HPLC法測定香砂養(yǎng)胃丸中橙皮苷的含量

孟 和 朱艷紅

內蒙古通遼市食品藥品檢驗所，內蒙古 通遼 028000

香砂養(yǎng)胃丸為《中國藥典》2010年版一部收載的品種，由木香、砂仁、白術、陳皮、茯苓、半夏、醋香附、枳實、豆蔻、姜厚樸、廣藿香、甘草等十二味藥材組成的復方制劑。具有溫中和胃功效。主要用于胃陽不足，濕阻氣滯所致的胃痛、痞滿，癥見胃痛隱隱、脘悶不舒、嘔吐酸水、嘈雜不適、不思飲食、四肢倦怠。其中陳皮、枳實具有理氣健脾，燥濕化痰;破氣消積、化痰散痞的功效［1］，對本處方的臨床療效有重要作用?！吨袊幍洹?010年版一部未對香砂養(yǎng)胃丸中的陳皮和枳實進行含量測定。以陳皮和枳實中的主要有效成分橙皮苷為定量指標可有效控制產品質量，本文參考有關文獻［1－3］，采用HPLC法測定其中橙皮苷的含量，現(xiàn)將結果報告如下。

1 儀器和試藥

島津LC－10AT高效液相色譜儀 (由 SPD－M10A VP型檢測器，CTO－2A柱溫箱、SIL－HTA自動進樣器、CLASS－VP色譜工作站組成)。

橙皮苷對照品 (中國食品藥品檢定院提供，供含量測定用批號:110721－201115。含量95.3%)。香砂養(yǎng)胃丸(包頭中藥有限責任公司;批號:1212202，1212204，1212205)。甲醇為色譜純，水為高純水。

2 方法和結果

2.1 色譜條件 色譜柱:采用 Agilent TC－C18 5μm，4.6μm×250mm柱。流動相為甲醇－水 (60∶40)，檢測波長為284nm，柱溫:30℃，流速為1.0ml·min－1，進樣量:10μl，理論板數:橙皮苷峰計算不得低于2000。分離度大于1.5，符合規(guī)定。橙皮苷的保留時間14.3min左右。陰性對照色譜在14.3min處無干擾峰。見圖1。

2.2 對照品溶液的制備 精密稱取橙皮苷對照品，加甲醇制成每1ml含0.47757mg的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備 取香砂養(yǎng)胃丸，研細，取粉末0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，密塞，超聲 (功率:250W，頻率:50kHz)處理40分鐘，放冷，用甲醇補足減失的重量，慮過，取續(xù)濾液，即得。

2.4 陰性對照溶液的制備 按處方比例并以相同工藝制備缺陳皮和枳實的陰性樣品，并按供試品溶液制備方法制成陰性對照溶液。

2.5 線性關系考察 精密稱取橙皮苷對照品 (含量95.3%)0.02088g，置50ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。再精密量取上述溶液3ml置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液(0.04776mg·ml－1)，精密吸取對照品溶液2，4，8，10，15，20μl注入色譜儀中，記錄色譜圖，以對照品的進樣量(μg)為橫坐標，以峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，得回歸方程:Y=1.15×106X－52002.3 r=099999結果表明橙皮苷在0.09551～0.95513μg范圍內呈良好的線性關系。

2.6 精密度試驗 取同一批號 (1212204)香砂養(yǎng)胃丸供試品溶液，連續(xù)進樣6次，測定橙皮苷色譜峰面積，平均面積為519978，RSD為0.6%。

2.7 重復性試驗 取同一批號 (1212204)香砂養(yǎng)胃丸供試品溶液6份，進行測定含量，結果橙皮苷的平均含量為11.55mg·g－1，RSD為0.5%。表明本試驗重復性良好。

2.8 穩(wěn)定性試驗 取同一批號 (1212204)香砂養(yǎng)胃丸供試品溶液，分別于第0，2，5，10，15，24h進樣測定，記錄峰面積，結果峰面積的RSD為1.1%。表明供試品溶液在24h內穩(wěn)定。

2.9 回收率試驗 取已知含量的樣品 (批號:1212204，含量11.55mg·g－1:)6份，每份約0.1g，精密稱定，分別精密加入橙皮苷對照品適量，按供試品溶液制備方法測定含量，并計算回收率。結果見表1。

表1 加樣回收率試驗結果

2.10 樣品測定 精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，結果見表2.

表2 橙皮苷含量測定結果

3 討論

先后考察了超聲30、40、60min的提取結果，表明30、40、60min的含量接近，穩(wěn)妥起見采用了超聲40min。

用HPLC方法測定香砂養(yǎng)胃丸中橙皮苷的含量測定，經方法學研究表明此方法具有樣品預處理簡單，回收率、重復性好，專屬性強等優(yōu)點，可作為香砂養(yǎng)胃丸的質量標準檢驗方法，能夠更有效控制樣品的質量。

［1］國家藥典委員會．中國藥典［S］．(一部)2010年版，中國醫(yī)藥科技出版社，2010:899、176－177、230－231．

［2］南京中醫(yī)藥大學編．中藥大辭典［M］．上海:上?？萍汲霭嫔?，2006:1666－1669、2228－2231．

［3］常新全，丁麗霞．中藥活性成分分析手冊［M］．北京:學苑出版社，2002:1194－1204、1489－1496．