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      商洛桔梗種子品質(zhì)檢驗(yàn)與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

      2014-08-08 04:07:42李小玲華智銳
      湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014年9期
      關(guān)鍵詞:質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)種子

      李小玲+華智銳

      摘要:為制定商洛桔梗(Platycodon grandiflorum)種子的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),規(guī)范種子供需市場(chǎng),參考種子凈度、千粒重、含水量、種子活力、發(fā)芽率等檢驗(yàn)規(guī)程,對(duì)商州A號(hào)、商州B號(hào)、丹鳳、商南和山陽(yáng)桔梗種子進(jìn)行品質(zhì)檢驗(yàn)。結(jié)果表明,不同桔梗種子凈度為52.38%~92.19%,千粒重0.973 5~1.093 0 g,135℃高溫法含水量7.53%~7.85%,發(fā)芽勢(shì)55.5%~87.0%,發(fā)芽率61.0%~88.0%,發(fā)霉率1.33%~5.67%,生活力72.0%~90.5%,活力指數(shù)0.011 2~0.024 3,種子的顏色有黑色和黃褐色兩種。商州A號(hào)種子在凈度、千粒重、發(fā)芽能力方面均優(yōu)于其他4種種子。采用發(fā)芽試驗(yàn)與TTC法測(cè)定的桔梗種子生活力基本一致。通過(guò)對(duì)商洛不同縣(區(qū))桔梗種子的對(duì)比研究,選用種子凈度、千粒重、生活力和發(fā)芽率為主要分級(jí)指標(biāo),把商洛桔梗種子初步分成3類(lèi),提出了供生產(chǎn)應(yīng)用的商洛桔梗種子分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)建議。

      關(guān)鍵詞:商洛桔梗(Platycodon grandiflorum);種子;品質(zhì)檢驗(yàn);質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

      中圖分類(lèi)號(hào):S567文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):0439-8114(2014)09-2075-04

      Quality Inspection and Quality Standards of Shangluo Platycodon grandiflorum Seeds

      LI Xiao-ling, HUA Zhi-rui

      (Department of Biomedical Medicine Engineering, Shangluo University, Shangluo 726000, Shaanxi, China)

      Abstract: The quality standards of Shangluo Platycodon grandiflorum seeds were put forward to standardize the market of seeds. Five kinds of P. grandiflorum seeds including Shangzhou NO.A, Shangzhou NO.B, and Danfeng,Luonan,Shanyang seeds were tested to provide a basis for the classification of P. grandiflorum seeds. Results showed that, the purity of different P. grandiflorum seeds was 52.38%~92.19%. The weight of a thousand seeds was 0.973 5~1.093 0 g. The moisture content was 7.53%~7.85%. The germination energy was 55.5%~87.0%. The germination rate was 61.0%~87.0%. The moldy rate was 2.0%~5.67%. The vitality was 72.0%~90.5%. The vigor index was 0.011 2~0.024 3. Seeds color were black and tawny. Shangzhou NO.A seeds was superior to the other four seeds with respect of seeds purity, thousand-seeds weight,the seed vitality and germination ability. Shangzhou NO.B seeds were lower than the other four seeds significantly in three indexes. The seed viability of the germination test and TTC method was almost consistent. Based on the comparison of five species, selection of purity, weight of a thousand seeds and germination rate of the main classification index, Shangluo Platycodon grandiflorum was divided into three kinds. The classification standards about P. grandiflorum seeds of Shangluo in production were proposed.

      Key words: Shangluo Platycodon grandiflorum; seeds; quality test; quality standard

      桔梗(Platycodon grandiflorum)別名鈴鐺花、包袱花、道拉基(朝鮮語(yǔ))、和尚帽等。李時(shí)珍在《本草綱目》一書(shū)中說(shuō),“此草之根結(jié)實(shí)而梗直,故名桔?!?。桔梗既是一種資源植物又是一種藥、食、觀賞兼用的經(jīng)濟(jì)植物。它為桔??浦参铮云涓稍锔胨?,味苦辛,性平,歸肺經(jīng);具宣肺,利咽,祛痰,排膿等功效,用于咳嗽痰多,胸悶不暢,咽痛,音啞,痢疾腹痛等[1]。

      隨著桔梗市場(chǎng)需求量的增大,提高其產(chǎn)量和質(zhì)量對(duì)提高我國(guó)藥農(nóng)的收入和增加種植地區(qū)經(jīng)濟(jì)效益都具有重要促進(jìn)作用。種子作為藥材生產(chǎn)的源頭,是發(fā)展中藥材規(guī)范化生產(chǎn)的根本,中藥材種子的優(yōu)良與否直接關(guān)系到中藥材的質(zhì)量。目前,在桔梗生產(chǎn)中存在出苗率低的現(xiàn)象,這在很大程度上是由種子質(zhì)量差造成的[2,3]。研究旨在通過(guò)對(duì)商洛桔梗種子凈度、千粒重、含水量、生活力、子粒狀況等主要檢驗(yàn)指標(biāo)的測(cè)定分析,初步制定桔梗種子的質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)[4],為商洛桔梗藥用種植提供一定的參考。

      1材料與方法

      1.1試驗(yàn)材料

      試驗(yàn)用種為2012年3月分別在商州、商南、丹鳳、山陽(yáng)四大桔梗種植縣(區(qū))種子站購(gòu)得。其中,商州購(gòu)得的種子有兩種,購(gòu)于天士力公司的種子命名為商州A號(hào)(公司本地藥源基地種植),沙河子種子站提供的為商州B號(hào)(當(dāng)?shù)厮庌r(nóng)種植)。室溫貯藏備用。

      1.2方法

      1.2.1種子凈度檢驗(yàn)采用四分法[5]。分別將抽取的2份樣品稱(chēng)重,在光潔的桌面上把凈度種子、廢種子和雜物分開(kāi),稱(chēng)量?jī)舳确N子的重量。3次重復(fù)。種子凈度=[(種子總重量-雜質(zhì)重量)/種子總重量]×100%。

      1.2.2種子千粒重檢驗(yàn)將全部?jī)舴N子分為4組,從每份中隨機(jī)?。玻担傲?,共1 000粒為1組,測(cè)定千粒重。3次重復(fù)。

      1.2.3種子含水量檢驗(yàn)105 ℃恒重法[6]測(cè)含水量:稱(chēng)?。埃?g整粒種子在烘箱中烘干,測(cè)烘干前后的重量差。3次重復(fù)。

      種子含水量=[(烘前試樣重-烘后試樣重)/烘前試樣重]×100%

      135 ℃高溫法:在135 ℃進(jìn)行烘干測(cè)定,方法同“105 ℃恒重法”。

      1.2.4種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽指數(shù)的檢驗(yàn)選取桔梗凈種子,用水浸種12 h后[7],在25 ℃每天光照12 h條件下,放入人工氣候箱中培養(yǎng),每個(gè)培養(yǎng)皿中放100粒種子,每組3次重復(fù),測(cè)定其發(fā)芽狀況[8]。

      發(fā)芽率=(12 d發(fā)芽總粒數(shù)/供試種子粒數(shù))×100%

      發(fā)芽勢(shì)=(前7 d內(nèi)發(fā)芽種子數(shù)/供試種子粒數(shù))×100%

      發(fā)芽指數(shù)(GI)= ∑(Gt/Dt)

      式中,GI為發(fā)芽指數(shù), Gt為t日的發(fā)芽數(shù), Dt為發(fā)芽時(shí)間(d)。

      1.2.5種子生活力檢驗(yàn)活力指數(shù)V=S·GI=S·∑(Gt/Dt)

      式中,S為幼苗的生長(zhǎng)勢(shì),也就是在種子發(fā)芽幾天后的幼苗干重或平均根長(zhǎng)。試驗(yàn)中選取發(fā)芽12 d后單株幼苗平均干重(105 ℃恒重法)。

      用TTC測(cè)定法[9]進(jìn)行桔梗種子生活力檢驗(yàn)。

      1)配制。稱(chēng)取 0.5 g 2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)放入小燒杯中,先加少許乙醇溶解,再加

      20 mL去離子水后用0.1 mol/L的NaOH溶液調(diào)pH至7.0,再用去離子水稀釋定容至100 mL,配成的0.5%TTC溶液避光保存。

      2)顯色。對(duì)桔梗種子用水浸種48 h,挑選相對(duì)飽滿健全的種子,用刀片縱切成兩瓣,使胚對(duì)半分,取半粒放入裝有0.5%TTC的試管中,于25 ℃下染色12 h。

      3)統(tǒng)計(jì)。倒出 TTC 溶液,再用清水將種子沖洗 l~2 次,觀察種胚被染色的情況。凡種胚全部或大部分被染成紅色的即為具有生活力的種子,種胚不被染色的無(wú)活力。

      1.2.6數(shù)據(jù)處理與分析 采用SPSS 13.0軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理與分析。

      2結(jié)果與分析

      2.1桔梗種子凈度檢驗(yàn)結(jié)果

      從表1可知,商洛不同縣(區(qū))的桔梗種子凈度相差較大,為52.38%~92.19%之間。商洛桔梗種子凈度從高到低為商州A號(hào)、商南、丹鳳、山陽(yáng)、商州B號(hào)。其中,商州A號(hào)種子凈度最高,為92.19%;商州B號(hào)種子凈度最低,含較多雜質(zhì),僅為52.38%。最高與最低之間相差39.81個(gè)百分點(diǎn)。

      2.2桔梗種子千粒重檢驗(yàn)結(jié)果

      從表2可知,商洛桔梗種子的千粒重為0.937 5~1.093 0 g之間。其中,商州A號(hào)種子千粒重最高,為1.093 0 g,最低的為山陽(yáng)的種子,千粒重僅為0.973 5 g,最高與最低之間相差0.119 5 g。丹鳳和商南的種子千粒重比較接近,只相差0.03 g。

      2.3桔梗種子含水量檢驗(yàn)結(jié)果

      從表3可知,商洛不同縣(區(qū))桔梗種子的含水量比較穩(wěn)定。兩種測(cè)量方法中,135 ℃下烘7 h測(cè)得的含水量較高,所以此方法獲得的結(jié)果較為準(zhǔn)確。135℃高溫法下商州A號(hào)種子的含水量最高,達(dá)到了7.85%,而商南種子含水量最低,僅為7.53%。

      2.4桔梗種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽指數(shù)的檢驗(yàn)結(jié)果

      從表4可知,在25 ℃下每天光照12 h進(jìn)行發(fā)芽試驗(yàn),其中發(fā)芽率最高的是商州A號(hào)和丹鳳種子,分別達(dá)到87.0%和88.0%,而商州B號(hào)種子和山陽(yáng)種子的發(fā)芽率較低,只有63.5%和61.0%,最高與最低相差27.0個(gè)百分點(diǎn)。通過(guò)發(fā)芽指數(shù)可以看出,商州A號(hào)、丹鳳和商南3種種子發(fā)芽比較整齊,而商州B號(hào)和山陽(yáng)種子的發(fā)芽指數(shù)分別為19.95和15.50。

      從表5可知,不同桔梗種子發(fā)霉率為商州B號(hào)種子>山陽(yáng)種子>丹鳳種子>商州A號(hào)種子>商南種子。其中,商州B號(hào)種子發(fā)霉率高達(dá)6.00%,商南種子的發(fā)霉率最低,為1.33%,兩者相差4.67個(gè)百分點(diǎn)。總體上,商洛桔梗種子的發(fā)霉率較低,均小于10%,對(duì)發(fā)芽試驗(yàn)的準(zhǔn)確性影響不大。

      2.5桔梗種子生活力檢驗(yàn)結(jié)果

      從表6可知,商洛桔梗種子的活力指數(shù)為商州A種子>丹鳳種子>商南種子>商州B號(hào)種子>山陽(yáng)種子?;盍χ笖?shù)與發(fā)芽指數(shù)的大小順序一致,它很好地反映了不同試樣點(diǎn)桔梗種子活力的大小。TTC染色法測(cè)定的生活力從整體上與活力指數(shù)的大小順序一致,但不同試樣點(diǎn)種子染色結(jié)果相差較大。用TTC法測(cè)得商州A號(hào)種子和丹鳳種子生活力最高,分別達(dá)到90.5%和87.5%,而商州B號(hào)種子和山陽(yáng)種子生活力最低,商南種子以80.0%居中。

      2.6數(shù)據(jù)處理與種子質(zhì)量分級(jí)

      試驗(yàn)過(guò)程中最穩(wěn)定、受人為因素干擾最少的是千粒重和發(fā)芽率,采用SPSS 13.0軟件對(duì)檢測(cè)的兩組數(shù)據(jù)進(jìn)行K聚類(lèi)分析,結(jié)果見(jiàn)表7。從表7可知,統(tǒng)計(jì)分析軟件把商洛桔梗種子分成3類(lèi),商州A號(hào)種子和丹鳳種子為一類(lèi)種子,一類(lèi)種子的最低千粒重為1.092 1 g,最低發(fā)芽率為88%,其余兩類(lèi)也都有各自的數(shù)值標(biāo)準(zhǔn)。從最低千粒重來(lái)看,一類(lèi)與三類(lèi)相差0.118 6 g,而與二類(lèi)只相差0.003 g。從最低發(fā)芽率來(lái)看,3個(gè)分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)的梯度良好,平均每個(gè)級(jí)別之間相差13.5個(gè)百分點(diǎn)。

      2.7商洛桔梗種子品質(zhì)檢驗(yàn)結(jié)果

      通過(guò)對(duì)不同縣(區(qū))桔梗種子的檢驗(yàn),從整體上得出商洛桔梗種子品質(zhì)相關(guān)數(shù)據(jù):平均凈度76.85%,平均千粒重1.047 9 g,135 ℃高溫法下平均含水量7.65%,平均發(fā)芽率75.7%,平均發(fā)芽指數(shù)22.28,平均發(fā)霉率3.47% ,平均活力指數(shù)0.018 1,平均生活力81.0%。

      2.8商洛桔梗種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的初步制定

      桔梗種子品質(zhì)分級(jí)還沒(méi)有制定國(guó)家和地方標(biāo)準(zhǔn),參照本試驗(yàn)研究取得的桔梗種子K聚類(lèi)分析結(jié)果,結(jié)合其他作物種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),初步制定商洛桔梗種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)(草案)見(jiàn)表8,以供參考。分級(jí)方法采用最低定級(jí)原則,即任何一項(xiàng)指標(biāo)不符合規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)都不能作為相應(yīng)等級(jí)的合格種子。

      3小結(jié)與討論

      桔梗種子凈度相差較大,兩種購(gòu)于商州區(qū)的種子卻有不同的結(jié)果,這可能與種子的采收過(guò)程有關(guān),往往可通過(guò)再加工如篩選來(lái)提高質(zhì)量。發(fā)芽率是以凈種子測(cè)定的,種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)離不開(kāi)凈度分析。

      千粒重的差異性較小,其測(cè)定過(guò)程受干擾因素少,它反映了種子飽滿程度,其可能與發(fā)育程度及遺傳有關(guān)。

      桔梗種子含水量比較穩(wěn)定,這可能與地理氣候和貯藏條件有關(guān)。135 ℃高溫法測(cè)得的結(jié)果較準(zhǔn)確,與郭巧生等[10]對(duì)桔梗種子的含水量研究結(jié)論一致,也可以用粉碎烘干法測(cè)定含水量。

      發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率和發(fā)芽指數(shù)是發(fā)芽能力的主要指標(biāo),在發(fā)芽試驗(yàn)中,不同縣(區(qū))種子差異性明顯,較準(zhǔn)確地體現(xiàn)了其發(fā)芽能力的大小。3個(gè)指標(biāo)中發(fā)芽率最為重要,它直接反映種子的田間出苗率。種子的發(fā)芽情況還受發(fā)霉率的影響,發(fā)霉率主要由種子的自身特性和發(fā)芽初期的培養(yǎng)條件決定,若初期加水過(guò)多,桔梗種子則易發(fā)霉。

      生活力是由人工短時(shí)間實(shí)驗(yàn)測(cè)得,存在人為的誤差可能性較大。桔梗種子非常小,且種子表面很光滑,在浸泡種子的過(guò)程中時(shí)間長(zhǎng)短不好把握,浸泡時(shí)間較短,種子不易切開(kāi),浸泡時(shí)間較長(zhǎng),種子變軟,切開(kāi)時(shí)易損傷胚,這使切開(kāi)種胚的操作變得困難。所以,使用染色法測(cè)桔梗種子活力難度較大。

      K聚類(lèi)分析結(jié)果中,分類(lèi)的千粒重差值較小,這樣小的差值在實(shí)際分級(jí)工作中很難精確測(cè)出。從最低發(fā)芽率來(lái)看,3個(gè)分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)的梯度良好。為了實(shí)際分級(jí)工作的方便,還需要對(duì)這些數(shù)值進(jìn)行調(diào)整。本研究只測(cè)定了商洛4個(gè)縣(區(qū))的桔梗種子,并未達(dá)到制定一個(gè)地區(qū)種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的嚴(yán)格要求,要保證分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的客觀性,只能把K聚類(lèi)分析得到的結(jié)果作為一種參考依據(jù)。確定種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),必須在大量的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),本試驗(yàn)測(cè)得的活力指數(shù)和生活力能在一定程度上代表桔梗種子質(zhì)量,但想要把它們當(dāng)成種子質(zhì)量的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),就必須對(duì)商洛所有縣域的桔梗種子進(jìn)行大量的、長(zhǎng)時(shí)間的檢驗(yàn)。另外,發(fā)芽結(jié)果表明,黑色種子的發(fā)芽數(shù)明顯高于黃褐色的種子,而黑色并帶有光澤的種子發(fā)芽情況最好。

      綜上所述,將凈度、千粒重、生活力、發(fā)芽率作為衡量桔梗種子分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的主要依據(jù),桔梗種子的外觀色澤可作為衡量其分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的次要依據(jù)??梢酝ㄟ^(guò)把握合理的采收時(shí)間、提供良好的貯藏條件來(lái)提高桔梗種子的綜合質(zhì)量,以更好地服務(wù)于中草藥生產(chǎn)。種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定需要一個(gè)長(zhǎng)期的過(guò)程,具體有待進(jìn)一步研究。

      參考文獻(xiàn):

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      135 ℃高溫法:在135 ℃進(jìn)行烘干測(cè)定,方法同“105 ℃恒重法”。

      1.2.4種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽指數(shù)的檢驗(yàn)選取桔梗凈種子,用水浸種12 h后[7],在25 ℃每天光照12 h條件下,放入人工氣候箱中培養(yǎng),每個(gè)培養(yǎng)皿中放100粒種子,每組3次重復(fù),測(cè)定其發(fā)芽狀況[8]。

      發(fā)芽率=(12 d發(fā)芽總粒數(shù)/供試種子粒數(shù))×100%

      發(fā)芽勢(shì)=(前7 d內(nèi)發(fā)芽種子數(shù)/供試種子粒數(shù))×100%

      發(fā)芽指數(shù)(GI)= ∑(Gt/Dt)

      式中,GI為發(fā)芽指數(shù), Gt為t日的發(fā)芽數(shù), Dt為發(fā)芽時(shí)間(d)。

      1.2.5種子生活力檢驗(yàn)活力指數(shù)V=S·GI=S·∑(Gt/Dt)

      式中,S為幼苗的生長(zhǎng)勢(shì),也就是在種子發(fā)芽幾天后的幼苗干重或平均根長(zhǎng)。試驗(yàn)中選取發(fā)芽12 d后單株幼苗平均干重(105 ℃恒重法)。

      用TTC測(cè)定法[9]進(jìn)行桔梗種子生活力檢驗(yàn)。

      1)配制。稱(chēng)取 0.5 g 2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)放入小燒杯中,先加少許乙醇溶解,再加

      20 mL去離子水后用0.1 mol/L的NaOH溶液調(diào)pH至7.0,再用去離子水稀釋定容至100 mL,配成的0.5%TTC溶液避光保存。

      2)顯色。對(duì)桔梗種子用水浸種48 h,挑選相對(duì)飽滿健全的種子,用刀片縱切成兩瓣,使胚對(duì)半分,取半粒放入裝有0.5%TTC的試管中,于25 ℃下染色12 h。

      3)統(tǒng)計(jì)。倒出 TTC 溶液,再用清水將種子沖洗 l~2 次,觀察種胚被染色的情況。凡種胚全部或大部分被染成紅色的即為具有生活力的種子,種胚不被染色的無(wú)活力。

      1.2.6數(shù)據(jù)處理與分析 采用SPSS 13.0軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理與分析。

      2結(jié)果與分析

      2.1桔梗種子凈度檢驗(yàn)結(jié)果

      從表1可知,商洛不同縣(區(qū))的桔梗種子凈度相差較大,為52.38%~92.19%之間。商洛桔梗種子凈度從高到低為商州A號(hào)、商南、丹鳳、山陽(yáng)、商州B號(hào)。其中,商州A號(hào)種子凈度最高,為92.19%;商州B號(hào)種子凈度最低,含較多雜質(zhì),僅為52.38%。最高與最低之間相差39.81個(gè)百分點(diǎn)。

      2.2桔梗種子千粒重檢驗(yàn)結(jié)果

      從表2可知,商洛桔梗種子的千粒重為0.937 5~1.093 0 g之間。其中,商州A號(hào)種子千粒重最高,為1.093 0 g,最低的為山陽(yáng)的種子,千粒重僅為0.973 5 g,最高與最低之間相差0.119 5 g。丹鳳和商南的種子千粒重比較接近,只相差0.03 g。

      2.3桔梗種子含水量檢驗(yàn)結(jié)果

      從表3可知,商洛不同縣(區(qū))桔梗種子的含水量比較穩(wěn)定。兩種測(cè)量方法中,135 ℃下烘7 h測(cè)得的含水量較高,所以此方法獲得的結(jié)果較為準(zhǔn)確。135℃高溫法下商州A號(hào)種子的含水量最高,達(dá)到了7.85%,而商南種子含水量最低,僅為7.53%。

      2.4桔梗種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽指數(shù)的檢驗(yàn)結(jié)果

      從表4可知,在25 ℃下每天光照12 h進(jìn)行發(fā)芽試驗(yàn),其中發(fā)芽率最高的是商州A號(hào)和丹鳳種子,分別達(dá)到87.0%和88.0%,而商州B號(hào)種子和山陽(yáng)種子的發(fā)芽率較低,只有63.5%和61.0%,最高與最低相差27.0個(gè)百分點(diǎn)。通過(guò)發(fā)芽指數(shù)可以看出,商州A號(hào)、丹鳳和商南3種種子發(fā)芽比較整齊,而商州B號(hào)和山陽(yáng)種子的發(fā)芽指數(shù)分別為19.95和15.50。

      從表5可知,不同桔梗種子發(fā)霉率為商州B號(hào)種子>山陽(yáng)種子>丹鳳種子>商州A號(hào)種子>商南種子。其中,商州B號(hào)種子發(fā)霉率高達(dá)6.00%,商南種子的發(fā)霉率最低,為1.33%,兩者相差4.67個(gè)百分點(diǎn)。總體上,商洛桔梗種子的發(fā)霉率較低,均小于10%,對(duì)發(fā)芽試驗(yàn)的準(zhǔn)確性影響不大。

      2.5桔梗種子生活力檢驗(yàn)結(jié)果

      從表6可知,商洛桔梗種子的活力指數(shù)為商州A種子>丹鳳種子>商南種子>商州B號(hào)種子>山陽(yáng)種子?;盍χ笖?shù)與發(fā)芽指數(shù)的大小順序一致,它很好地反映了不同試樣點(diǎn)桔梗種子活力的大小。TTC染色法測(cè)定的生活力從整體上與活力指數(shù)的大小順序一致,但不同試樣點(diǎn)種子染色結(jié)果相差較大。用TTC法測(cè)得商州A號(hào)種子和丹鳳種子生活力最高,分別達(dá)到90.5%和87.5%,而商州B號(hào)種子和山陽(yáng)種子生活力最低,商南種子以80.0%居中。

      2.6數(shù)據(jù)處理與種子質(zhì)量分級(jí)

      試驗(yàn)過(guò)程中最穩(wěn)定、受人為因素干擾最少的是千粒重和發(fā)芽率,采用SPSS 13.0軟件對(duì)檢測(cè)的兩組數(shù)據(jù)進(jìn)行K聚類(lèi)分析,結(jié)果見(jiàn)表7。從表7可知,統(tǒng)計(jì)分析軟件把商洛桔梗種子分成3類(lèi),商州A號(hào)種子和丹鳳種子為一類(lèi)種子,一類(lèi)種子的最低千粒重為1.092 1 g,最低發(fā)芽率為88%,其余兩類(lèi)也都有各自的數(shù)值標(biāo)準(zhǔn)。從最低千粒重來(lái)看,一類(lèi)與三類(lèi)相差0.118 6 g,而與二類(lèi)只相差0.003 g。從最低發(fā)芽率來(lái)看,3個(gè)分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)的梯度良好,平均每個(gè)級(jí)別之間相差13.5個(gè)百分點(diǎn)。

      2.7商洛桔梗種子品質(zhì)檢驗(yàn)結(jié)果

      通過(guò)對(duì)不同縣(區(qū))桔梗種子的檢驗(yàn),從整體上得出商洛桔梗種子品質(zhì)相關(guān)數(shù)據(jù):平均凈度76.85%,平均千粒重1.047 9 g,135 ℃高溫法下平均含水量7.65%,平均發(fā)芽率75.7%,平均發(fā)芽指數(shù)22.28,平均發(fā)霉率3.47% ,平均活力指數(shù)0.018 1,平均生活力81.0%。

      2.8商洛桔梗種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的初步制定

      桔梗種子品質(zhì)分級(jí)還沒(méi)有制定國(guó)家和地方標(biāo)準(zhǔn),參照本試驗(yàn)研究取得的桔梗種子K聚類(lèi)分析結(jié)果,結(jié)合其他作物種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),初步制定商洛桔梗種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)(草案)見(jiàn)表8,以供參考。分級(jí)方法采用最低定級(jí)原則,即任何一項(xiàng)指標(biāo)不符合規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)都不能作為相應(yīng)等級(jí)的合格種子。

      3小結(jié)與討論

      桔梗種子凈度相差較大,兩種購(gòu)于商州區(qū)的種子卻有不同的結(jié)果,這可能與種子的采收過(guò)程有關(guān),往往可通過(guò)再加工如篩選來(lái)提高質(zhì)量。發(fā)芽率是以凈種子測(cè)定的,種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)離不開(kāi)凈度分析。

      千粒重的差異性較小,其測(cè)定過(guò)程受干擾因素少,它反映了種子飽滿程度,其可能與發(fā)育程度及遺傳有關(guān)。

      桔梗種子含水量比較穩(wěn)定,這可能與地理氣候和貯藏條件有關(guān)。135 ℃高溫法測(cè)得的結(jié)果較準(zhǔn)確,與郭巧生等[10]對(duì)桔梗種子的含水量研究結(jié)論一致,也可以用粉碎烘干法測(cè)定含水量。

      發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率和發(fā)芽指數(shù)是發(fā)芽能力的主要指標(biāo),在發(fā)芽試驗(yàn)中,不同縣(區(qū))種子差異性明顯,較準(zhǔn)確地體現(xiàn)了其發(fā)芽能力的大小。3個(gè)指標(biāo)中發(fā)芽率最為重要,它直接反映種子的田間出苗率。種子的發(fā)芽情況還受發(fā)霉率的影響,發(fā)霉率主要由種子的自身特性和發(fā)芽初期的培養(yǎng)條件決定,若初期加水過(guò)多,桔梗種子則易發(fā)霉。

      生活力是由人工短時(shí)間實(shí)驗(yàn)測(cè)得,存在人為的誤差可能性較大。桔梗種子非常小,且種子表面很光滑,在浸泡種子的過(guò)程中時(shí)間長(zhǎng)短不好把握,浸泡時(shí)間較短,種子不易切開(kāi),浸泡時(shí)間較長(zhǎng),種子變軟,切開(kāi)時(shí)易損傷胚,這使切開(kāi)種胚的操作變得困難。所以,使用染色法測(cè)桔梗種子活力難度較大。

      K聚類(lèi)分析結(jié)果中,分類(lèi)的千粒重差值較小,這樣小的差值在實(shí)際分級(jí)工作中很難精確測(cè)出。從最低發(fā)芽率來(lái)看,3個(gè)分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)的梯度良好。為了實(shí)際分級(jí)工作的方便,還需要對(duì)這些數(shù)值進(jìn)行調(diào)整。本研究只測(cè)定了商洛4個(gè)縣(區(qū))的桔梗種子,并未達(dá)到制定一個(gè)地區(qū)種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的嚴(yán)格要求,要保證分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的客觀性,只能把K聚類(lèi)分析得到的結(jié)果作為一種參考依據(jù)。確定種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),必須在大量的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),本試驗(yàn)測(cè)得的活力指數(shù)和生活力能在一定程度上代表桔梗種子質(zhì)量,但想要把它們當(dāng)成種子質(zhì)量的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),就必須對(duì)商洛所有縣域的桔梗種子進(jìn)行大量的、長(zhǎng)時(shí)間的檢驗(yàn)。另外,發(fā)芽結(jié)果表明,黑色種子的發(fā)芽數(shù)明顯高于黃褐色的種子,而黑色并帶有光澤的種子發(fā)芽情況最好。

      綜上所述,將凈度、千粒重、生活力、發(fā)芽率作為衡量桔梗種子分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的主要依據(jù),桔梗種子的外觀色澤可作為衡量其分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的次要依據(jù)??梢酝ㄟ^(guò)把握合理的采收時(shí)間、提供良好的貯藏條件來(lái)提高桔梗種子的綜合質(zhì)量,以更好地服務(wù)于中草藥生產(chǎn)。種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定需要一個(gè)長(zhǎng)期的過(guò)程,具體有待進(jìn)一步研究。

      參考文獻(xiàn):

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      [2] 孫麗娜,吳松權(quán),王艷秋,等.市場(chǎng)上流通桔梗種子質(zhì)量分析[J]. 中國(guó)種業(yè),2005(11):533.

      [3] 韋春蘭,劉麗,趙榮梅,等.桔梗種子發(fā)芽特性的研究[J].中國(guó)中藥雜志,2006,31(11):23.

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      [5] 顏啟傳.種子檢驗(yàn)原理和技術(shù)[M].杭州:浙江大學(xué)出版社,2001.

      [6] 國(guó)際種子檢驗(yàn)協(xié)會(huì)(ISTA)種苗評(píng)定與種子活力測(cè)定方法手冊(cè)[M].徐本美,韓建國(guó),等,譯.北京:北京農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,1993.

      [7] DAVIDSON K G V,SAWA S,MOORE F D, et al. Maize seed response to successive imbibition/dryback cycles:viability and vigour[J]. Seed Science Research,1994,4(4):31-37.

      [8] 劉自剛,張雁,王新軍,等.桔梗種子活力研究進(jìn)展[J].種子,2006,25(26):4-6.

      [9] 李錦文.種子活力測(cè)定方法研究[J].林業(yè)科技,2010,13(6):82-91.

      [10] 郭巧生,趙榮梅,劉麗,等.桔梗種子品質(zhì)檢驗(yàn)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中國(guó)中藥雜志,2007(5):9-11.

      135 ℃高溫法:在135 ℃進(jìn)行烘干測(cè)定,方法同“105 ℃恒重法”。

      1.2.4種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽指數(shù)的檢驗(yàn)選取桔梗凈種子,用水浸種12 h后[7],在25 ℃每天光照12 h條件下,放入人工氣候箱中培養(yǎng),每個(gè)培養(yǎng)皿中放100粒種子,每組3次重復(fù),測(cè)定其發(fā)芽狀況[8]。

      發(fā)芽率=(12 d發(fā)芽總粒數(shù)/供試種子粒數(shù))×100%

      發(fā)芽勢(shì)=(前7 d內(nèi)發(fā)芽種子數(shù)/供試種子粒數(shù))×100%

      發(fā)芽指數(shù)(GI)= ∑(Gt/Dt)

      式中,GI為發(fā)芽指數(shù), Gt為t日的發(fā)芽數(shù), Dt為發(fā)芽時(shí)間(d)。

      1.2.5種子生活力檢驗(yàn)活力指數(shù)V=S·GI=S·∑(Gt/Dt)

      式中,S為幼苗的生長(zhǎng)勢(shì),也就是在種子發(fā)芽幾天后的幼苗干重或平均根長(zhǎng)。試驗(yàn)中選取發(fā)芽12 d后單株幼苗平均干重(105 ℃恒重法)。

      用TTC測(cè)定法[9]進(jìn)行桔梗種子生活力檢驗(yàn)。

      1)配制。稱(chēng)取 0.5 g 2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)放入小燒杯中,先加少許乙醇溶解,再加

      20 mL去離子水后用0.1 mol/L的NaOH溶液調(diào)pH至7.0,再用去離子水稀釋定容至100 mL,配成的0.5%TTC溶液避光保存。

      2)顯色。對(duì)桔梗種子用水浸種48 h,挑選相對(duì)飽滿健全的種子,用刀片縱切成兩瓣,使胚對(duì)半分,取半粒放入裝有0.5%TTC的試管中,于25 ℃下染色12 h。

      3)統(tǒng)計(jì)。倒出 TTC 溶液,再用清水將種子沖洗 l~2 次,觀察種胚被染色的情況。凡種胚全部或大部分被染成紅色的即為具有生活力的種子,種胚不被染色的無(wú)活力。

      1.2.6數(shù)據(jù)處理與分析 采用SPSS 13.0軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理與分析。

      2結(jié)果與分析

      2.1桔梗種子凈度檢驗(yàn)結(jié)果

      從表1可知,商洛不同縣(區(qū))的桔梗種子凈度相差較大,為52.38%~92.19%之間。商洛桔梗種子凈度從高到低為商州A號(hào)、商南、丹鳳、山陽(yáng)、商州B號(hào)。其中,商州A號(hào)種子凈度最高,為92.19%;商州B號(hào)種子凈度最低,含較多雜質(zhì),僅為52.38%。最高與最低之間相差39.81個(gè)百分點(diǎn)。

      2.2桔梗種子千粒重檢驗(yàn)結(jié)果

      從表2可知,商洛桔梗種子的千粒重為0.937 5~1.093 0 g之間。其中,商州A號(hào)種子千粒重最高,為1.093 0 g,最低的為山陽(yáng)的種子,千粒重僅為0.973 5 g,最高與最低之間相差0.119 5 g。丹鳳和商南的種子千粒重比較接近,只相差0.03 g。

      2.3桔梗種子含水量檢驗(yàn)結(jié)果

      從表3可知,商洛不同縣(區(qū))桔梗種子的含水量比較穩(wěn)定。兩種測(cè)量方法中,135 ℃下烘7 h測(cè)得的含水量較高,所以此方法獲得的結(jié)果較為準(zhǔn)確。135℃高溫法下商州A號(hào)種子的含水量最高,達(dá)到了7.85%,而商南種子含水量最低,僅為7.53%。

      2.4桔梗種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽指數(shù)的檢驗(yàn)結(jié)果

      從表4可知,在25 ℃下每天光照12 h進(jìn)行發(fā)芽試驗(yàn),其中發(fā)芽率最高的是商州A號(hào)和丹鳳種子,分別達(dá)到87.0%和88.0%,而商州B號(hào)種子和山陽(yáng)種子的發(fā)芽率較低,只有63.5%和61.0%,最高與最低相差27.0個(gè)百分點(diǎn)。通過(guò)發(fā)芽指數(shù)可以看出,商州A號(hào)、丹鳳和商南3種種子發(fā)芽比較整齊,而商州B號(hào)和山陽(yáng)種子的發(fā)芽指數(shù)分別為19.95和15.50。

      從表5可知,不同桔梗種子發(fā)霉率為商州B號(hào)種子>山陽(yáng)種子>丹鳳種子>商州A號(hào)種子>商南種子。其中,商州B號(hào)種子發(fā)霉率高達(dá)6.00%,商南種子的發(fā)霉率最低,為1.33%,兩者相差4.67個(gè)百分點(diǎn)??傮w上,商洛桔梗種子的發(fā)霉率較低,均小于10%,對(duì)發(fā)芽試驗(yàn)的準(zhǔn)確性影響不大。

      2.5桔梗種子生活力檢驗(yàn)結(jié)果

      從表6可知,商洛桔梗種子的活力指數(shù)為商州A種子>丹鳳種子>商南種子>商州B號(hào)種子>山陽(yáng)種子?;盍χ笖?shù)與發(fā)芽指數(shù)的大小順序一致,它很好地反映了不同試樣點(diǎn)桔梗種子活力的大小。TTC染色法測(cè)定的生活力從整體上與活力指數(shù)的大小順序一致,但不同試樣點(diǎn)種子染色結(jié)果相差較大。用TTC法測(cè)得商州A號(hào)種子和丹鳳種子生活力最高,分別達(dá)到90.5%和87.5%,而商州B號(hào)種子和山陽(yáng)種子生活力最低,商南種子以80.0%居中。

      2.6數(shù)據(jù)處理與種子質(zhì)量分級(jí)

      試驗(yàn)過(guò)程中最穩(wěn)定、受人為因素干擾最少的是千粒重和發(fā)芽率,采用SPSS 13.0軟件對(duì)檢測(cè)的兩組數(shù)據(jù)進(jìn)行K聚類(lèi)分析,結(jié)果見(jiàn)表7。從表7可知,統(tǒng)計(jì)分析軟件把商洛桔梗種子分成3類(lèi),商州A號(hào)種子和丹鳳種子為一類(lèi)種子,一類(lèi)種子的最低千粒重為1.092 1 g,最低發(fā)芽率為88%,其余兩類(lèi)也都有各自的數(shù)值標(biāo)準(zhǔn)。從最低千粒重來(lái)看,一類(lèi)與三類(lèi)相差0.118 6 g,而與二類(lèi)只相差0.003 g。從最低發(fā)芽率來(lái)看,3個(gè)分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)的梯度良好,平均每個(gè)級(jí)別之間相差13.5個(gè)百分點(diǎn)。

      2.7商洛桔梗種子品質(zhì)檢驗(yàn)結(jié)果

      通過(guò)對(duì)不同縣(區(qū))桔梗種子的檢驗(yàn),從整體上得出商洛桔梗種子品質(zhì)相關(guān)數(shù)據(jù):平均凈度76.85%,平均千粒重1.047 9 g,135 ℃高溫法下平均含水量7.65%,平均發(fā)芽率75.7%,平均發(fā)芽指數(shù)22.28,平均發(fā)霉率3.47% ,平均活力指數(shù)0.018 1,平均生活力81.0%。

      2.8商洛桔梗種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的初步制定

      桔梗種子品質(zhì)分級(jí)還沒(méi)有制定國(guó)家和地方標(biāo)準(zhǔn),參照本試驗(yàn)研究取得的桔梗種子K聚類(lèi)分析結(jié)果,結(jié)合其他作物種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),初步制定商洛桔梗種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)(草案)見(jiàn)表8,以供參考。分級(jí)方法采用最低定級(jí)原則,即任何一項(xiàng)指標(biāo)不符合規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)都不能作為相應(yīng)等級(jí)的合格種子。

      3小結(jié)與討論

      桔梗種子凈度相差較大,兩種購(gòu)于商州區(qū)的種子卻有不同的結(jié)果,這可能與種子的采收過(guò)程有關(guān),往往可通過(guò)再加工如篩選來(lái)提高質(zhì)量。發(fā)芽率是以凈種子測(cè)定的,種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)離不開(kāi)凈度分析。

      千粒重的差異性較小,其測(cè)定過(guò)程受干擾因素少,它反映了種子飽滿程度,其可能與發(fā)育程度及遺傳有關(guān)。

      桔梗種子含水量比較穩(wěn)定,這可能與地理氣候和貯藏條件有關(guān)。135 ℃高溫法測(cè)得的結(jié)果較準(zhǔn)確,與郭巧生等[10]對(duì)桔梗種子的含水量研究結(jié)論一致,也可以用粉碎烘干法測(cè)定含水量。

      發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率和發(fā)芽指數(shù)是發(fā)芽能力的主要指標(biāo),在發(fā)芽試驗(yàn)中,不同縣(區(qū))種子差異性明顯,較準(zhǔn)確地體現(xiàn)了其發(fā)芽能力的大小。3個(gè)指標(biāo)中發(fā)芽率最為重要,它直接反映種子的田間出苗率。種子的發(fā)芽情況還受發(fā)霉率的影響,發(fā)霉率主要由種子的自身特性和發(fā)芽初期的培養(yǎng)條件決定,若初期加水過(guò)多,桔梗種子則易發(fā)霉。

      生活力是由人工短時(shí)間實(shí)驗(yàn)測(cè)得,存在人為的誤差可能性較大。桔梗種子非常小,且種子表面很光滑,在浸泡種子的過(guò)程中時(shí)間長(zhǎng)短不好把握,浸泡時(shí)間較短,種子不易切開(kāi),浸泡時(shí)間較長(zhǎng),種子變軟,切開(kāi)時(shí)易損傷胚,這使切開(kāi)種胚的操作變得困難。所以,使用染色法測(cè)桔梗種子活力難度較大。

      K聚類(lèi)分析結(jié)果中,分類(lèi)的千粒重差值較小,這樣小的差值在實(shí)際分級(jí)工作中很難精確測(cè)出。從最低發(fā)芽率來(lái)看,3個(gè)分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)的梯度良好。為了實(shí)際分級(jí)工作的方便,還需要對(duì)這些數(shù)值進(jìn)行調(diào)整。本研究只測(cè)定了商洛4個(gè)縣(區(qū))的桔梗種子,并未達(dá)到制定一個(gè)地區(qū)種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的嚴(yán)格要求,要保證分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的客觀性,只能把K聚類(lèi)分析得到的結(jié)果作為一種參考依據(jù)。確定種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),必須在大量的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),本試驗(yàn)測(cè)得的活力指數(shù)和生活力能在一定程度上代表桔梗種子質(zhì)量,但想要把它們當(dāng)成種子質(zhì)量的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),就必須對(duì)商洛所有縣域的桔梗種子進(jìn)行大量的、長(zhǎng)時(shí)間的檢驗(yàn)。另外,發(fā)芽結(jié)果表明,黑色種子的發(fā)芽數(shù)明顯高于黃褐色的種子,而黑色并帶有光澤的種子發(fā)芽情況最好。

      綜上所述,將凈度、千粒重、生活力、發(fā)芽率作為衡量桔梗種子分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的主要依據(jù),桔梗種子的外觀色澤可作為衡量其分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的次要依據(jù)??梢酝ㄟ^(guò)把握合理的采收時(shí)間、提供良好的貯藏條件來(lái)提高桔梗種子的綜合質(zhì)量,以更好地服務(wù)于中草藥生產(chǎn)。種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定需要一個(gè)長(zhǎng)期的過(guò)程,具體有待進(jìn)一步研究。

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