細(xì)胞因子TNF-a、IL-6在輸卵管性不孕患者中的表達(dá)

王一斌 黃潔貞 林耀華 葉 明 黃 崢

(廣州市婦女兒童醫(yī)療中心，廣東廣州510623)

我國(guó)不孕癥的發(fā)病率約為7～10%，其中輸卵管性不孕是引起女性不孕的重要因素。通過檢測(cè)腫瘤壞死因子-a(TNF-a)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)在輸卵管性不孕與非輸卵管性不孕患者盆腔液中表達(dá)的變化，來初步探討TNF-a、IL-6等細(xì)胞因子在輸卵管性不孕中作用?，F(xiàn)報(bào)導(dǎo)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2012年9月至2013年8月在本院住院手術(shù)治療的不孕患者。術(shù)前子宮輸卵管碘油造影提示輸卵管堵塞，并排除多囊卵巢、高泌乳素血癥等內(nèi)分泌因素及盆腔子宮內(nèi)膜異位癥、盆腔結(jié)核等疾病，無宮腹腔鏡手術(shù)禁忌證，最后經(jīng)腹腔鏡檢查證實(shí)為盆腔炎性疾病后遺癥所致不孕的患者共50例，年齡25～35歲，中位年齡28歲。對(duì)照組選擇同期住院手術(shù)治療的子宮肌瘤、卵巢良性腫瘤患者，且術(shù)中確認(rèn)所選患者無合并盆腔炎性疾病后遺癥，共50例，年齡25～35歲，中位年齡29.5歲。剔除術(shù)中新發(fā)現(xiàn)盆腔子宮內(nèi)膜異位癥患者，不孕組入組45例，對(duì)照組入組47例，兩組一般情況比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

1.2 方法

兩組患者均行腹腔鏡下手術(shù)。在腹腔鏡直視下，吸管吸取子宮直腸陷凹及子宮膀胱陷凹腹腔液10 mL，以 2 000 r/min，離心 10 min，取上清液，置－20℃保存待測(cè)。采用酶聯(lián)免疫法(Elisa法)，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算腹腔液樣本中TNF-a和IL-6的含量。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析處理。計(jì)量資料的統(tǒng)計(jì)量用ˉx±s表示，采用配對(duì)t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

不孕組腹腔液中檢測(cè)到的TNF-a和IL-6的水平明顯高于對(duì)照組，兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.03，P＜0.05;t=2.13，P＜0.05)，測(cè)定結(jié)果見表1。

表1 腹腔液中TNF-α和IL-6水平比較(±s，ng/L)

表1 腹腔液中TNF-α和IL-6水平比較(±s，ng/L)

注:與對(duì)照組 TNF-a比較，*P＜0.05;與對(duì)照組 IL-6 比較，#P＜0.05

組別 n TNF-α IL-6不孕組 45 178±40* 322±161#對(duì)照組 47 115±37 203±147

3 討 論

輸卵管微環(huán)境是精子卵子運(yùn)輸及其功能發(fā)揮、受精和早期胚胎發(fā)育等賴以生存的物質(zhì)基礎(chǔ)。輸卵管液是輸卵管微環(huán)境中最重要的組成部分，主要來自血漿滲液、輸卵管黏膜上皮分泌物、子宮液、卵泡液等。輸卵管液含有細(xì)胞因子、黏附分子、特異性糖蛋白、離子、氨基酸等多種物質(zhì)，其合成、分泌和生物學(xué)活性受到體內(nèi)各種激素，如孕激素、雌激素等影響［1］。輸卵管液中各種成分對(duì)精子、卵子在輸卵管內(nèi)的遷移、停留和經(jīng)歷受精前的生理、生化改變及受精卵和胚胎的早期發(fā)育等都有相當(dāng)?shù)挠绊?，其中?xì)胞因子成分起到至關(guān)重要的作用［2-4］。大量研究表明，輸卵管的功能與微環(huán)境的周期調(diào)節(jié)密切相關(guān)。任何導(dǎo)致輸卵管微環(huán)境中物質(zhì)變化及輸卵管結(jié)構(gòu)和功能的異常因素均可引起女性不孕。

TNF-a是由單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的一種多效能的細(xì)胞因子，具有殺傷腫瘤、抗感染、促進(jìn)細(xì)胞增殖及炎癥介導(dǎo)的作用，其在生殖免疫中的作用取決于局部含量的高低以及與激素之間的內(nèi)環(huán)境。體外實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，TNF-a能明顯刺激局部合成和釋放收縮相關(guān)性物質(zhì)，如前列腺素(PG)、內(nèi)皮素(ET)和血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)等［5］。這些物質(zhì)能直接促進(jìn)血管平滑肌收縮，推測(cè)TNF-a很可能在濾泡期和排卵后期通過這些物質(zhì)間接刺激輸卵管平滑肌引發(fā)其強(qiáng)烈收縮，使配子迅速地轉(zhuǎn)運(yùn)到受精部位。在早期胚胎期TNF-a分泌增加，這可能又促進(jìn)輸卵管強(qiáng)烈收縮，從而確保胚胎在最佳時(shí)期進(jìn)入子宮。提示TNF-a分泌異?？赡苡绊懪渥蛹芭咛フ＿\(yùn)輸及發(fā)育，從而導(dǎo)致不孕癥的發(fā)生。TNF-a亦是一種炎癥因子，其參與了輸卵管炎癥過程。Maisey等［6］研究發(fā)現(xiàn)輸卵管炎時(shí)輸卵管液中TNF-a及TNF-a受體濃度增高，并級(jí)聯(lián)放大，在抗感染同時(shí)造成組織損傷，其損傷程度與TNF-a的濃度成正比，從而影響胚胎的運(yùn)輸、配子及胚胎質(zhì)量，容易導(dǎo)致不孕。Thorley等［7］研究發(fā)現(xiàn)，阻斷TNF-a的產(chǎn)生可減輕輸卵管炎中的輸卵管損傷程度，進(jìn)一步提示輸卵管炎中輸卵管的損傷部分由TNF-a介導(dǎo)。

IL-6是炎癥反應(yīng)的主要標(biāo)志之一，具有多種生物活性，IL-6可能參與慢性炎癥自身發(fā)展的病理生理過程，最終形成輸卵管等局部組織粘連、促進(jìn)肉芽纖維組織的生長(zhǎng)。有研究發(fā)現(xiàn)，輸卵管炎性不孕的病因不一定只由輸卵管阻塞引起，還與IL-2、IL-6、IL-8等炎性介質(zhì)有密切關(guān)系［8］。

本研究顯示，輸卵管性不孕患者中盆腔液的TNF-α和IL-6的含量明顯高于非輸卵管性不孕患者盆腔液中表達(dá)(P＜0.05)，提示 TNF-a、IL-6 等細(xì)胞因子作為一個(gè)調(diào)節(jié)因子參與了輸卵管性不孕的發(fā)生。其產(chǎn)生機(jī)制可能為TNF-a的細(xì)胞毒作用及其刺激單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和成纖維細(xì)胞等合成更多的IL-1、IL-6、IL-8以及 TNF-a等，促進(jìn)炎癥的反應(yīng)，加重輸卵管的損傷和盆腔局部的粘連，同時(shí)刺激成纖維細(xì)胞增殖，促進(jìn)膠原酶釋放等作用，參與炎癥瘢痕形成，造成輸卵管狹窄和阻塞等，從而造成不孕。

目前國(guó)內(nèi)外大多學(xué)者認(rèn)為輸卵管炎性阻塞是引起不孕的主要原因之一，并通過物理方法、化學(xué)方法、生物方法來制作輸卵管阻塞的動(dòng)物模型，使其輸卵管發(fā)生炎性反應(yīng)，導(dǎo)致管腔被滲出液及壞死碎片閉塞引起輸卵管堵塞［9］。故臨床主要是采用腹腔鏡聯(lián)合宮腔鏡，通過松解盆腔粘連、疏通輸卵管梗阻，治療因機(jī)械性原因造成的不孕。有文獻(xiàn)報(bào)道，經(jīng)腹腔鏡輸卵管整形術(shù)后2～3年內(nèi)正常妊娠率31%～42%，有61.3%的病例經(jīng)治療后雖輸卵管復(fù)通但未妊娠，甚至有5.4%的患者復(fù)通后發(fā)生異位妊娠。有研究發(fā)現(xiàn)，輸卵管組織中IL-2和IL-6呈顯著上升趨勢(shì)，提示其在輸卵管炎慢性反應(yīng)階段是一個(gè)重要的介質(zhì)，在一定程度上反映了IL-2和IL-6與慢性輸卵管炎的病變程度及繼發(fā)不孕有關(guān);研究過程中還發(fā)現(xiàn)輸卵管內(nèi)雖然有肉芽組織生成，輸卵管管腔卻不一定完全阻塞［8］。那么在經(jīng)腹腔鏡聯(lián)合宮腔鏡行輸卵管整形復(fù)通術(shù)解除輸卵管機(jī)械性不孕的同時(shí)，通過抑制對(duì)于TNF-a、IL-6等細(xì)胞因子的細(xì)胞毒性作用引起的不孕以及術(shù)后TNF-a、IL-6等細(xì)胞因子引起的再發(fā)輸卵管粘連、梗阻所致不孕進(jìn)行針對(duì)性治療，可能改善經(jīng)宮腔鏡聯(lián)合腹腔鏡輸卵管整形復(fù)通術(shù)的輸卵管性不孕的妊娠結(jié)局。

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