以患者新鮮血清標(biāo)本制備室內(nèi)控品的應(yīng)用研究＊

崔 婷，馬建鋒（南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，南京 210029）

依據(jù)《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法》，臨床檢測(cè)項(xiàng)目都需進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量控制（簡(jiǎn)稱室內(nèi)質(zhì)控），而在實(shí)際工作中經(jīng)常遇到某些檢驗(yàn)項(xiàng)目的質(zhì)控品供應(yīng)不足，不能滿足正常的質(zhì)控需求［1-2］。本研究嘗試用患者新鮮血清進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控，與商品化的質(zhì)控血清進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控的效果比較，評(píng)估其可行性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1材料與方法

1.1 材料來(lái)源選擇本院20份當(dāng)日臨床新鮮血清，其中胱抑素C（Cys-C）濃度不超過(guò)0.6mg／L 4份，＞0.6～1.0mg／L 6份，＞1.0～2.0mg／L 4份，＞2.0～4.0mg／L 4份，大于4.0 mg／L 2份。使用儀器為Olympus AU 5400公司生化分析儀，試劑為北京利德曼股份有限公司生產(chǎn)的Cys-C檢測(cè)試劑，批號(hào)212251；標(biāo)準(zhǔn)品批號(hào)：205111C；質(zhì)控品采用Bio-RAD公司質(zhì)控品，批號(hào)14431和14432。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本穩(wěn)定性驗(yàn)證 在標(biāo)本采集當(dāng)日，對(duì)20份臨床新鮮血清進(jìn)行2次Cys-C檢測(cè)，計(jì)算并記錄均值及標(biāo)準(zhǔn)差（SD），2次檢測(cè)均未發(fā)現(xiàn)離群值。標(biāo)本檢測(cè)后加蓋保存于普通冰箱冷藏，以后在第3、5、8天分別對(duì)每份標(biāo)本檢測(cè)2次，計(jì)算并記錄和SD，以第1天的結(jié)果為比較靶值，隨后的結(jié)果分別與第1天結(jié)果進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)和回歸分析，計(jì)算在正常參考區(qū)間兩端的誤差，以確定該項(xiàng)目的標(biāo)本穩(wěn)定時(shí)間［3-4］。

1.2.2 室內(nèi)質(zhì)控的實(shí)施 以高濃度質(zhì)控物的變異系數(shù)（CV%）作為自制質(zhì)控品的質(zhì)量控制目標(biāo)，取濃度在正常參考區(qū)間兩端處（0.50～0.70mg／L、1.0～1.4mg／L）的患者新鮮血清標(biāo)本各一份作為自制質(zhì)控品，同時(shí)使用購(gòu)買的Bio-RAD質(zhì)控品進(jìn)行常規(guī)室內(nèi)質(zhì)控，比較兩種質(zhì)控方法的分析結(jié)果［5-6］。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理使用SPSS17.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，所有結(jié)果以±s表示，將第3、5、8天的結(jié)果與第1天結(jié)果采用配對(duì)t檢驗(yàn)進(jìn)行比較，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；以第1天的結(jié)果為Y，第3、5、8天的結(jié)果為X，通過(guò)回歸分析計(jì)算回歸方程Y=bX+a，并分別計(jì)算在正常參考區(qū)間兩端（0.60mg／L和1.20mg／L）的誤差。

2 結(jié) 果

2.1 自制控制品穩(wěn)定性結(jié)果新鮮血清樣品第1天檢測(cè)結(jié)果為（1.81±1.96）mg／L，第3、5、8天結(jié)果分別為（1.82±1.96）、（1.82±2.02）、（1.79±1.95）mg／L，檢測(cè)結(jié)果與第1天檢測(cè)結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），說(shuō)明新鮮血清樣品在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)冷藏條件下至少可以穩(wěn)定8d?；貧w分析同樣顯示新鮮血清樣品在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)冷藏條件下至少穩(wěn)定8d。見(jiàn)表1。

表1 穩(wěn)定性檢測(cè)回歸分析

2.2 Bio-RAD質(zhì)控品和自制品控物的室內(nèi)質(zhì)控檢測(cè)結(jié)果第1個(gè)月不同濃度室內(nèi)質(zhì)控品檢測(cè)結(jié)果比較，Bio-RAD質(zhì)控品和自制質(zhì)控品的圖形基本相似，說(shuō)明質(zhì)控效果相近。見(jiàn)圖1、2。

圖1 第1個(gè)月低濃度質(zhì)控品檢測(cè)結(jié)果

圖2 第1個(gè)月高濃度質(zhì)控品檢測(cè)結(jié)果

圖3 第2個(gè)月低濃度質(zhì)控品檢測(cè)結(jié)果

圖4 第2個(gè)月高濃度質(zhì)控品檢測(cè)結(jié)果

圖5 第3個(gè)月低濃度質(zhì)控品檢測(cè)結(jié)果

當(dāng)?shù)?個(gè)月后，根據(jù)統(tǒng)計(jì)得到的x、SD制訂后續(xù)室內(nèi)質(zhì)控的控制線，以13S，22S為質(zhì)控規(guī)則進(jìn)行質(zhì)量控制。第2個(gè)月未檢測(cè)出失控結(jié)果。第3個(gè)月在第13質(zhì)控批次，兩個(gè)濃度水平的質(zhì)控品均檢出失控結(jié)果，但兩種質(zhì)控物的效果相似，見(jiàn)圖3～6。

圖6 第3個(gè)月高濃度質(zhì)控品檢測(cè)結(jié)果

3 討 論

室內(nèi)質(zhì)控檢測(cè)旨在監(jiān)控實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢測(cè)工作的精密度，提高實(shí)驗(yàn)室工作中批內(nèi)、批間標(biāo)本檢測(cè)的一致性，保障向臨床提供準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，從而幫助正確判斷疾病類型、發(fā)展趨勢(shì)及決定治療方案［7-8］。在采用切實(shí)可行的室內(nèi)質(zhì)控工作方案中，使用基質(zhì)與臨床標(biāo)本接近的質(zhì)控品是最理想的，其優(yōu)勢(shì)在于與實(shí)際檢測(cè)標(biāo)本有相同的基質(zhì)，能真正體現(xiàn)標(biāo)本檢測(cè)過(guò)程中的狀況，但同時(shí)也存在質(zhì)控品存放穩(wěn)定時(shí)間的問(wèn)題，如果使用不穩(wěn)定的質(zhì)控品進(jìn)行質(zhì)控，結(jié)果將毫無(wú)意義［9-10］。本研究結(jié)果中，第3個(gè)月在同一點(diǎn)高、低濃度Bio-RAD質(zhì)控品各有1次超過(guò)2SD，而用自制質(zhì)控品也能檢出該失控點(diǎn)，符合22S規(guī)則而判為失控結(jié)果，經(jīng)查為當(dāng)天試劑裝載錯(cuò)誤所致。從本研究結(jié)果中也發(fā)現(xiàn)，每周一的結(jié)果普遍低于周二，回顧穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，1天結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。原因可能是周末工作量小，分析儀中試劑剩余量較多，周一加入新試劑量少，而本研究中Cys-C檢測(cè)采用顆粒增加免疫比濁法，試劑由于長(zhǎng)時(shí)間放置，導(dǎo)致其中致敏抗體的顆粒沉淀，從而影響檢測(cè)結(jié)果。因此，應(yīng)降低周六試劑加載量上限，同時(shí)在周一加入新試劑后增加混勻次數(shù)。以此作為預(yù)防性措施未發(fā)生上述現(xiàn)象。本研究結(jié)果顯示，Cys-C的濃度在臨床新鮮血清標(biāo)本冷藏于普通冰箱時(shí)，至少可以穩(wěn)定8d，說(shuō)明新鮮血清標(biāo)本可以代替商品化的質(zhì)控用于常規(guī)室內(nèi)質(zhì)控［11］。

通過(guò)驗(yàn)證并確定新鮮血清標(biāo)本的穩(wěn)定時(shí)間，發(fā)現(xiàn)在其穩(wěn)定期內(nèi)作為質(zhì)控品進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控是完全可行的。這對(duì)沒(méi)有商品化質(zhì)控品的檢測(cè)項(xiàng)目，提供了一種可行的室內(nèi)質(zhì)控方式，同時(shí)對(duì)于降低實(shí)驗(yàn)室成本也有一定意義。除節(jié)省購(gòu)買質(zhì)控品所需資金外，由于以新鮮血清標(biāo)本制備的質(zhì)控品與臨床檢測(cè)標(biāo)本具有相同的特性，減少了基質(zhì)效應(yīng)的影響，使該方法可更加準(zhǔn)確地反應(yīng)實(shí)際情況，更能有效檢出失控事件。而且商品化質(zhì)控品濃度不可以選擇，而臨床新鮮血清標(biāo)本則可以選擇，這樣便能保證臨床關(guān)注點(diǎn)的標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性，保障檢測(cè)結(jié)果的質(zhì)量。

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