IL-18、IL-1β水平與非酒精性脂肪性肝病的關(guān)系

陳艷麗，張 寶，管石俠，侯麗麗，蔣建華

IL-18、IL-1β水平與非酒精性脂肪性肝病的關(guān)系

陳艷麗，張 寶，管石俠，侯麗麗，蔣建華

目的探討血清炎癥因子白細(xì)胞介素18（IL-18）、白細(xì)胞介素1β（IL-1β）與非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的關(guān)系。方法選取NAFLD患者作為NAFLD組（n＝46）、正常對(duì)照者作為對(duì)照組（n＝45），對(duì)被選人群進(jìn)行問(wèn)卷調(diào)查、體格測(cè)量、人體成分分析及肝臟超聲檢查。收集其體檢報(bào)告。ELISA法檢測(cè)血清IL-18、IL-1β。結(jié)果NAFLD組體質(zhì)指數(shù)（BMI）、內(nèi)臟脂肪面積、體脂百分比、腰臀百分比、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞絕對(duì)數(shù)、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、空腹血糖、三酰甘油（TG）、極低密度脂蛋白、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、血尿酸及IL-18、IL-1β均明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。同時(shí)，相關(guān)分析顯示血清IL-18及IL-1β水平與BMI、TG均有相關(guān)性。結(jié)論 在NAFLD患者血清中炎癥因子IL-18、IL-1β均明顯升高，IL-18、IL-1β參與的慢性炎癥反應(yīng)可能是NAFLD的病因之一。

非酒精性脂肪性肝??；白細(xì)胞介素18；白細(xì)胞介素1β

非酒精性脂肪性肝?。╪onalcoholic fatty liver disease，NAFLD）被定義為在無(wú)過(guò)度飲酒情況下，肝臟脂肪堆積［1］，其疾病譜包括單純性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎（nonalcoholicsteatohepatitis，NASH）及與之相關(guān)的肝硬化［2］。NAFLD與肥胖、2型糖尿病關(guān)系密切，現(xiàn)在大多認(rèn)為NAFLD是代謝綜合征的一部分，共同的病理機(jī)制是胰島素抵抗和系統(tǒng)性炎癥［3］。炎癥小體是病原相關(guān)分子模式及損傷相關(guān)分子模式的內(nèi)源性或外源性的感受器，切割促炎因子如白細(xì)胞介素18（interleukin-18，IL-18）和白介素1β（interleukin-1β，IL-1β）的前體［4］。IL-18是T細(xì)胞介導(dǎo)肝損傷的必須媒介，由于IL-18在分泌γ-干擾素的同時(shí)產(chǎn)生大量的腫瘤壞死因子α、白介素6等細(xì)胞因子加劇了免疫功能和代謝紊亂，在肝損傷中起著重要作用［5］。IL-1β可通過(guò)促進(jìn)胰島β細(xì)胞的一氧化氮生成和細(xì)胞凋亡而引起β細(xì)胞選擇性的破壞，誘導(dǎo)胰島素抵抗。白介素家族已被許多實(shí)驗(yàn)證實(shí)可以影響胰島素、血糖代謝及調(diào)節(jié)代謝障礙。該研究通過(guò)檢測(cè)NAFLD人群IL-18、IL-1β炎癥標(biāo)志物水平，探討IL-18、IL-1β與NAFLD之間的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 病例資料選擇2013年7月在安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院體檢中心健康體檢人群符合NAFLD的診斷標(biāo)準(zhǔn)的46例NAFLD患者為NAFLD組，以同期同一單位體檢正常者45例作為對(duì)照組。NAFLD人群均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝臟病學(xué)分會(huì)脂肪肝和酒精性肝病學(xué)組2010年修訂的《非酒精性脂肪性肝病診斷標(biāo)準(zhǔn)》［6］。入選對(duì)象均排除病毒性肝炎及其他肝臟疾病、嚴(yán)重心腦腎疾病、嚴(yán)重感染、腫瘤和長(zhǎng)期服藥史。對(duì)照組男28例，女17例，年齡41～71（51.68±8.40）歲；NAFLD組男30例，女16例，年齡41～71（52.10±8.60）歲。各組在年齡、性別比例等方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，組間均衡性好，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1問(wèn)卷調(diào)查 采用自行設(shè)計(jì)的健康狀況調(diào)查表對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行面對(duì)面調(diào)查，內(nèi)容包括一般信息、生活方式、疾病史等，由調(diào)查員填寫(xiě)問(wèn)卷。

1.2.2一般指標(biāo)檢測(cè) 所有受試者在清晨空腹進(jìn)行體格檢查，由經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的工作人員測(cè)量身高、體重、收縮壓（systolic blood pressure，SBP）、舒張壓（diastolic blood pressure，DBP）。

1.2.3人體成分指標(biāo) 采用韓國(guó)Biospace Inbody 720人體成分分析儀進(jìn)行人體成分檢測(cè)，記錄相關(guān)指標(biāo)，包括體質(zhì)指數(shù)（body mass index，BMI）、內(nèi)臟脂肪面積（visceral fat area，VFA）、體脂百分比（percent body fat，PBF）、腰臀比（waist-hip ratio，WHR）。其中WHR指腰與臀之間的周長(zhǎng)比率，通常用來(lái)判斷腹部肥胖，因?yàn)榕c其密切相關(guān)。女性WHR≥0.85、男性WHR≥0.90時(shí)可判斷為腹部肥胖；VFA用來(lái)判斷腹部?jī)?nèi)臟脂肪的橫截面積，內(nèi)臟脂肪的增加意味著肥胖和身體老化，尤其會(huì)增加生活習(xí)慣性疾病的發(fā)病率。

1.2.4生化指標(biāo)檢測(cè) ①所有研究對(duì)象清晨空腹采靜脈血，分離血清。血液細(xì)胞計(jì)數(shù)采用日本Sysmex公司XE-2100五分類(lèi)全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀測(cè)定白細(xì)胞計(jì)數(shù)（white blood cell，WBC）、中性粒細(xì)胞絕對(duì)數(shù)（absolute neutrophil count，NEUT）、淋巴細(xì)胞絕對(duì)數(shù)（absolute lymphocyte count，LYMP），血液生化檢查采用Roche公司日立-7600型生化儀測(cè)定空腹血糖（fasting plasma glucose，F(xiàn)PG）、三酰甘油（triglycerides，TG）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alanine transaminase，ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（aspartate aminotransferase，AST）、極低密度脂蛋白（very low density lipoprotein，VLDL）、血尿酸（blood uric acid，UA）。②IL-18和IL-1β使用ELISA試劑盒（蘇州卡爾文生物科技有限公司R＆D分裝）測(cè)定，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作。用Bio-Tek酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)下讀取各孔吸光度值，并根據(jù)繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出相應(yīng)的濃度。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)以±s表示。兩組間比較采用t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α＝0.05。相關(guān)分析采用Pearson直線相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2.1 兩組人群基本指標(biāo)及人體成分指標(biāo)比較比較兩組人體成分、血壓指標(biāo)，兩組DBP差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而NAFLD組的SBP、BMI、VFA、PBF、WHR顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，P＜0.01），見(jiàn)表1。

表1 兩組研究對(duì)象基本指標(biāo)及人體成分指標(biāo)比較（±s）

表1 兩組研究對(duì)象基本指標(biāo)及人體成分指標(biāo)比較（±s）

與對(duì)照組比較：*P＜0.05，**P＜0.01

2.2 兩組研究對(duì)象血液指標(biāo)比較兩組人群的TC、AST方面差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而NAFLD組的WBC、FPG、VLDL、ALT、UA均顯著高于對(duì)照組（P＜0.01），NEUT、LYMP、TG也明顯高于對(duì)照組（P＜ 0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表2。

表2 兩組研究對(duì)象血液指標(biāo)比較（±s）

表2 兩組研究對(duì)象血液指標(biāo)比較（±s）

與對(duì)照組比較：*P＜0.05，**P＜0.01

2.3 IL-18和IL-1β濃度比較血清IL-18、IL-1β濃度在NAFLD組［（121.01±39.61）、（23.78± 9.40）pg／ml］均明顯高于對(duì)照組［（98.08± 40.10）、（19.06±9.42）pg／ml］，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t＝－2.550、－2.307，P＝0.013、0.024）。

2.4 相關(guān)性分析NAFLD組IL-18與BMI、TG呈正相關(guān)性（r＝0.361、0.372，P＜0.05），見(jiàn)圖1、2。IL-1β與BMI、TG呈正相關(guān)性（r＝0.345、0.465，P＜0.05），見(jiàn)圖3、4。

3 討論

本研究結(jié)果顯示，NAFLD組人群BMI、PBF、WHR、VFA均明顯高于對(duì)照組，說(shuō)明肥胖程度高于對(duì)照組，特別是腹型肥胖尤為明顯。研究［7］表明超質(zhì)量、Ⅰ度肥胖、Ⅱ度肥胖組與正常質(zhì)量組相比，脂肪肝患病風(fēng)險(xiǎn)分別增加了1.7、1.9、9.1倍，脂肪肝組較非脂肪肝組超質(zhì)量或肥胖檢出率顯著增高。Caballería et al［8］發(fā)現(xiàn)肥胖個(gè)體高達(dá)25.2%，將超重者計(jì)入可達(dá)69.2%；其中46.1%的肥胖者和25.8%的超重者患有NAFLD，這些因素與該疾病密切相關(guān)（與正常體重者相比，超重及肥胖者與NAFLD發(fā)病的OR值分別為2.19、6.78）。但經(jīng)多分類(lèi)協(xié)變量分析顯示差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其原因可能是肥胖的程度與脂肪肝無(wú)密切關(guān)系，但肥胖相關(guān)代謝紊亂的程度與脂肪肝的發(fā)生密切相關(guān)［7］。

NAFLD組的TG、ALT、VLDL升高明顯，可能是由于肥胖者體內(nèi)脂肪組織增多，體內(nèi)脂肪酸和游離脂肪酸釋出增加，肝臟脂肪氧化磷酸化和脂肪酸β氧化受損使脂肪酸分解下降，TG合成增多集聚肝臟形成脂肪肝。肝內(nèi)TG的合成速度超過(guò)VLDL的合成及泌入血液的速度時(shí)，便出現(xiàn)TG的堆積［9］，并促使肝臟合成VLDL增加，最終導(dǎo)致肝功能異常。

慢性炎癥和氧化應(yīng)激在NAFLD起著重要的作用。WBC在臨床實(shí)踐中是一個(gè)簡(jiǎn)單經(jīng)濟(jì)的炎癥標(biāo)志物。本研究顯示，WBC、NEUT、LYMP在NAFLD組較對(duì)照組顯著增加，表明NAFLD患者體內(nèi)炎癥活動(dòng)性可能增強(qiáng)。有研究［10］表明NAFLD組的WBC、NEVT、LYMP顯著高于對(duì)照組，同時(shí)Lee et al［11］認(rèn)為慢性低度系統(tǒng)炎癥表現(xiàn)為WBC的高水平是非酒精性脂肪性肝病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。Alkhouri et al［12］證實(shí)WBC／LYMP可作為NASH患者疾病嚴(yán)重程度的新的非侵入性標(biāo)記。

IL-18和IL-1β是重要的炎癥細(xì)胞因子，在機(jī)體的免疫和炎癥反應(yīng)中發(fā)揮著重要的作用。IL-18是重要的參與炎癥反應(yīng)的前炎癥細(xì)胞因子，可通過(guò)激活單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生，在自身免疫性疾病、炎癥及感染性疾病中起重要作用。研究［13］表明，與正常組相比，血清IL-18在肝硬化、NAFLD及NASH患者分別是其7.5、8、16倍。有研究［14］表明多囊卵巢綜合征患者IL-18、IL-1β顯著高于對(duì)照組，與BMI呈正相關(guān)性。研究［5］顯示IL-18與TG呈正相關(guān)性。有研究［15］表明糖尿病組血清IL-1β與BMI、TG呈正相關(guān)性。本研究結(jié)果與上述基本一致。IL-1β參與慢性炎癥的發(fā)生、發(fā)展，由以上研究推測(cè)非NAFLD的發(fā)生同樣有IL-1β的參與。同時(shí)NAFLD與肥胖之間的炎癥反應(yīng)關(guān)系相互作用，有待進(jìn)一步的研究。

綜上所述，IL-18、IL-1β在NAFLD發(fā)病機(jī)制中可能起重要作用，但之間的相互作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。通過(guò)血清IL-18、IL-1β濃度的變化，從側(cè)面反映NAFLD患者肝損傷的程度，對(duì)判斷NAFLD的進(jìn)展及預(yù)后有一定價(jià)值。

［1］ Kim N H，Park J，Kim S H，et al.Non-alcoholic fatty liver disease，metabolic syndrome and subclinical cardiovascular changes in the general population［J］.Heart，2014，100（12）：938－43.

［2］ Farrell G C，Larter C Z.Nonalcoholic fatty liver disease：from steatosis to cirrhosis［J］.Hepatology，2006，43（2 Suppl 1）：S99－S112.

［3］ Tapan S，Dogru T，Kara M，et al.Circulating levels of interleukin-18 in patients with non-alcoholic fatty liver disease［J］.Scand J Clin Lab Invest，2010，70（6）：399－403.

［4］ Henao-Mejia J，Elinav E，Jin C，et al.Inflammasome-mediated dysbiosis regulates progression of NAFLD and obesity［J］.Nature，2012，482（7384）：179－85.

［5］ 程 勇，言紅健，孟 杰，等.非酒精性脂肪性肝病患者肝損傷程度與IL-18、IL-8含量的相關(guān)性［J］.中國(guó)老年學(xué)雜志，2011，31（9）：1528－9.

［6］ 中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝臟病學(xué)分會(huì)脂肪肝和酒精性肝病學(xué)組.非酒精性脂肪性肝病診療指南（2010年修訂版）［J］.臨床肝膽病雜志，2010，26（2）：120－4.

［7］ 向國(guó)卿，孟憲云，張 浩，等.脂肪肝相關(guān)危險(xiǎn)因素的評(píng)估［J］.世界華人消化雜志，2009，17（10）：1038－41.

［8］ Caballería L，Pera G，Auladell M A，et al.Prevalence and factors associated with the presence of nonalcoholic fatty liver disease in an adult population in Spain［J］.Eur J Gastroenterol Hepatol，2010，22（1）：24－32.

［9］ 喬京貴，趙聰亞，張淑芬，等.非酒精性脂肪肝的相關(guān)指標(biāo)分析［J］.陜西醫(yī)學(xué)雜志，2012，41（8）：1009－11.

［10］李 靜，周利霞，王俊明，等.非酒精性脂肪性肝病胰島素抵抗程度與全血細(xì)胞計(jì)數(shù)的相關(guān)性［J］.中國(guó)老年學(xué)雜志，2012，32（16）：3371－3.

［11］Lee Y J，Lee H R，Shim J Y，et al.Relationship between white blood cell count and nonalcoholic fatty liver disease［J］.Dig Liver Dis，2010，42（12）：888－94.

［12］Alkhouri N，Morris-Stiff G，Campbell C，et al.Neutrophil to lymphocyte ratio：a new marker for predicting steatohepatitis and fibrosis in patients with nonalcoholic fatty liver disease［J］.Liver Int，2012，32（2）：297－302.

［13］Felipo V，Urios A，Montesinos E，et al.Contribution of hyperammonemia and inflammatory factors to cognitive impairment in minimal hepatic encephalopathy［J］.Metab Brain Dis，2012，27（1）：51－8.

［14］楊 艷，喬 杰，李美芝，等.白細(xì)胞介素18、白細(xì)胞介素1β與多囊卵巢綜合征發(fā)病的相關(guān)性研究［J］.中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2008，24（1）：38－40.

［15］王 露，張 微.血清白介素-1β水平與2型糖尿病及肥胖的相關(guān)性分析［J］.中國(guó)醫(yī)學(xué)工程，2011，19（7）：60－1.

Study on the correlation between interleukin-18，interleukin-1β and nonalcoholic fatty liver disease

Chen Yanli，Zhang Bao，Guan Shixia，et al
（Dept of Clinical Nutriology，The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University，Hefei 230022）

ObjectiveTo investigate the relationship of the serum levels of interleukin-18（IL-18），interleukin-1β（IL-1β）with pathogenesis of nonalcoholic fatty liver disease（NAFLD）.Methods46 cases of NAFLD patients，45 cases of normal controls were selected，questionnaire survey，physical measurement，body composition and liver ultrasound were conducted for selected population.Collect the physical examination report，serum levels of IL-18 and IL-1β were examined by ELISA.ResultsThe body mass index（BMI），visceral fat area，percent body fat，waist-hip ratio，white blood cell，absolute neutrophil count，absolute lymphocyte count，fasting plasma glucose，triglycerides（TG），very low density lipoprotein，alanine transaminase and blood uric acid，serum levels of IL-18 and IL-1β were significantly higher in NAFLD group than in control group（P＜0.05），with statistical significance.The correlative analysis showed that the serum levels of IL-18 and IL-1β were correlated with body mass index and triglycerides.ConclusionSerum levels of IL-18 and IL-1β in NAFLD group are higher than those in control group，IL-18 and IL-1β participating in chronic inflammation may be one of the causes of NAFLD.

nonalcoholic fatty liver disease；interleukin-18；interleukin-1β

R 589.2

1000－1492（2015）02－0181－04

2014－10－23接收

安徽省年度科研項(xiàng)目（編號(hào)：1301043019）

安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院臨床營(yíng)養(yǎng)科，合肥 230022作者簡(jiǎn)介：陳艷麗，女，碩士研究生；蔣建華，女，主任醫(yī)師，副教授，碩士生導(dǎo)師，責(zé)任作者，E-mail：Jjhua＠yeah.net