貝前列素鈉腹腔注射對急性重癥胰腺炎大鼠血栓素、前列環(huán)素的影響

王 珣，于紅剛，王明林，周立云，胡義奎

(武漢市武昌醫(yī)院，武漢430000)

急性重癥胰腺炎(SAP)治療效果差，病死率高達(dá)25%，嚴(yán)重威脅人們的健康。目前認(rèn)為，微循環(huán)障礙是SAP病情進(jìn)展的一個(gè)重要因素［1～3］，其中血栓素(TXA2)及前列環(huán)素(PGI2)在微循環(huán)障礙中起非常重要的作用［4～7］。貝前列素鈉為 PGI2的衍生物，能調(diào)節(jié)血管張力、抑制血小板聚集、維持組織血流，通過升高cAMP水平、抑制Ca2+內(nèi)流及TXA2生成，起到改善微循環(huán)的作用［8］，目前已被用于慢性血管閉塞性疾病的治療。2011年5月～2012年5月，本研究初步探討了貝前列素鈉對 SPA大鼠TXA2、PGI2的影響，旨在為貝前列素鈉用于臨床治療SAP提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 SD大鼠60只，體質(zhì)量(300±20)g，雌雄各半，由武漢大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心提供。淀粉酶試劑盒(南京建成生物公司)，放射免疫試劑盒(北京科美東雅生物公司)。

1.2 方法

1.2.1 動物模型建立 按文獻(xiàn)［9］方法建立SAP模型。實(shí)驗(yàn)前12 h禁食，不禁飲。大鼠腹腔注射鹽酸氯胺酮麻醉，逆行胰膽管內(nèi)加壓注射5%牛磺膽酸鈉建立SAP模型。

1.2.2 分組及干預(yù) 將大鼠隨機(jī)分為5組，A組系正常大鼠，翻動十二指腸、胰腺后關(guān)閉腹腔，腹腔注射生理鹽水;B組為急性SAP造模后大鼠，腹腔注射生理鹽水干預(yù);C組為造模后大鼠，腹腔注射貝前列素鈉10 μg/kg干預(yù);D組為造模后大鼠，腹腔注射貝前列素鈉20 μg/kg干預(yù);E組為造模后大鼠，腹腔注射貝前列素鈉30 μg/kg干預(yù)。5組均于術(shù)后第6、12 h分兩批麻醉后行腹主動脈放血法處死，取其血漿和胰腺病理標(biāo)本。部分組織以10%中性甲醛固定，部分組織液氮凍存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3 TXA2/PGI2檢測 由于 TXA2和 PGI2在體內(nèi)極不穩(wěn)定，難以直接測定，故通過放射免疫分析法分析血漿中兩者穩(wěn)定的代謝終產(chǎn)物TXB2和6-Keto-PGF1α，將此作為TXA2和PGI2水平的指標(biāo)。

1.2.4 血清淀粉酶檢測 采用CNPG3法檢測。從低溫冰箱中取出裝有胰腺組織的EP管，于室溫放置30 min后稱重(M1)，打開EP管蓋，于90℃烤箱烘烤24 h后再次稱重(M2)，去除管中胰腺組織后稱量空管質(zhì)量(M3)，以組織濕質(zhì)量(M1-M3)/干質(zhì)量(M2-M3)表示胰腺組織含水量。

1.2.5 病理檢查 按照文獻(xiàn)［10］方法從胰腺水腫、壞死、出血、炎性浸潤4個(gè)方面進(jìn)行評分，每個(gè)項(xiàng)目計(jì)分分別為 0、0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4 分。

1.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以±s表示，正態(tài)資料行單因素方差分析;病理評分為非正態(tài)資料，用中位數(shù)表示，比較行秩和檢驗(yàn)。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組不同時(shí)間血淀粉酶、TXA2/PGI2比較 見表1。

表1 各組不同時(shí)間血淀粉酶、TXA2/PGI2比較(±s)

表1 各組不同時(shí)間血淀粉酶、TXA2/PGI2比較(±s)

注:不同時(shí)間各組間比較，P均＜0.05

組別 n 血淀粉酶(U/L) TXA2/PGI 2 A組12 6 h 2 883.01 ±692.35 1.15 ±0.08 12 h 2 792.00 ±688.44 1.16 ±0.10 B組 12 6 h 15 047.24 ±662.09 2.11 ±0.12 12 h 16 047.34 ±702.05 2.62 ±0.13 C組 12 6 h 11 099.57 ±714.13 2.08 ±0.14 12 h 10 087.20 ±654.63 1.87 ±0.06 D組 12 6 h 11 808.93 ±804.39 1.99 ±0.11 12 h 8 808.91 ±776.75 1.78 ±0.09 E組 12 6 h 12 106.33 ±699.84 1.84 ±0.07 12 h 8 711.25 ±712.56 1.62 ±0.10

2.2 各組病理評分比較 A、B、C、D、E組6 h胰腺標(biāo)本病理評分分別為 0.82、8.72、7.05、6.77、5.26分，12 h 分別為 0.84、13.72、9.21、8.54、6.05 分，B組各時(shí)間點(diǎn)胰腺標(biāo)本病理評分高于A組，C、D、E組低于B組，且呈劑量依賴性(P均＜0.05)。

3 討論

研究表明，胰腺微循環(huán)障礙不僅是SAP的始動因素，而且貫穿于SAP發(fā)展的全過程，更是SAP的一個(gè)重要惡化因素。SAP時(shí)機(jī)體產(chǎn)生大量炎癥介質(zhì)，包括 TXA2和PGI2。TXA2是極強(qiáng)的血管收縮劑，其可誘導(dǎo)血小板釋放、聚集，引發(fā)凝血障礙，使胰腺組織缺血加重，形成惡性循環(huán)。PGI2是血管擴(kuò)張劑，能強(qiáng)烈舒張血管和抑制血小板聚集，是TXA2最強(qiáng)的生理拮抗劑。TXA2和PGI2是一對血管張力調(diào)節(jié)介質(zhì)，其平衡失調(diào)將使胰腺血管舒縮功能失調(diào)、血栓形成、微循環(huán)障礙，最終影響胰腺組織灌注，導(dǎo)致胰腺壞死。因此，TXA2/PGI2相對平衡對SAP的轉(zhuǎn)歸尤為重要，積極改善微循環(huán)障礙可能是治療SAP的一個(gè)新的靶點(diǎn)［11～16］。

目前，改善胰腺微循環(huán)的藥物少，療效不確切。貝前列素鈉作為新型的具有抗血小板和擴(kuò)血管作用的PGI2衍生物，主要用于糖尿病周圍神經(jīng)病變及外周血管病的治療，并取得良好效果。有研究表明，貝前列素鈉對肺動脈高壓疾病的TXA2、PGI2變化有重要影響。日本關(guān)于抗凝血藥的論述中也評價(jià)了貝前列素鈉可改善微循環(huán)。本研究結(jié)果顯示，SAP時(shí)，6、12 h TXA2/PGI2、淀粉酶、病理評分均增高，貝前列素鈉干預(yù)后各指標(biāo)均降低，并呈劑量依賴性。提示貝前列素鈉可能通過降低TXA2/PGI2、淀粉酶而減輕SAP時(shí)的胰腺損傷，并隨劑量增大而抗損傷作用越強(qiáng)，為其用于臨床治療SAP提供了理論依據(jù)。

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