指南，2013，11（5）：177-178.

［2］ 陽建，余賽紅，文艷.2種全自動血凝分析儀檢測結(jié)果的線性分析［J］.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（2）：205-206.

［3］ 許慧.標(biāo)本離心時(shí)間對凝血酶原時(shí)間（PT）和活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）的影響［J］.中國社區(qū)醫(yī)師：醫(yī)學(xué)專業(yè)，2011，13（16）：235.

［4］ 韓升波.兩種檢測膽紅素的指標(biāo)評價(jià)黃疸療效的比較［J］.中國實(shí)用醫(yī)藥，2011，6（33）：45-46.

［5］ 王亮，李曉紅，潘家華.新生兒高膽紅素血癥1082例臨床分析［J］.安徽醫(yī)學(xué)，2013，34（1）：15-17.

［6］ 劉志鋒，張耀輝，李雯麗.標(biāo)本離心時(shí)間對凝血四項(xiàng)檢測結(jié)果的影響［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2013，10（12）：1547.

［7］ 戴慶忠，覃瑜.影響凝血四項(xiàng)檢測的因素分析［J］.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（17）：2349-2350.

［8］ 熊將軍.肝病患者多項(xiàng)凝血指標(biāo)檢測結(jié)果分析［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2011，8（19）：2337-2338，2340.

［9］ 郭素玲，許德英.肝臟疾病患者凝血系列指標(biāo)分析［J］.中國現(xiàn)代醫(yī)生，2013，51（19）：70-72.

［10］ 吳美秀.經(jīng)皮膽紅素測定新生兒黃疸的準(zhǔn)確度評價(jià)［J］.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33（14）：1747-1749.