4—氨基安替比林分光光度法測定土壤中的揮發(fā)酚

賈佳等

摘 要：該文主要研究了4-氨基安替比林分光光度法測定土壤中的揮發(fā)酚的方法，并對該方法的檢出限、精密度、加標回收率、線性進行了驗證。結果表明，該方法的線性相關可達到0.999以上，精密度在7%以內(nèi)，檢出限為0.011mg/kg，加標回收率在89%～105%。

關鍵詞：分光光度法；揮發(fā)酚；土壤；液液萃取

中圖分類號 X833 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731（2014）23-19-02

Abstract：The determination of volatile phenolic compounds in soil by 4-AAP spectrophotometric method was studied in this paper，verifying the method detection limit，precision，recovery and the linear correlation of the method.The result showed that the linear correlation of volatile phenolic could reach above 0.999，and the precision was less than 7%，the MDL of volatile phenolic was 0.011mg/kg，the recoveries were in the range of 89% to 105%.

Key words：Spectrophotometric method；Volatile phenolic compounds；Soil；Extraction

土壤中的揮發(fā)酚（volatile phenolic compounds）屬于我國土壤環(huán)境監(jiān)測的常規(guī)項目，由于土壤監(jiān)測屬于痕量分析，加之土壤成分的不均一性，因此對分析方法的準確性有較高的要求。測定土壤中的揮發(fā)酚大多采用4-氨基安替比林分光光度法，該方法具有較靈敏且穩(wěn)定性高的優(yōu)點。所謂揮發(fā)酚，就是能隨水蒸氣同時蒸出的揮發(fā)性酚類化合物[1]，因此可先從土壤中將酚提取出來，再進行蒸餾以測定其含量。土壤中提取酚的方法主要有硫酸直接蒸餾法、水蒸氣蒸餾法及直接用蒸餾水提取土壤中的酚后再蒸餾[2]。由于揮發(fā)酚在土壤中含量較低，并且在酸、堿條件下易發(fā)生降解，影響測定結果，因此可選擇水提取后再蒸餾的方法。

1 適用范圍

適用于新鮮土壤。

2 樣品采集與保存

土壤樣品中揮發(fā)酚不穩(wěn)定，在采集的新鮮土壤中加入2%氯化汞作為固定劑，24h內(nèi)分析。若4℃下存放，可保存7d。

3 方法原理

用水將土壤中的游離揮發(fā)酚全部提取出來，蒸餾提取液，被蒸餾出的酚類化合物于pH（10.0±0.2）介質(zhì)中，在鐵氰化鉀存在下，與4-氨基安替比林反應生成橙紅色的安替比林染料，用三氯甲烷萃取后，在460nm波長下測定吸光度，吸光度值與酚含量成正比，結果以苯酚計。

4 實驗材料和方法

4.1 儀器與試劑

4.1.1 儀器 全玻璃蒸餾裝置；往復式振蕩器；分光光度計；抽濾裝置；250mL具塞錐形瓶；250mL分液漏斗；不同體積的大肚移液管和刻度移液管。

4.1.2 試劑 酚標準貯備液：500mg/L，室溫下保存；酚標準使用液：1.00mg/L，室溫下保存；三氯甲烷：優(yōu)級純；無酚水；2%4-氨基安替比林溶液：棕色試劑瓶，4℃保存7d；緩沖溶液（pH9.8）：棕色試劑瓶，4℃保存7d；2%氯化汞溶液；10%硫酸銅溶液；5%氯化鈣溶液；（1+3）硫酸溶液；磷酸；甲基橙指示劑。

4.2 測定方法

4.2.1 土壤干物質(zhì)含量測定 準確稱取20g土樣，測定其干物質(zhì)含量。

4.2.2 土樣預處理

4.2.2.1 水提取 準確稱取50g新鮮土壤樣品置于250mL具塞錐形瓶中，加入15mL2%氯化汞溶液，搖勻。再加入80mL無酚水、5mL 5%氯化鈣溶液，在往復式振蕩器上振蕩20min。取下錐形瓶，對土壤懸濁液進行過濾，并用無酚水將錐形瓶和沉淀洗滌幾次，收集濾液。

4.2.2.2 提取液蒸餾 將濾液移入500mL蒸餾瓶中，加水至約250mL，加入幾滴甲基橙指示劑，用磷酸調(diào)節(jié)pH至4以下，再加入5mL10%硫酸銅和數(shù)粒玻璃珠，進行蒸餾，餾出液定容至200mL。

4.2.3 餾出液分析 將餾出液全部轉(zhuǎn)移至250mL分液漏斗中，向各分液漏斗中加入1.0mL緩沖溶液，混勻，加入1.0mL 2%4-氨基安替比林溶液，混勻，再加入1.0mL8%鐵氰化鉀溶液，充分搖勻后靜置10min。加入10mL三氯甲烷，劇烈振搖2min，靜置待溶液分層后，于分液漏斗頸管內(nèi)塞一小團干脫脂棉或濾紙，將三氯甲烷層通過干脫脂棉團或濾紙，棄去最初濾出的數(shù)滴萃取液后，將余下三氯甲烷直接放入光程為20mm的比色皿中，在460nm波長處，以三氯甲烷為參比測定三氯甲烷層的吸光度。

4.2.4 標準曲線的繪制 （1）酚標準貯備溶液：500mg/L。（2）酚標準使用溶液：1.00mg/L。4℃保存，7d內(nèi)有效。（3）標準曲線的繪制：準確吸取酚標準使用液0.00，1.00，2.50，5.00，10.00，15.00，20.00mL于250mL分液漏斗中，加水至總體積為200mL，搖勻。分析過程同4.2.3。

6 注意事項

（1）所用樣品為新鮮土壤，采集后的樣品應盡快分析，冰箱4℃下保存。（2）實驗用水均不含酚。（3）由于酚類化合物的揮發(fā)速度是隨餾出液體積而變化的，因此，餾出液體積必須與試樣體積相等。（4）蒸餾時溫度不宜過高，避免蒸餾瓶內(nèi)出現(xiàn)泡沫。

參考文獻

[1]HJ503-2009.水質(zhì) 揮發(fā)酚的測定4-氨基安替比林分光光度法[S].

[2]城鄉(xiāng)建設環(huán)境保護部環(huán)境保護局環(huán)境監(jiān)測分析方法編寫組.環(huán)境監(jiān)測分析方法[M].北京：中國環(huán)境科學出版社，1983：332-335.

（責編：張宏民）endprint

摘 要：該文主要研究了4-氨基安替比林分光光度法測定土壤中的揮發(fā)酚的方法，并對該方法的檢出限、精密度、加標回收率、線性進行了驗證。結果表明，該方法的線性相關可達到0.999以上，精密度在7%以內(nèi)，檢出限為0.011mg/kg，加標回收率在89%～105%。

關鍵詞：分光光度法；揮發(fā)酚；土壤；液液萃取

中圖分類號 X833 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731（2014）23-19-02

Abstract：The determination of volatile phenolic compounds in soil by 4-AAP spectrophotometric method was studied in this paper，verifying the method detection limit，precision，recovery and the linear correlation of the method.The result showed that the linear correlation of volatile phenolic could reach above 0.999，and the precision was less than 7%，the MDL of volatile phenolic was 0.011mg/kg，the recoveries were in the range of 89% to 105%.

Key words：Spectrophotometric method；Volatile phenolic compounds；Soil；Extraction

土壤中的揮發(fā)酚（volatile phenolic compounds）屬于我國土壤環(huán)境監(jiān)測的常規(guī)項目，由于土壤監(jiān)測屬于痕量分析，加之土壤成分的不均一性，因此對分析方法的準確性有較高的要求。測定土壤中的揮發(fā)酚大多采用4-氨基安替比林分光光度法，該方法具有較靈敏且穩(wěn)定性高的優(yōu)點。所謂揮發(fā)酚，就是能隨水蒸氣同時蒸出的揮發(fā)性酚類化合物[1]，因此可先從土壤中將酚提取出來，再進行蒸餾以測定其含量。土壤中提取酚的方法主要有硫酸直接蒸餾法、水蒸氣蒸餾法及直接用蒸餾水提取土壤中的酚后再蒸餾[2]。由于揮發(fā)酚在土壤中含量較低，并且在酸、堿條件下易發(fā)生降解，影響測定結果，因此可選擇水提取后再蒸餾的方法。

1 適用范圍

適用于新鮮土壤。

2 樣品采集與保存

土壤樣品中揮發(fā)酚不穩(wěn)定，在采集的新鮮土壤中加入2%氯化汞作為固定劑，24h內(nèi)分析。若4℃下存放，可保存7d。

3 方法原理

用水將土壤中的游離揮發(fā)酚全部提取出來，蒸餾提取液，被蒸餾出的酚類化合物于pH（10.0±0.2）介質(zhì)中，在鐵氰化鉀存在下，與4-氨基安替比林反應生成橙紅色的安替比林染料，用三氯甲烷萃取后，在460nm波長下測定吸光度，吸光度值與酚含量成正比，結果以苯酚計。

4 實驗材料和方法

4.1 儀器與試劑

4.1.1 儀器 全玻璃蒸餾裝置；往復式振蕩器；分光光度計；抽濾裝置；250mL具塞錐形瓶；250mL分液漏斗；不同體積的大肚移液管和刻度移液管。

4.1.2 試劑 酚標準貯備液：500mg/L，室溫下保存；酚標準使用液：1.00mg/L，室溫下保存；三氯甲烷：優(yōu)級純；無酚水；2%4-氨基安替比林溶液：棕色試劑瓶，4℃保存7d；緩沖溶液（pH9.8）：棕色試劑瓶，4℃保存7d；2%氯化汞溶液；10%硫酸銅溶液；5%氯化鈣溶液；（1+3）硫酸溶液；磷酸；甲基橙指示劑。

4.2 測定方法

4.2.1 土壤干物質(zhì)含量測定 準確稱取20g土樣，測定其干物質(zhì)含量。

4.2.2 土樣預處理

4.2.2.1 水提取 準確稱取50g新鮮土壤樣品置于250mL具塞錐形瓶中，加入15mL2%氯化汞溶液，搖勻。再加入80mL無酚水、5mL 5%氯化鈣溶液，在往復式振蕩器上振蕩20min。取下錐形瓶，對土壤懸濁液進行過濾，并用無酚水將錐形瓶和沉淀洗滌幾次，收集濾液。

4.2.2.2 提取液蒸餾 將濾液移入500mL蒸餾瓶中，加水至約250mL，加入幾滴甲基橙指示劑，用磷酸調(diào)節(jié)pH至4以下，再加入5mL10%硫酸銅和數(shù)粒玻璃珠，進行蒸餾，餾出液定容至200mL。

4.2.3 餾出液分析 將餾出液全部轉(zhuǎn)移至250mL分液漏斗中，向各分液漏斗中加入1.0mL緩沖溶液，混勻，加入1.0mL 2%4-氨基安替比林溶液，混勻，再加入1.0mL8%鐵氰化鉀溶液，充分搖勻后靜置10min。加入10mL三氯甲烷，劇烈振搖2min，靜置待溶液分層后，于分液漏斗頸管內(nèi)塞一小團干脫脂棉或濾紙，將三氯甲烷層通過干脫脂棉團或濾紙，棄去最初濾出的數(shù)滴萃取液后，將余下三氯甲烷直接放入光程為20mm的比色皿中，在460nm波長處，以三氯甲烷為參比測定三氯甲烷層的吸光度。

4.2.4 標準曲線的繪制 （1）酚標準貯備溶液：500mg/L。（2）酚標準使用溶液：1.00mg/L。4℃保存，7d內(nèi)有效。（3）標準曲線的繪制：準確吸取酚標準使用液0.00，1.00，2.50，5.00，10.00，15.00，20.00mL于250mL分液漏斗中，加水至總體積為200mL，搖勻。分析過程同4.2.3。

6 注意事項

（1）所用樣品為新鮮土壤，采集后的樣品應盡快分析，冰箱4℃下保存。（2）實驗用水均不含酚。（3）由于酚類化合物的揮發(fā)速度是隨餾出液體積而變化的，因此，餾出液體積必須與試樣體積相等。（4）蒸餾時溫度不宜過高，避免蒸餾瓶內(nèi)出現(xiàn)泡沫。

參考文獻

[1]HJ503-2009.水質(zhì) 揮發(fā)酚的測定4-氨基安替比林分光光度法[S].

[2]城鄉(xiāng)建設環(huán)境保護部環(huán)境保護局環(huán)境監(jiān)測分析方法編寫組.環(huán)境監(jiān)測分析方法[M].北京：中國環(huán)境科學出版社，1983：332-335.

（責編：張宏民）endprint

摘 要：該文主要研究了4-氨基安替比林分光光度法測定土壤中的揮發(fā)酚的方法，并對該方法的檢出限、精密度、加標回收率、線性進行了驗證。結果表明，該方法的線性相關可達到0.999以上，精密度在7%以內(nèi)，檢出限為0.011mg/kg，加標回收率在89%～105%。

關鍵詞：分光光度法；揮發(fā)酚；土壤；液液萃取

中圖分類號 X833 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731（2014）23-19-02

Abstract：The determination of volatile phenolic compounds in soil by 4-AAP spectrophotometric method was studied in this paper，verifying the method detection limit，precision，recovery and the linear correlation of the method.The result showed that the linear correlation of volatile phenolic could reach above 0.999，and the precision was less than 7%，the MDL of volatile phenolic was 0.011mg/kg，the recoveries were in the range of 89% to 105%.

Key words：Spectrophotometric method；Volatile phenolic compounds；Soil；Extraction

土壤中的揮發(fā)酚（volatile phenolic compounds）屬于我國土壤環(huán)境監(jiān)測的常規(guī)項目，由于土壤監(jiān)測屬于痕量分析，加之土壤成分的不均一性，因此對分析方法的準確性有較高的要求。測定土壤中的揮發(fā)酚大多采用4-氨基安替比林分光光度法，該方法具有較靈敏且穩(wěn)定性高的優(yōu)點。所謂揮發(fā)酚，就是能隨水蒸氣同時蒸出的揮發(fā)性酚類化合物[1]，因此可先從土壤中將酚提取出來，再進行蒸餾以測定其含量。土壤中提取酚的方法主要有硫酸直接蒸餾法、水蒸氣蒸餾法及直接用蒸餾水提取土壤中的酚后再蒸餾[2]。由于揮發(fā)酚在土壤中含量較低，并且在酸、堿條件下易發(fā)生降解，影響測定結果，因此可選擇水提取后再蒸餾的方法。

1 適用范圍

適用于新鮮土壤。

2 樣品采集與保存

土壤樣品中揮發(fā)酚不穩(wěn)定，在采集的新鮮土壤中加入2%氯化汞作為固定劑，24h內(nèi)分析。若4℃下存放，可保存7d。

3 方法原理

用水將土壤中的游離揮發(fā)酚全部提取出來，蒸餾提取液，被蒸餾出的酚類化合物于pH（10.0±0.2）介質(zhì)中，在鐵氰化鉀存在下，與4-氨基安替比林反應生成橙紅色的安替比林染料，用三氯甲烷萃取后，在460nm波長下測定吸光度，吸光度值與酚含量成正比，結果以苯酚計。

4 實驗材料和方法

4.1 儀器與試劑

4.1.1 儀器 全玻璃蒸餾裝置；往復式振蕩器；分光光度計；抽濾裝置；250mL具塞錐形瓶；250mL分液漏斗；不同體積的大肚移液管和刻度移液管。

4.1.2 試劑 酚標準貯備液：500mg/L，室溫下保存；酚標準使用液：1.00mg/L，室溫下保存；三氯甲烷：優(yōu)級純；無酚水；2%4-氨基安替比林溶液：棕色試劑瓶，4℃保存7d；緩沖溶液（pH9.8）：棕色試劑瓶，4℃保存7d；2%氯化汞溶液；10%硫酸銅溶液；5%氯化鈣溶液；（1+3）硫酸溶液；磷酸；甲基橙指示劑。

4.2 測定方法

4.2.1 土壤干物質(zhì)含量測定 準確稱取20g土樣，測定其干物質(zhì)含量。

4.2.2 土樣預處理

4.2.2.1 水提取 準確稱取50g新鮮土壤樣品置于250mL具塞錐形瓶中，加入15mL2%氯化汞溶液，搖勻。再加入80mL無酚水、5mL 5%氯化鈣溶液，在往復式振蕩器上振蕩20min。取下錐形瓶，對土壤懸濁液進行過濾，并用無酚水將錐形瓶和沉淀洗滌幾次，收集濾液。

4.2.2.2 提取液蒸餾 將濾液移入500mL蒸餾瓶中，加水至約250mL，加入幾滴甲基橙指示劑，用磷酸調(diào)節(jié)pH至4以下，再加入5mL10%硫酸銅和數(shù)粒玻璃珠，進行蒸餾，餾出液定容至200mL。

4.2.3 餾出液分析 將餾出液全部轉(zhuǎn)移至250mL分液漏斗中，向各分液漏斗中加入1.0mL緩沖溶液，混勻，加入1.0mL 2%4-氨基安替比林溶液，混勻，再加入1.0mL8%鐵氰化鉀溶液，充分搖勻后靜置10min。加入10mL三氯甲烷，劇烈振搖2min，靜置待溶液分層后，于分液漏斗頸管內(nèi)塞一小團干脫脂棉或濾紙，將三氯甲烷層通過干脫脂棉團或濾紙，棄去最初濾出的數(shù)滴萃取液后，將余下三氯甲烷直接放入光程為20mm的比色皿中，在460nm波長處，以三氯甲烷為參比測定三氯甲烷層的吸光度。

4.2.4 標準曲線的繪制 （1）酚標準貯備溶液：500mg/L。（2）酚標準使用溶液：1.00mg/L。4℃保存，7d內(nèi)有效。（3）標準曲線的繪制：準確吸取酚標準使用液0.00，1.00，2.50，5.00，10.00，15.00，20.00mL于250mL分液漏斗中，加水至總體積為200mL，搖勻。分析過程同4.2.3。

6 注意事項

（1）所用樣品為新鮮土壤，采集后的樣品應盡快分析，冰箱4℃下保存。（2）實驗用水均不含酚。（3）由于酚類化合物的揮發(fā)速度是隨餾出液體積而變化的，因此，餾出液體積必須與試樣體積相等。（4）蒸餾時溫度不宜過高，避免蒸餾瓶內(nèi)出現(xiàn)泡沫。

參考文獻

[1]HJ503-2009.水質(zhì) 揮發(fā)酚的測定4-氨基安替比林分光光度法[S].

[2]城鄉(xiāng)建設環(huán)境保護部環(huán)境保護局環(huán)境監(jiān)測分析方法編寫組.環(huán)境監(jiān)測分析方法[M].北京：中國環(huán)境科學出版社，1983：332-335.

（責編：張宏民）endprint