UPLC法測(cè)定復(fù)配食品添加劑丙酸鈣含量

岑琴++李智

摘要：為避免復(fù)配添加劑對(duì)滴定結(jié)果的干擾，采用高效液相色譜法測(cè)定丙酸鈣的含量。試驗(yàn)結(jié)果表明：丙酸的質(zhì)量濃度在0.05～1.00 g/L的范圍內(nèi)與其峰面積呈線性關(guān)系，定量限為0.05 g/kg，回收率為97.3%～103.4 %，RSD≤2.9%（n=6）。該方法精確度好，靈敏度高，樣品預(yù)處理簡(jiǎn)單，是復(fù)配食品添加劑中丙酸鈣含量測(cè)定的理想方法。

關(guān)鍵詞：丙酸鈣；高效液相色譜；回收率；定量限；標(biāo)準(zhǔn)曲線

中圖分類號(hào)：TS202.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-1161（2014）09-0049-02

丙酸鈣是我國《GB2760-2011》允許使用的食品防腐劑，廣泛用于糕點(diǎn)、面包等面制食品和部分調(diào)味品，能抑制霉菌、酵母菌、需氧芽孢桿菌和革蘭氏陰性桿菌的生長繁殖。隨著食品添加劑應(yīng)用技術(shù)的發(fā)展和提高，復(fù)合食品添加劑越來越受到人們的重視，已經(jīng)成為食品添加劑工業(yè)的發(fā)展方向和潮流。復(fù)合食品添加劑往往在包裝上不標(biāo)明所含成份含量，使得應(yīng)用企業(yè)很難按《GB2760-2011》掌握具體的添加量。用水提取復(fù)合食品添加劑中丙酸鈣，采用高效液相色譜—二極管陣列檢測(cè)器測(cè)定，方法的精確度好、靈敏度高，樣品預(yù)處理簡(jiǎn)單，避免了滴定分析方法中復(fù)配添加劑對(duì)滴定結(jié)果干擾的問題，是復(fù)配食品添加劑中丙酸鈣含量測(cè)定的理想方法。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

1.1.1 儀器 WATERS 2695高效液相色譜儀（配二極管陣列檢測(cè)器）：美國waters公司；色譜柱Thermo Syncronis C18 （4.6 mm ×150 mm，5 μm）、電子天平：北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司。

1.1.2 試劑 丙酸鈣標(biāo)準(zhǔn)品（純度97.5 %）由DR.Ehrenstorfer GmbH生產(chǎn)；甲醇（色譜純）由美國fisher公司生產(chǎn)；色譜用水符合《GB/T6682-2008》規(guī)定的一級(jí)水。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 樣品前處理 準(zhǔn)確稱取1 g粉末樣品（精確至0.00 02 g）至100 mL容量瓶中，用水溶解并定容至100 mL，待樣品完全溶解后，移取適量溶液至100 mL容量瓶中，用水定容至100 mL。

1.2.2 色譜條件 流動(dòng)相的選擇：選擇甲醇及水（用磷酸調(diào)pH值至2.7～3.5，使用時(shí)配制）15∶85（V/V）為流動(dòng)相，流速1.0 mL/min，柱溫30 ℃。

檢測(cè)波長的選擇：對(duì)丙酸在190～400 nm之間進(jìn)行全波長掃描，確定丙酸的最大吸收波長為210 nm。

在以上色譜條件下，進(jìn)樣10 μL，以色譜峰面積外標(biāo)法定量，測(cè)得丙酸的色譜圖，如圖1所示。

1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線 準(zhǔn)確稱取丙酸鈣126.0 mg，加水溶解后，移入50 mL容量瓶中，用水定容至50 mL，作為儲(chǔ)備溶液（丙酸含量為2 mg/mL），于4 ℃冰箱內(nèi)貯存，有效期3個(gè)月。

分別移取0.25，0.50，1.00，2.00，5.00 mL儲(chǔ)備液于10 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，得到濃度分別為0.05，0.10，0.20，0.40，1.00 g/L的標(biāo)準(zhǔn)使用溶液，在1.2.2色譜條件下進(jìn)樣100 μL，根據(jù)濃度與峰面積的關(guān)系繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.4 方法回收率及精密度 為考察方法的可靠性，對(duì)添加劑進(jìn)行加標(biāo)回收率測(cè)定。將丙酸加標(biāo)量為10，100，500 g/kg的樣品按照1.2.1提取方法提取3份，每份提取樣品測(cè)定6次，計(jì)算回收率及精密度。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性范圍及檢出限

檢測(cè)結(jié)果中色譜峰高為噪聲高10倍（S/N=10）相對(duì)應(yīng)的濃度為定量限。線性方程、相關(guān)系數(shù)、線性范圍及檢出限見表1。

從表1可以看出，丙酸在線性范圍內(nèi)的線性關(guān)系良好。

2.2 方法回收率及精密度

通過加標(biāo)回收率試驗(yàn)，對(duì)方法進(jìn)行回收率和精密度測(cè)定，結(jié)果見表2。

由表2可知：丙酸的平均回收率為97.5%～101.0%，RSD≤2.2%（n=6）。表明該方法精密度、準(zhǔn)確度能滿足分析要求。

3 結(jié)論

該研究建立了復(fù)合食品添加劑中丙酸鈣含量的高效液相色譜測(cè)定方法。結(jié)果表明，丙酸在0.05～1.00 g/L的范圍內(nèi)與其峰面積呈線性關(guān)系，線性方程分別為y=476 732x-490 1.7，方法定量限為0.05 g/kg，回收率為97.3%～103.4%，RSD≤2.9%。該方法精確度好，靈敏度高，樣品預(yù)處理簡(jiǎn)單，避免了滴定分析方法中復(fù)配添加劑對(duì)滴定結(jié)果的干擾，是復(fù)配食品添加劑中丙酸鈣含量測(cè)定的理想檢測(cè)方法。

摘要：為避免復(fù)配添加劑對(duì)滴定結(jié)果的干擾，采用高效液相色譜法測(cè)定丙酸鈣的含量。試驗(yàn)結(jié)果表明：丙酸的質(zhì)量濃度在0.05～1.00 g/L的范圍內(nèi)與其峰面積呈線性關(guān)系，定量限為0.05 g/kg，回收率為97.3%～103.4 %，RSD≤2.9%（n=6）。該方法精確度好，靈敏度高，樣品預(yù)處理簡(jiǎn)單，是復(fù)配食品添加劑中丙酸鈣含量測(cè)定的理想方法。

關(guān)鍵詞：丙酸鈣；高效液相色譜；回收率；定量限；標(biāo)準(zhǔn)曲線

中圖分類號(hào)：TS202.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-1161（2014）09-0049-02

丙酸鈣是我國《GB2760-2011》允許使用的食品防腐劑，廣泛用于糕點(diǎn)、面包等面制食品和部分調(diào)味品，能抑制霉菌、酵母菌、需氧芽孢桿菌和革蘭氏陰性桿菌的生長繁殖。隨著食品添加劑應(yīng)用技術(shù)的發(fā)展和提高，復(fù)合食品添加劑越來越受到人們的重視，已經(jīng)成為食品添加劑工業(yè)的發(fā)展方向和潮流。復(fù)合食品添加劑往往在包裝上不標(biāo)明所含成份含量，使得應(yīng)用企業(yè)很難按《GB2760-2011》掌握具體的添加量。用水提取復(fù)合食品添加劑中丙酸鈣，采用高效液相色譜—二極管陣列檢測(cè)器測(cè)定，方法的精確度好、靈敏度高，樣品預(yù)處理簡(jiǎn)單，避免了滴定分析方法中復(fù)配添加劑對(duì)滴定結(jié)果干擾的問題，是復(fù)配食品添加劑中丙酸鈣含量測(cè)定的理想方法。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

1.1.1 儀器 WATERS 2695高效液相色譜儀（配二極管陣列檢測(cè)器）：美國waters公司；色譜柱Thermo Syncronis C18 （4.6 mm ×150 mm，5 μm）、電子天平：北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司。

1.1.2 試劑 丙酸鈣標(biāo)準(zhǔn)品（純度97.5 %）由DR.Ehrenstorfer GmbH生產(chǎn)；甲醇（色譜純）由美國fisher公司生產(chǎn)；色譜用水符合《GB/T6682-2008》規(guī)定的一級(jí)水。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 樣品前處理 準(zhǔn)確稱取1 g粉末樣品（精確至0.00 02 g）至100 mL容量瓶中，用水溶解并定容至100 mL，待樣品完全溶解后，移取適量溶液至100 mL容量瓶中，用水定容至100 mL。

1.2.2 色譜條件 流動(dòng)相的選擇：選擇甲醇及水（用磷酸調(diào)pH值至2.7～3.5，使用時(shí)配制）15∶85（V/V）為流動(dòng)相，流速1.0 mL/min，柱溫30 ℃。

檢測(cè)波長的選擇：對(duì)丙酸在190～400 nm之間進(jìn)行全波長掃描，確定丙酸的最大吸收波長為210 nm。

在以上色譜條件下，進(jìn)樣10 μL，以色譜峰面積外標(biāo)法定量，測(cè)得丙酸的色譜圖，如圖1所示。

1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線 準(zhǔn)確稱取丙酸鈣126.0 mg，加水溶解后，移入50 mL容量瓶中，用水定容至50 mL，作為儲(chǔ)備溶液（丙酸含量為2 mg/mL），于4 ℃冰箱內(nèi)貯存，有效期3個(gè)月。

分別移取0.25，0.50，1.00，2.00，5.00 mL儲(chǔ)備液于10 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，得到濃度分別為0.05，0.10，0.20，0.40，1.00 g/L的標(biāo)準(zhǔn)使用溶液，在1.2.2色譜條件下進(jìn)樣100 μL，根據(jù)濃度與峰面積的關(guān)系繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.4 方法回收率及精密度 為考察方法的可靠性，對(duì)添加劑進(jìn)行加標(biāo)回收率測(cè)定。將丙酸加標(biāo)量為10，100，500 g/kg的樣品按照1.2.1提取方法提取3份，每份提取樣品測(cè)定6次，計(jì)算回收率及精密度。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性范圍及檢出限

檢測(cè)結(jié)果中色譜峰高為噪聲高10倍（S/N=10）相對(duì)應(yīng)的濃度為定量限。線性方程、相關(guān)系數(shù)、線性范圍及檢出限見表1。

從表1可以看出，丙酸在線性范圍內(nèi)的線性關(guān)系良好。

2.2 方法回收率及精密度

通過加標(biāo)回收率試驗(yàn)，對(duì)方法進(jìn)行回收率和精密度測(cè)定，結(jié)果見表2。

由表2可知：丙酸的平均回收率為97.5%～101.0%，RSD≤2.2%（n=6）。表明該方法精密度、準(zhǔn)確度能滿足分析要求。

3 結(jié)論

該研究建立了復(fù)合食品添加劑中丙酸鈣含量的高效液相色譜測(cè)定方法。結(jié)果表明，丙酸在0.05～1.00 g/L的范圍內(nèi)與其峰面積呈線性關(guān)系，線性方程分別為y=476 732x-490 1.7，方法定量限為0.05 g/kg，回收率為97.3%～103.4%，RSD≤2.9%。該方法精確度好，靈敏度高，樣品預(yù)處理簡(jiǎn)單，避免了滴定分析方法中復(fù)配添加劑對(duì)滴定結(jié)果的干擾，是復(fù)配食品添加劑中丙酸鈣含量測(cè)定的理想檢測(cè)方法。

摘要：為避免復(fù)配添加劑對(duì)滴定結(jié)果的干擾，采用高效液相色譜法測(cè)定丙酸鈣的含量。試驗(yàn)結(jié)果表明：丙酸的質(zhì)量濃度在0.05～1.00 g/L的范圍內(nèi)與其峰面積呈線性關(guān)系，定量限為0.05 g/kg，回收率為97.3%～103.4 %，RSD≤2.9%（n=6）。該方法精確度好，靈敏度高，樣品預(yù)處理簡(jiǎn)單，是復(fù)配食品添加劑中丙酸鈣含量測(cè)定的理想方法。

關(guān)鍵詞：丙酸鈣；高效液相色譜；回收率；定量限；標(biāo)準(zhǔn)曲線

中圖分類號(hào)：TS202.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-1161（2014）09-0049-02

丙酸鈣是我國《GB2760-2011》允許使用的食品防腐劑，廣泛用于糕點(diǎn)、面包等面制食品和部分調(diào)味品，能抑制霉菌、酵母菌、需氧芽孢桿菌和革蘭氏陰性桿菌的生長繁殖。隨著食品添加劑應(yīng)用技術(shù)的發(fā)展和提高，復(fù)合食品添加劑越來越受到人們的重視，已經(jīng)成為食品添加劑工業(yè)的發(fā)展方向和潮流。復(fù)合食品添加劑往往在包裝上不標(biāo)明所含成份含量，使得應(yīng)用企業(yè)很難按《GB2760-2011》掌握具體的添加量。用水提取復(fù)合食品添加劑中丙酸鈣，采用高效液相色譜—二極管陣列檢測(cè)器測(cè)定，方法的精確度好、靈敏度高，樣品預(yù)處理簡(jiǎn)單，避免了滴定分析方法中復(fù)配添加劑對(duì)滴定結(jié)果干擾的問題，是復(fù)配食品添加劑中丙酸鈣含量測(cè)定的理想方法。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

1.1.1 儀器 WATERS 2695高效液相色譜儀（配二極管陣列檢測(cè)器）：美國waters公司；色譜柱Thermo Syncronis C18 （4.6 mm ×150 mm，5 μm）、電子天平：北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司。

1.1.2 試劑 丙酸鈣標(biāo)準(zhǔn)品（純度97.5 %）由DR.Ehrenstorfer GmbH生產(chǎn)；甲醇（色譜純）由美國fisher公司生產(chǎn)；色譜用水符合《GB/T6682-2008》規(guī)定的一級(jí)水。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 樣品前處理 準(zhǔn)確稱取1 g粉末樣品（精確至0.00 02 g）至100 mL容量瓶中，用水溶解并定容至100 mL，待樣品完全溶解后，移取適量溶液至100 mL容量瓶中，用水定容至100 mL。

1.2.2 色譜條件 流動(dòng)相的選擇：選擇甲醇及水（用磷酸調(diào)pH值至2.7～3.5，使用時(shí)配制）15∶85（V/V）為流動(dòng)相，流速1.0 mL/min，柱溫30 ℃。

檢測(cè)波長的選擇：對(duì)丙酸在190～400 nm之間進(jìn)行全波長掃描，確定丙酸的最大吸收波長為210 nm。

在以上色譜條件下，進(jìn)樣10 μL，以色譜峰面積外標(biāo)法定量，測(cè)得丙酸的色譜圖，如圖1所示。

1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線 準(zhǔn)確稱取丙酸鈣126.0 mg，加水溶解后，移入50 mL容量瓶中，用水定容至50 mL，作為儲(chǔ)備溶液（丙酸含量為2 mg/mL），于4 ℃冰箱內(nèi)貯存，有效期3個(gè)月。

分別移取0.25，0.50，1.00，2.00，5.00 mL儲(chǔ)備液于10 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，得到濃度分別為0.05，0.10，0.20，0.40，1.00 g/L的標(biāo)準(zhǔn)使用溶液，在1.2.2色譜條件下進(jìn)樣100 μL，根據(jù)濃度與峰面積的關(guān)系繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.4 方法回收率及精密度 為考察方法的可靠性，對(duì)添加劑進(jìn)行加標(biāo)回收率測(cè)定。將丙酸加標(biāo)量為10，100，500 g/kg的樣品按照1.2.1提取方法提取3份，每份提取樣品測(cè)定6次，計(jì)算回收率及精密度。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性范圍及檢出限

檢測(cè)結(jié)果中色譜峰高為噪聲高10倍（S/N=10）相對(duì)應(yīng)的濃度為定量限。線性方程、相關(guān)系數(shù)、線性范圍及檢出限見表1。

從表1可以看出，丙酸在線性范圍內(nèi)的線性關(guān)系良好。

2.2 方法回收率及精密度

通過加標(biāo)回收率試驗(yàn)，對(duì)方法進(jìn)行回收率和精密度測(cè)定，結(jié)果見表2。

由表2可知：丙酸的平均回收率為97.5%～101.0%，RSD≤2.2%（n=6）。表明該方法精密度、準(zhǔn)確度能滿足分析要求。

3 結(jié)論

該研究建立了復(fù)合食品添加劑中丙酸鈣含量的高效液相色譜測(cè)定方法。結(jié)果表明，丙酸在0.05～1.00 g/L的范圍內(nèi)與其峰面積呈線性關(guān)系，線性方程分別為y=476 732x-490 1.7，方法定量限為0.05 g/kg，回收率為97.3%～103.4%，RSD≤2.9%。該方法精確度好，靈敏度高，樣品預(yù)處理簡(jiǎn)單，避免了滴定分析方法中復(fù)配添加劑對(duì)滴定結(jié)果的干擾，是復(fù)配食品添加劑中丙酸鈣含量測(cè)定的理想檢測(cè)方法。