TCL法定性鑒別補腎生精合劑中三味中藥

孫艷杰 王皓 張聰 王路宏

補腎生精合劑是由巴戟天、菟絲子、 枸杞子等11味中藥組成的醫(yī)院制劑, 具有補腎生精、強筋健骨的功效。為控制該藥品的質(zhì)量, 本文對巴戟天、菟絲子、枸杞子三味藥進行了薄層色譜鑒別, 制定了補腎生精合劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn),更加全面地控制樣品質(zhì)量。

1 儀器與試劑

1.1 儀器 LC-250超聲波清洗器(濟寧市市中區(qū)魯超儀器廠)、ZF-2型三用紫外儀(上海安亭電儀器廠)、定量毛細管。

1.2 試劑 菟絲子對照藥材、巴戟天對照藥材、槲皮素對照品、枸杞子對照藥材(均購自中國藥品生物制品檢定所)。其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 巴戟天的鑒別 取補腎生精合劑50 ml, 加在聚酰胺柱(14～30目, 3 g, 內(nèi)徑1.5 cm, 先用乙醇50 ml, 再用水50 ml預(yù)洗)上, 用水50 ml洗脫, 棄去水洗脫液, 再用30%乙醇100 ml洗脫, 收集洗脫液, 置水浴上蒸至近干, 加水20 ml使溶解, 加入0.2 ml濃硫酸, 沸水浴加熱30 min, 放冷, 用乙醚萃取2次(分別20 ml、15 ml), 合并乙醚液, 揮干。殘渣加甲醇1 ml使溶解, 作為供試品溶液。 取巴戟天對照藥材1 g, 加水煎煮2次,30 min/次, 合并煎液、濾過, 濾液濃縮至近30 ml, 放冷, 加在聚酰胺柱(14～30目, 3 g, 內(nèi)徑1.5 cm, 先用乙醇50 ml, 再用水50 ml預(yù)洗)上, 按上述供試品溶液制備方法, 制成對照藥材溶液。按處方比例及生產(chǎn)工藝制備缺巴戟天陰性樣品, 并按供試品方法制成陰性對照溶液。照薄層色譜法［1］試驗, 吸取上述3種溶液各10 μl, 分別點于同一硅膠GF254薄層板上,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(6:4:0.1)作為展開劑, 展開、取出、晾干, 用氨蒸氣熏5 min, 置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品色譜中, 在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上, 顯相同的藍色熒光斑點。陰性無干擾。見圖1。

2.2 菟絲子的鑒別 取補腎生精合劑30 ml, 加1 ml的稀鹽酸酸化, 用乙酸乙酯提取2次(分別25 ml、20 ml), 合并乙酸乙酯液, 水浴蒸干, 殘渣加甲醇1 ml使溶解, 作為供試品溶液。取槲皮素對照品, 加甲醇制成每1 ml含0.5 mg槲皮素的溶液, 作為對照品溶液［2］。取菟絲子對照藥材1 g加水煎煮2次, 30 min /次, 合并煎液, 濾過, 濾液濃縮至近30 ml, 放冷,加1 ml的稀鹽酸酸化, 按上述供試品溶液制備方法, 制成對照藥材溶液。按處方比例及生產(chǎn)工藝制備缺菟絲子陰性樣品,并按供試品方法制成陰性對照溶液。照薄層色譜法［1］實驗,吸取上述4種溶液各10 μl, 分別點于同一硅膠G薄層板上,以甲苯-三氯甲烷-丙酮-甲酸(8:5:8.5:0.6)作為展開劑, 展開, 展距為15 cm以上, 取出, 晾干, 噴以5%三氯化鋁乙醇溶液, 在105℃加熱3 min后, 置紫外光燈(365 nm)下檢視,供試品色譜中, 在與對照藥材色譜和對照品色譜相應(yīng)的位置上, 顯相同顏色的熒光斑點。陰性無干擾, 見圖2。

2.3 枸杞子的鑒別 取本品35 ml, 用三氯甲烷20 ml振搖提取2次, 合并氯仿液, 用無水硫酸鈉脫水, 過濾, 濾液蒸干,殘渣加甲醇2 ml使溶解, 作為供試品溶液。取枸杞子對照藥材1 g, 加水煎煮2次, 30 min/次, 合并煎液, 濾過, 濾液濃縮至近30 ml, 放冷, 按上述供試品溶液制備方法, 制成對照藥材溶液。按處方比例及生產(chǎn)工藝制備缺枸杞子陰性樣品, 并按供試品方法制成陰性對照溶液。照薄層色譜法［1,3］實驗。吸取上述3種溶液各5 μl, 分別點于同一硅膠G薄層板上,以甲苯-丙酮-甲酸(5:1:1)的上層溶液為展開劑, 展開, 取出,晾干, 置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品色譜中, 在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上, 顯相同的亮藍色熒光斑點。陰性無干擾［4］。見圖 3。

圖1 巴戟天的TCL色譜圖

圖2 菟絲子的薄層色譜

圖3 枸杞子的薄層色譜

3 討論

補腎生精合劑是由11味中藥組成的復(fù)方制劑, 組成復(fù)雜, 干擾多。各味藥的鑒別分別嘗試了《中國藥典》、《中華人民共和國藥典薄層色譜彩色圖集》等多種文獻資料, 嘗試了多種樣品提取及純化方法, 改變了各種薄層色譜條件, 最后選定了本文中的巴戟天、菟絲子、枸杞子的定性鑒別方法,陰性對照表明其他成分對本方法無干擾, 該方法操作簡便,結(jié)果可靠, 專屬性強, 重現(xiàn)性好, 可用于控制本品質(zhì)量。

［1］國家藥典委員會 .中國藥典(一部).北京：中國醫(yī)藥科技出版社, 2010:83.

［2］張貴君 .常用中藥鑒定大全.哈爾濱 ：黑龍江科學(xué)技術(shù)出版社,1993:35.

［3］孫黎, 蘇克劍, 姚曉東, 等.TCL法定性鑒別黃麥合劑中6味中藥.中國藥師, 2012, 15(8):1199-1201.

［4］蔡伯漢, 陸兔林, 毛春芹.復(fù)方益腎膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立.藥學(xué)與臨床研究, 2010(6):578-579 .