紫莖澤蘭提取物對煙青蟲的生物活性試驗(yàn)

華勁松+歐陽朝輝

基金項(xiàng)目 四川省教育廳科研重點(diǎn)項(xiàng)目（2012ZA151）。

摘要測試了4種濃度的紫莖澤蘭提取液對煙青蟲的觸殺、胃毒和選擇性忌避作用等室內(nèi)生物活性。試驗(yàn)結(jié)果表明，紫莖澤蘭提取物對煙青蟲的胃毒作用效果比較明顯，當(dāng)濃度大于6 g/L，處理48 h后，煙青蟲校正死亡率可達(dá)60%以上；選擇性忌避作用也較為明顯，濃度為10 g/L，處理48 h后，煙青蟲忌避率可達(dá)為53.33%；而在觸殺作用方面效果不太理想，作用較遲緩；對煙青蟲的生物活性強(qiáng)度均隨提取液濃度的增大和處理時(shí)間的延長而增強(qiáng)。

關(guān)鍵詞煙青蟲；紫莖澤蘭提取物；生物活性

中圖分類號(hào)S435.72文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào) 1007-5739（2014）11-0115-02

煙青蟲（Helicoverpa assulta（Guenee））是煙草的一種重要害蟲，廣泛分布于我國各個(gè)煙區(qū)，嚴(yán)重影響煙葉的產(chǎn)量和質(zhì)量[1]。目前我國防治煙青蟲主要依賴化學(xué)農(nóng)藥，而化學(xué)農(nóng)藥的長期使用，不僅導(dǎo)致煙青蟲天敵大量死亡，而且致使煙青蟲對多種農(nóng)藥產(chǎn)生抗性，造成煙青蟲再度猖獗，同時(shí)化學(xué)農(nóng)藥的大量使用還會(huì)導(dǎo)致環(huán)境污染，增加煙葉中農(nóng)藥殘留，嚴(yán)重影響煙葉質(zhì)量。面對當(dāng)前化學(xué)農(nóng)藥使用產(chǎn)生的各種問題，植物源殺蟲劑以其對害蟲的獨(dú)特作用機(jī)制，不容易產(chǎn)生抗藥性，以及對天敵、人畜低毒、無殘留污染等優(yōu)點(diǎn)而成為國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。

紫莖澤蘭（Eupatouium adenophorum Spreng）為菊科澤蘭屬，多年生草本植物，原產(chǎn)于墨西哥，自20世紀(jì)40年代傳入我國，目前在云貴川等地已造成嚴(yán)重危害，是國家環(huán)保局公布的我國首批16種外來入侵性有害生物之一，其入侵性位居前列[2]，被稱為“生物癌癥”。隨著對紫莖澤蘭的化學(xué)成分、綜合利用研究的深入，紫莖澤蘭中含有殺蟲生物活性物質(zhì)已被證實(shí)，據(jù)報(bào)道，紫莖澤蘭提取物對螨蟲、菜青蟲、蚜蟲、倉儲(chǔ)害蟲等害蟲具有較好的毒殺作用[3-5]。為驗(yàn)證將其應(yīng)用到煙青蟲防治上是否具有相同防治效果，筆者測定了幾種濃度的紫莖澤蘭提取液對煙青蟲的室內(nèi)生物活性，以探索其作為植物源殺蟲劑對煙青蟲的防治效果，并為紫莖澤蘭的開發(fā)利用和煙青蟲無公害防治提供參考。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

供試紫莖澤蘭采集于西昌市袁家山，取其地上部分陰干后用粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，然后過40目篩，按乙醇∶紫莖澤蘭體積比約4∶1加入95%乙醇，浸泡約24 h，用布氏漏斗進(jìn)行過濾，再重復(fù)浸泡5次，混合所有的浸提液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行濃縮直至提取物呈膏狀，且重量不再變化，稱重、密封，并進(jìn)行低溫避光保存?zhèn)溆?。供試煙草品種為涼山州煙草公司提供的云煙85。供試煙青蟲采集于德昌縣麻栗鄉(xiāng)未噴過農(nóng)藥的煙田，將采回的煙青蟲卵放在培養(yǎng)皿中讓其孵化，飼養(yǎng)至3齡進(jìn)行觸殺、胃毒和選擇性忌避試驗(yàn)。幼蟲飼養(yǎng)及試驗(yàn)的條件為：溫度為（25±2）℃，濕度為75%~80%，光照為16∶8（L∶D）。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1提取液濃度設(shè)置。用少量甲醇將提取物溶解，待溶劑自然揮發(fā)干后，用含0.1%吐溫80的蒸餾水（測定胃毒作用時(shí)不加）將提取物稀釋成10、6、3、1 g/L等4種濃度作為供試藥液。

1.2.2觸殺作用測定。采用小型噴霧器噴霧法。取直徑為15 cm的玻璃培養(yǎng)皿，在其中放入1張中性濾紙，在上面滴幾滴清水用來保濕，接入健康活潑、生長發(fā)育一致的3齡幼蟲，每皿20頭，手持小型噴霧器對準(zhǔn)幼蟲噴霧，每皿噴藥液約1 mL，以噴含0.1%吐溫80的蒸餾水為對照。在培養(yǎng)皿中放入1張新鮮幼嫩的煙葉供幼蟲取食，葉柄用浸水的脫脂棉包裹，培養(yǎng)皿用保鮮膜封口，用昆蟲針扎若干氣孔，于噴藥12、24、48 h后檢查死蟲數(shù)并計(jì)算死亡率和校正死亡率，每處理重復(fù)3次。判斷煙青蟲死亡以細(xì)毛筆觸及足和觸角等附肢時(shí)完全不動(dòng)為死亡[6-8]。計(jì)算公式如下：

死亡率（%）=死蟲數(shù)/總蟲數(shù)×100

校正死亡率（%）=[（處理死亡率-對照死亡率）/（1-對照死亡率）]×100

1.2.3胃毒作用測定。取新鮮的煙草葉片，將葉柄剪整齊插入藥液中浸泡48 h后取出，用浸水的脫脂棉包裹葉柄放入直徑為15 cm的培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)皿中先放1張中性濾紙，滴清水保濕，然后接入健康活潑、生長發(fā)育一致的3齡幼蟲（試驗(yàn)前饑餓5 h），每皿20頭。對照葉柄浸蒸餾水。培養(yǎng)皿用保鮮膜封口，并用昆蟲針扎若干氣孔。于12、24、48 h后檢查死蟲數(shù)并計(jì)算死亡率和校正死亡率，重復(fù)3次[9]。

1.2.4選擇性忌避作用測定。將新鮮的煙草葉片剪成直徑為7.5 cm的圓葉，用藥液涂抹葉片正、反兩面，待藥液晾干，煙葉表面形成藥膜后放入培養(yǎng)皿中，對照用含0.1%吐溫80的蒸餾水涂抹。每培養(yǎng)皿中放置2片煙草葉片，藥液和蒸餾水處理各1片。將3齡幼蟲接入培養(yǎng)皿中，每培養(yǎng)皿接蟲20頭，培養(yǎng)皿用保鮮膜封口，并用昆蟲針扎通氣孔，于12、24、48 h后檢查煙草葉片上煙青蟲棲息數(shù)量，并計(jì)算忌避率。每處理設(shè)重復(fù)3次。忌避率（%）=[（對照葉片棲息蟲數(shù)-處理葉片棲息蟲數(shù)）/（對照葉片棲息蟲數(shù)+處理葉片棲息蟲數(shù)）]×100。

2結(jié)果與分析

2.1紫莖澤蘭提取物對煙青蟲的觸殺作用

紫莖澤蘭提取物對煙青蟲的觸殺效果如表1所示。從表1可以看出，紫莖澤蘭提取物對煙青蟲有一定的觸殺作用，但濃度較小時(shí)，觸殺效果不是很明顯，3、1 g/L濃度的紫莖澤蘭提取物噴藥48 h后，煙青蟲校正死亡率僅有16.96%、11.86%。同時(shí)，紫莖澤蘭提取物對煙青蟲的觸殺作用較慢，噴藥12 h后，4個(gè)濃度處理的煙青蟲死亡數(shù)都較少，但隨著處理時(shí)間的延長其觸殺作用持續(xù)增強(qiáng)，噴藥24 h和48 h后，各處理的煙青蟲死亡數(shù)增多，10、6 g/L濃度噴藥48 h后，煙青蟲校正死亡率分別達(dá)到55.91%、40.66%，各濃度處理之間差異達(dá)到極顯著水平。

2.2紫莖澤蘭提取物對煙青蟲的胃毒作用

紫莖澤蘭提取物對煙青蟲具有較強(qiáng)的胃毒作用（表2），即使1 g/L濃度處理，48 h后對煙青蟲也有明顯的胃毒作用，校正死亡率達(dá)21.43%。當(dāng)紫莖澤蘭提取物濃度大于6 g/L時(shí)，其校正死亡率可達(dá)60%以上；而且從處理煙青蟲后不同時(shí)間的校正死亡率還可以看出，隨著時(shí)間的延長，各濃度處理的校正死亡率都呈明顯上升趨勢，48 h后，10、6、3、1 g/L濃度的紫莖澤蘭提取物處理的校正死亡率分別比24 h時(shí)增加了24.29%~41.23%。

2.3紫莖澤蘭提取物對煙青蟲的選擇性忌避作用

紫莖澤蘭提取物對煙青蟲具有一定的選擇性忌避作用，其作用隨濃度的增大而增強(qiáng)（圖1）。48 h后，10、6、3、1 g/L濃度處理煙青蟲忌避率分別為53.33%、36.67%、6.67%、3.33%，各處理間差異達(dá)極顯著水平。同時(shí)，低濃度處理（1、3 g/L）對煙青蟲的忌避率隨著時(shí)間的延長呈逐漸下降的趨勢，高濃度處理（6、10 g/L）對煙青蟲的忌避率隨著時(shí)間的延長逐漸呈上升趨勢。由此可見，紫莖澤蘭提取物中含有對煙青蟲有驅(qū)避作用的物質(zhì)，在濃度大于6 g/L時(shí)，對其忌避效果較好。

3結(jié)論與討論

目前研究表明，植物源殺蟲劑對昆蟲的防治作用方式主要有觸殺作用、胃毒作用、忌避作用等[6]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，紫莖澤蘭提取物對煙青蟲的生物活性以胃毒作用效果最好，其次是選擇性忌避作用，在觸殺作用方面，雖然有一定的效果，但需要的濃度較大，時(shí)間較長。

目前大多數(shù)植物源農(nóng)藥研究還停留在粗提物和復(fù)配階段，對進(jìn)一步的有效活性成分分析及殺蟲作用毒理研究較少。試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)紫莖澤蘭提取物防治煙青蟲具有較好的效果，因此應(yīng)對其提取物中的活性物質(zhì)進(jìn)行分離純化，以明確其有效成分及結(jié)構(gòu)，使其成為一種植物源殺蟲劑而被開發(fā)利用，為紫莖澤蘭綜合防治利用和煙草優(yōu)質(zhì)無害化生產(chǎn)提供理論基礎(chǔ)。

4參考文獻(xiàn)

[1] 朱賢朝，王彥亭，王智發(fā).中國煙草病蟲害防治手冊[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2002.

[2] 候太平，劉世貴.有毒植物紫莖澤蘭研究進(jìn)展[J].國外畜牧學(xué)：草原與牧草，1998（4）：8.

[3] 李小平，胡學(xué)難，羅興毅.紫莖澤蘭提取液防治柑桔全爪螨田間藥效試驗(yàn)[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，1995（1）：48-49.

[4] 王一丁，高平，張其紅，等.紫莖澤蘭滅蚜活性物質(zhì)的分離、純化及其對棉蚜乙酰膽堿酯酶的影響[J].高技術(shù)通訊，2002（9）：21-23.

[5] 李云壽，鄒華英，佴注，等.紫莖澤蘭精油各餾份對4種倉庫害蟲的殺蟲活性[J].西南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2000，22（4）：331-333.

[6] 商顯坤，曾濤，曾憲儒.植物源農(nóng)藥對蚜蟲控制作用的研究概述[J].廣西植保，2009，22（4）：21-24.

[7] 商顯坤，韋德衛(wèi)，周興華，等.廣西4種外來入侵植物提取物對煙蚜的生物活性[J].廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，39（6）：763-766.

[8] 商顯坤.鴉膽子提取物對煙蚜的生物活性研究[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2009，21（6）：1591-1594.

[9] 程麗坤，劉小俠，張青文，等.紫莖澤蘭提取物對美洲大蠊和米蛾的忌避活性[J].昆蟲知識(shí)，2007，44（4）：538-541.

基金項(xiàng)目 四川省教育廳科研重點(diǎn)項(xiàng)目（2012ZA151）。

摘要測試了4種濃度的紫莖澤蘭提取液對煙青蟲的觸殺、胃毒和選擇性忌避作用等室內(nèi)生物活性。試驗(yàn)結(jié)果表明，紫莖澤蘭提取物對煙青蟲的胃毒作用效果比較明顯，當(dāng)濃度大于6 g/L，處理48 h后，煙青蟲校正死亡率可達(dá)60%以上；選擇性忌避作用也較為明顯，濃度為10 g/L，處理48 h后，煙青蟲忌避率可達(dá)為53.33%；而在觸殺作用方面效果不太理想，作用較遲緩；對煙青蟲的生物活性強(qiáng)度均隨提取液濃度的增大和處理時(shí)間的延長而增強(qiáng)。

關(guān)鍵詞煙青蟲；紫莖澤蘭提取物；生物活性

中圖分類號(hào)S435.72文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào) 1007-5739（2014）11-0115-02

煙青蟲（Helicoverpa assulta（Guenee））是煙草的一種重要害蟲，廣泛分布于我國各個(gè)煙區(qū)，嚴(yán)重影響煙葉的產(chǎn)量和質(zhì)量[1]。目前我國防治煙青蟲主要依賴化學(xué)農(nóng)藥，而化學(xué)農(nóng)藥的長期使用，不僅導(dǎo)致煙青蟲天敵大量死亡，而且致使煙青蟲對多種農(nóng)藥產(chǎn)生抗性，造成煙青蟲再度猖獗，同時(shí)化學(xué)農(nóng)藥的大量使用還會(huì)導(dǎo)致環(huán)境污染，增加煙葉中農(nóng)藥殘留，嚴(yán)重影響煙葉質(zhì)量。面對當(dāng)前化學(xué)農(nóng)藥使用產(chǎn)生的各種問題，植物源殺蟲劑以其對害蟲的獨(dú)特作用機(jī)制，不容易產(chǎn)生抗藥性，以及對天敵、人畜低毒、無殘留污染等優(yōu)點(diǎn)而成為國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。

紫莖澤蘭（Eupatouium adenophorum Spreng）為菊科澤蘭屬，多年生草本植物，原產(chǎn)于墨西哥，自20世紀(jì)40年代傳入我國，目前在云貴川等地已造成嚴(yán)重危害，是國家環(huán)保局公布的我國首批16種外來入侵性有害生物之一，其入侵性位居前列[2]，被稱為“生物癌癥”。隨著對紫莖澤蘭的化學(xué)成分、綜合利用研究的深入，紫莖澤蘭中含有殺蟲生物活性物質(zhì)已被證實(shí)，據(jù)報(bào)道，紫莖澤蘭提取物對螨蟲、菜青蟲、蚜蟲、倉儲(chǔ)害蟲等害蟲具有較好的毒殺作用[3-5]。為驗(yàn)證將其應(yīng)用到煙青蟲防治上是否具有相同防治效果，筆者測定了幾種濃度的紫莖澤蘭提取液對煙青蟲的室內(nèi)生物活性，以探索其作為植物源殺蟲劑對煙青蟲的防治效果，并為紫莖澤蘭的開發(fā)利用和煙青蟲無公害防治提供參考。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

供試紫莖澤蘭采集于西昌市袁家山，取其地上部分陰干后用粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，然后過40目篩，按乙醇∶紫莖澤蘭體積比約4∶1加入95%乙醇，浸泡約24 h，用布氏漏斗進(jìn)行過濾，再重復(fù)浸泡5次，混合所有的浸提液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行濃縮直至提取物呈膏狀，且重量不再變化，稱重、密封，并進(jìn)行低溫避光保存?zhèn)溆?。供試煙草品種為涼山州煙草公司提供的云煙85。供試煙青蟲采集于德昌縣麻栗鄉(xiāng)未噴過農(nóng)藥的煙田，將采回的煙青蟲卵放在培養(yǎng)皿中讓其孵化，飼養(yǎng)至3齡進(jìn)行觸殺、胃毒和選擇性忌避試驗(yàn)。幼蟲飼養(yǎng)及試驗(yàn)的條件為：溫度為（25±2）℃，濕度為75%~80%，光照為16∶8（L∶D）。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1提取液濃度設(shè)置。用少量甲醇將提取物溶解，待溶劑自然揮發(fā)干后，用含0.1%吐溫80的蒸餾水（測定胃毒作用時(shí)不加）將提取物稀釋成10、6、3、1 g/L等4種濃度作為供試藥液。

1.2.2觸殺作用測定。采用小型噴霧器噴霧法。取直徑為15 cm的玻璃培養(yǎng)皿，在其中放入1張中性濾紙，在上面滴幾滴清水用來保濕，接入健康活潑、生長發(fā)育一致的3齡幼蟲，每皿20頭，手持小型噴霧器對準(zhǔn)幼蟲噴霧，每皿噴藥液約1 mL，以噴含0.1%吐溫80的蒸餾水為對照。在培養(yǎng)皿中放入1張新鮮幼嫩的煙葉供幼蟲取食，葉柄用浸水的脫脂棉包裹，培養(yǎng)皿用保鮮膜封口，用昆蟲針扎若干氣孔，于噴藥12、24、48 h后檢查死蟲數(shù)并計(jì)算死亡率和校正死亡率，每處理重復(fù)3次。判斷煙青蟲死亡以細(xì)毛筆觸及足和觸角等附肢時(shí)完全不動(dòng)為死亡[6-8]。計(jì)算公式如下：

死亡率（%）=死蟲數(shù)/總蟲數(shù)×100

校正死亡率（%）=[（處理死亡率-對照死亡率）/（1-對照死亡率）]×100

1.2.3胃毒作用測定。取新鮮的煙草葉片，將葉柄剪整齊插入藥液中浸泡48 h后取出，用浸水的脫脂棉包裹葉柄放入直徑為15 cm的培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)皿中先放1張中性濾紙，滴清水保濕，然后接入健康活潑、生長發(fā)育一致的3齡幼蟲（試驗(yàn)前饑餓5 h），每皿20頭。對照葉柄浸蒸餾水。培養(yǎng)皿用保鮮膜封口，并用昆蟲針扎若干氣孔。于12、24、48 h后檢查死蟲數(shù)并計(jì)算死亡率和校正死亡率，重復(fù)3次[9]。

1.2.4選擇性忌避作用測定。將新鮮的煙草葉片剪成直徑為7.5 cm的圓葉，用藥液涂抹葉片正、反兩面，待藥液晾干，煙葉表面形成藥膜后放入培養(yǎng)皿中，對照用含0.1%吐溫80的蒸餾水涂抹。每培養(yǎng)皿中放置2片煙草葉片，藥液和蒸餾水處理各1片。將3齡幼蟲接入培養(yǎng)皿中，每培養(yǎng)皿接蟲20頭，培養(yǎng)皿用保鮮膜封口，并用昆蟲針扎通氣孔，于12、24、48 h后檢查煙草葉片上煙青蟲棲息數(shù)量，并計(jì)算忌避率。每處理設(shè)重復(fù)3次。忌避率（%）=[（對照葉片棲息蟲數(shù)-處理葉片棲息蟲數(shù)）/（對照葉片棲息蟲數(shù)+處理葉片棲息蟲數(shù)）]×100。

2結(jié)果與分析

2.1紫莖澤蘭提取物對煙青蟲的觸殺作用

紫莖澤蘭提取物對煙青蟲的觸殺效果如表1所示。從表1可以看出，紫莖澤蘭提取物對煙青蟲有一定的觸殺作用，但濃度較小時(shí)，觸殺效果不是很明顯，3、1 g/L濃度的紫莖澤蘭提取物噴藥48 h后，煙青蟲校正死亡率僅有16.96%、11.86%。同時(shí)，紫莖澤蘭提取物對煙青蟲的觸殺作用較慢，噴藥12 h后，4個(gè)濃度處理的煙青蟲死亡數(shù)都較少，但隨著處理時(shí)間的延長其觸殺作用持續(xù)增強(qiáng)，噴藥24 h和48 h后，各處理的煙青蟲死亡數(shù)增多，10、6 g/L濃度噴藥48 h后，煙青蟲校正死亡率分別達(dá)到55.91%、40.66%，各濃度處理之間差異達(dá)到極顯著水平。

2.2紫莖澤蘭提取物對煙青蟲的胃毒作用

紫莖澤蘭提取物對煙青蟲具有較強(qiáng)的胃毒作用（表2），即使1 g/L濃度處理，48 h后對煙青蟲也有明顯的胃毒作用，校正死亡率達(dá)21.43%。當(dāng)紫莖澤蘭提取物濃度大于6 g/L時(shí)，其校正死亡率可達(dá)60%以上；而且從處理煙青蟲后不同時(shí)間的校正死亡率還可以看出，隨著時(shí)間的延長，各濃度處理的校正死亡率都呈明顯上升趨勢，48 h后，10、6、3、1 g/L濃度的紫莖澤蘭提取物處理的校正死亡率分別比24 h時(shí)增加了24.29%~41.23%。

2.3紫莖澤蘭提取物對煙青蟲的選擇性忌避作用

紫莖澤蘭提取物對煙青蟲具有一定的選擇性忌避作用，其作用隨濃度的增大而增強(qiáng)（圖1）。48 h后，10、6、3、1 g/L濃度處理煙青蟲忌避率分別為53.33%、36.67%、6.67%、3.33%，各處理間差異達(dá)極顯著水平。同時(shí)，低濃度處理（1、3 g/L）對煙青蟲的忌避率隨著時(shí)間的延長呈逐漸下降的趨勢，高濃度處理（6、10 g/L）對煙青蟲的忌避率隨著時(shí)間的延長逐漸呈上升趨勢。由此可見，紫莖澤蘭提取物中含有對煙青蟲有驅(qū)避作用的物質(zhì)，在濃度大于6 g/L時(shí)，對其忌避效果較好。

3結(jié)論與討論

目前研究表明，植物源殺蟲劑對昆蟲的防治作用方式主要有觸殺作用、胃毒作用、忌避作用等[6]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，紫莖澤蘭提取物對煙青蟲的生物活性以胃毒作用效果最好，其次是選擇性忌避作用，在觸殺作用方面，雖然有一定的效果，但需要的濃度較大，時(shí)間較長。

目前大多數(shù)植物源農(nóng)藥研究還停留在粗提物和復(fù)配階段，對進(jìn)一步的有效活性成分分析及殺蟲作用毒理研究較少。試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)紫莖澤蘭提取物防治煙青蟲具有較好的效果，因此應(yīng)對其提取物中的活性物質(zhì)進(jìn)行分離純化，以明確其有效成分及結(jié)構(gòu)，使其成為一種植物源殺蟲劑而被開發(fā)利用，為紫莖澤蘭綜合防治利用和煙草優(yōu)質(zhì)無害化生產(chǎn)提供理論基礎(chǔ)。

4參考文獻(xiàn)

[1] 朱賢朝，王彥亭，王智發(fā).中國煙草病蟲害防治手冊[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2002.

[2] 候太平，劉世貴.有毒植物紫莖澤蘭研究進(jìn)展[J].國外畜牧學(xué)：草原與牧草，1998（4）：8.

[3] 李小平，胡學(xué)難，羅興毅.紫莖澤蘭提取液防治柑桔全爪螨田間藥效試驗(yàn)[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，1995（1）：48-49.

[4] 王一丁，高平，張其紅，等.紫莖澤蘭滅蚜活性物質(zhì)的分離、純化及其對棉蚜乙酰膽堿酯酶的影響[J].高技術(shù)通訊，2002（9）：21-23.

[5] 李云壽，鄒華英，佴注，等.紫莖澤蘭精油各餾份對4種倉庫害蟲的殺蟲活性[J].西南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2000，22（4）：331-333.

[6] 商顯坤，曾濤，曾憲儒.植物源農(nóng)藥對蚜蟲控制作用的研究概述[J].廣西植保，2009，22（4）：21-24.

[7] 商顯坤，韋德衛(wèi)，周興華，等.廣西4種外來入侵植物提取物對煙蚜的生物活性[J].廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，39（6）：763-766.

[8] 商顯坤.鴉膽子提取物對煙蚜的生物活性研究[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2009，21（6）：1591-1594.

[9] 程麗坤，劉小俠，張青文，等.紫莖澤蘭提取物對美洲大蠊和米蛾的忌避活性[J].昆蟲知識(shí)，2007，44（4）：538-541.

基金項(xiàng)目 四川省教育廳科研重點(diǎn)項(xiàng)目（2012ZA151）。

摘要測試了4種濃度的紫莖澤蘭提取液對煙青蟲的觸殺、胃毒和選擇性忌避作用等室內(nèi)生物活性。試驗(yàn)結(jié)果表明，紫莖澤蘭提取物對煙青蟲的胃毒作用效果比較明顯，當(dāng)濃度大于6 g/L，處理48 h后，煙青蟲校正死亡率可達(dá)60%以上；選擇性忌避作用也較為明顯，濃度為10 g/L，處理48 h后，煙青蟲忌避率可達(dá)為53.33%；而在觸殺作用方面效果不太理想，作用較遲緩；對煙青蟲的生物活性強(qiáng)度均隨提取液濃度的增大和處理時(shí)間的延長而增強(qiáng)。

關(guān)鍵詞煙青蟲；紫莖澤蘭提取物；生物活性

中圖分類號(hào)S435.72文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào) 1007-5739（2014）11-0115-02

煙青蟲（Helicoverpa assulta（Guenee））是煙草的一種重要害蟲，廣泛分布于我國各個(gè)煙區(qū)，嚴(yán)重影響煙葉的產(chǎn)量和質(zhì)量[1]。目前我國防治煙青蟲主要依賴化學(xué)農(nóng)藥，而化學(xué)農(nóng)藥的長期使用，不僅導(dǎo)致煙青蟲天敵大量死亡，而且致使煙青蟲對多種農(nóng)藥產(chǎn)生抗性，造成煙青蟲再度猖獗，同時(shí)化學(xué)農(nóng)藥的大量使用還會(huì)導(dǎo)致環(huán)境污染，增加煙葉中農(nóng)藥殘留，嚴(yán)重影響煙葉質(zhì)量。面對當(dāng)前化學(xué)農(nóng)藥使用產(chǎn)生的各種問題，植物源殺蟲劑以其對害蟲的獨(dú)特作用機(jī)制，不容易產(chǎn)生抗藥性，以及對天敵、人畜低毒、無殘留污染等優(yōu)點(diǎn)而成為國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。

紫莖澤蘭（Eupatouium adenophorum Spreng）為菊科澤蘭屬，多年生草本植物，原產(chǎn)于墨西哥，自20世紀(jì)40年代傳入我國，目前在云貴川等地已造成嚴(yán)重危害，是國家環(huán)保局公布的我國首批16種外來入侵性有害生物之一，其入侵性位居前列[2]，被稱為“生物癌癥”。隨著對紫莖澤蘭的化學(xué)成分、綜合利用研究的深入，紫莖澤蘭中含有殺蟲生物活性物質(zhì)已被證實(shí)，據(jù)報(bào)道，紫莖澤蘭提取物對螨蟲、菜青蟲、蚜蟲、倉儲(chǔ)害蟲等害蟲具有較好的毒殺作用[3-5]。為驗(yàn)證將其應(yīng)用到煙青蟲防治上是否具有相同防治效果，筆者測定了幾種濃度的紫莖澤蘭提取液對煙青蟲的室內(nèi)生物活性，以探索其作為植物源殺蟲劑對煙青蟲的防治效果，并為紫莖澤蘭的開發(fā)利用和煙青蟲無公害防治提供參考。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

供試紫莖澤蘭采集于西昌市袁家山，取其地上部分陰干后用粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，然后過40目篩，按乙醇∶紫莖澤蘭體積比約4∶1加入95%乙醇，浸泡約24 h，用布氏漏斗進(jìn)行過濾，再重復(fù)浸泡5次，混合所有的浸提液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行濃縮直至提取物呈膏狀，且重量不再變化，稱重、密封，并進(jìn)行低溫避光保存?zhèn)溆?。供試煙草品種為涼山州煙草公司提供的云煙85。供試煙青蟲采集于德昌縣麻栗鄉(xiāng)未噴過農(nóng)藥的煙田，將采回的煙青蟲卵放在培養(yǎng)皿中讓其孵化，飼養(yǎng)至3齡進(jìn)行觸殺、胃毒和選擇性忌避試驗(yàn)。幼蟲飼養(yǎng)及試驗(yàn)的條件為：溫度為（25±2）℃，濕度為75%~80%，光照為16∶8（L∶D）。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1提取液濃度設(shè)置。用少量甲醇將提取物溶解，待溶劑自然揮發(fā)干后，用含0.1%吐溫80的蒸餾水（測定胃毒作用時(shí)不加）將提取物稀釋成10、6、3、1 g/L等4種濃度作為供試藥液。

1.2.2觸殺作用測定。采用小型噴霧器噴霧法。取直徑為15 cm的玻璃培養(yǎng)皿，在其中放入1張中性濾紙，在上面滴幾滴清水用來保濕，接入健康活潑、生長發(fā)育一致的3齡幼蟲，每皿20頭，手持小型噴霧器對準(zhǔn)幼蟲噴霧，每皿噴藥液約1 mL，以噴含0.1%吐溫80的蒸餾水為對照。在培養(yǎng)皿中放入1張新鮮幼嫩的煙葉供幼蟲取食，葉柄用浸水的脫脂棉包裹，培養(yǎng)皿用保鮮膜封口，用昆蟲針扎若干氣孔，于噴藥12、24、48 h后檢查死蟲數(shù)并計(jì)算死亡率和校正死亡率，每處理重復(fù)3次。判斷煙青蟲死亡以細(xì)毛筆觸及足和觸角等附肢時(shí)完全不動(dòng)為死亡[6-8]。計(jì)算公式如下：

死亡率（%）=死蟲數(shù)/總蟲數(shù)×100

校正死亡率（%）=[（處理死亡率-對照死亡率）/（1-對照死亡率）]×100

1.2.3胃毒作用測定。取新鮮的煙草葉片，將葉柄剪整齊插入藥液中浸泡48 h后取出，用浸水的脫脂棉包裹葉柄放入直徑為15 cm的培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)皿中先放1張中性濾紙，滴清水保濕，然后接入健康活潑、生長發(fā)育一致的3齡幼蟲（試驗(yàn)前饑餓5 h），每皿20頭。對照葉柄浸蒸餾水。培養(yǎng)皿用保鮮膜封口，并用昆蟲針扎若干氣孔。于12、24、48 h后檢查死蟲數(shù)并計(jì)算死亡率和校正死亡率，重復(fù)3次[9]。

1.2.4選擇性忌避作用測定。將新鮮的煙草葉片剪成直徑為7.5 cm的圓葉，用藥液涂抹葉片正、反兩面，待藥液晾干，煙葉表面形成藥膜后放入培養(yǎng)皿中，對照用含0.1%吐溫80的蒸餾水涂抹。每培養(yǎng)皿中放置2片煙草葉片，藥液和蒸餾水處理各1片。將3齡幼蟲接入培養(yǎng)皿中，每培養(yǎng)皿接蟲20頭，培養(yǎng)皿用保鮮膜封口，并用昆蟲針扎通氣孔，于12、24、48 h后檢查煙草葉片上煙青蟲棲息數(shù)量，并計(jì)算忌避率。每處理設(shè)重復(fù)3次。忌避率（%）=[（對照葉片棲息蟲數(shù)-處理葉片棲息蟲數(shù)）/（對照葉片棲息蟲數(shù)+處理葉片棲息蟲數(shù)）]×100。

2結(jié)果與分析

2.1紫莖澤蘭提取物對煙青蟲的觸殺作用

紫莖澤蘭提取物對煙青蟲的觸殺效果如表1所示。從表1可以看出，紫莖澤蘭提取物對煙青蟲有一定的觸殺作用，但濃度較小時(shí)，觸殺效果不是很明顯，3、1 g/L濃度的紫莖澤蘭提取物噴藥48 h后，煙青蟲校正死亡率僅有16.96%、11.86%。同時(shí)，紫莖澤蘭提取物對煙青蟲的觸殺作用較慢，噴藥12 h后，4個(gè)濃度處理的煙青蟲死亡數(shù)都較少，但隨著處理時(shí)間的延長其觸殺作用持續(xù)增強(qiáng)，噴藥24 h和48 h后，各處理的煙青蟲死亡數(shù)增多，10、6 g/L濃度噴藥48 h后，煙青蟲校正死亡率分別達(dá)到55.91%、40.66%，各濃度處理之間差異達(dá)到極顯著水平。

2.2紫莖澤蘭提取物對煙青蟲的胃毒作用

紫莖澤蘭提取物對煙青蟲具有較強(qiáng)的胃毒作用（表2），即使1 g/L濃度處理，48 h后對煙青蟲也有明顯的胃毒作用，校正死亡率達(dá)21.43%。當(dāng)紫莖澤蘭提取物濃度大于6 g/L時(shí)，其校正死亡率可達(dá)60%以上；而且從處理煙青蟲后不同時(shí)間的校正死亡率還可以看出，隨著時(shí)間的延長，各濃度處理的校正死亡率都呈明顯上升趨勢，48 h后，10、6、3、1 g/L濃度的紫莖澤蘭提取物處理的校正死亡率分別比24 h時(shí)增加了24.29%~41.23%。

2.3紫莖澤蘭提取物對煙青蟲的選擇性忌避作用

紫莖澤蘭提取物對煙青蟲具有一定的選擇性忌避作用，其作用隨濃度的增大而增強(qiáng)（圖1）。48 h后，10、6、3、1 g/L濃度處理煙青蟲忌避率分別為53.33%、36.67%、6.67%、3.33%，各處理間差異達(dá)極顯著水平。同時(shí)，低濃度處理（1、3 g/L）對煙青蟲的忌避率隨著時(shí)間的延長呈逐漸下降的趨勢，高濃度處理（6、10 g/L）對煙青蟲的忌避率隨著時(shí)間的延長逐漸呈上升趨勢。由此可見，紫莖澤蘭提取物中含有對煙青蟲有驅(qū)避作用的物質(zhì)，在濃度大于6 g/L時(shí)，對其忌避效果較好。

3結(jié)論與討論

目前研究表明，植物源殺蟲劑對昆蟲的防治作用方式主要有觸殺作用、胃毒作用、忌避作用等[6]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，紫莖澤蘭提取物對煙青蟲的生物活性以胃毒作用效果最好，其次是選擇性忌避作用，在觸殺作用方面，雖然有一定的效果，但需要的濃度較大，時(shí)間較長。

目前大多數(shù)植物源農(nóng)藥研究還停留在粗提物和復(fù)配階段，對進(jìn)一步的有效活性成分分析及殺蟲作用毒理研究較少。試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)紫莖澤蘭提取物防治煙青蟲具有較好的效果，因此應(yīng)對其提取物中的活性物質(zhì)進(jìn)行分離純化，以明確其有效成分及結(jié)構(gòu)，使其成為一種植物源殺蟲劑而被開發(fā)利用，為紫莖澤蘭綜合防治利用和煙草優(yōu)質(zhì)無害化生產(chǎn)提供理論基礎(chǔ)。

4參考文獻(xiàn)

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